苦参抗水产病原哈氏弧菌活性物质的提取、鉴定及作用机制

利用单因素实验、Box-Behnken试验设计结合响应面分析法，从提取溶剂（蒸馏水、50%甲醇、甲醇、50%乙醇、乙醇）、乙醇浓度（60%～100%）、提取温度（60℃、70℃、80℃、90℃、100℃）、提取时间（60 min、90 min、120min、150 min、180 min）和液料比等对抑菌活性的影响几方面优化苦参抗水产病原哈氏弧菌（Vibrio harveyi）活性物质（ASSF）的提取工艺；采用高效液相色谱和标准品比对技术，鉴定ASSF的抗菌活性化合物；从对哈氏弧菌的生长、细胞膜的完整性和通透性、细胞壁的通透性等方面探讨ASSF的作用机理。结果表明：ASSF的最佳提取条件是：无水乙醇为溶剂，液料比30∶1 m L/g，提取温度79℃，提取146 min。在此条件下，提取物抑菌圈的实际值为（17.64±0.22）mm，与预测值无显著性差异。固态ASSF的得率为（21.17±0.91）%。鉴定出苦参酮是ASSF中的抗哈氏弧菌活性化合物。ASSF和苦参酮的最小抑菌浓度分别为0.125 mg/m L和0.062 5 mg/m L。ASSF对于哈维氏弧菌的抑制作用主要是通过破坏...     

黄颡鱼源温和气单胞菌的分离鉴定及中草药体外抑菌效果研究

为探明遵义金鼎镇合江源养殖场患病黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)的致病原因，通过对患有腹水、鳍条充血和游动缓慢等症状的黄颡鱼进行了病原菌分离纯化，得到纯培养菌株MLT-1,经过回归感染证实其为黄颡鱼的致病菌，经生理生化和16S rDNA鉴定为温和气单胞菌(Aeromonas sobria)。同时采用乙醇提取法获得30种中草药醇提物，固体培养基打孔测试中药醇提物对MLT-1的抑菌作用，结果显示：诃子、大黄、烟叶、樟叶、桑白皮5种中草药对MLT-1的抑菌效果较好，诃子和大黄的最小抑菌浓度(MIC)及最小杀菌浓度(MBC)均为0.49 mg/mL,烟叶的MIC和MBC均为0.98 mg/mL,樟叶和桑白皮抑杀温和气单胞菌效果相同，MIC和MBC分别为0.195 mg/mL和3.91 mg/mL。结果表明诃子、大黄、烟叶、樟叶、桑白皮5种中草药可用于防治黄颡鱼温和气单胞菌细菌病。     

溶壁酶体外抗同丝水霉活性研究

为探究溶壁酶对水产动物水霉病的预防和治疗效果,以同丝水霉(Saprolegnia monoica)为研究对象,溶壁酶设0、5、10、20、40、80 mg/m L共计6个浓度处理组,取浓度为103个/m L的水霉孢子菌悬液0.1 m L,涂布于不同溶壁酶浓度的马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)上,25℃培养5 d,以最低抑菌浓度为判定指标,研究溶壁酶溶解同丝水霉孢子的抑菌活性;在此基础上,以溶壁酶最低抑菌浓度30℃分别水浴2 h和4 h处理同丝水霉菌丝块,PDA培养基上25℃培养5 d,通过用体外抑菌试验、菌丝显微结构观察等方法,研究溶壁酶最低抑菌浓度对同丝水霉菌丝的抑菌活性,为进一步开发水产动物抗真菌(替代孔雀石绿)药物提供科学依据。结果显示,溶壁酶对同丝水霉孢子的最低抑菌浓度为20 mg/m L,通过间隔添加溶壁酶该浓度,72 h能够有效抑制同丝水霉菌丝的生长;溶壁酶30℃水浴处理同丝水霉菌丝块的时间(2 h和4 h)与溶壁酶溶解菌丝效果呈正相关。     

山姜对益生芽孢杆菌体外抑菌活性试验研究

为研究中草药山姜粗提液对益生芽孢杆菌体外抑菌效果,特采用试管二倍稀释法和管碟法检测不同浓度的山姜煎煮液和乙醇提取液在体外对蜡样芽孢杆菌PAS38菌株和枯草芽孢杆菌Pab04菌株的最小抑菌浓度(MIC)和抑菌直径,并以肠毒性大肠杆菌(ETEC)、4μg/mL硫酸庆大霉素作阳性对照,生理盐水作阴性对照。结果表明,山姜煎煮液和乙醇提取液对两株益生芽孢杆菌和ETEC无抑菌作用,硫酸庆大霉素对蜡样芽孢杆菌PAS38和枯草芽孢杆菌Pab04菌株MIC均为1.25μg/mL,对ETEC的最低抑菌浓度MIC为0.625μg/mL。山姜煎煮液和乙醇提取液对受试菌株抑菌直径与生理盐水相比差异不显著(P>0.05),硫酸庆大霉素与其相比差异极显著(P<0.01)。山姜粗提液对两株益生芽孢杆菌无明显抑菌作用。     

