低温期养殖刺参腐皮综合征的发生与环境因子间的关系

为研究低温期养殖刺参腐皮综合征的发生与环境因子之间的关系,2006年1-5月在青岛周边地区3个养殖场刺参腐皮综合征发生的早期,采用异养菌总数TSB平板计数法、弧菌TCBS平板计数法对发病池塘的水质和池塘中异养菌总数和弧菌总数的数量与分布以及刺参肠道中的异养菌总数和弧菌总数进行了研究,同时比较研究了刺参病灶组织中优势菌与池塘环境及刺参肠道中优势菌的相关性.结果表明:发病池塘水体中细菌的数量较少,但底层水体中细菌总数普遍多于表层,水体中的优势菌与刺参病灶组织中的优势菌相关性不大;池塘表层底泥和刺参肠道中异养菌总数较多,弧菌总数较少,其优势菌与刺参病灶组织优势菌具有一致性.刺参腐皮综合征的发生与池塘水体分层引起的水质恶化和底泥中异养菌的数量密切相关.     

刺参养殖池环境细菌群落对底质改良剂的响应

运用平板培养计数法、最大或然数法和16S rRNA 基因的 PCR-DGGE 指纹图谱技术,分析发病刺参池塘环境中不同生理类群细菌数量及群落结构对底质改良剂的响应。结果显示,加入底质改良剂后,发病刺参池塘沉积环境中的总异养菌、硝化细菌、硫酸盐还原细菌等的数量在最初的2–4 d 有所上升,但升高幅度小于对照组,且在之后的2–4 d 内下降至加改良剂之前菌量;在加入底质改良剂后第2天,弧菌和硫化细菌数量便迅速下降,明显低于对照组。PCR-DGGE 图谱及测序结果显示,刺参养殖环境细菌优势菌分别属于绿弯菌门、变形菌门的莫拉菌科、柄杆菌科和气单胞菌科以及厚壁菌门的芽孢杆菌科和乳杆菌科的某种细菌,多样性指数在2.5–3.5之间。实验组加入底质改良剂后,气单胞菌属两种细菌数量逐渐下降。研究结果表明,底质改良剂可改变沉积环境中不同细菌类群的数量,降低致病菌的数量,从而改善底质环境并对“刺参腐皮综合征”起到防治作用。     

刺参养殖池塘底泥理化指标和细菌数量变化的检测

通过检测刺参养殖池塘底泥的6项理化指标和8类细菌数量,研究了山东省莱州刺参养殖池塘底质的周年变化规律。实验结果显示,底泥的pH值和氧化还原电位变化趋势相同,变化范围分别为(7.15±0.40)~(7.80±0.21)和(42.8±85.5)~(-351.0±61.5)mV。硫化物的变化趋势与pH值和氧化还原电位相反,其含量变化范围为(47.66±47.01)~(496.12±418.57)μg/g(干重)。总氮、总磷和有机碳含量变化范围分别为(457.42±103.40)~(865.83±187.85)、(166.83±17.12)~(241.32±27.21)μg/g和0.27%±0.08%~0.37%±0.10%。异养细菌、弧菌和芽孢杆菌数量的变化范围分别为(3.27±5.55)×105~(6.41±8.48)×106、(5.39±4.32)×103~(1.62±2.01)×105和(1.31±1.57)×104~(7.57±1.66)×104 CFU/g。氨化细菌、反硝化细菌和亚硝化细菌数量的变化范围分别为(6.80±1.16)×105~(1.31±1.64)×107个/g、(2.67±2.48)×103~(5.11±5.88)×104个/g和(8.08±8.99)×10~(1.45±1.73)×103个/g,氨化细菌和反硝化细菌在1年内的变化趋势相同。硫还原细菌和硫氧化细菌数量的变化范围分别为(5.62±5.53)×102~(7.22±5.52)×104个/g和(6.50±5.17)×101~(1.00±1.16)×104个/g,两种细菌数量在一年内的变化趋势相反。研究表明,底泥的氧化还原电位与硫氧化细菌数量呈显著正相关(P0.05),硫化物含量分别与芽孢杆菌、反硝化细菌、氨化细菌及硫还原细菌的数量呈极显著正相关(P0.01),有机碳含量与硫还原细菌的数量呈显著正相关(P0.05)。刺参养殖池塘底泥的多项理化指标和细菌数量之间显著相关,关系复杂。     

