用IGF-ⅠmRNA表达量评价鲮饲料配方效果的研究

试验以秘鲁鱼粉为饲料蛋白源,研究4种蛋白水平(21.5%、32.2%、42.5%和51.6%)的饲料对鲮(Cirrhinus molitorella)生长、消化酶活性及类胰岛素生长因子(IGF-Ⅰ)mRNA表达水平的影响。经过8周的养殖试验,不同饲料蛋白水平下,蛋白酶活性与特定生长率(SGR)成极显著的正相关性(P0.01);鲮肝组织中IGF-ⅠmRNA的表达量与特定生长率成极显著正相关性(P0.01);鲮肝组织IGF-ⅠmRNA的表达量与蛋白酶活性也成极显著正相关性(P0.01)。结果表明,用鲮肝组织IGF-ⅠmRNA的表达量可以快速鉴定饲料的质量。     

重组鲮GH对鲮IGF-Ⅰ表达的影响

使用半定量RT-PCR方法,研究了鲮（Cirrhinus molitorella）各组织中IGF-ⅠmRNA组织表达,并分析重组鲮GH处理后鲮IGF-Ⅰ表达变化情况。结果表明,鲮IGF-ⅠmRNA在肝组织中表达最高,其次是肾和脑,另外在肠、鳃、脾、性腺和心脏组织中也有表达,而在肌肉、皮肤中没有检测到鲮IGF-ⅠmRNA的表达;按120μg·g^-1鱼体重的剂量经腹腔注射重组鲮GH,观察12h后鲮IGF-Ⅰ表达变化情况,发现经重组鲮GH处理后,鲮肝组织IGF-ⅠmRNA表达水平显著升高,脑组织IGF-ⅠmRNA表达水平也稍有升高,而在肌肉中仍未检测到IGF-ⅠmRNA的表达;重组鲮GH处理前后,对照组中鲮血清中IGF-Ⅰ的含量为145.59±21.84ng·mL^-1,试验组中鲮血清中IGF-Ⅰ的含量为247.71±2.83ng·mL^-1,经t检验,P=0.043〈0.05,表明重组鲮GH处理前后鲮血清中IGF-Ⅰ的含量存在显著性差异。     

光合细菌PS2对尖吻鲈的生长、消化酶及非特异性免疫酶的影响

研究了光合细菌对尖吻鲈（Latescal carifer）的生长、消化酶及血清免疫酶活性的影响。把浓度为8×10^8cfu·mL^-1的荚膜红假单胞菌（Rhodopseudomonas capsulate）的液体制剂分别以0．0％（对照组）、0．5％、1．0％和1．5％的比例添加到饲料中，投喂初始体质量为（10．95±0．25）g的尖吻鲈50d。鱼的增重率、特定生长率、成活率及饲料系数在组间均没有显著性差异（P〉0．05）。肝蛋白酶、肠淀粉酶及胃淀粉酶在1．0％组显著高于对照组（P〈0．05）；肠蛋白酶在1．5％组显著低于1．0％组（P〈0．05），但试验组与对照组间没有显著性差异（P〉0．05）；幽门垂的消化酶在1．5％组显著高于其他各组（P〈0．05）。血清碱性磷酸酶（AKP）、过氧化物酶（POD）和超氧化物歧化酶（SOD）的活性在组间均没有显著性差异（P〉0．05）。结果表明，该株光合细菌对尖吻鲈的生长及非特异性免疫力没有显著影响，但在1．5％组能显著促进其幽门垂消化酶的活性，在1．0％组显著促进肝蛋白酶及肠和胃淀粉酶的活性。     

