大菱鲆受精过程的细胞学观察

采用人工授精和组织切片技术对大菱鲆（Scophthalmus maximus L．）受精过程进行细胞学观察。大菱鲆成熟卵处于第二次成熟分裂的中期。精子入卵后，卵子被激动，第二次成熟分裂继续进行，同时发生皮层反应；受精后15min出现精子星光；受精后20min雄原核早于雌原核形成，然后两性原核逐渐靠拢；受精后30min两原核相互靠拢，结合线清晰；受精后40min两原核结合线逐渐消失联合成合子核，之后合子核核膜消失；受精后50min合子核处于第一次有丝分裂中期；受精后60min第一次卵裂完成。[中国水产科学，2006，13（4）：555—560]     

缢蛏受精和早期卵裂过程的细胞学变化观察

采用普通光镜、荧光显微镜和石蜡切片技术,对缢蛏受精和早期卵裂过程中的精子入卵、减数分裂、雌雄原核形成与结合、早期卵裂以及多精入卵等细胞学事件进行了显微观察。结果表明,缢蛏成熟未受精卵多呈圆球形或卵圆形,少数呈梨形,卵径为82～88μm,核相处于第一次成熟分裂中期;精子为典型的原生型,全长55～58μm,头部呈保龄球形,顶体前端的顶体杆呈特别细长的花丝状;在水温21～22℃、盐度10的条件下进行人工授精,精、卵混合后,精子迅速附着于卵子表面,启动卵子发育;受精后4～6 min,精子的头部已进入卵内并明显膨胀,卵子外形变圆,卵外附着的精子量明显减少;在受精后12～15 min、20～25 min,受精卵先后排出第一极体、第二极体,完成两次成熟分裂;第二次成熟分裂结束以后,精、卵核体积迅速膨胀,雄原核的膨胀早于雌原核,核膜重建,在受精后约30 min形成雌、雄原核;雌、雄原核均向卵子中央移动,雄原核旁边的精子星光清晰可见,随后二者在卵子中央以染色体联合的方式结合,联合核的染色体共同排列在纺锤体的赤道板上,形成第一次有丝分裂的中期分裂相;受精后40 min左右,受精卵进行第一次卵裂,染色体在纺锤丝的牵引下向两极移动,结果形成2个大小不等的卵裂球;受精后45～50 min,卵子进行第二次卵裂,核相变化与第一次卵裂相同,在与第一次卵裂垂直的纵轴方向上发生不等全裂,最终形成3小1大4个卵裂球;受精后60～70 min,胚胎进行第三次卵裂,仍为不等全裂,但自此次卵裂起已开始进行螺旋分裂。此外,对实验中发现的缢蛏极少量多精入卵、多极分离等异常细胞学现象进行了分析,并探讨了海洋贝类卵子阻止多精入卵发生的机制。     

三角鲂(Megalobrama terminalis)精子与青鱼(Mylopharyngodon piceus)卵子的受精细胞学研究

以青鱼(Mylopharyogodon piceus)为母本和三角鲂(Megalobrama terminalis)为父本的杂交虽是不同亚科的远缘杂交,但有正常的受精细胞学程序和常规的细胞分裂<卵裂>方式。这些实验结果,为开展鱼类远缘杂交提供了受精生物学的理论基础;同时还证实鱼类远缘杂交的异种精子不仅有激活卵子的作用,而且参与了遗传物质的组成,使父本的性状能够在杂种后代表现出来。实践证明,鱼类遗传育种可以通过远缘杂交的途径获得杂种优势。青鲂杂种一代既具有母本青鱼的性状,也兼有父本三角鲂的特征,通过养殖试验已在渔业生产中取得成效<拟另文发表>。     

贝类受精细胞学的研究现状

从成熟卵子的核相与体外促熟,精子的顶体反应,受精膜的形成,极体的释放与雌雄原核的形成以及多精入卵方面综述了贝类受精细胞学的研究成果,并展望了这一领域的研究和应用前景。     

胭脂鱼受精过程的细胞学观察

采用人工授精,组织学、超微结构技术等方法对胭脂鱼(Myxocyprinus asiaticus)受精卵进行细胞学观察。结果表明:胭脂鱼卵子动物极卵壳仅有一受精孔,属单精受精。精孔器为深凹陷,短孔道型。在17～18℃水温条件下,受精后3 s精子开始穿过精孔管,受精后5 s进入卵子;受精后10 s形成精子星光;受精后15 min,卵子处于第二次减数分裂后期;受精后20 min,第二极体形成;受精后90 min,雌雄原核融合;受精后140 min,受精卵进入第一次有丝分裂中期;受精后180 min,第一次有丝分裂结束,二细胞形成。研究发现:成熟卵子精孔器内无精孔细胞及其他物质,和其他大多数硬骨鱼相似,精孔管内径2.42μm,而精子头部直径与其接近;同时精孔器前庭内壁有许多嵴突,孔洞顺螺旋排列,这些结构特点提示其是造成胭脂鱼单精受精的原因之一。本研究旨在为胭脂鱼人工繁殖技术的研究及其保护管理提供基础资料。     

