尿素浓度对三角褐指藻的生长及其脂肪酸组成的影响

用不同尿素浓度的叉培养基对三角褐指藻（Phaeodactylum tricornutum）进行培养，研究对该藻的生长和脂肪酸组成的影响。结果表明，尿素的添加明显提高三角褐指藻的细胞密度，生长随尿素浓度增加（0-8．0mmol／1）而增加。二十碳五烯酸（EPA）和多不饱和脂肪酸（PUFAs）含量随尿素浓度增加先上升后下降，在2．1mmol／L时EPA的含量最高，达到19．1％。综合生物量与EPA和PUFAs产量，叉培养基中以尿素浓度为2．1mmol／L为宜，此时的细胞密度较高。且有利于EPA和PUFAs的富集。     

Fe~(3+)对鳗池中铜绿微囊藻和小球藻生长的影响

以铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)和小球藻(Chlorella vulgaris)为研究对象,分别测定了初始Fe3+摩尔浓度为0、1、10、15、20、25、50、100μmol·L-1时铜绿微囊藻和小球藻的生长曲线和叶绿素a含量。结果表明,2株藻均存在铁限制,其中缺铁对铜绿微囊藻生长的限制较为显著,当初始Fe3+浓度为0,1μmol·L-1时,其生长曲线呈现出负增长的趋势;铜绿微囊藻的μmax出现在25μmol·L-1,小球藻的μmax则出现在20μmol·L-1;当浓度为100μmol·L-1时,2株藻的生长均受到了一定的抑制,但此时的生长速度仍高于低Fe3+组。     

微拟球藻高pH沉降采收的响应面法优化及其培养基的循环利用

针对微藻采收成本高的难题,以一株微拟球藻(Nannochloropsis sp.)为研究材料,采用响应面法优化该藻株的高p H沉降采收技术,并初步评估其培养基的循环利用。结果显示,藻株培养液的细胞密度、沉降p H及处理时间3种因素对其生物量采收率(BRR)具有显著影响。预测最优采收参数为:藻细胞光密度OD750=2.08;沉降p H=12.20;处理时间12 h,预测BRR为98.97%,验证实验实测BRR为98.31%。采收藻细胞后的上清液经过滤、p H调整及营养盐补充后,探究高p H采收后的培养基上清液的循环利用。与新鲜培养基相比,高p H采收回收培养基中的藻细胞生长和油脂含量有小幅度的降低,但总脂分级特性及脂肪酸组成无显著差异。该藻株的高p H采收及其培养基的回收利用方法具有可行性。     

营养元素和pH对若夫小球藻生长和油脂积累的影响

以若夫小球藻（Chlorella zofingiensis）为研究对象,考察了不同的营养方式（自养、混养、异养）,不同的氮源、磷（P）质量浓度和pH对其生长和油脂积累的影响.结果表明,若夫小球藻在混合营养方式下藻体质量浓度及油脂质量分数明显高于自养与异养方式,以蔗糖为碳源的混合营养方式下若夫小球藻总脂质量浓度最高（3.14g·L^-1）,分别是自养和异养的4.6和5.0倍.以尿素为氮源时若夫小球藻总脂质量浓度最高（0.79 g·L^-1）.在一定范围内增加P质量浓度能提高若夫小球藻总脂质量浓度,其最适P质量浓度为7.0 ～ 14.0 mg·L^-1.人为改变培养液的pH对若夫小球藻细胞生长影响较大,若夫小球藻能够在pH4.5 ～9.5范围内生长,超出此范围时细胞很快裂解死亡.     