黄颡鱼幼鱼对蛋白质和脂肪的需要量

在水温23±5℃下,将平均体质量10．32g的黄颡鱼（Pelteobagrus fulvidraco）放养在27个60cm×60cm×120cm的微流水网箱中,饲喂3个蛋白质水平（32．0％、40．0％、48．0％）,每个蛋白质水平设3个脂肪水平（3．0％、10．0％和17．0％）的饲料,饲养100d。结果表明：在3．0％脂肪水平下,黄颡鱼摄食含40．0％蛋白质的饲料时,平均末体质量、特定生长率和蛋白质效率显著提高,饲料系数降低（P〈0．05）。在10．0％脂肪水平下,黄颡鱼摄食含48．0％蛋白质饲料时,饲料系数显著降低（P〈0．05）,摄食含40．0％的蛋白质饲料次之。黄颡鱼摄食含48．0％蛋白质与3．0％脂肪饲料组和40．0％蛋白质与10．0％脂肪组的干物质消化率最高（P〈0．01）;蛋白质消化率在48．0％蛋白质与3．0％脂肪达到最高（P〈0．01）,脂肪消化率均在40．0％蛋白质与10．0％脂肪达到最高（P〈0．01）。实验表明,黄颡鱼幼鱼较为适宜的蛋白质和脂肪需要量分别为40．0％和10．0％。     

饲料中用混合植物蛋白并添加氨基酸替代鱼粉对斑节对虾生长及免疫力的影响

以不同比例大豆浓缩蛋白和花生麸为混合植物蛋白源替代不同水平鱼粉,并添加包膜赖氨酸和蛋氨酸,饲喂斑节对虾（Penaeus morlodoll）[（1．27±0．02）g]56d,研究不同鱼粉含量饲料对斑节对虾生长及非特异性免疫力的影响。结果表明：1）斑节对虾增重率（245．02％）、特定生长率（2．58％·d^-1）均在对照组获得最大值,显著高于除F1和F2组外的其他各组（P〈0．05）。当对虾摄食F1组饲料时饲料系数最小,显著小于F3～F5组（P〈0．05）。成活率在F4组最低,显著低于F0～F2组（P〈0．05）,但与其他各组无显著性差异（P〉0．05）;2）混合植物蛋白替代不同水平鱼粉的饲料对虾体成分无显著性影响（P〉0．05）;3）肝脏中超氧化物歧化酶（SOD）活性在F2组最高,显著高于对照组（P〈0．05）,与其他各组差异不显著（P〉0．05）。肌肉中S01）活性在F5组最高,显著高于其他各组（P〈0．05）,酸性磷酸酶（ACP）活性在F1组最高,显著高于F2～F4组（P〈0．05）,溶菌酶（LSZ）活性在F4和F5组最高,显著高于F1D～F3组（P〈0．05）。根据斑节对虾的增电率和特定生长率得出用混合植物蛋白并添加包膜氨基酸可替代饲料中20％的鱼粉,且随着饲料中植物蛋向含量的增加,对虾非特异性免疫力增强。     

饲料脂肪水平对褐菖鲉生长、肠道消化酶及主要脂代谢酶活力的影响

研究了不同脂肪水平饲料对褐菖鲉（Sebastiscusmarmoratus）生长、肠道消化酶及肝脏中主要脂代谢酶活力的影响,试验选用平均体质量为（27．56±0．19）g的褐菖鼬幼鱼225尾,随机分成5个组,分别投喂脂肪水平为6．1％、9．5％、12．4％、15．1％和18．5％的饲料,试验周期为60d。结果表明,1）褐菖铀的特定生长率和肥满度呈先升后降的趋势,在脂肪水平12．4％时达到最大（P〈0．05）,饵料系数则相反,呈先降后升的趋势,肝体指数随脂肪水平的升高而增大（P〈0．05）,成活率在各组问没有显著差异;2）鱼体肠道脂肪酶活力呈上升趋势（P〈0．05）,胃蛋白酶与淀粉酶活力在各组之间没有显著差异;3）褐菖鲉的脂肪酸合成酶活力呈先升后降的趋势（P〈0．05）,脂蛋白酶活力和肝酯酶活力也呈上升趋势,但各组间差异不显著。根据特定生长率与饲料脂肪水平的回归曲线计算得出,褐菖鲉幼鱼最适脂肪需求量为12．72％。     

