汞离子胁迫对红鳍笛鲷抗氧化酶及乙酰胆碱酯酶活性的影响

为探讨鱼体抗氧化系统以及神经系统对水体中汞胁迫的响应机制,在实验条件下研究了汞离子对红鳍笛鲷幼鱼[体长为(4.95±0.79)cm,体重为(4.57±2.02)g]的急性毒性及对鱼体肝脏、鳃组织的超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及脑组织乙酰胆碱酯酶(AChE)活力的影响。结果表明:半静水实验条件下,汞离子对红鳍笛鲷幼鱼的安全浓度为0.040mg/L。汞离子暴露6h时,各浓度组的肝脏SOD酶活均比对照组有显著升高(P<0.05)。随暴露时间的增加,低浓度组SOD的活性变化较小,而高浓度组鱼体肝脏SOD的活性出现被诱导或被抑制的现象,表明鱼体在高浓度汞胁迫下抗氧化系统出现一定程度的紊乱。鳃的SOD活力在暴露6h亦显著升高,随时间的延长,各浓度组SOD的活性具不同程度的下降趋势。MDA含量的变化表明,鳃组织在暴露6h时已开始受到显著损伤(P<0.05),而肝在6h时无显著变化,在12h时开始受损伤。脑组织AChE活性在暴露6h时略受抑制(P>0.05);暴露12h时高浓度组显著增加(P<0.05),诱导率平均为36%;汞离子暴露24h时,鱼脑AChE的抑制率分别为28%～38%;暴露48h、96h时抑制率...     

邻苯二甲酸二丁酯对红鳍笛鲷幼鱼的胁迫效应

为了探讨邻苯二甲酸二丁酯(DBP)对红鳍笛鲷(Lutjanus erythropterus)幼鱼的胁迫效应,于DBP暴露后0、6、12、24、48和96 h时检测红鳍笛鲷鳃、肝和脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和乙酰胆碱酯酶(AChE)活性。结果表明,DBP对红鳍笛鲷的24 h、48 h和96 h LC50分别为7.10 mg/L、6.98 mg/L和6.66 mg/L,安全质量浓度为2.04 mg/L。随着浓度增加,鳃组织中的SOD酶活性表现为先升高后下降,具有明显的时间效应;肝组织中的SOD酶活性在0.5 mg/L和2.0 mg/L浓度组交替表现为升高和降低,与对照组比较有显著性差异(P<0.05);而0.125 mg/L浓度组肝SOD没有明显变化。鳃组织中MDA含量在DBP暴露6 h后显著性增加(P<0.05),之后随时间延长而下降;DBP暴露6 h和12 h后,0.5 mg/L和2.0 mg/L浓度组肝组织中的MDA含量都显著升高(P<0.05),之后随时间延长MDA含量下降并趋于稳定。与对照组比较,DBP暴露48 h后,红鳍笛鲷脑组织中AChE酶活性显著升高(P<0.01),96 ...     

DBP对斑马鱼肝脏和鳃SOD及ATPase酶活性的影响

以斑马鱼(Brachyclanio rerio)为实验材料,暴露于邻苯二甲酸二丁酯(DBP)5个浓度组中96 h,测得半致死浓度(96 h LC50)为8.51 mg/L,从而得出安全浓度0.85 mg/L。在此基础上,等对数浓度差设置4个质量浓度0.38、0.85、1.90、4.25 mg/L进行20 d的慢性染毒,期间每5 d测定斑马鱼肝脏、鳃中SOD酶和ATPase活性。结果表明,随DBP的浓度增大和作用时间增长,斑马鱼肝脏、鳃中SOD酶和ATPase活性均受到显著的抑制。     

氯氰菊酯对草鱼鳃和肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响

在实验室条件下,研究了氯氰菊酯对草鱼鱼种的急性毒性及其对鳃和肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响。结果表明,氯氰菊酯对草鱼鱼种24,48,72,96h半致死浓度分别为32 82μg L、9 92μg L、8 12μg L、6 51μg L;经1μg L、3μg L、5μg L浓度处理,测得鳃SOD活性6h时升高,后转为抑制,对肝脏SOD酶呈现促进作用,酶活性的变化呈一定浓度相关性。     

