微囊藻水华叠加对太湖沉积物中细菌垂直分布的影响

为研究微囊藻水华爆发对沉积物中细菌的影响,加强对富营养化湖泊细菌生态分布和环境调控原理的认识,选取太湖竺山湾沉积物柱状样,经添加高浓度微囊藻培养后,采用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(polymerase chain reaction-denaturing gradient gel electrophoresis;PCR-DGGE)方法,分析细菌在沉积物中的垂直分布特征.结果显示,微囊藻水华叠加对于沉积物剖面表层细菌群落结构影响很小,对沉积物中细菌垂直分布的影响不大,仅在7 ～9 cm深度之间有一定影响.     

池塘微囊藻水华防控技术探讨

随着精养池塘富营养化的日趋严重,微囊藻水华也大量出现,微囊藻水华形成后又向水体排放含N、P、C物质和一类单环七肽的生物毒素,加剧水质恶化,给鱼类生长以及渔业生产的发展带来很大的影响。我们从微囊藻水华形成的环境因子入手,应用药物清杀,给全水泥衬砌池塘回填粘土,在池塘底泥中种植小麦,在微囊藻水华大量出现时增放红草鲫鱼等综合方法,成功地抑制了微囊藻水华的形成和发展。     

曝气对蓝藻门微囊藻属水华形成过程的影响

为研究曝气是否会促进池塘蓝藻门微囊藻属(Microcystis)水华的发生,于夏季在温室内用玻璃缸进行了实验。实验设1个处理组和1个对照组,均不添加沉积物,各组3个重复。对照组不曝气,处理组进行水产养殖池塘中常见强度的曝气,对照组和处理组均添加2次相同的无机氮(N)、磷(P)营养盐。初始时浮游植物以绿藻为优势,随后对照组和处理组中均逐渐形成微囊藻属优势,其在实验后期成为优势最大的种类(平均湿质量浓度为36.28～75.81 mg·L~(-1))。对照组的溶解氧质量浓度显著高于处理组(P0.05),叶绿素a、浮游植物总湿质量浓度、蓝藻湿质量浓度、绿藻湿质量浓度、微囊藻占藻类总湿质量的比例以及浮游动物等均无显著差异(P0.05)。表明曝气对浮游植物由绿藻门优势向微囊藻优势的转变,即微囊藻水华的形成过程无直接影响;曝气是否存在均可以形成微囊藻优势;曝气主要改变了微囊藻在水中的分布。     

春夏季节池塘养鱼病害发生的原因及对策

一、鱼病发生的原因１．水环境的影响水是鱼类赖以生存的首要条件，水不仅直接影响鱼类本身，还影响到鱼类食物的组成、分布和丰歉。水环境的影响突出表现在三个方面：①水源水质差，近年来，工业“三废”和农药污染越来越严重，每年发生的鱼类酚中毒事件就是水污染造成的。②鱼池淤泥过多，淤泥中含有大量的腐殖质，是滋生细菌、病毒、寄生虫卵的有利场所。③形成水华。鱼池进入高温季节后，以微囊藻为主的有害藻类容易滋生泛滥，形成水华，微囊藻死后，蛋白质分解产生羟胺、硫化氢等有毒物质，破坏水质，影响鱼类生长。２．放养密度过高有…     

池塘微囊藻水华的研究与治理

微囊藻是池塘中常见的鱼类不易消化利用的蓝藻。温暖季节 ,该藻易大量繁殖形成水华 ,使其他有益藻类受到严重抑制 ,如微囊藻水华时间很长 ,将影响鱼类 (特别是滤食性鱼类 )生长 ,水华突然消失 ,又易造成水中缺氧或产生有毒物质 ,危及鱼类生存。治理微囊藻水华的方法 ,多用硫酸铜等药物清杀。近年来 ,生产实践中发现以上方法不够理想 ,往往是清杀后不久 ,微囊藻水华照样大量出现。Ｍ .Ｌ .Ｂｈｏｗｍｉｃｋ等曾用Ｋａｒｍｅｘ(敌草隆 )在池塘里进行了清杀微囊藻水华的试验 ,但用药后 ,池水溶氧量由9 5ｍｇ/Ｌ下降到 1 2ｍｇ/Ｌ ,二氧化碳由…     