微生物制剂对中华鲟生长、消化酶及非特异性免疫酶活性的影响

在水温15．8～18．6℃下,研究了EM菌液对体质量（13．85±1．44）g中华鲟（Acipenser sinensis）生长、消化酶和非特异性免疫酶活性的影响。实验鱼随机分为对照组和试验组,每组3个重复,每个重复20尾,饲养在室内直径1m、高0．7m的圆形玻纤缸中,分别投喂基础饲料和含EM菌（5．0×10^9 CFU·kg-1饲料）的试验饲料。90d的饲养表明,试验组中华鲟的生长指标均大于对照组,其中增重率及特定增重率显著大于对照组（P〈0．05）;试验组鱼淀粉酶、脂肪酶及胃蛋白酶活性均大于对照组,其中试验组肝、胃中淀粉酶活性比对照组高46％和79％、脂肪酶活性高52％和246％,肠、胃中蛋白酶活性比对照组高54％和48％,均呈显著差异（P〈0．05）。试验组鱼肝中过氧化物酶（POD）、超氧物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）活性均显著大于对照组（P〈0．05）,分别提高了29％、33％和34％,脾中除POD外,其他酶活性与肝中相同,但试验组鱼肝、脾中MDA含量比对照组分别小了47％和44％,呈显著性差异（P〈0．05）,溶菌酶活性无明显变化（P〉0．05）。由此得出,在饲料中添加EM菌液可提高子中华鲟的消化酶及非特异性免疫酶的活性,促进生长。     

金丝桃素、绿原酸和硬葡聚糖对草鱼幼鱼生长及免疫功能的影响

在水温（25±2）℃下，分别在基础饲料中添加不同剂量的硬葡聚糖（0．2％，G1组；0．4％，G2组）绿原酸（0．04％，G3组；0．08％，G4组）和金丝桃素（0．066％，G5组；0．132％，G6组），连续投喂放在1．0m×0．5m×1．0m网箱内、体质量110±5g的草鱼（Ctenopharyngodon idellus）幼鱼35d，以未添加者为对照组，探讨三种添加剂对草鱼幼鱼生长和免疫功能的影响。结果表明，三种添加济对草鱼幼鱼增重率和特定生长率均影响不显著，当饲料中添加0．08％的绿原酸时，草鱼幼鱼末体质量和肝体比显著增加（P〈0．05）；三种添加剂都可显著提高碱性磷酸酶活性，其中以添加0．08％的绿原酸效果最好，添加剂各组间碱性磷酸酶活性差异不显著（P〉0．05）；0．132％金丝桃素组的草鱼血清超氧化物歧化酶活性显著高于对照组，其它试验组与对照组差异不显著；饲料中添加0．2％硬葡聚糖可显著提高草鱼幼鱼血清溶菌酶含量（P〈0．05）；三种添加剂对草鱼幼鱼血清中丙二醛的含量影响不显著（P〉0．05）。     

不同饲料蛋白水平对华鲮幼鱼生长的影响

用3种不同蛋白含量（26．1％、38．3％、52．7％）的配合饲料投喂华鲮幼鱼153d，随着饲料蛋白质含量从26．1％上升到52．7％，平均日增重从0．08g／d上升到0．33g／d，3组之间的日增重和体重有显著差异（P〈0．05）；饲料系数从4．82下降为2．18，3组之间的饲料系数有显著差异（P〈0．05）。3种不同蛋白含量（26．1％、38．3％、52．7％）的配合饲料的成本分别为2．53元／kg、3．75元／kg、5．57元／kg；鱼体每kg增重所需饲料成本分别为12．19元、10．39元、12，14元／。初步认为蛋白含量为38．3％的配合饲料更适合华鲮幼鱼的生产需要。     