干燥方法及保存条件对小球藻粉脂肪酸含量和种类组成的影响

研究了低温烘干、真空冻干和微波干燥3种干燥方式对蛋白核小球藻粗脂肪、脂肪酸含量和种类组成的影响及不同保存条件下脂肪酸的变化规律。试验结果表明,低温烘干藻粉的粗脂肪含量明显低于真空冻干藻粉和微波干燥藻粉。3种干燥方式对小球藻脂肪酸含量无显著影响,但藻粉颜色明显不同。藻粉脂肪酸含量与鲜藻之间无显著差异。在小球藻粉保存过程中,脂肪酸种类组成保持不变。藻粉在常温(14.5～18.5℃)下保存半年、4℃下保存1年时,多不饱和脂肪酸含量显著减少,饱和脂肪酸和单不饱和脂肪酸含量显著增加。在-24℃下保存1年时,各脂肪酸含量无明显变化。     

一株斜生栅藻的筛选及生长条件的优化

从内蒙古本地淡水湖泊中筛选得到一株含油相对较高、长势较好的藻种,经初步确定为斜生栅藻(Scenedesmus obliquus),以BG11为基础培养基对其生长条件进行了优化.斜生栅藻的最适生长条件为:接种量为20%;培养基初始pH值为6.5;N、P、Fe、Mg四种营养盐的质量浓度分别为NaNO3 0.5 g/L,K2HPO4·3H2O 0.10 g/L.FeCl3·6H2O 0.008 g/L,MgSO4·7H2O 0.10 g/L,富油斜生栅藻在优化后的培养基中生长状况良好,稳定期最大生物量(A680)可达1.905.     

盐度和无机碳对蛋白核小球藻生长、胞外碳酸酐酶活性及其基因表达的影响

为探讨小球藻中碳酸酐酶对环境调控的响应规律,提高小球藻的生物量及对无机碳的利用,实验采用生化和荧光定量PCR方法研究了盐度和2种无机碳对蛋白核小球藻生长、胞外碳酸酐酶(CA)活性及3种亚型碳酸酐酶基因(ca)表达的影响。结果发现,培养至第9天时盐度15和30培养藻生长较快,盐度45藻细胞密度降为盐度15的0.83倍;CA活性随着盐度增加而降低,盐度45长时间处理酶活性降低更为明显,3种亚型ca基因表达量则随盐度升高而增加。2倍空气CO2浓度培养藻密度可达空气CO2浓度的1.23倍,但CA活性较低,第8天为空气CO2浓度组的0.41倍,α-ca和γ-ca基因表达量比空气CO2浓度组略有升高。在0~10 mmol/L HCO-3条件下,蛋白核小球藻随HCO-3含量升高生长加快,CA活性在5 mmol/L HCO-3最高,而3种亚型ca基因表达量在1 mmol/L HCO-3处理组最高。研究表明,蛋白核小球藻生长比较适合中低盐度、2倍空气CO2浓度和高HCO-3处理,其CA活性可被低盐、空气CO2浓度和5 mmol/L HCO-3所诱导,而ca基因表达在高盐、2倍空气CO2浓度和低HCO-3条件下较高。     

小球藻和盐藻利用石油烃富集油脂的研究

利用单细胞分离和紫外诱变技术分别获得海水小球藻和盐生杜氏藻的生长优势株,将其分别接种于不同石油浓度的海水培养液中,利用紫外和荧光分光光度法分别测定培养液中带共轭双键的烃类化合物和芳烃的含量,利用索氏提取法测定胞内油脂含量。结果表明,石油浓度为1.5~10.0μg/ml的培养液中,小球藻和盐藻均能有效降解带共轭双键的烃类化合物,降解率分别为25.3%~35.5%和17.9%~24.0%,芳烃降解率分别为22.1%~30.2%和18.7%~26.2%;石油浓度为3.5μg/ml时,两种微藻对带共轭双键的烃类化合物和芳烃的降解效率均最大,小球藻的降解能力略好于盐藻;石油浓度为1.5μg/ml和3.5μg/ml时,两种微藻的胞内油脂含量分别占细胞干重的14.0%和25.5%,分别是对照组的1.5倍和1.2倍,浓度为3.5μg/ml时两种微藻的胞内油脂含量均最高。该研究为利用石油污染海水培养微藻使其富集油脂及今后开发微藻燃料奠定了基础。     

