2座级联调水型水库枝角类的季节动态特征

2012年对深圳铁岗水库和石岩水库的枝角类进行了调查,探讨级联水库枝角类群落结构的季节演替特征及调控机制。铁岗位于级联水库群的上游,石岩水库则位于其下游,鱼类捕食压力相近。石岩水库营养盐水平明显高于铁岗水库,并且在丰水期显著高于枯水期,但枝角类种类组成基本一致,以象鼻溞(Bosmina)、裸腹溞(Moina)和秀体溞(Diaphanosoma)等小型枝角类为优势种类。2座水库枝角类生物量的季节变化呈"单峰型",峰值出现在捕食压力相对较低的丰水早期(4月)。在群落结构上,2座水库枝角类呈现不同的季节变化模式,上游的铁岗水库全年以长额象鼻溞(Bosmina longirostris)为优势种;下游石岩水库在枯水期以长额象鼻溞为优势种,丰水期则以微型裸腹溞(Moina micrura)为优势种。营养盐的季节变化可能是导致2座水库枝角类群落结构呈现不同季节变化模式的主要原因。     

武汉市湖泊微型裸腹溞种群遗传结构比较分析

分析武汉市9个湖泊中枝角类微型裸腹溞(Moina micrura)细胞色素氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因的多样性情况,对种群遗传多样性进行分析,了解不同地理距离对枝角类种群遗传分化的影响。形态鉴定表明,9个湖泊26个样点中共有8个湖泊17个样点检出微型裸腹溞,牛山湖设置的3个样点均未检测出微型裸腹溞。通过基因测序共得到66条微型裸腹溞COⅠ基因序列。由COⅠ基因序列构建的邻接树及Network分析显示,武汉8个湖泊中所得到的微型裸腹溞序列分为3大枝并具有14种不同的单倍体型。曼-惠特尼检验及科尔莫格罗夫-斯米尔诺夫检验均表明,湖泊内和湖泊间的微型裸腹溞遗传距离存在极显著差异。武汉市不同湖泊间微型裸腹溞存在遗传分化倾向。微型裸腹溞COⅠ基因在选择上是中性的,并且积累了相对较多的突变位点,可以用于种群遗传结构尤其是大尺度上的种群遗传结构分析。     

白洋淀浮游甲壳动物的生物多样性研究

基于2006年4月至2006年12月对白洋淀浮游甲壳动物进行采样调查，分析了白洋淀浮游甲壳动物的群落结构及多样性。本次调查共记录到浮游甲壳动物34种，隶属于9科19属，其中枝角类（Cladocera）19种，桡足类（Copepoda）16种。物种多样性季节性明显：枝角类优势种在春、夏和秋冬季依次为微型裸腹溞（Moina micrura）、长额象鼻溞（Bosmina longirostris）、长肢秀体溞（Diaphanosoma leuch）；而桡足类优势种在冬春季为英勇剑水蚤（Cyclopidae strenuus），在夏秋季为锯缘真剑水蚤（Eucyclopinae macruroides）和台湾温剑水蚤（Thermocyclops tsihokurnsis）。物种多样性春秋季较高，夏季和冬季较低。浮游甲壳类个体密度以春季最高，冬季最低。根据生物多样性指数综合判定白洋淀的水质为中营养化水平。     

蒙古裸腹溞的土池培养技术

蒙古裸腹溞(Moina mongolica)是一种盐水低等甲壳动物,在分类上隶属于甲壳纲、鳃足亚纲、枝角目、裸腹溞科、裸腹溞属.最早是何志辉等在山西地区发现并经海水驯化成功.     