微量元素对水华发生、发展的影响

微量元素作为藻类营养因子的一部分,对藻类生长具有重要作用,而藻类(特别是微囊藻)的大量增长则会造成"水华"现象。本文综述了各种微量元素对水华藻类生长的影响及其影响机理,进而得出结论:微量元素对水华藻类的生长影响趋势为低浓度促进生长,高浓度抑制生长,而藻类对微量元素有一定的富集作用;在微量元素中,铁元素对水华的发生、发展至为重要,在某种情况下有可能成为水华发生、发展的限制因子;其他元素(如稀土元素和重金属元素等)在水华发生、发展中则起辅助作用。     

微囊藻水华的综合防治技术

池塘中微囊藻（主要是铜绿微囊藻及水华微囊藻）大量繁殖后，可在水面形成一层翠绿色的水华，早晨很容易观察到，江浙一带群众称之为“湖靛”，两广称之为“耗”，福建称之为“铜绿水”。近年来，受养殖模式改变及水体富营养化趋势的影响，微囊藻的发生有加剧的趋势，一些地区池塘微囊藻的发生率高达３０％～５０％，小型水库和湖泊等大水面也时有发生，这给渔业生产带来了较大的影响。一、微囊藻水华的主要危害１．微囊藻大量繁殖能抑制其它有益藻类、微生物的生长、繁殖，使水体老化，不利于鲢、鳙鱼的生长。２．强烈的光合作用能使水体p…     

养殖池塘水华的防治方法

长期养殖的池塘,由于水中溶解有机质和营养盐类十分丰富,在池塘水温较高的夏秋季节,常出现水华现象。水华长时间存在,对鱼类生长非常不利,严重时还会发生水质恶化、鱼类中毒、发生鱼病甚至死亡事故。池塘中一旦发现水华现象,一般较难根治,因此,切不可掉以轻心。水华是由某些优势种的浮游藻类过度繁殖引起的,常见的有蓝藻、微囊藻、颤藻、鱼腥藻、绿藻、裸藻、金藻、黄藻等。由优势种微囊藻引起的水华,优势种为铜绿微囊藻和粉     

淡水养殖中微囊藻水华的控制研究

近年来,我国不少地区水质日趋富营养化,藻类水华频繁暴发,危害水产养殖,其中微囊藻是我国池塘养殖中最常见,危害最严重的藻类之一。现就我国微囊藻的控制研究作一介绍。 一、微囊藻水华暴发的机制     

青鱼和鲇肠道排泄物对养殖水体铜绿微囊藻休眠体复苏的影响及作用途径

为探讨养殖水体底栖鱼类肠道排泄物对铜绿微囊藻休眠体复苏的影响,将青鱼和鲇肠道排泄物与铜绿微囊藻休眠体用野外养殖水域沉积物(底泥)混匀包埋,在10、15和20°C梯度温度下进行休眠体复苏实验。结果显示,铜绿微囊藻休眠体主要复苏期为第3～15天,在10和15°C条件下,青鱼排泄物组(MP)、鲇排泄物组(SA)和青鱼-鲇排泄物混合组(MP-SA)铜绿微囊藻休眠体复苏率均显著高于对照组(CK),且MP组也显著高于SA组和MP-SA组;在20°C条件下,MP组铜绿微囊藻休眠体复苏率显著高于SA组、MP-SA混合组和CK组,但SA组和MP-SA组与CK组复苏率并无显著性差异。实验过程中MP组沉积物中优势菌群以假单胞菌为主,SA组和MP-SA组优势菌群分别以芽孢杆菌和厚壁菌为主,第0～12天为菌群增殖期,且此期间沉积物-水体界面(SWI)实验MP组、SA组和MP-SA组溶解氧含量(DO)和氮磷比(N/P)均显著低于对照组。研究表明,青鱼和鲇肠道排泄物能促进铜绿微囊藻休眠体复苏,且这种促复苏效果在低温区间(10～15°C)更显著,可能是排泄物中菌群在生长增殖期降低了沉积物-水体界面N/P和DO的结果。研究结果对养殖水体底泥清淤和春季铜绿微囊藻水华防控具有一定的理论意义。     