含油微藻的选育及其冷冻保藏研究

在东北地区水域采集含有浮游微藻的水样,用纱布过滤去掉水体中较大的沉淀物,取100 mL滤液转入500 mL的三角摇瓶中,加入100 L BG11培养基,在25～28℃、光照强度为3 000 Lux,光暗比为14∶10下富集培养,采用稀释涂布法分离纯化至明显的绿色。对筛出微藻在200 mL柱式光照反应器中进行光照通气培养与评价,其中生长最快的微藻生物量达到1.8305 g·L~(-1),最高的油脂含量达到34.69%,最高油脂产率达29 mg·L~(-1)·d~(-1)。取5株(一株小球藻属Chlorella、两株单针藻属Monoraphidium两株栅藻属Scenedesmus)生长快速、含油量高的藻种新鲜藻液分别离心(4 000 r·min~(-1),3 min),去离子水洗两次后,加入新鲜培养基重悬,取出部分微藻加入5种保护剂:甘油(GLY)、二甲基亚砜(DMSO)、蔗糖(SUC)、聚乙二醇(PEG)和羟二基淀粉(HES),分别置于-18℃和-80℃保藏。一个月后,取出保藏微藻,解冻,摇匀,离心,用生理盐水洗两次,去除保护剂后一部分检测细胞活性评价,一部分接种到新鲜培养基进行生长评价。选取确定保护剂后进一步考察保护剂浓度(10%、20%、30%、40%和50%)和保藏时间(3个月、6个月和9个月以及1年)。结果表明:采用二醋酸荧光素法能快速反应细胞冷冻后细胞活力,采用-18℃添加20%甘油或-80℃添加10%甘油冷冻保藏,适用于大多数含油微藻。该方法可保藏含油微藻至少1年且细胞生物量和油脂含量稳定。     

培藻肥水型EM菌对3种微藻生长的影响

在水温(22±1)℃和连续光照强度为50μmol·m~(-1)·s~(-2)下,取主要由乳酸菌、硝化菌、芽孢杆菌、光合菌,及酵母菌等组成的培藻肥水型EM菌0.5m L、2.5m L或5.0m L,分别加入到200m L密度相同的小新月菱形藻Nitzschia closterium f.、球等鞭金藻3011 Isochrysis galbana parke和小球藻Chlorella sp.中培养15d,以f培养基为对照,研究不同浓度培藻肥水型EM菌对这3种藻类生长的影响。结果表明:EM菌对金藻、硅藻、绿藻的生长都有一定的促进作用,其中对金藻及硅藻生长的促进作用更加显著,生长率提高20%~50%,最终细胞密度有所提高,添加5m L促生长作用更持久。     

小球藻固定化培养的初步研究

用海藻酸钙作固定化载体，初步探讨了海藻酸钠浓度、CaCl2浓度、胶球密度、胶球直径等固定化条件对小球藻（Chlorella vulgaris)生长的影响。确定了优化的固定化条件为：4＃针头、2％的海藻酸钠溶液和0．15mol/L的CaCl2溶液制备固定化小球藻，在含50mL培养液的150mL三角烧瓶内放置250个小球藻胶球时，其生长速度较高，生长周期较长。与游离的小球藻相比，固定化小球藻生长速率慢，但生长周期长。实验结果为微藻固定化技术的应用和发展提供了必要的实验数据和理论基础。     

锯缘青蟹幼体饵料的营养强化

用酵母、水球藻、鱼油强化和豆油强化四种不同方式培养轮虫，再分别投喂锯缘青蟹幼体，分析测定轮虫和体的生化组成，结果显示，（1）不同方式培养的轮虫之间以及摄食这些轮虫的锯缘青蟹幼体之间的蛋白质含量都没有显著差异；（2）轮虫的脂类含量和脂肪酸组成与培养方式密切相关，小球藻轮虫的脂类含量最高，20：5n-3(EPA)占总脂肪酸的比例也最高 ，为18.05%，鱼油轮虫则含有最多的22：6n-3(DHA)，占总脂肪酸3.16%，脂类含量仅次于小球藻轮虫；（3）锯缘青蟹幼体的脂类含量和脂肪酸组成受相应饵料营养成分的影响。另外，幼体培育实验也发现，饵料营养成分影响幼体的存活率，结果表明，提高轮虫的EPA和DHA含量，尤其晨DHA含量，将有利于锯缘青蟹幼体的存活和发育。     