泥鳅早期发育阶段食性的研究

对池养泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)早期发育阶段的食物组成和食物选择性进行了研究.结果表明,泥鳅早期发育阶段主要摄食浮游动物.7日龄和9日龄泥鳅主要摄食轮虫,其数量比例和重量比例分别达到98.73％、79.59％和97.59％、66.67％.13日龄枝角类的数量和重量比例高达41.15％和98.04％,17日龄桡足类的数量比例和重量比例为30.00％和62.03％.24日龄和31日龄,枝角类和桡足类的数量比例虽然都小于20.00％,但是其重量比例共占到95.00％;13 ～31日龄,枝角类和桡足类为泥鳅的主要食物.7日龄和9日龄,泥鳅对臂尾轮虫属(Brachionus)、龟甲轮虫属(Keratella)和异尾轮虫属(Trichocerca)表现出较强的摄食喜好性,对微型裸腹溞(Moina micrura)也表现出一定的摄食喜好性,对桡足类回避.13日龄和17日龄泥鳅对臂尾轮虫属和龟甲轮虫属仍有较强的摄食偏好性,同时对裸腹溞属(Moina)、秀体溞属(Diaphanosoma)、剑水蚤属(Cyclops)和华哲水蚤属(Sinocalanus)也表现出了较强的摄食喜好性.24日龄和31日龄泥鳅不再主动选食轮虫,喜好摄食裸腹潘属、低额溞属(Simocephalus)、剑水蚤属和华哲水蚤属.     

用蒲公英、鸡粪培养多刺裸腹溞的研究

多刺裸腹溞(Moina macrocepa Straus)是池溏中的一种优势枝角类,其食性主要是细菌和有机碎屑。本试验利用发酵蒲公英草浆和鸡粪渗出液作为培养液,根据其增殖结果,拟合出它们的增殖方程,反映了多刺裸腹溞的增殖趋势,并阐述了两种培养液增殖差异的原因。     

选择浮游动物和浮游植物喂养鳙仔鱼和鱼苗的可行性

根据投喂不同活性生物饵料来决定孵化后3、6、9、12和15天的鳙鱼苗的成活率。卵黄消失3—6天后,给其投喂臂尾轮虫、小旅藻和颤藻可获得较高的成活率。当单独把裸腹溞个体较大的细胞投喂鳙仔鱼时,到16天其死亡率达20%。而给鱼苗投喂臂尾轮虫和裸腹溞时,15天后其成活率分别是52%和53%。投喂颤藻的鱼苗的成活率在上述两者之间。摄食裸腹溞的鳙仔鱼和鱼苗,15天后的体重最高,其次是投喂颤藻属的仔鱼和鱼苗,而摄食臂尾轮虫和小球藻的仔鱼和鱼苗的体重增长最慢。     

长江江苏段浮游动物群落结构调查报告

2004年9月和12月、2005年3月对长江江苏段浮游动物的群落结构进行调查.浮游动物108种,以轮虫最多,45个种属,占41.66%;原生动物12个种属,占11.11%;枝角类25个种属,占23.14%;桡足类26个种属,占24.07%.年浮游动物密度为47.96个/L,生物量0.3663mg/L.全年常见的优势类群为:轮虫的臂尾轮虫属、三肢轮虫属、龟甲轮虫属、晶囊轮虫属;枝角类的象鼻溞属、秀体溞属;桡足类的真剑水蚤属、温剑水蚤属、许水蚤属.     

