外源基因导入鲤受精卵最佳时期的研究

本研究以鲤鱼受精卵为材料，通过显微注射技术，在受精卵的不同发育时期把鲤鱼ＭＴ启动子基因和大麻哈鱼ＧＨ基因导入受精卵中，按孵出的鱼苗数分别计算成活率，再通过斑点杂交和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｂｌｏｔ杂交检测整合情况，计算整合率，孵化率最高的为单细胞中期（９０．８３％），整合率最高的为单细胞后期和囊胚期（４０％）。综合研究结果外源基因导入鲤鱼受精卵的最佳时期应选在单细胞后期。     

鲤鱼受精卵导入外源基因最佳时期的研究

鲤鱼受精卵导入外源基因最佳时期的研究梁利群，孙孝文，沈俊宝，闫学春，王鹏（中国水产科学研究院黑龙江水产研究所，哈尔滨１５００７６）１９８５年以来，世界各国先后应用不同外源基因导入虹鳟鱼、鲤鱼、鲶鱼等人工养殖鱼类以提高鱼的质量和产量。但受精卵发育到何时...     

用显微注射技术导入外源DNA对鲤鱼和虹鳟鱼受精卵孵化率的影响

本报道了利用显微注射技术导入外源基因分别对鲤鱼和虹鳟鱼授精卵孵化率影响的研究。从1993年－1996年4年中，我们用显微注射方法，将全鱼生长激素基因导入虹鳟鱼授精卵（包括囊胚期卵）5，676粒，孵出鱼苗364尾，孵化率为6.4%(4年平均，虹鳟鱼正常孵化率为80％）；而用这种方法，将全鱼生长激素基因导入鲤鱼授精卵12，196粒，孵出鱼苗4，290，孵化率为34．0％（4年平均，鲤鱼正常孵化率为70％左右）。实验结果：显微注射技术在虹鳟鱼和鲤鱼两种受精卵上的效果明显不同，斑点杂交和SouthernBlot杂交结果相近。     

显微注射生长激素基因导入中国对虾（Penaeus chinensis）受精卵的研究

本实验采用显微微量注射方法，交羊生长激素基因导入中轻地虾受精卵，受精卵发育到蚤状幼体第三期后采样检测。ＰＣＲ检测结果表明：７个样品共９３尾幼体，有３个样品呈出阳性信号，基因转移比率至少在３％以上。同时斑点杂交结果也证明有两个明显阳性斑点。     

中国对虾（Penaeus chinensis）精子做载体将生长激素基因导入受精卵的研究

本实验采用卡介苗注射器将羊生长激素基因溶液注射到亲虾纳精囊中，以精子为载体，携带基因导入对虾受精卵，而达到转基因对虾的目的。经ＰＣＲ检测表明：１．经ＳＴＥ（ｐＨ８．０）第一次洗涤精子的洗涤液呈阳性信号；第２－４次的洗涤液呈阴性；２．多次洗涤后的精子抽提的ＤＮＡ呈阳性；３．检测 １０个样品１００尾仔虾中有一个样品呈阳性结果，转基因比率在 １％以上。同时斑点杂交结果也印证了上述结果。     

水温对岩原鲤受精卵孵化的影响

观察了不同水温条件下岩原鲤受精卵的孵化过程，探索研究了水温对孵化时间、孵化率、畸形率的影响。结果表明：孵化水温与孵化时间成反比；孵化水温明显影响孵化率、畸形率；22～24℃为岩原鲤孵化的最适温区。     

鲤（Cyprinus carpio）Rh糖蛋白家族基因的克隆与组织mRNA表达

为了研究鱼类氨代谢机制,克隆了鲤（Cyprinus carpio）Rh糖蛋白家族的Rhag、Rhbg、Rhcgl基因的cDNA全序列,与人类Rh基因的氨基酸序列比对结果显示,鲤Rh糖蛋白保守性较高。系统分析表明,鲤3个Rh基因与斑马（Daniorerio）Rh基因的亲缘关系较近。Rhag、Rhbg、Rhcgl基因在鲤鳃组织中表达较高,而在其它组织表达的相对量极低。比较3个基因在鳃组织的表达,Rhbg的表达量极显著高于其它2个基因。这一结果预示Rhag、Rhbg、Rhcgl与鲤的氨代谢密切相关,尤其是Rhbg基因,可能是鲤氨代谢的重要因子。     

中国对虾精子做载体将生长激素基因导入受精卵的研究

本实验采用卡介苗注射器将羊生长激素基因溶液注射到亲虾纳精囊中，以精子为载体，携带基因导入对虾受精卵，而达到转基因对虾的目的。经ＰＣＲ检测表明：１．经ＳＴＥ（ｐＨ８．０）第一次洗涤精子的洗涤液呈阳性信号；第２－４次的洗涤液呈阴性；２．多次洗涤后的精子抽提的ＤＮＡ呈阳性；３．检测１０个样品１００尾仔虾中有一个样品呈阳性结果，转基因比率在１％以上。同时斑点杂交结果也印证了上述结果。     

青海湖裸鲤受精卵快速脱粘技术

为了加速资源恢复步伐,青海湖裸鲤救护中心每年繁育出大量的青海湖裸鲤幼苗进行人工放流,以补充湖内渔业资源量。在前期的采卵环节中稍有不慎往往会有即将成熟但尚未成熟和游离的卵粒被挤出,这些卵同样     

青海湖裸鲤受精卵水霉病的预防措施

<正>青海湖裸鲤是青海湖中唯一的经济鱼类,属冷水性,它在整个青海湖生态系统中处于核心地位。每年5-8月份是它溯河洄游产卵的季节,产卵结束后,亲鱼随水流入湖,陆续孵出的幼苗也在河水的作用下流入湖中。青海湖裸鲤产卵分批完成,一般需2~3次。其绝对怀卵量在6 912~35 189粒之间,相对怀卵量在24~38粒/g,其卵属微粘性,沉性。自2002年大规模青海湖裸鲤人工繁育成功以来,繁育规模逐年扩大,现已具有年     

转牛（羊）生长激素基因工程鲤鱼研究

生产出转牛和羊生长激素基因实验鲤鱼一万余尾，筛选出生长速度快，含有外源基因的转基因鲤鱼１４３尾，遗传实验证实外源基因可遗传给后代，经池塘生长实验证明于代仍具有生长速度快的特征，建立了把外源基直接注入鲤鱼受精卵及确定了外源基因导入鲤鱼受精卵的最佳时期等构建转基因鱼的一整套技术。     

人生长激素基因在团头鲂和鲤中的整合和表达

采用显微注射方法，将带有小鼠ＭＴ－１基因启动顺序与人生长激素ｈＧＨ基因顺序重组的线状ＤＮＡ片段，注入团头鲂和鲤的受精卵，获得成活的实验鱼。经斑点、Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交、放射免疫和酶联等方法检测，表明外源基因在受体鱼中得到整合、转录、翻译和表达，并具促生长效应。转基因雌鱼和雄鱼有性繁殖所获得的子鱼带有外源基因，表明外源基因能通过性细胞传递给子代，并仍具促生长效应。