２株污染小球藻的除菌技术

本论文在考察了普通小球藻(Chlorella vulgaris)和蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)对青霉素、硫酸链霉素和制霉菌素三种抗生素敏感性的基础上，研究了对已污染藻种进行无菌化的几种分离方法。结果表明，两株小球藻对抗生素的敏感性有明显差异；青霉素、链霉素与制霉菌素的联合使用与单独使用对藻生长的影响差别不是很大；液体培养中加入组合抗生素能够暂时抑制藻液中杂菌的生长，但并不能得到纯培养藻种；离心清洗与抗生素结合使用能够大量除掉细菌，却使霉菌旺盛生长，说明藻菌间存在复杂的相互关系；连续两次使用添加合适浓度混合抗生素的固体平板最终得到藻的纯培养物。     

不同饵料对真蛸浮游幼体生长和存活的影响

为了满足真蛸浮游幼体阶段的营养需要,研究了几种饵料生物对真蛸浮游幼体的育苗效果。结果表明:轮虫不宜作为真蛸浮游幼体的生物饵料;恒温培养试验得出混合营养强化的丰年虫幼体的育苗效果优于混合营养强化的蒙古裸腹溞,并优于小球藻强化的丰年虫幼体及蒙古裸腹溞;常温试验得出梭子蟹溞状幼体+丰年虫幼体组合的饵料效果最好,而微囊营养强化剂强化的丰年虫幼体的育苗效果好于混合营养组合。综上所述,可认为:梭子蟹溞状幼体+丰年虫幼体组合是真蛸浮游幼体期比较适宜的饵料。     

Finishing diets stimulate compensatory growth: results of a study on Murray cod, Maccullochella peelii peelii

The effective implementation of a finishing strategy (wash‐out) following a grow‐out phase on a vegetable oil‐based diet requires a period of several weeks. However, fish performance during this final stage has received little attention. As such, in the present study the growth performance during both, the initial grow‐out and the final wash‐out phases, were evaluated in Murray cod (Maccullochella peelii peelii). Prior to finishing on a fish oil‐based diet, fish were fed one of three diets that differed in the lipid source: fish oil, a low polyunsaturated fatty acid (PUFA) vegetable oil mix, and a high PUFA vegetable oil mix. At the end of the grow‐out period the fatty acid composition of Murray cod fillets were reflective of the respective diets; whilst, during the finishing period, those differences decreased in degree and occurrence. The restoration of original fatty acid make up was more rapid in fish previously fed with the low PUFA vegetable oil diet. During the final wash‐out period, fish previously fed the vegetable oil‐based diets grew significantly (P < 0.05) faster (1.45 ± 0.03 and 1.43 ± 0.05, specific growth rate, % day⁻¹) than fish continuously fed with the fish oil‐based diet (1.24 ± 0.04). This study suggests that the depauperated levels of highly unsaturated fatty acids in fish previously fed vegetable oil‐based diets can positively stimulate lipid metabolism and general fish metabolism, consequently promoting a growth enhancement in fish when reverted to a fish oil‐based diet. This effect could be termed ‘lipo‐compensatory growth’.     