太湖五里湖湖滨带浮游动物群落结构特征

湖滨带在保持物种多样性、拦截陆源污染物、净化水体等方面发挥着重要作用。选取经生态修复的五里湖湖滨带为研究对象,于2014年7月至2015年6月对该水域4个区域(A,B,C,D)浮游动物进行逐月采样,以探讨五里湖湖滨带浮游动物群落结构及其生态意义。结果表明,本次调查共鉴定出浮游动物104属207种,其中原生动物37属88种,轮虫38属76种,枝角类17属29种,桡足类12属14种,物种数最多出现在8月(63种),最少出现在2月(25种);岸型对物种数的影响表现为自然滩地型明显高于水泥护岸。浮游动物丰度和生物量均值分别为3 135.35个/L和2.38mg/L,原生动物和轮虫丰度是五里湖湖滨带浮游动物丰度主体,轮虫生物量是五里湖湖滨带浮游动物生物量主体。浮游动物群落结构的季节差异明显,枝角类丰度和生物量表现为春季最高,夏季最低,而浮游动物、原生动物、轮虫和桡足类丰度和生物量均为秋季最高,冬季或春季最低;空间格局上也存在较大差异,浮游动物及各类群丰度和生物量均表现为C区D区B区A区,整体呈现东五里湖高于西五里湖的趋势。浮游动物多样性指数及丰度对水质的分析表明,五里湖湖滨带水质为中污染,水体营养状态为轻度富营养。冗余分析表明,TN、DO、Chl-a及pH是影响浮游动物群落结构动态变化的重要环境因子。     

南亚热带水库中盔形溞牧食对浮游植物群落影响的围隔试验

为了解热带-亚热带地区大型枝角类对浮游植物的控制作用,2010年3-4月在广东省流溪河水库进行了围隔试验研究.围隔尺寸4m×4m×6m,用孔径2mm的网过滤库水.设置4个试验组,包括1个对照组(C)和低、中、高密度(L、M、H)的3个梯度处理组,添加的盔形溞(Daphnia galeata)分别为0、0.3、0.6、1.0个/L；每个试验组设3个平行,持续6周.由于盔形溞以孤雌生殖为主,在无鱼条件下,盔形溞在较短的时间内快速建立了较高密度的种群,对照组与处理组之间没有显著的差异.在试验进行至21 d,所有围隔中的盔形溞种群达到最大密度,随后出现了明显下降；4个试验组的总浮游植物生物量差异不显著,所有处理中浮游植物和叶绿素a在试验初期出现快速下降.在浮游植物密度下降的同时,其群落组成结构发生了很大的变化.小环藻(Cyclotella meneghiniana)、卵囊藻(Oocystis lacustris)等细胞直径＜30 μm的浮游植物种类前期生物量降低后期稳定,而转板藻(Mougeotia)等粒径＞30μm的种类后期生物量呈增加趋势.试验结果表明,在热带-亚热带深水贫营养水库中,当盔形溞等大型枝角类种群存在时,通过对鱼类的合理调控,存在有效调控浮游植物密度与结构的可能性.     

Brackishwater carp culture in potentially waterlogged areas using animal wastes as pond fertilizers

In order to assess the possibilities of utilizing drainage effluents (salinity range 5.0–12.5), fish culture experiments were carried out. Experiments on polyculture using cow dung (24 000 kg ha^–1 y^–1) as pond fertilizer were conducted at five different salinity levels (0.3–8.5). Studies have revealed that carp perform well in salinities up to 7.5 and reasonably high fish production has been obtained. Even though the ponds had a high trophic status, higher salinities ( > 7.5) appear to repress fish growth probably due to low dissolved oxygen (DO), high BOD and high NH₄-N. Experiments on monoculture of common carp (Cyprinus carpio) conducted at two different salinity levels (0.3–0.9 and 6.0–7.0) using four different organic fertilizers (cow dung at 24 000 kg and 20 000 kg, poultry at 1500 kg, duck at 6000 kg and sheep/goat at 1500 kg ha^–1 y^–1) have revealed the highest fish growth to be in poultry-treated ponds, followed in decreasing order by duck and sheep/goat wastes. Similar trends in fish production were observed both in fresh- and salt-water ponds. However, fish production was lower in ponds having higher salinities ( > 7.5). Nevertheless, these studies indicated that inland saline waters can be utilized for fish culture. With minor modifications in the existing technology of fish culture in stagnant freshwater fish ponds, animal wastes could be used to fertilize brackishwater fish ponds.     