3种仿刺参养殖池塘底质特性的研究

为研究3种仿刺参养殖池塘底质的特点,于2014年4—6月检测了砂质底、泥沙质底和泥质底仿刺参养殖池塘底泥的粒度组成、7项理化指标及8类细菌数量特点。试验结果显示,3种池塘底质分别属于含砾泥质砂质底、粉砂质砂质底和砂质粉砂质底;底泥pH值波动均不大;氧化还原电位的变化范围分别为-336.83~-233.83mV、-340.77~-310.30mV和-380.66~-369.77mV;硫化物含量分别为29.64~386.83μg/g、47.6~507.50μg/g和160.16~991.04μg/g;砂质底池塘总氮、总磷、有机碳含量较少,泥沙质底总氮含量超标严重,泥质底总磷含量超标,且有机碳含量远高于其他两种底质池塘。3种底质池塘底泥中氨化细菌、反硝化细菌的数量均远高于亚硝化细菌的数量,还原性物质大量积累;泥沙质底池塘弧菌和硫还原细菌数量较多。结果表明,3种底质池塘底泥所存在的共性问题是底泥氧化还原电位偏低,硫化物含量较高;其差异性体现在砂质底池塘各指标波动较大,泥沙质底池塘总氮含量超标,有害细菌滋生,泥质底池塘底泥总磷含量超标,有机碳含量较高。     

辽东湾仿刺参养殖池塘底质环境季节变化

2013年夏季、秋季和2014年冬季、春季采集辽东湾底充氧和未充氧的仿刺参养殖池塘沉积物样品,2014年春季采集仿刺参发病池塘沉积物样品,分别检测了-5~0cm、-10~-5cm、-15~-10cm 3个层面沉积物的温度、硫化物含量、pH、氧化还原电位,同时监测各池塘表、底层海水温度、盐度、溶解氧、pH、氧化还原电位,探讨两种池塘沉积物底质环境的季节变化规律及春季仿刺参发病池塘与两种未发病池塘沉积物4个指标的变化规律。结果发现,底充氧池塘和未充氧池塘沉积物均呈弱碱性和还原性,两种池塘不同深度沉积物硫化物含量、pH、氧化还原电位的季节变化差异显著,其中,底充氧池塘沉积物各季节硫化物含量显著低于未充氧池塘;池塘沉积物的氧化还原环境与底层海水理化环境存在相关性。与未发病池塘相比,春季发病池塘沉积物呈弱酸性,氧化还原环境为弱还原特性,硫化物含量显著高于未发病池塘。上述结果为仿刺参池塘生态健康养殖和科学管理提供参考。     

梭子蟹养殖环境及生物体内细菌的数量动态及区系组成

研究结果表明:随着养殖的结束,池塘水体和底泥中总异养菌数和反硝化细菌、氨化细菌、硫酸还原菌等特殊生理类群的数量均显著降低。从梭子蟹养殖环境及生物体内分离到115株细菌,经鉴定可归于9个属与肠杆菌科的部分属。通过监控养殖环境中异养细菌和弧菌的数量波动,可以预警梭子蟹病害的发生,及时采取有效的应急防治措施。     