不同质量浓度铅对草鱼鱼种抗氧化性能的影响

将草鱼暴露于不同水平(0、72、144、288 mg/L)的硝酸铅水溶液中,分别于12、24、48、96 h测定草鱼肝、鳃组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量.试验结果表明,当鱼经不同质量浓度Pb2+处理24 h后,其肝脏的GSH-Px活性表现为诱导效应;而鳃在低质量浓度(72 mg/L)Pb2+处理也表现诱导效应,但高质量浓度Pb2+(144、288 mg/L)处理24 h后,其GSH-Px活性表现为抑制效应.与肝GSH-Px相比,草鱼肝SOD经Pb2+处理后其活性抑制更加明显,表明肝SOD对Pb2+的毒性反应比肝GSH-Px敏感.同时,草鱼经不同质量浓度Pb2+处理12 h后,肝与鳃的MDA含量均比对照组明显增加.上述研究结果表明,水体铅可能通过诱导草鱼肝脏与鳃发生氧化损伤而发挥毒性作用,并进一步损伤机体结构及其生理功能.     

镉对绿鳍马面鲀幼鱼急性毒性、肝脏抗氧化能力及组织结构的影响

本研究采用静水生物测试法测定了镉(Cd2+)对绿鳍马面鲀(Thamnaconus septentrionalis)幼鱼的急性毒性。根据预实验结果，设定8.19、9.18、10.30、11.56 mg/L共4个Cd2+浓度梯度进行急性毒性实验，根据急性毒性实验结果，设定1.84、2.76、3.68和4.60 mg/L 4个不同浓度Cd2+急性暴露实验，分别在6、12、24、48、72和96 h检测肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽抗氧化酶(GSH-PX)活性及丙二醛(MDA)含量，观察肝脏、鳃组织结构的变化。结果显示，随着Cd2+浓度的增加，急性毒性效应逐渐增强，24、48、72和96 h半致死浓度 (LC50)分别为11.47、10.82、9.84和9.19 mg/L，Cd2+对绿鳍马面鲀幼鱼的96 h安全浓度为0.92 mg/L。6 h时，各浓度组SOD和CAT活性与对照组相比显著升高；6—48 h时，SOD、CAT、GSH-PX活性均呈先上升后下降的趋势；48—96 h时，各浓度组酶活性均呈下降趋势，且时间越长，浓度越大，活性越低。与对照组相比，MDA含量整体呈先降低后增加的趋势，12—48 h时，1.84和2.76 mg/L组MDA含量有波动，3.68、4.60 mg/L组MDA含量与时间和浓度成正比。24 h时，1.84 mg/L组肝脏组织未见明显变化，2.76、3.68和4.60 mg/L组肝脏组织开始受到明显损伤，表现为细胞体积增大且形状不规则，细胞膜边界模糊，1.84和2.76 mg/L组鳃组织相比无显著变化，3.68和4.60 mg/L组出现鳃小片弯曲，上皮细胞水肿膨大，相邻鳃小片相互黏连融合，无游离端，细胞坏死脱落等损伤现象。在安全浓度为0.92 mg/L内绿鳍马面鲀幼鱼可健康生长，SOD、CAT和GSH-PX活性变化及MDA含量反映了绿鳍马面鲀幼鱼受损害程度，可作为安全性风险评价的参考依据。     