一种免疫诱导型鲤启动子的克隆与功能分析

为发掘适用于基因工程抗病育种的鱼类启动子,通过实时荧光定量PCR实验对鲤Rab GTP酶(Ras-associated binding-GTPases 1a3,Rab1a3)基因的表达模式进行了分析,证实该基因在鳃、头肾等与机体免疫防御功能密切相关的组织内转录水平较高,且免疫激活后转录显著增强,符合基因工程抗病育种所需的外源免疫基因转录模式。从鲤细菌人工染色体文库中,使用Rab1a3基因特异引物筛选获得包含该基因区域的文库克隆,测序获得该基因完整序列,以及上下游调控序列。通过生物信息学手段,预测到长度为1014 bp的鲤Rab1a3基因启动子序列,该启动子不具有典型的TATA盒或CpG岛特征,存在多个免疫相关转录因子结合位点。在草鱼肾组织细胞系内验证该启动子活性,结果显示,绿色荧光蛋白基因和萤火虫荧光素酶基因都能够在该启动子驱动下表达,证实该片段具有启动子活性,且启动子活性在受到免疫诱导后增强,双荧光素酶报告基因检测结果显示,该启动子活性在免疫刺激后增强至免疫刺激前的8.67倍。研究表明,鲤Rab1a3基因启动子有望被开发成为免疫诱导型的基因工程元件,驱动外源免疫基因在鱼体内适时表达,抵御外界病原感染,同时避免非必要条件下的过度表达形成生长负担。     

鲤和草鱼IL17受体基因家族的全基因组识别、起源进化及表达分析

为了研究鲤科鱼类最具代表性的二个物种—鲤和草鱼IL17受体基因家族的起源进化,实验采用比较基因组学和生物信息学的方法,分别在鲤和草鱼基因组数据库进行序列比对和注释,然后对得到的基因进行结构域和系统发育学分析,最后在12个不同组织中进行基因表达分析研究。结果显示,在鲤和草鱼中分别注释得到9个和5个IL17受体基因家族成员。系统发育分析显示,该基因家族不存在鱼类特有的基因,在硬骨鱼类中具有一定的保守性。比较基因组学结果显示,与四足动物相比,大多数硬骨鱼类中IL17受体基因没有明显增多。鲤与草鱼等其他硬骨鱼类相比,除IL17RB以外,其余IL17受体基因家族成员均加倍。不同组织的表达分析结果显示全基因组复制后不同基因拷贝的功能发生了分化。研究表明,虽然硬骨鱼经历第三轮全基因组复制,但是由于复制发生时间久远,大多数基因已经发生改变或退化,进而在基因组中丢失。而鲤第四轮基因组复制时间发生在820万年前,复制发生时间较近,故复制后的基因基本得以保留。但是对于一些具有特殊功能的高度保守基因(例如IL17RB),也会发生在极短时间内出现丢失现象。鲤和草鱼健康组织的表达谱分析结果同样表明,鲤IL17受体基因的不同拷贝之间已经发生了快速进化及亚功能化,并且这种现象在鲤四倍体基因组中普遍存在。     

鲢鳙混养对三角帆蚌生长和养殖水质影响的围隔实验

2008年4月23日—9月21日通过围隔实验,研究了不同鲢鳙混养比例对三角帆蚌生长及水化学指标的影响。实验中鲢鳙混养比例设置了6个水平,分别为0/0(对照组),100/0,70/30,50/50,30/70和0/100。实验开始和结束时测量三角帆蚌湿重,壳长和壳宽。每个月上下旬测量围隔水化学指标包括NO3N、NO2N、NH3N、TN、TP、PO4P和COD。实验结果表明,鲢鳙混养比例100/0的围隔蚌壳长相对生长率显著低于混养比例0/0,50/50和0/100的围隔(P<0.05),而不同混养比例下蚌的成活率、蚌壳宽及蚌重增长均无显著差异(P>0.05)。从水质来看,混养比例30/70围隔TP显著低于100/0(P<0.05),COD显著低于100/0及70/30(P<0.05),NH3N显著低于100/0(P<0.05)以及PO4P显著低于70/30(P<0.05)。因此,综合蚌生长及水质指标,混养比例30/70围隔对三角帆蚌养殖最有利。     