有益微生物在大海马健康养殖中的应用研究

实验用复合微生物由芽孢杆菌(Bacillusspp.)、红螺菌(Rhodospirillumspp.)、硝化细菌(Nitrobacterspp.)和硫化细菌(Thiobacillusspp.)组成,菌量比例分别为61.5%、27.3%、5.8%和5.4%。向大海马养殖池每10d使用1次,用量5mL/m3,菌液密度(2.0～2.5)×109/mL。结果表明,应用复合微生物的试验组溶解氧比对照组(不加菌)提高了32.7%,氨氮、亚硝酸盐和硫化物含量则分别降低了76.9%、97.1%和93.3%。对照池的浮游藻类优势种为蓝藻、甲藻和隐藻,分别占浮游植物总量的35.3%、22.3%和19.6%;试验池的浮游藻类优势种为绿藻和硅藻,分别占69.0%和26.8%,其藻类多样性指数比对照组增大了1.2倍。试验池的异养菌增长率为55.3%,而对照池的异养菌增长率达274.6%。试验期间,水温23～26℃,试验组的芽孢杆菌的数量从0.15×103CFU/mL急剧增至55.63×103CFU/mL,但对照组的仍保持在(0.13～0.38)×103CFU/mL的水平。而试验组弧菌数量比对照池的降低了2个数量级。     

有益微生物在大海马健康养殖中的应用研究

实验研究了定期定量投放由芽孢杆菌、红螺菌、硝化细菌和硫化细菌组成的复合微生物,对大海马健康养殖过程中产生的有机污物的降解作用、浮游藻类生长,菌相以及对大海马成活率的影响.结果表明,应用复合微生物的试验组溶解氧比对照组提高了32.7%,氨氮、亚硝酸盐和硫化物含量则分别降低了76.9%、97.1%和93.3%.对照池的浮游藻类优势种为蓝藻、甲藻和隐藻,分别各占35.3%、22.3%和19.6%;试验池的浮游藻类优势种为绿藻和硅藻,分别各占69.0%和26.8%,其藻类多样性指数比对照组的增大了1.2倍.试验池的异养菌的增长率为55.3%,而对照池的异养菌增长速度达274.6%.试验期间内,芽孢杆菌的数量从0.15×103 cfu/ml,急剧增至55.63×103 cfu/ml,但对照组的仍保持在(0.13～0.38)×103 cfu·ml-1的水平上.而弧菌数量比对照池的降低了2个数量级.试验海马体长生长速率、体重增重率和平均成活率比对照组分别提高了64.9%、72.3%和78.8%.     

低盐度海水池塘剌参网箱保苗技术研究

正池塘网箱生态育苗具有低成本、高收益的特点,同时网箱出产的参苗由于其本身就生长在池塘水域中,放苗后不存在是否适应环境和发生应激反应的情况,高成活率、高品质的参苗受到广大刺参养殖户的欢迎。笔者利用刺参养殖池塘在高温期、低盐度期做了刺参苗网箱保苗试验,现将试验情况总结如下。一、材料与方法1.试验池的选择选择2个池塘进行试验。1~#池     

夏季降雨对仿刺参养殖池塘理化参数影响

正为了探明降雨对仿刺参养殖池塘海水理化参数的影响,作者选择辽东湾滨海养殖池塘,连续监测雨前雨后池塘表、中、底层海水温度、盐度、溶解氧(DO)、pH、氧化还原电位(ORP)等理化指标变化情况。结果表明:降雨后池塘海水出现盐度分层现象,表层盐度中层底层;各层海水温度显著降低,出现波动;雨后1h,各层海水DO显著降低,出现短暂缺氧现象。雨后1h各层海水pH显著降低,pH     