重组鲮IGF—I对鲮GH表达的影响

使用半定量 RT-PCR 方法检测了鲮各组织中 GH mRNA 的表达,并分析重组鲮 IGF-Ⅰ处理后鲮 GH 表达变化情况。结果表明:鲮的 GH mRNA 表达具有明显的组织特异性,在鲮的肝、肾、脾、肌肉、肠、鳃、性腺、心脏和皮肤中都未检测到 GH mRNA 表达,只在鲮脑中检测到 GH mRNA 表达;经重组鲮 IGF-Ⅰ处理后,鲮脑中GH mRNA 稍有升高,但在肝和肌肉中仍未检测到 GH mRNA 表达;重组鲮 IGF-Ⅰ处理前后,鲮血清中 GH 浓度变化不明显。     

饲料蛋白质和能量水平对草鱼幼鱼生长和消化酶活性的影响

在水温24～29℃下,将675尾规格整齐、健康、体质量为（35.59士0.44）g的草鱼（Ctenopharyngodon idel-lus）随机分为9个处理,每处理3个重复,放养于水泥池中的网箱（100cm×50cm×100cm）内,投喂以鱼粉和豆粕为蛋白源,豆油作为脂肪源配制的3个蛋白水平（24%、28%、32%）,每一蛋白水平设3个脂肪水平（4%、6%、8%）,共计9种饲料。饲料蛋能比（P/E）在15.81-22.46 mg·kJ-1之间。92d的饲养表明：D4组（蛋白质含量为28.02%,脂肪为4.30%）草鱼的特定生长率最高,显著高于其他各组（P〈0.05）。随着饲料中蛋白含量的增加,草鱼全肠中蛋白酶的活力逐渐升高,之后又降低,以D4组饲料的蛋白酶活性最高,显著高于D1、D8和D9（P〈0.05）。本实验表明,该生长阶段的草鱼所需最适蛋白水平为28.02%,能量为14307kJ.kg-1,P/E约为19.58mg·kJ-1。     

外源激素对花鲈(Lateolabrax japonicus)血清IGF-1含量及肝脏IGF-1和IGFBP-1 mRNA表达的影响

对花鲈(Lateolabrax japonicas)成鱼腹腔注射促黄体激素释放激素类似物(LHRH-A3)和人体绒毛膜促性腺激素(HCG),利用放射性免疫激素测定方法(RIA)检测了花鲈血清中类胰岛素生长因子(Insulin-like growth factor 1,IGF-1)在注射后6、12、24、48 h内的变化情况,同时还利用荧光实时定量PCR技术检测了花鲈肝脏中IGF-1和类胰岛素生长因子结合蛋白1(Insulin-like growth factor-binding protein 1,IGFBP-1)mRNA的相对表达量的变化情况。结果表明,注射LHRH-A3的花鲈血清中IGF-1的含量在24 h后出现了明显的降低(P0.05),而花鲈肝脏中IGF-1 mRNA的相对表达量在注射6 h后较对照组明显升高(P0.05),而肝脏中IGFBP-1 mRNA的相对表达量则呈现下降趋势。注射HCG的花鲈血清中IGF-1的含量在注射后12 h出现了明显降低(P0.05),24 h后血清中IGF-1含量持续降低。肝脏中IGF-1 mRNA的相对表达量在注射后的24 h内均保持稳定,而在处理后的48 h出现了显著上升(P0.05)。肝脏中IGFBP-1 mRNA的相对表达量在注射后12h检测到显著升高(P0.05)。研究结果表明,LHRH-A3和HCG均可以通过直接或间接的刺激作用来触发花鲈IGF系统的应答反应,但是其中具体机制尚不明了。     