基于黄河鲤新品系IGF2b基因SNPs获取体系的建立及在该品系选育中的应用

为了建立鲤IGF2b (insulin-like growth factor 2)基因全基因组信息SNPs (single nucleotide polymorphism)的获取体系,并验证该获取体系在黄河鲤新品系选育中运用的适用性,本研究首先对10个不同鲤品种的33个鲤个体重测序数据进行分析,整体上了解IGF2b基因的单核苷酸位点及其在基因组上的分布情况。然后在基因组DNA水平上分段获取IGF2b基因的SNPs信息,并以不同的鲤品种验证引物的适用性,最后在黄河鲤新品系中检测其应用。研究结果:获得8对聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)引物进行分段克隆的结果,并通过直接测序和限制性片段长度多态性来获取相应的SNPs。经过直接测序,本文对黄河鲤、建鲤、黄河鲤和建鲤的正反交后代进行PCR检测发现条带单一,目地片段正确;结合黄河鲤新品系的体重数据,本文又以IGF2b~(3#)引物检测到一个与体重明显相关的SNPs,同时检测到一个与该基因表达量相关的另一个SNPs。本研究的方法能够在该基因全基因组范围内开展鲤分子育种中SNPs的检测,并验证发现黄河鲤新品系IGF2b~(3#)引物227号位点处,出现的突变位点使体重降低,且有一处SNPs与其表达量有关。这将为其他物种、其他功能基因的多态性分子标记研究提供思路。     

Chromosome set manipulations in the black carp

The mollusc-eating black carp (Mylopharyngodon piceus) has economic and health-care potential for biological control of nuisance aquatic molluscs. The present study investigates the production of gynogenetic-monosex and triploid-sterile populations of black carp. The goal was to provide a method which would eliminate unwanted biological and environmental impacts of introducing this exotic species into areas with nuisance mollusc infestation. Meiotic gynogenesis was induced by inseminating black carp eggs with UV-irradiated (800 Jm⁻²) sperm of common carp (Cyprinus carpio) or Japanese ornamental (koi) carp. Diploidy was restored through retention of the second polar body (2PB), by shocking activated eggs at 1–8 min post-fertilization (embryological age of 0.07–0.57τ₀, a parameter defined by the cell cycle duration) at 1 min intervals, with heat-shocks (41.0±1.0 °C for 1 min) or pressure-shocks (7500–7600 psi for 1.5 min). Highest survival was found when embryos were heat-shocked 1.5–4.5 min post-fertilization (0.10–0.25τ₀). The highest survival of free-swimming larvae from pressure-shocked eggs, was achieved at 7500 psi at 1–2 min post-fertilization (0.08–0.16τ₀). Triploidy was induced by retention of 2PB following normal fertilization. Batches of 30 000 eggs were fertilized with intact sperm and pressure-shocked (6000–8500 psi for 1.5 min) 2 min post-fertilization (0.15–0.16τ₀). The highest survival of triploid swim-up larvae was 5.1% in eggs shocked with 7500 psi. In random samples of individual larvae taken from each treatment, triploidy was analysed by cytofluorometry of the cellular DNA content. In DNA analysis performed in fingerlings (N≥15), 50% of the fish were triploids.     