刺参苗期附着基更换频率对刺参生长及其养殖系统菌群结构的影响

为了探究刺参(Apoasichopus japonicus)保苗阶段(7–9月)最佳的附着基更换频率(changing frequency,CF),本实验在夏季保苗期设置5个附着基更换频率组,即CF10、CF20、CF_(30)、CF40和CF_(50)。采用实验生态学的方法,并结合传统细菌培养法和16S r DNA细菌鉴定技术对上述不同实验组进行检测。结果表明:CF20组刺参整池增重和个体增重幅度最大,CF_(30)次之,CF_(50)组由于死亡率高,整池重量为负增长。CF20组的特定生长率和存活率分别为(5.986±0.135)%/d和(95.231±0.265)/%,且显著高于其他各组(P0.05),CF_(30)次之,而CF_(50)组的特定生长率和存活率最低,且显著低于其他各组(P0.05)。养殖用水中4NH+-N、2NO--N和COD随着附着基更换频率的降低而升高,并在第50天时分别达到0.53 mg/L、0.28 mg/L、0.18 mg/L。各实验组水体中异养细菌和弧菌数量随附着基更换频率变化不明显,而附着基上的异养细菌和弧菌数量随附着基更换频率的降低而升高,CF_(50)组异养细菌总数在第50天时达到1.38×105 cfu/cm2,弧菌数量达到1.5×104 cfu/cm2,皆明显高于其他各组。附着基上优势菌为溶藻弧菌(Vibrio algindyticus)、需钠弧菌(V.natriegens)、马胃葡萄球菌(Staphylococcus equorum)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、苏云金芽孢杆菌(B.thuringiensis)和副溶血弧菌(V.parahaemolyticus)。其中,溶藻弧菌为刺参条件致病菌,且一直存在于养殖系统中并逐步占据绝对优势。这与CF_(50)组在实验进行到43 d时开始出现化皮,50 d时开始出现死亡现象有一定的关系。同时,附着基长时间未更换,会滋生大量玻璃海鞘、日本毛壶、内刺盘管虫等敌害生物,争夺栖息空间和食物,导致刺参苗种生长减慢。综上,由实验结果显示,在7–9月高温季节每20 d更换一次附着基最佳。考虑到生产成本,附着基更换频率一般为20~30 d为宜。本研究结果为刺参苗种培育工艺的优化及刺参健康养殖提供了理论依据和参考。     

两种海洋寡糖对仿刺参免疫活性的影响

研究了褐藻酸钠寡糖(AOS)和壳寡糖(COS)对仿刺参(Apostichopus japonicus)生长及免疫功能的影响。实验分为对照组、COS组和AOS组,对照组投喂企业常规饲料,COS组在对照组饲料基础上添加壳寡糖(1 g·kg~(-1)),AOS组在对照组饲料基础上添加褐藻酸钠寡糖(1 g·kg~(-1))。在第30、60、90天,测定各组仿刺参的质量,并在第90天随机采集50 ind仿刺参的体腔液,测定酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、过氧化氢酶和一氧化氮合酶等免疫酶的活力。结果表明,AOS组和COS组仿刺参体质量分别比对照组增长16.4%和18.2%;AOS组仿刺参的酸性、碱性磷酸酶活性分别提高了75.1%和67.3%;而COS组仿刺参的过氧化氢酶和一氧化氮合酶的活性分别提高了190.3%和55.6%。海洋寡糖COS和AOS作为仿刺参的免疫增强剂,可有效提高幼参的生长性能和免疫力,其中COS的作用效果优于AOS。     

Beneficial co‐culture of jellyfish Rhopilema esculenta (Kishinouye) and sea cucumber Apostichopus japonicus (Selenka): implications for pelagic‐benthic coupling

This study investigated monthly changes of sedimentation and sediment properties in three different culture systems (ponds) – i.e. jellyfish Rhopilema esculenta monoculture (J), sea cucumber Apostichopus japonicus and jellyfish co‐culture (SJ) and sea cucumber monoculture (S) – to verify the feasibility of co‐culturing jellyfish and sea cucumbers. Results showed that jellyfish culture accelerated the settling velocity of total particulate matter (TPM). Average TPM settling velocities in the SJ (75.6 g m^?2 day^?1) and J (71.1 g m^?2 day^?1) ponds were significantly higher than that in the S pond (21.7 g m^?2 day^?1) from June to September during the jellyfish culture period. Average settling velocities of organic matter (OM), total organic carbon (TOC), total nitrogen (TN) and total phosphorus (TP) in the SJ pond increased significantly by 3.0, 2.9, 3.3 and 3.8 times, respectively, compared with those in the S pond. Sediment contents of OM, TOC, TN and TP in the SJ and J ponds were significantly higher than those in the S pond during the jellyfish culture season. The specific growth rate of sea cucumbers feeding on SJ sediment was significantly higher than that of those feeding on S sediment. Co‐culturing sea cucumbers with jellyfish may help alleviate benthic nutrient loading due to the jellyfish and provide a secondary cash crop.     