红笛鲷和卵形鲳鲹鳃的扫描电镜观察与功能探讨

对两种鲈形目鱼类红笛鲷Lutjanus erythopterus和卵形鲳(鱼参) Trachinotus ovatus的鳃结构进行扫描电镜观察。结果表明,红笛鲷和卵形鲳(鱼参)鳃的表面结构和微细结构与其他硬骨鱼类基本相似,鳃丝表面都具有规则或不规则分布的环形微嵴、沟、坑、孔等结构。红笛鲷的中部鳃丝表面一部分较为平坦,基部鳃丝表面则凹凸不平。红笛鲷的鳃小片高度要较卵形鲳(鱼参)鳃小片高。红笛鲷和卵形鲳(鱼参)鳃上皮的几种细胞的形态结构及数量分布存在细微的差异。红笛鲷鳃上的扁平上皮细胞界限清楚,而卵形鲳(鱼参)鳃上扁平上皮细胞表面遍布不规则的微嵴,细胞界限模糊。红笛鲷鳃丝表面的氯细胞数量多于卵形鲳(鱼参),这可能与两种鱼对生活环境、生活习性的长期演变相关。     

水体铅对胚胎-仔鱼期南方鲇的氧化应答及神经毒性作用

为了解水体中铅(Pb)对鱼类早期发育阶段的毒性影响,使用人工受精获得南方鲇(Silurus meridionalis Chen)胚胎和仔鱼为研究对象,以硝酸铅(Pb(NO3)2)为毒物源,探讨研究对象在胚胎期和仔鱼期受到5个(0~400μg/L)不同浓度水平铅持续暴露、半持续暴露以及暴露后恢复处理条件下,实验鱼鳃、肝脏和肾脏抗氧酶的活性变化以及脑组织中乙酰胆碱酯酶活性情况。结果表明,恢复组实验鱼鳃、肝脏和肾脏组织中总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性在后期恢复过程中呈升高趋势;三种组织中丙二醛(MDA)含量随着胚胎期水体Pb浓度升高而升高。持续组和半持续组实验鱼鳃、肝脏和肾脏组织中TAOC、SOD、CAT活性随着水体铅浓度升高而降低,显著低于对照组(P<0.05),丙二醛含量随着Pb浓度升高而升高,脂质过氧化程度加剧;而相同Pb浓度水平之间,持续组和半持续组实验鱼三种组织中,持续组中TAOC、SOD、CAT的活性和MDA的含量变化大于半持续组。发现:南方鲇胚胎期受重金属暴露,后期恢复饲养,其鳃、肝脏和肾脏组织中T-AOC、SOD、CAT的活性会出现恢复效应;胚胎期和仔鱼期重金属暴露存在叠加效应,且重金属对仔鱼的毒性作用更加剧烈。     

溴氰菊酯对克氏原螯虾的氧化胁迫效应

为了解溴氰菊酯对克氏原螯虾的毒性及致毒机理,采用24h换水式生物试验研究了溴氰菊酯对克氏原螯虾的96h急性毒性,分光光度法检测了6、12、24和48h后0.01、0.02和0.04μg/L溴氰菊酯对肝胰腺超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活力和丙二醛(MDA)的含量等氧化胁迫相关指标的影响。结果表明,24、48和96h的半致死浓度分别为0.1560、0.0993和0.0562μg/L,安全浓度为5.62ng/L;在整个暴露过程中,溴氰菊酯各个处理组都引起了氧化胁迫相关指标的变化。SOD和CAT活力的变化趋势相同,都呈抑制-诱导-抑制的变化规律,MDA含量则一直高于对照组。暴露6h后,0.01μg/L浓度组MDA含量极显著高于对照组(P<0.01),0.04μg/L浓度组MDA含量约为对照组的1.98倍(P<0.05);暴露12h后,MDA仍保持较高水平,0.02μg/L浓度组MDA含量约为对照组的1.76倍(P<0.05);暴露24h后,各浓度组CAT活力分别比对照组上升了70.98%、73.05%和66.67%(P<0.01);暴露48h后,0.01、0.02μg/L浓度组的SOD活力分别下降了...     