Larval pigmentation, survival and growth of Penaeus indicus fed the nematode Panagrellus redivivus enriched with astaxanthin and various lipids

The highly unsaturated fatty acid (HUFA) content of the free-living nematode Panagrellus redivivus was successfully increased when three different lipid sources (cod-liver oil, marilla oil and capelin oil) from marine animals were used in the nematode culture medium. The lipid enrichment significantly increased the ω3 HUFA content, particularly eicosapentaenoic acid (EPA) and docosahexaenoic acid (DHA), of the nematodes compared with lipid non-enriched nematodes. Penaeus indicus larvae fed the lipid-enriched nematodes had significantly ( P < 0.05) greater larval survival (69–77%) until metamorphosis than those fed non-enriched nematodes (54%).
This nematode species was also enriched with astaxanthin to determine the effects of this carotenoid on pigmentation, survival and growth during the larval development of P. indicus . The pigment, delivered via nematodes, significantly ( P < 0.05) improved larval coloration and survival (88%) compared with that of placebo-pigmented nematodes (78%). However, there was no strong evidence to show the benefit of either pigment and/or lipid enrichment on larval growth and development of P. indicus .
This study has shown that the nutritional value of the nematodes can be enhanced by the addition of fish oil into the culture medium. Supplementation of EPA and DHA, together with synthetic astaxanthin, allow the nematodes to be used as a sole diet for the larval culture of P. indicus .     

甲鱼养殖场抗污螺旋藻的分离及生长特性研究

从嘉兴市某温室甲鱼养殖场废水储存池中分离出1株螺旋藻JXSC-S1。通过与典型钝顶螺旋藻品系进行比较,确定该藻种的藻丝颜色、形状、螺距、螺宽、细胞大小等符合钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)的形态特征。在Zarrouk培养基中,JXSC-S1的生长速率为1.64/d,生长代时为13.96 h,与典型钝顶螺旋藻种S6、S2相似,高于Ns-90020。在温室甲鱼废水中,JXSC-S1的生长速率、外观颜色和藻丝特征都与在Zarrouk培养基中相差不大,远高于S6(0.33/d),而Ns-90020基本不长,S2死亡。上述结果表明,该本地藻种JXSC-S1可以在温室甲鱼废水中快速生长,在用温室甲鱼废水代替昂贵的Zarrouk培养基高效规模生产优质饲料蛋白方面有很大应用潜力。     

光照强度对香溪河水华类型影响的模拟实验

探究光照强度对小球藻生长的影响,为香溪河水华预测提供理论依据。小球藻藻种为香溪河河水中平板分裂后逐步纯化所得。培养箱为40 L的方形塑料箱,四周用遮光布严实包裹。培养液30 L。培养液为用放置24 h后的自来水稀释25倍后的BG-11标准培养基,磷浓度0.285 mg/L,氮浓度9.48 mg/L,p H值7.3~7.8。恒温加热棒控制水温24℃。以平行布置的8根日光灯管作为光源,开关不同数量的日光灯管设定光强梯度,光照梯度为0、800、1 500、2 400、3 200、4 500、6 000 lx。采用电磁式真空泵曝气,曝气比率设置为10%。设置2组平行实验,每个培养箱中加入处理后的藻液10 m L。实验过程为期12d,每天上午8∶00取样,监测指标为光密度、叶绿素a、溶解性总磷、溶解性总氮。结果表明,光照强度在800~1 500 lx时易发生长周期的绿藻水华,绿藻水华转变为蓝藻水华的可能性低;3 200~4 500 lx时易发生短周期的绿藻水华;6 000 lx时发生蓝藻水华的风险很大。香溪河在光照强度小于3 200 lx时不必做蓝藻水华防御措施;光照强度大于4 500 lx时,需提前做适当的蓝藻水华防御措施。     

铜绿微囊藻和小球藻室内竞争实验研究

对铜绿微囊藻和小球藻进行藻类竞争实验,并通过模拟计算,分别得到铜绿微囊藻和小球藻纯培养和竞争条件下的生长模式,并计算了2种藻之间的相互竞争抑制强度。纯培养时铜绿微囊藻和小球藻的增长速率r分别为0.451/d和0.419/d,最大环境容量K分别为1414×104个/mL和812×104个/mL;混合培养时铜绿微囊藻对小球藻的种间竞争强度为1.44,小球藻对铜绿微囊藻的种间竞争强度为0.9。