刺参体内的新病原--一种球状病毒

2004年12月中下旬~2005年4月对辽宁沿海地区刺参越冬苗发病严重地区,进行了跟踪调查分析。调查结果显示,2004年刺参越冬苗发病比往年早,来势凶猛,持续时间长,流行面广,具较明显的流行病特征,病症异于往年,发病厂家达50%以上,部分地区超过80%,严重地区80%~90%;从患病参体内分离出2株优势细菌和一种新的球状病毒,经负染和超薄切片在电镜下观察,证实有大量球状病毒存于参体内。     

亚硒酸钠对刺参免疫反应中体腔液酶活力的影响

为了合理评价硒对水产养殖刺参的作用,实验检测和观察了室内模拟亚硒酸钠处理及病菌感染条件下刺参体腔液免疫酶的变化、组织病理变化和相对保护率。结果表明,随着亚硒酸钠处理强度的增加,刺参体腔液中超氧物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GP-X)、溶菌酶(LYZ)、酚氧化酶(PO)及碱性磷酸酶(ALP)活性升高;在同时感染病菌的情况下,SOD、GP-X及LYZ活性表现为先升高后下降的趋势,PO和ALP活性则持续上升,但随亚硒酸钠浓度升高,ALP活性增加的幅度减少,而较高亚硒酸钠浓度时累计发病率上升,相对保护率下降。研究结果表明,适宜浓度的亚硒酸钠可增强刺参对病菌感染的免疫力,而病菌感染可以加剧亚硒酸钠胁迫对刺参造成的免疫功能损伤,所以适度利用硒可减轻刺参养殖病害的发生。     

Effects of light intensity on larval development and juvenile growth of sea cucumber Apostichopus japonicus

The growth rate, survival rate, development and setting rate of larval sea cucumber Apostichopus japonicus were measured under four light intensities (0, 50, 500 and 2,000 lx), and the growth rate and metabolism of the juvenile sea cucumbers were investigated under four light intensity treatments (0, 100, 1,000 and 2,500 lx). The light requirements (i.e. intensity) of the sea cucumber changed as they grew. Better growth performance, development and survival rate were observed in embryos and larvae under 500 lx treatment. However, reduced light intensity (50 lx) increased the settlement rate of the larvae. The highest specific growth rate occurred in juvenile sea cucumbers under 1,000 lx. The sea cucumbers in this group also had the lowest oxygen consumption rate and ammonia excretion rate, but the highest O:N ratio, indicating that the optimal light intensity for the juvenile sea cucumber culture was 1,000 lx. Therefore, appropriate light intensities were suggested to provide larval and juvenile sea cucumbers with better growth and development conditions.     

Feasibility of Offshore Co‐culture of Abalone,Haliotis discus hannai Ino,and Sea Cucumber,Apostichopus japonicus,in a Temperate Zone