框镜鲤肠管单极虫病的组织病理学分析及分子鉴定

2017年6月，四川德阳某养殖场的框镜鲤患病且大量死亡。主要症状为腹部膨大，肠管有大小不等的肿物。为明确其死亡病因，进行了细菌学、寄生虫形态学观察，组织病理学和PCR检测。细菌学检查为阴性；病理组织学观察发现肠道的损伤最为严重，表现为有大量寄生虫样孢囊突出于肠管。寄生虫形态学观察可见孢子长约23~30 μm，宽10~15 μm，极囊长11~15 μm，呈长卵圆形，约占孢子长的1/3~1/2，孢子外面被有一层无色透明的薄膜，前端孢子质中有一个大核和两个小核，与单极虫形态一致；针对吉陶单极虫的18S SSUrRNA基因进行巢式PCR检测，扩增出大小为716 bp的目的片段(命名为TKF-1)，目的条带的测序和序列分析结果表明其为吉陶单极虫。根据组织病理特点及PCR检测结果确认框镜鲤的死亡是感染吉陶单极虫所致。     

草鱼hsp70和hsp90对温度急性变化的响应

为研究不同温度条件下草鱼热休克蛋白(hsp70和hsp90)的表达模式,了解草鱼对温度的耐受和适应机理,实验将在20℃下驯化的草鱼在7个实验温度(22,24,26,28,30,32和34℃)中热激3h,然后20℃恢复2h,取肝脏,肌肉和鳃测定hsp70和hsp90表达.结果表明,hsp70和hsp90表达量随着温度升高而上升,当温度达到34℃时,肌肉与鳃热休克蛋白基因表达量显著下降,草鱼耗氧率、热休克蛋白表达和死亡率之间的关系符合氧限制热耐受理论(OCLTT).基于OCLTT理论,草鱼生理临界温度为28℃,当温度超过28℃,热休克蛋白表达所需能量主要由无氧代谢提供,进而导致体内氧自由基和变性蛋白的增加,影响草鱼的生长和存活.     

鲤硒缺乏的病理学研究

将健康幼鲤360尾设置3个相同平行处理,每个处理用鱼120尾,随机分为四组,分别投以0 mg/kg、0.15 mg/kg、0.30 mg/kg和0.45mg/kg硒水平的饲料,各试验组的发病率和死亡率与日粮中硒含量高低呈负相关,其发病率分别为46.7%、33.3%、13.3%和0%,死亡率分别为26.7%、16.7%、6.7%和0%。病鱼出现特征性的“瘦背病”和脊柱弯曲等症状。组织学上最突出的变化表现为营养性肌病、营养性肝病、胰腺的变性、坏死等多器官组织的退行性变化。超微结构上,骨骼肌纤维、肝细胞和肾小管上皮细胞线粒体肿胀,嵴断裂,甚至发生溶解,整个线粒体呈囊泡状。硒缺乏幼鲤血液中谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）活性升高,谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化物歧化酶（SOD）活性降低,丙二醛（MDA）含量升高。     

锦鲤墨蝶呤还原酶基因的克隆、表达和定位分析

为探究SPR在锦鲤体色形成中的作用,实验利用RACE技术获得spr cDNA全长序列,并分析其时空表达模式,同时利用Western blot和免疫组织化学方法检测SPR蛋白在皮肤、鳍条和鳞片中的分布和表达情况。结果显示,spr cDNA全长879 bp,包含132 bp和134 bp的5′和3′非编码区,开放阅读框510 bp,编码170个氨基酸残基。氨基酸序列比对和系统进化树分析显示,锦鲤SPR具有保守的adh_short_C2结构域,与金鱼相似性高达97.7%。spr在各组织中均有表达,其中皮肤的表达量最高。spr在锦鲤个体发育的4个阶段表现为先降后升。纯红、纯白及红白3种体色锦鲤皮肤、鳞片和鳍条中spr mRNA和蛋白表达水平基本一致,在纯红锦鲤皮肤中表达量最高,红白锦鲤白色皮肤、鳞片和鳍条的表达量最低。SPR组织定位分析显示,红色锦鲤和白色锦鲤皮肤中均检测到阳性信号,其中红色皮肤阳性信号强度高于白色皮肤。研究表明,spr可能与锦鲤红/黄色素细胞的分化和形成具有一定相关性,参与了锦鲤体色的形成。