汾河太原段沉积物中细菌群落的分布特征

采用Illumina高通量测序技术分析汾河太原段沉积物细菌丰度和群落结构，利用主成分分析（PCoA）、冗余分析（RDA）和相关性分析等方法探讨沉积物中细菌群落结构分布特征以及主要影响因素。结果表明，10个断面表层沉积物中5422个细菌OTUs分属于61个门，140个纲，346个目，580个科，1073个属。细菌群落结构在fh6、fh7、fh8、fh9、fh10、fh11 和fh4相似度较高，fh1和fh2相似度较高，而fh3断面与其它断面差异显著。除fh3，沉积物细菌优势菌门均为变形杆菌门（Proteobacteria），次优势菌门为绿弯菌门（Chloroflexi），优势菌纲为γ-变形菌纲（Gammaproteobacteria）。Pearson相关性分析表明，TN、OM和Pb与OTUs、Shannon指数和Simpson指数相关性显著。TN、OM和Pb是细菌群落结构的主要影响因子。RDA和Spearman分析表明，变形杆菌（Proteobacteria）与TN和OM呈显著正相关（P<0.01），与Pb和Ni呈正相关（P<0.05）；绿弯菌（Chloroflexi）与Cr呈显著负相关（P<0.01），与OTC和TC呈显著正相关（P<0.01）；放线菌（Actinobacteria）与TN、OM和Cu呈负相关（P<0.05）；厚壁菌（Firmicutes）与pH呈负相关，与TP呈正相关（P<0.05）。本研究结果为认识汾河太原段沉积物中细菌群落的分布特征，识别环境影响因子提供了数据支撑。     

刺参养殖池环境细菌群落对底质改良剂的响应

运用平板培养计数法、最大或然数法和16S rRNA 基因的 PCR-DGGE 指纹图谱技术，分析发病刺参池塘环境中不同生理类群细菌数量及群落结构对底质改良剂的响应。结果显示，加入底质改良剂后，发病刺参池塘沉积环境中的总异养菌、硝化细菌、硫酸盐还原细菌等的数量在最初的2–4 d 有所上升，但升高幅度小于对照组，且在之后的2–4 d 内下降至加改良剂之前菌量；在加入底质改良剂后第2天，弧菌和硫化细菌数量便迅速下降，明显低于对照组。PCR-DGGE 图谱及测序结果显示，刺参养殖环境细菌优势菌分别属于绿弯菌门、变形菌门的莫拉菌科、柄杆菌科和气单胞菌科以及厚壁菌门的芽孢杆菌科和乳杆菌科的某种细菌，多样性指数在2.5–3.5之间。实验组加入底质改良剂后，气单胞菌属两种细菌数量逐渐下降。研究结果表明，底质改良剂可改变沉积环境中不同细菌类群的数量，降低致病菌的数量，从而改善底质环境并对“刺参腐皮综合征”起到防治作用。     

不同季节刺参养殖池塘沉积物菌群结构及其影响因素

本研究以辽宁省营口地区刺参(Apostichopus japonicus)养殖池塘为研究对象,利用高通量测序技术,构建不同季节刺参养殖池塘沉积物菌群16S rRNA基因测序文库,解析刺参养殖池塘沉积物菌群的季节性差异和共性,查明影响沉积物菌群构成的主导环境因子。结果显示,营口地区刺参养殖池塘沉积物菌群的丰度和多样性以夏季最高,春秋次之,冬季最低。不同季节刺参养殖池塘沉积物差异菌群呈显著性季节演替特征(P<0.05)。其中,春季差异菌群主要隶属于拟杆菌门(Bacteroides),夏季差异菌群主要隶属于酸杆菌门(Acidobacteria)、疣微菌门(Verrucomicrobia)和浮霉菌门(Planctomycetes),秋季差异菌群主要隶属于厚壁菌门(Firmicutes),冬季差异菌群主要隶属于放线菌门(Actinobacteria)。尽管不同季节沉积物细菌组分比例不同,但第一优势菌门均隶属于变形菌门(Proteobacteria)(相对丰度>43.19%)。环境因子中,影响刺参养殖池塘沉积物菌群的主导环境因子为温度、总有机碳、总氮和pH。本研究将为刺参养殖池塘微生态调控提供理论参考。     