饲料蛋白水平对鲈鱼生长、体组成及蛋白酶活力的影响

以初始体重为(34.15±0.33)g的鲈鱼Lateolabrax japonicus为研究对象,鱼粉和酪蛋白作为蛋白源,设计并制成蛋白质梯度分别为35%、40%、45%、50%、55%的5组配合饲料,进行为期56 d的生长试验,探讨配合饲料中不同蛋白质水平对鲈鱼生长、体组成及蛋白酶活力的影响。结果表明,各组鲈鱼存活率为91.7%-96.7%,无显著差异(P0.05);随着饲料蛋白质水平的提高,鲈鱼的特定生长率逐渐升高,当饲料蛋白质水平达到45%时趋于稳定,且饲料蛋白45%、50%、55%组试验的特定生长率显著高于35%组(P0.05);蛋白质沉积率呈先上升后下降的趋势,当饲料蛋白质水平达到45%时达到最大值;饲料蛋白质水平对鲈鱼鱼体水分含量无显著性影响(P0.05),鲈鱼鱼体粗蛋白含量随着饲料蛋白水平提高而增加,粗灰分、粗脂肪含量则呈减少趋势;随饲料蛋白质水平提高,胃蛋白酶和胰蛋白酶的活性呈升高趋势,肝脏组织中谷草转氨酶的活性呈现升高趋势,而谷丙转氨酶的活性没有显著性变化(P0.05)。饲料中蛋白水平为45.00%-45.89%,其生长及蛋白沉积率最高。     

饲料中添加甜菜碱对军曹鱼生长、体营养成分和血清生化指标的影响

通过8周的养殖试验,评估了饲料中添加甜菜碱对军曹鱼（Rachycentron canadum）生长、体营养成分、血清生化指标和肝脏中酶活性的影响。共设计6种饲料,甜菜碱添加水平分别为0、0．05％、0．10％、0．20％、0．30％和0．40％。结果显示,添加水平为0．05％时增重率（WG）和特定生长率（SGR）最高,肝脏组织状况最好,全鱼和肌肉中蛋白质质量分数最高;添加水平超过0．20％时肥满度（cF）随甜菜碱添加量的上升而下降。各添加组的肝体比（HSI）均显著低于对照组且全鱼和肝脏中（0．10％添加组除外）的脂肪质量分数均低于对照组;血清指标中各添加组的血清甘油三酯（TG）浓度均高于对照组,但随着添加量的提高有先升后降的趋势;肝脏中谷丙转氨酶（GPT）的活性显著低于对照组。由此可见,饲料中添加适量的甜菜碱可以促进军曹鱼的生长,具有一定的降脂作用,利于脂肪代谢。     

饲料中碳水化合物水平对鲈鱼生长、生理状态参数及体组成的影响

以初始体重(34.26±0.37)g的鲈鱼Lateolabrax japonicus为研究对象,进行为期70d的生长实验,探讨饲料中不同的碳水化合物(CHO)水平对其生长、饲料利用、血糖水平和糖酵解酶活力的影响。实验配制6种不同CHO水平(0、6%、12%、18%、24%和30%)的等氮等脂饲料。结果表明,随着饲料中CHO水平的升高,特定生长率(SGR)和饲料效率(FE)均呈现先上升后下降的趋势,都在12%组达到最大值,并显著高于24%和30%组(P0.05),而肝体比(HSI)和脏体比(VSI)呈显著升高的趋势(P0.05),且在30%组达到最大值。饲料中不同CHO水平对鲈鱼成活率、肥满度、肌糖原和己糖激酶(HK)活力均无显著影响(P0.05)。饲料中不同CHO水平显著提高了鲈鱼粗蛋白和粗脂肪含量(P0.05),降低了灰分含量(P0.05)。饲料干物质的表观消化率(ADC)在各组之间差异显著(P0.05),18%组显著高于其余5组(P0.05),12%组饲料蛋白质的ADC显著高于对照组(P0.05)。血清中葡萄糖、甘油三酯、胆固醇含量随着饲料中CHO水平的增加而逐渐上升(P0.05),肝糖原含量先显著升高后趋于平稳(P0.05)。以SGR为评价指标,用二次曲线模型分析得出鲈鱼饲料中CHO的适宜添加量为17.75%。     

Molecular cloning of fatty acid synthase from grass carp (Ctenopharyngodon idella) and the regulation of its expression by dietary fat level