尖膀胱螺对毒死蜱毒性的生物化学响应

以尖膀胱螺作为试验动物,研究毒死蜱对尖膀胱螺抗氧化系统、乙酰胆碱酯酶和一氧化氮合酶的影响.通过预试验获得尖膀胱螺72 h LC50为243 μg/L,推算的安全浓度为16 μg/L,正式试验以16和121.5 μg/L浓度组分别暴露尖膀胱螺96 h.在第24、48和96 h分别取材,测定尖膀胱螺体内超氧化物歧化酶(SOD)、乙酰胆碱酯酶(AChE)、一氧化氮合酶(NOS)的活性和丙二醛(MDA)含量变化情况.结果显示,在推算的安全浓度(16 μg/L)暴露后,尖膀胱螺体内MDA含量和NOS活性在各时间段变化均不明显,而SOD和AChE活性在96 h被抑制；在高浓度组(121.5 μg/L),尖膀胱螺SOD呈现先上升后下降后又有所回升的趋势,MDA水平持续上升,NOS水平被显著性诱导,AChE活性则被显著性抑制,且在48 h时抑制作用最强.试验结果表明毒死蜱对尖膀胱螺抗氧化系统和神经中枢均产生一定的影响,提示尖膀胱螺可作为毒死蜱毒理学试验模型动物,同时MDA和AChE可作为毒死蜱毒性的生物标记物.     

红笛鲷和卵形鲳鳗鳃的扫描电镜观察与功能探讨

对两种鲈形目鱼类红笛鲷Lutjanus erythopterus和卵形鲳碜Trachinotus ovatus的鳃结构进行扫描电镜观察。结果表明，红笛鲷和卵形鲳够鳃的表面结构和微细结构与其他硬骨鱼类基本相似，鳃丝表面都具有规则或不规则分布的环形微嵴、沟、坑、孔等结构。红笛鲷的中部鳃丝表面一部分较为平坦，基部鳃丝表面则凹凸不平。红笛鲷的鳃小片高度要较卵形鲳够鳃小片高。红笛鲷和卵形鲳够鳃上皮的几种细胞的形态结构及数量分布存在细微的差异。红笛鲷鳃上的扁平上皮细胞界限清楚，而卵形鲳够鳃上扁平上皮细胞表面遍布不规则的微嵴，细胞界限模糊。红笛鲷鳃丝表面的氯细胞数量多于卵形鲳够，这可能与两种鱼对生活环境、生活习性的长期演变相关。     

4种笛鲷属鱼类随机扩增多态性DNA及遗传多样性研究

使用RAPD技术分析了红鳍笛鲷、紫红笛鲷、勒氏笛鲷和约氏笛鲷的种内遗传多样性、种间遗传多样性和种间亲缘关系。在120个随机引物中筛选出扩增效果好的引物36个，平均每个引物在每个个体上产生7．7个条带。种内遗传多样性研究结果显示：遗传距离(D)分别为0．2257，0．2228，0．2679和0．2247；遗传多样性指数(H)分别为0．1854，0．1904，0．2015和0．1865。说明目前湛江近海这4种笛鲷的遗传多样性比较丰富，它们的种质资源仍处于一个良好的水平。种间遗传多样性结果显示：勒氏笛鲷与约氏笛鲷遗传距离(Dpq)最小，亲缘关系最密切，勒氏笛鲷与红鳍笛鲷种间Dpq最大，亲缘关系最远。     

Purification and characterization of hatching enzyme from flounder Paralichthys olivaceus

Using chorion of Paralichthys as a specific substrate, hatching enzyme (HE) from Paralichthys olivaceus (PHE) was purified by gel-filtration and ion-exchange chromatography, and characterized in terms of its molecular weight and enzymatic properties in this study. It was found that the molecular size of PHE is about 34.8 kDa in SDS-PAGE. The PHE had obvious choriolytic activity, which was optimal at pH 7.0 and temperature of 35 °C, respectively. The Km value of the PHE for casein was 4.28 mg ml⁻¹. The PHE was very sensitive to trypsin-specific inhibitors, especially serine protease-specific inhibitors, such as LBTI, SBTI, bestatin and p-APMSF, leupeptin, ovomucoid, PMSF, pepstatin A and TLCK, indicates that it is a trypsin-type serine protease. The PHE was also extremely sensitive to Cu²⁺ and Ca²⁺, combined with the results that it was inhibited by EDTA in a dose-dependent manner, indicates this PHE is also a kind of metalloprotease.     