两种三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)养殖塘中浮游细菌的季节变化

结合基于细菌16S rRNA基因的T-RFLP技术与克隆测序技术，对象山港三疣梭子蟹、脊尾白虾混养模式下改良塘M1(塘底铺网四周铺砂)以及传统塘M2(土塘)水体不同季节细菌群落结构和多样性进行分析。结果显示，M1、M2养殖塘水体细菌群落主要由变形纲门(Proteobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、放线菌门(Actinobacteria)、蓝藻门(Cyanobacteria)组成。养殖过程中，细菌群落结构随时间发生了显著变化，不同养殖塘水体细菌群落结构变化的方向不同。M1养殖塘水体由放线菌门主导的群落结构向蓝藻菌门以及变形菌门主导的群落结构发展，M2养殖水体由蓝藻菌门主导的向变形纲门主导的群落结构发展，说明养殖后期改良塘水体有利于蓝藻细菌的生长。无论是M1还是M2，拟杆菌门在8-9月含量最高，且养殖过程中在M2水体的含量始终高于M1。随着养殖时间的推移，M1养殖塘水体细菌群落由多样性指数高的稳定性结构向多样性指数低的不稳定性结构转变，而M2水体养殖后期仍保持较高的多样性指数。PCA分析结果显示，M1养殖塘水体细菌群落差异性大于M2，说明M2水体细菌群落对环境变化的抵御能力大于M1。相关性分析结果显示，不同养殖塘水体细菌群落分布受环境的影响效应不同。     

冻融期刺参养殖池塘沉积物菌群结构特征及其影响因素

本研究以我国北方典型岸基半开放刺参(Apostichopus japonicus)养殖池塘为对象，利用高通量测序技术构建冻融期刺参养殖池塘沉积物菌群16S rRNA基因测序文库，解析封冰期、融冰期和化冰期刺参养殖池塘沉积物菌群结构特征，并查明影响菌群结构的主导环境因子。结果显示，冻融期刺参养殖池塘沉积物菌群丰度和多样性表现为整体下调趋势，在融冰初期呈现显著性波动(P<0.05)。冻融期刺参养殖池塘沉积物菌群结构呈现显著性差异，封冰期、融冰期和化冰期差异菌群分别隶属于厚壁菌门(Firmicutes)、酸杆菌门(Acidobacteria)和软壁菌门(Tenericutes)。尽管不同阶段微生物相对丰度比例不同，但第一优势菌门均隶属于变形菌门(Proteobacteria)，相对丰度高于49.04%；次优势菌门则呈现出显著性变化，其中，封冰期为拟杆菌门(Bacteroidetes)，融冰期为绿弯菌门(Chloroflexi)和放线菌门(Actinobacteria)，化冰期为浮霉菌门(Planctomycetes)。环境因子与菌群相关性分析表明，冻融期刺参养殖池塘沉积物菌群结构与环境因子具有显著相关性(P<0.05)，温度、盐度、总氮和总有机碳是沉积物菌群的主导环境因子。本研究将为刺参养殖池塘精细化管理提供理论依据。     

应用RFLP和DGGE技术分析工厂化养殖凡纳滨对虾肠道微生物群落特征

本研究应用PCR-RFLP(Polymerase Chain Reaction-Restriction Fragment Length Polymorphism)和PCR-DGGE(Polymerase Chain Reaction-Denaturing Gradient Gel Electrophoresis)技术,对工厂化养殖的凡纳滨对虾肠道菌群进行多样性分析。RFLP结果显示,8月样品中不同的克隆子为5个,其中以不可培养细菌(Unculturable bacteria)为主要优势菌,其次为鲁杰氏菌属菌种Ruegeria spp.和Rhodobacterales spp.。依据微生物多样性的覆盖率分析结果表明,所构建16S rDNA克隆文库的覆盖率为97.5%。10月样品中克隆子为8个,其中以不可培养细菌、芽孢杆菌属Bacillus spp.和弧菌属Vibrio spp.为主要优势菌属,其次为Photobacterium spp.和Neptunomonas spp.;所构建16S rDNA克隆文库的覆盖率为90.8%。应用DGGE分析8月和10月对虾肠道样品,菌群以不可培养细菌和弧菌属为主,其次为Streptomyces spp.、Ruegeria spp.、Enterococcus spp.和Photobacterium damselae。     