The fatty acid synthase (FAS) gene was cloned from liver of grass carp (Ctenopharyngodon idella) by degenerate oligonucleotide primed PCR. The obtained cDNA fragment was 683 bp, which encoded 227 amino acids. Then, grass carps with initial body weight of (134.89 ± 12.12) g were fed diet supplemented with 0, 20, 40 g kg^?1 fat to investigate the impacts of dietary fat levels on growth, liver FAS enzyme activity and mRNA expression. After 8 weeks feeding, final body weights of the three groups were 344.11, 347.23 and 373.02 g. Compared with control group (0 g kg^?1), growth rate of 40 g kg^?1 fat group was increased by 14.03%, and feed conversion rate decreased by 11.32% (P < 0.05), liver FAS enzyme activity of 20, 40 g kg^?1 fat groups were reduced by 33%, 64% (P < 0.05), and FAS mRNA expression level reduced by 18%, 74% (P < 0.05), respectively. Results above showed that 40 g kg^?1 fat addition can significantly improve growth performance of grass carp. Liver FAS activity and mRNA expression tended to be inhibited by the increasing dietary fat level. Fat containing high levels of polyunsaturated fatty acids had strongly inhibitory effects on liver FAS activity and gene expression.     

蛋白水平对不同斑节对虾家系生长与消化酶活性的影响

为探究饲料蛋白水平与不同斑节对虾(Penaeus monodon)家系生长和消化酶之间的关系,研究了3种蛋白水平(34%、38%、42%)的饲料对16个斑节对虾家系的生长性状以及胃和肝脏消化酶活性的影响。经过56 d的养殖实验,结果表明:(1)随着蛋白水平的升高,所有斑节对虾家系的特定生长率均有所增加,F1、F2、F4、F7、F12、F13、F15等7个家系的特定生长率在34%、38%、42%3种蛋白水平组未见显著性差异(P>0.05),其余家系在3种或者其中的2种饲料之间有显著性差异(P<0.05);(2)斑节对虾特定生长率在家系和饲料蛋白质水平这两个因素间交互作用不显著(P=0.974);(3)所有斑节对虾家系的蛋白酶活性均随着饲料蛋白含量的增加而增加,淀粉酶活性有所下降,但规律不明显;(4)13个斑节对虾家系的肝脏蛋白酶活性、14个家系的胃蛋白酶活性均与家系特定生长率有着极显著的相关性(P<0.01),淀粉酶活性和特定生长率的相关性远小于蛋白酶活性。     

饥饿对卵形鲳鲹幼鱼不同组织抗氧化能力、Na＋／K＋-ATP酶活力和鱼体生化组成的影响

卵形鲳鲹（Trachinotusovatus）幼鱼经短期饥饿处理后测定其鳃、肝脏和肌肉中的总抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）活力、丙二醛（MDA）质量摩尔浓度、Na＋／K＋-ATP酶活力和全鱼生化组成。结果显示,饥饿7d后鳃丝和肌肉的T-AOC显著升高,肝脏的T-AOC显著下降（P〈0．01）;鳃丝和肌肉SOD活力均显著升高（P〈0．01）,肝脏的SOD活力变化不显著（P〉0．05）;鳃丝、肝脏和肌肉的b（MDA）在饥饿后上升,鳃丝b（MDA）与对照组差异极显著（P〈0．01）,肝脏b（MDA）与对照组相比差异显著（P〈0．05）,肌肉b（MDA）差异不显著（P〉0．05）。饥饿8d后鳃丝Na＋／K＋-ATP酶活力显著升高（P〈0．01）,肝脏Na＋／K＋-ATP酶活力显著下降（P〈0．01）,肌肉Na＋／K＋-ATP酶活力也有所升高（P〉0．05）;饥饿后鱼体水分质量分数上升,粗蛋白质量分数、粗脂肪质量分数和能值下降,而且相对损失率是粗脂肪〉粗蛋白,表明卵形鲳鲹幼鱼在饥饿早期主要消耗脂肪向机体提供能量,随着饥饿时间的延长,蛋白质将被消耗。