紫红笛鲷与红鳍笛鲷5种同工酶的比较研究

采用聚丙烯酰胺垂直平板梯度凝胶电泳的方法,对紫红笛鲷和红鳍笛鲷8种组织中的5种同工酶(EST,LDH,MDH,ME,POD)进行比较研究,对所研究的5种同工酶在两种鱼的组织分布、位点表达及活性作了分析和总结。试验结果表明:两种鱼的ME、MDH同工酶谱非常相似,只在活性上略有差异;EST、LDH、POD等的酶谱表达带型和活性不同,这些酶可作为紫红笛鲷和红鳍笛鲷的遗传鉴定标记,能够将亲缘关系很近的这两种鱼区分开来,从而为形态分类学提供生化依据。     

Cloning and expression of the gene encoding an extracellular alkaline serine protease from Vibrio alginolyticus strain HY9901, the causative agent of vibriosis in Lutjanus erythopterus (Bloch)

A 750-bp internal fragment of the alkaline serine protease gene (asp) from the Vibrio alginolyticus strain HY9901 was amplified by polymerase chain reaction (PCR). The flanking sequences of the 5'- and 3'- ends of the asp gene were characterized by reverse and nested PCR. Sequence analysis showed that the asp gene contained an 1893-bp ORF encoding 630 amino acids. The deduced amino acid sequence of the ASP (alkaline serine protease) precursor showed significant homology with several bacterial alkaline serine proteases. Expression of the asp gene in Escherichia coli and activity tests of the ASP indicated that the N-signal peptide of the ASP precursor was essential to autocatalyse and fold correctly the enzyme to obtain activity. The purified ASP was lethal for Lutjanus erythopterus with an LD(50) of 0.25 microg protein g(-1) body weight.     

饥饿与恢复投喂对红鳍笛鲷血液生化指标的影响

对红鳍笛鲷(Lutjanus erythopterus)进行不同时间的饥饿处理后恢复投喂，研究其血液生化指标的变化。结果表明饥饿4周后，血糖、血脂含量均下降，而血蛋白含量则维持较恒定的水平。其中，血糖含量在饥饿第1周后就显著降低，而血脂含量在饥饿第2周后显著下降，二者下降趋势均持续到饥饿第4周。恢复投喂8周后，血糖、血脂含量均上升，血蛋白含量仍保持较恒定的水平。其中，血糖、血脂分量在恢复投喂8周舌均恢复到对照组水平。     

菲和苯并（b）荧蒽曝露对翡翠贻贝外套膜的氧化胁迫及损伤

实验室条件下研究了不同质量浓度（2.0μg.L-1、10.0μg.L-1和50.0μg.L-1）的菲（PHE）和苯并（b）荧蒽（BbF）胁迫15 d和清洁海水恢复7 d中翡翠贻贝（Perna viridis）外套膜组织中超氧化物歧化酶（SOD）活力和丙二醛（MDA）质量摩尔浓度的变化。结果表明,PHE胁迫下翡翠贻贝外套膜SOD活力呈先升高后降低的变化规律;BbF胁迫下的翡翠贻贝外套膜SOD活力在胁迫第15天时被显著诱导（P〈0.05）。从b（MDA）的变化来看,PHE和BbF均可导致翡翠贻贝外套膜明显的氧化损伤,之后在清洁海水的净化过程中,这种损伤逐渐降低并恢复至正常水平。鉴于2种PAHs胁迫下翡翠贻贝外套膜SOD活力和b（MDA）均发生明显变化并表现出一定的差异性,翡翠贻贝体内的生化指标适合指示PAHs对海洋环境的污染。     

重金属对鱼类毒性的综合研究

鱼体重金属蓄积量的研究，同时取相应组织块进行病变的内在联系及重金属对鱼胚和鱼苗的毒性作用的研究，证实了温州市水产养殖场遭受到附近一家铅锌冶炼厂废水、废渣的污染。