兴国红鲤同草鱼杂交的受精细胞学研究

兴国红鲤与草鱼杂交虽属亚科间的远缘杂交,却符合鲤科鱼类一般的受精规律,精子由唯一的受精孔道进入卵内,单精入卵。受精的适当时间是在卵细胞第二次成熟分裂的中期。受精后7分钟形成精子星光。接着雄性原核、雌性原核先后形成,并逐渐靠拢;受精后40分钟两性原核结合(水温21℃);受精后45—50分钟出现新个体的第一次卵裂。说明草鱼精子对兴国红鲤成熟卵细胞不仅起激动作用,而且参与了遗传物质的组成。此系亚科间远缘杂交具有生活力的生物学基础。实验发现:在特定的条件下,同一批受精卵中,多倍体,单倍体,雌发育可能同时存在。本文还比较分析了常见的几种鲤科鱼类及其杂种受精的过程。     

人工诱导栉孔扇贝雄核发育早期的荧光显微镜观察

利用荧光显微镜观察栉孔扇贝(Chlamysfarreri)正常卵子与雄核发育卵子在减数分裂、受精过程和卵裂早期中的核相变化。雄核发育单倍体是将强度为2.8mW/(cm2·s)的紫外线照射20s的卵子与正常精子受精后得到的。结果表明,尽管紫外线照射并没有影响卵子的成熟分裂及雌性、雄性原核的形成,但它们的发生过程滞后。在第1卵裂中期,雄核发育卵子中雌性原核并不像雄性原核一样形成染色体,而是形成1个浓缩的染色质小体(DCB)。第1卵裂后期,DCB不参与核分裂。第1卵裂结束时,DCB位于2个分裂球其中之一的细胞质内或在赤道板处被分割成两部分。实验结果首次提供了栉孔扇贝雄核发育的细胞学证据。     

中国对虾受精过程的细胞学研究

通过光镜和电镜切片技术，对中国对虾的受挤过程进行了观察。结果表明，中国对虾成熟卵子处于第1次成熟分裂前期，卵子激活后产生胶质层，精子在卵子的诱导下产生顶体反应后进入卵子。中国对虾为多精入卵、单精受精。精子入卵后，卵子完成成熟分裂并举起围卵膜，但精子的存在并非此过程所必需。在卵子进行第1次成熟分裂时，其纺锤体旋转90°。卵子完成成熟分裂后，精卵原核原核化并向卵子中央移动，最后，精卵原核结合形成合子核，卵子完成受挤过程。     

异源精子诱导栉孔扇贝雌核发育二倍体的微管动态变化

采用紫外线遗传灭活的长牡蛎（Crassostrea gigas）精子激活栉孔扇贝（Chlamys farreri）卵子,并用6-DMAP诱导染色体加倍的方法,获得第二极体抑制型雌核发育二倍体早期胚胎。多聚甲醛固定、免疫荧光染色后,运用荧光显微镜观察栉孔扇贝正常发育卵子和异源精子诱导的雌核发育卵子,对其受精过程中微管的动态变化过程进行观察和分析。结果表明：（1）正常发育组受精卵内以微管为基础的纺锤体能够顺利地组装并引导卵细胞进行减数分裂和第一、第二极体的排放,以及雌、雄原核融合和第一次卵裂;（2）异源精子诱导雌核发育的卵子经6-DMAP处理后,部分微管变得模糊或消失,纺锤体受到破坏导致染色体的分离无法进行,第二极体的形成受到抑制并使雌核染色体二倍化;去除6-DMAP作用后,微管重新组装,雌核分裂重新启动继而进行卵裂;精核保持固浓缩状态或轻微膨胀形成雄性原核,但卵裂后期则以致密的染色质体（DCB）形式存在于分裂沟上或进入一个卵裂球中。结果证实,长牡蛎精子经紫外线遗传灭活后可顺利进入并激活栉孔扇贝成熟卵子但不参与合子核的形成,6-DMAP也可有效抑制第二极体的排放而获得雌核发育二倍体胚胎。本实验结果为研究异源精子诱导栉孔扇贝雌核发育的可行性提供了细胞学依据。     