Feasibility of offshore co‐culture of abalone and sea cucumber was investigated in Northern China. Survival and growth of abalone, Haliotis discus hannai Ino, and sea cucumber, Apostichopus japonicus, co‐cultured in abalone cages from suspended longlines, in the offshore area, were examined. Abalone and sea cucumbers were co‐cultured at density ratios of both 3:1 and 6:1 for 1 yr. Abalone were fed with fresh kelp and no additional feed was given to sea cucumbers. Survival of abalone and sea cucumber was 100% for all treatments. Abalone and sea cucumber grew well; the body weight (BW) of abalone and sea cucumber was nearly doubled and had reached a commercial size. There were no significant differences in the growth rates for both abalone and sea cucumber between the two density treatments. The specific growth rate of BW of abalone (SGRbw) was highest in June, with a value of 0.536%/d. Growth rate of sea cucumber (SGRsc) was highest in December, reached 1.84%/d, with an annual average SGRsc of 0.182%/d. Results suggested that the offshore co‐culture of abalone and sea cucumber was feasible offshore. The co‐culture of abalone with sea cucumbers may provide an additional valuable crop without additional financial input.     

刺参(Apostichopus japonicus)保苗期“肠炎病”及其治疗方法

对2014年3月山东省蓬莱某刺参(Apostichopus japonicus)保苗场患“肠炎病”的刺参进行了临床症状和组织病理学观察以及病原菌分离与鉴定,利用氟苯尼考为治疗药品,以脏壁比、增重率和特定生长率为评判指标,探讨了3种不同用药方式(口服、药浴、口服+药浴)对刺参保苗期“肠炎病”的治疗效果.结果显示,刺参“肠炎病”症状表现为体色发黑,附着能力弱,摄食和活动能力差,解剖后可见肠道内食物不连续,肠腔内有大量黄白色粘液或浓状物质,肠道壁变脆、韧性差且易断裂,显微镜下观察到肠道存在大量细菌;组织病理学显示,患病刺参肠道绒毛膜散乱、粘膜层溃散,结缔组织散乱,且与肌肉层分离较明显.自刺参肠道处分离出优势度最高的细菌In-1菌株,人工感染实验证实,该菌为刺参“肠炎病”致病菌,该致病菌主要来源于饲料藻粉.利用细菌形态观察、生理生化和分子生物学方法(16S rDNA和gyrB)鉴定该菌株为哈维氏弧菌(Vibrioharveyi).该菌株对头孢三嗪、阿奇霉素、强力霉素和氟苯尼考等12种药物高度敏感.不同用药方式的治疗效果显示,使用氟苯尼考药浴可获得最佳治疗效果,刺参经药浴治疗后增重率达(24.23±0.41)％,特定生长率达(0.77±0.01)％/d.本研究可为刺参疾病防控和健康养殖提供理论依据和技术参考.     

地衣芽孢杆菌对仿刺参生长、消化和免疫功能的影响

为探讨益生菌制剂对仿刺参生长、消化和免疫功能的影响,选用分离自仿刺参肠道的地衣芽孢杆菌作为潜在的益生菌株进行仿刺参投喂试验。选择初始体质量为(7.17±0.86)g的仿刺参为试验对象,设计空白对照组及益生菌处理组进行投喂。益生菌在饲料中的添加密度分别为10⁵、10⁷、10⁹、10¹¹cfu/g,每10d测定相关指标。40d投喂试验结束后,通过注射灿烂弧菌的方式对各组仿刺参进行攻毒试验。试验结果显示,105、1011cfu/g处理组与对照组相比,各指标差异不显著。而投喂含有10⁷ cfu/g和10⁹cfu/g地衣芽孢杆菌饲料时,仿刺参质量增加率、特定生长率、消化酶活性(胰蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶)及免疫酶活性(酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、超氧化物歧化酶、溶菌酶)均显著高于对照组。试验期间,淀粉酶及超氧化物歧化酶活性呈先升后降的趋势,其他指标呈上升趋势。攻毒试验表明,投喂107cfu/g和109cfu/g地衣芽孢杆菌的仿刺参累积死亡率较低,相对免疫保护率较高,仿刺参抵抗灿烂弧菌的能力得到提高。试验结果表明,当饲料中地衣芽孢杆菌密度为10⁷cfu/g和10⁹cfu/g时,仿刺参生长指标、消化酶活性和免疫酶活性均显著提高。