Bacterial community composition shifts in sediments influenced by fish feeds

This study investigated the influence of fish feed deposition on the microbial community of sediments in a coastal lake. Microcosms were designed to simulate the addition of fish feeds to the sediment, and physicochemical factors as well as composition of microbial assemblages were analysed. Although total organic carbon and total organic nitrogen did not significantly increase, redox potential and total sulphides showed a transition of sediment environments into anaerobic condition due to the addition of fish feeds. The bacterial community composition shifted with fish feed deposition as revealed by the band profiles of denaturing gradient gel electrophoresis, Sørensen's similarity indices and cell numbers of sulphate‐reducing bacteria. Occurrence of anaerobic bacteria (sulphate and nitrate reducers) and disappearance of strictly aerobic bacteria were observed with fish feed inputs. The results clarify the succession of the microbial flora and suggest negative impact of uneaten fish feeds on the microbial community in sediment and resultant environmental deterioration of fish‐farming areas.     

Bacterial community of pond's water,sediment and in the guts of tilapia (Oreochromis niloticus) juveniles characterized by fluorescent in situ hybridization technique

Information about bacterial community structure and functioning in fish farming ponds remains scarce, mainly due to methodological difficulties in counting and identifying uncultured bacteria. The main objective of this study was to evaluate the degree of similarity between the bacterial community of the digestive tract of tilapia (Oreochromis niloticus) juveniles and that of the test pond's water and sediment, using the Fluorescent In Situ Hybridization (FISH) technique. Samples of water, sediment and gut content of 30 tilapia juveniles from a single nursery ground were collected in January 2010. Potentially probiotic and pathogenic bacteria of the species Bacillus, Lactobacillus brevis, Lactobacillus collinoides, Lactobacillus coryniformis, Lactobacillus farciminis, Vibrio and Pseudomonas fluorescens were found in different samples using specific fluorescent probes. The similarity between bacterial community environments and gastrointestinal tracts was determined using the Morisita‐Horn index. The fish guts presented higher abundances of Pseudomonas fluorescens, Bacillus, Lactobacillus brevis and Lactobacillus collinoides. The bacterial community composition of tilapia gastrointestinal tract was more similar to the water than the sediment of the pond. The results of this study showed that the FISH technique can be easily used for monitoring of probiotics and pathogen detection in aquaculture systems.     

庙湖水华过程中浮游细菌丰度与多样性的变化

藻类的过度繁盛(水华)将产生大量有机质,并由此造成严重危害,而浮游细菌在有机质分解过程中的作用尚未得到充分研究。描述了2010年4-8月武汉庙湖叶绿素与不同形态氮和磷的浓度,分析了不同形态细菌的丰度和多样性(以DNA的DGGE图谱为表征)及其与胞外水解酶活性的关系。结果表明,庙湖叶绿素a与总磷浓度显著正相关(P<0.05),4月与7月的叶绿素浓度均超过120μg/L。在水华间隔期内,自由生活菌的数量大幅度升高(1.39×106～2.72×107个/mL),而附着细菌的数量则大体相近(7.77×105～4.49×106个/mL)。水华衰亡初期,二者的群落结构基本相似,并随时间逐渐分化至显著不同的程度;附着细菌的数量直接或间接地明显正比于胞外水解酶活性,在水华有机碎屑分解过程中的作用更为重要。     

Microbial changes occurring at the sediment-water interface in an intensively stocked and fed fish pond

The microbial changes occurring in the upper 1 cm of the solid sediment surface in intensively fed and aerated fish ponds located in northern Israel were examined. The bacterial groups enumerated included: total aerobes, total anaerobes, sulfate and iron reducing bacteria, ammonia and nitrite oxidizing bacteria, acid forming bacteria, and denitrifying bacteria. With the exception of the nitrifying bacteria, large microbial populations were observed in the pond sediment even prior to fish stocking. All the different groups enumerated displayed a rapid change in number during the first 2–8 days following fish stocking, and a subsequent approach toward a steady state. Since both microbial and chemical steady states were approached within a relatively short period of time, it does not appear that these components of the sediment are related to the inhibition of fish growth occurring 50–70 days after fish stocking. While the practice of pond draining and air drying the sediment does oxidize some of the accumulated organic material, it does not appear to affect the resident microbial flora significantly to an extent that could decrease the rate of reestablishment of the microbial community. Therefore, upon establishment of anaerobic conditions a large microbiological community is present capable of mediating the chemical reduction of SO₄^2? to H₂S, or other transformations resulting in products which contribute to fish growth inhibition commonly observed in such intensively stocked and fed fish ponds.