刺参受精及早期胚胎发育过程的细胞学观察

采用HOECHST 33258染色荧光显微方法,对刺参成熟未受精卵以及受精过程中精子入卵、极体排放、雌雄原核的形成与结合、早期卵裂以及多精入卵等细胞学进行了研究。结果显示,刚产出的刺参成熟未受精卵呈圆形,核相处于第一次成熟分裂中期;在水温22~23 ℃、盐度29条件下进行受精,受精后12 min,完成第一次成熟分裂,释放第一极体;受精后20 min,大部分受精卵完成第二次成熟分裂,放出第二极体。受精后35 min,雌、雄原核开始在卵中央发生染色体联合;受精后80 min,部分受精卵完成第一次卵裂,受精后100 min,部分受精卵完成第二次卵裂。刺参在受精过程中存在极少数的多精入卵现象。     

兴国红鲤、草鱼及其杂种一代血清蛋白质的电泳分析

用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳分析了兴国红鲤、草鱼及其杂种一代的血清蛋白。结果表明,它们各有不同的电泳图谱,杂种一代为双亲的嵌合型,相对而言,MA带偏向母本,MI带偏向父本。     

鲤鲫移核鱼与散鳞镜鲤杂交优势及遗传性状的研究

本研究将鲤鲫移核鱼进行有性杂交,使其遗传性状得到改良,效果显著。试验材料为鲤鲫移核鱼 F_2?(以下简称移核鱼)和散鳞镜鲤?(以下简称镜鲤),经杂交获 F_1(以下简称颖鲤)。当年颖鲤个体增重平均比双亲快 47％,群体增重平均快 109％;二冬龄个体增重平均快60.1％,群体增重平均快75.11％。颖鲤含肉率为74.58％,移核鱼和镜鲤为61.7％与72.21％。颖鲤和父母本肌肉蛋白质含量分别为18.35％,17.37％和16.95％。模糊数学聚类分析表明,颖鲤及其反交在体高、体厚、头长等性状均偏向移核鱼,尤其偏向其雌性个体。     

淤泥湖团头鲂与梁子湖团头鲂杂交子一代的性状研究

团头鲂(Megalobrama amblycephala Yih)是一种优良的淡水养殖鱼类,但在家养条件下连续传代会引起经济性状指标下降。本试验通过原种选优,以优配优的杂交组合,得出淤泥湖团头鲂与梁子湖团头鲂杂交子一代和回交子代。经饲养观察,证明杂交子一代和回交子代都有良好的生长优势,含肉率和粗蛋白含量相对增高,经济性状较亲本更好。血清蛋白电泳分析结果表明,杂交子代与亲本存在着质的差异。     

三角帆蚌钩介幼虫在5种寄主鱼体寄生效果的比较

选用黄颡鱼、草鱼、鲢、鳙和鲫作为三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)的寄主鱼,分析了寄苗悬液钩介幼虫密度和寄苗时间对5种鱼初始寄苗量的影响,并对寄生在这5种鱼上的钩介幼虫发育情况进行了观察。结果表明:无论高密度寄苗还是低密度寄苗,长时间寄苗还是短时间寄苗,黄颡鱼和草鱼的寄苗量都明显高于鲢、鳙和鲫。提高寄苗悬液钩介幼虫密度,寄主鱼的寄苗量显著增加,但增加寄苗时间,寄主鱼的寄苗量未见显著提高。黄颡鱼和草鱼的稚蚌脱苗率显著高于鲢、鳙和鲫,寄生在鲢、鳙和鲫鳃上的钩介幼虫约80%未发育至稚蚌便提前脱落。不论在寄苗量方面,还是在稚蚌脱苗率方面,黄颡鱼和草鱼均是三角帆蚌钩介幼虫的最佳寄主。     

Molecular cloning of Insulin-like Growth Factor-I from triangular bream (Megalobrama terminalis)

Triangular bream (Megalobrama terminalis) IGF-I DNA and gene were cloned from triangular bream liver for the first time by RT-PCR. Sequence analysis indicated that the IGF-I cDNA consisted of 486 nucleotides encoding 117 amino acids which spanned the complete signal peptide, B, C, A, D and E domains. Analysis of the E domain indicated that triangular bream IGF-I belongs to the IGF-I Ea-2 subtype. Compared to bluntnose bream (Megalobrama amblycephala), another member of the same Megalobrama genus, triangular bream IGF-I shared 99.8% identity in cDNA sequence and 99.4% in predicted amino acid sequence. However, considerable differences were found in comparison to with common carp (Cyprinus carpio) and grass carp (Ctenopharyngodon idellus), which are members of the same family but of a different genus. This revised version was published online in July 2006 with corrections to the Cover Date.     

黑龙江野鲤、散鳞镜鲤良种选育技术

本文报道选育黑龙江野鲤和散鳞镜鲤良种的研究。根据对不同水域野鲤的遗传分析,发现不同自然品系之间在形态、生化遗传结构和生长都存在阴显差异,试验采用品系选育方法,筛选出一个生长比其他野鲤快10％的松花江野鲤品系。对已高度强化选育的镜鲤品种,试验采用已选育30年的散鳞镜鲤和由德国引进的纯系镜鲤进行杂交,获得一个比亲本生长快20％的杂交种。     

草鱼贮藏过程中导电特性变化规律的研究

运用物理特性-伏安法测定了不同频率下冰鲜和解冻草鱼的阻抗,分析在不同贮藏时间下阻抗的相对变化值(Q值)的变化特点。结果显示:从1 kHz增大到10 kHz,冰鲜和解冻草鱼的阻抗均随着频率的增大而减小,冰鲜草鱼的阻抗相对变化值(Q值)明显大于解冻草鱼。冰鲜草鱼在第1、2、4、7、10天的阻抗相对变化Q值分别为:28.89%、25.10%、17.01%、11.65%、10.37%,而冷冻7、14、30 d后解冻草鱼的最大Q值分别为4.34%、4.18%、4.63%。结果表明:以Q值10%为界限,快速鉴定冰鲜草鱼和解冻草鱼是基本可行的。     

Preliminary Results on Rearing of Sparus Aurata × Pagrus Pagrus Hybrids. Performance Comparison With the Parental Species

Hybridization between gilthead sea bream, Sparus aurata, and red porgy, Pagrus pagrus, was undertaken and viable hybrids were produced by an artificial hormonal-induced cross. The hybrids, from the cross of female red porgy and male gilthead sea bream (Pp × Sa), survived through the yolk-sac larval stage. The hybrids produced from the cross of female gilthead sea bream and male red porgy (Sa × Pp) presented higher mortality in the larval stage (98.4%) compared to gilthead sea bream (80.0%) and red porgy (92.5%). Afterwards, the Sa × Pp hybrid was compared to the offspring of its parental species under the same rearing conditions (tanks of 500 l capacity, natural light, ambient temperature, self-feeding with commercial feed) in a 40–week experiment. In this comparative study, the Sa × Pp hybrid had intermediate mortality rate (6%), compared to gilthead sea bream (0%) and red porgy (21%). The growth profile of this hybrid resembled the slow growing phases of its parents (red porgy in warm period and gilthead sea bream in cold period). The feed conversion ratio between fish forms was not significantly different (1.54–1.84 in the Sa × Pp hybrid, 1.53–1.56 in the maternal species and 1.33–1.40 in the paternal one). The body weight variation in the Sa × Pp hybrid was quite high (31.7–37.9%), compared to that in gilthead sea bream (19.7–24.7%) and red porgy (18.0–31.3%). With respect to body coloration, the Sa × Pp hybrid was distinguishable and classified into groups of red porgy-like (55.1%), gilthead sea bream-like (40.6%), and intermediate forms (4.3%). The preliminary results of this study proved that the produced Sa × Pp hybrid had too low a performance for aquaculture use, but the interesting consequent hereditary potential could be a useful tool in fish hybridization practice.     

赣昌鲫(日本白鲫♀×兴国红鲤♂)及其双亲同工酶的研究

采用不连续聚丙酰胺凝胶电泳法,研究了赣昌鲫(Carassius cuvieri♀×Cyprinus carpio var. singuonensis ♂)及其双亲的肌肉、肝脏、肾脏、心脏、脑、晶状体6种组织在超氧化物歧化酶(SOD)、苹果酸脱氢酶同工酶(MDH)、乳酸脱氢酶同工酶(LDH)、酯酶(EST)四种同工酶酶谱表达上的遗传差异。结果显示:赣昌鲫的SOD酶谱表达在6种组织中与母本一致;心脏、肝脏、肾脏的MDH表达酶带数与母本相同,且具偏母遗传特性,肌肉的MDH表达谱带数与父本肌肉相同,具偏父遗传特性;LDH、EST在各组织中的酶带表达形式则多数特征偏向于父本,部分与母本相似;LDH同工酶的表达显示出新杂种酶带特异性,EST同工酶在肾脏中也表达了自身特有的杂种酶带。结果表明,属间杂交的后代遗传物质上也存在着变异,存在可选育的性状。     

盐碱地池塘配置网箱养鱼试验

在盐碱地一个面积为2871m^2的鱼池中，配置4个网箱．分别放养罗非鱼、淡水白鲳和鲤，箱外放养鲢、草鱼和鲤。试验结果：罗非鱼箱(20m^2)出鱼525kg．平均单产26．3kg／m^2,淡水白鲳箱(12m^2)出鱼400kg,平均单产33.3kg／m^2,鲤鱼箱两个(各12m^2)分别出鱼488．5kg和522kg，平均单产为40．7kg／m^2和43．5kg／m^2。箱外出鲢516kg,草鱼130kg，鲤1125kg。总计全池出鱼3706．5kg，亩产鱼862kg，每亩纯盈利2173．85元。试验证明：池塘配置网箱养鱼．可同池主养几种鱼，起捕容易，管理方便。