高压静电场结合冰温气调保鲜技术对罗非鱼鱼片品质的影响

文章研究了高压静电场结合冰温气调保鲜技术对罗非鱼鱼片的保鲜效果,通过罗非鱼片贮藏过程中肉汁渗出率、菌落总数、感官品质、色差值、总挥发性盐基氮(TVB-N)、脂质氧化(TBA)、p H等指标的变化情况,分析比较3.8 kV、1.8 kV、0 V高压静电下罗非鱼肉品质指标的变化。结果表明,高压静电场能够显著改善鱼肉的品质,贮藏至第30天,样品无异味,感官品质良好,可显著抑制肉汁渗出;可有效抑制微生物的生长和挥发性盐基氮的增加,在一定程度上抑制了鱼肉内脂肪氧化,具有较好的保鲜效果。总体上3.8 kV高压静电对鱼肉的保鲜效果优于1.8 kV高压静电,可延长肉片的保质期至30 d。     

三种助溶剂对氟苯尼考水溶液助溶效果的比较研究

氟苯尼考是一种新型动物专用氯霉素类广谱抗菌药,在畜禽及水产动物细菌性疾病的防治中应用较广。而其在水中溶解度小,所配药液浓度低,长时间贮存稳定性差,使用极其不便。本实验摸索了常用的二甲基亚砜、甲醇、乙醇三种助溶剂在不超过70%添加量下促进氟苯尼考水溶液所能达到的最大浓度,观察了在低温（4℃）、常温（20℃）和高温（30℃）下药物的稳定性,通过抑菌实验检测了助溶剂对药物抑菌效果的影响。结果表明：二甲基亚砜助溶效果最好,对药效影响最小,可作为氟苯尼考水溶制剂的首选助溶剂。甲醇最大可促进氟苯尼考溶液达到2%,乙醇仅为0.7%,两者对药物抑菌效果影响较大,但可增强药液在低温下的稳定性,长时间放置（7d）无药物析出。     

海参皂苷的提取条件研究

海参皂苷极性较大,多采用醇提法进行提取,为减少海参皂苷制备过程中多糖和蛋白质的干扰,简化后续分离过程,本实验考察了乙醇浓度、温度、料液比对干海参中海参皂苷提取的影响。结果表明:乙醇浓度为0%、80%时海参皂苷得率较高,其中0%乙醇提取时提取液中多糖含量较少,更有利于后续分离;20℃、30℃提取时皂苷得率高,30℃提取时杂质更少;料液比为1∶15时提取得到的海参皂苷含量较高,提取时间控制在8 h内,可有效减少杂质产生且能获得较多皂苷。     

乳酸菌胞外产物对副溶血弧菌抑制作用的研究

分离到对副溶血弧菌有抑制作用的3株乳酸菌,命名为A-1、A-2、A-3。对其胞外产物的抑制作用进行研究,结果表明:3株乳酸菌胞外产物对副溶血弧菌有较强抑制作用,抑菌环直径分别可达18.6mm、20.3 mm1、9.5 mm;抑菌物质对热处理不敏感:在60℃、80℃抑菌活性基本不变,在121℃处理20min条件下抑菌效果分别是原液的67%,83%,74%,蛋白酶K处理对其活性有较大影响,抑菌成分可能是细菌素。进一步研究了细菌素抑菌活性与乳酸菌培养时间的关系。根据形态特征和常规生理生化反应进行鉴定,A-1、A-2鉴定为嗜热链球菌,A-3鉴定为嗜酸乳杆菌。     

马氏珠母贝精子的超低温保存

通过比较不同pH值（5．5-9．5）、不同盐度的海水等作为基础液对马氏珠母贝精子保存的影响，选择其中无激活精子作用又对其生理特性（活力，寿命，受精能力等）无影响者，加入二甲亚砜抗冻剂配制成超低温保存的抗冻保护液，精液与保护液按1：10和1：20的比例混合，样品按4组不同的降温程序平衡后转入液氮冷冻，比较其超低温冻存的效果。结果表明：以海水（pH7．5—8．0）为基础液，配制10％DMSO作为抗冻保护液，精液与保护液比例为1：20，在低温（0-4℃）中平衡约30min，在距液氮面15cm、5cm处分别停留5min、10min后转入液氮（-196℃），冻存精子效果良好。冷冻24h、48h及5个月后，在38—40℃下水浴解冻复苏后，用终浓度0．25‰的氨海水刺激，精子存活率可超过60％，受精率可达80％。     

渔家乐A型对鱼类细菌病的抑菌效果初报

采用平板抑菌法，试管抑菌法测定渔家乐A型对鱼类细菌病的抑制效果。结果表明。该鱼药对草鱼赤皮、肠炎、烂鳃及鲢鱼暴发病等细菌性鱼病具有明显的抑菌效果，在10ppm浓度时，平均抑菌范围达35mm以上。最低有效抑菌浓度为0．1ppm。且稳定性好，置30天，后抑菌效果无明显下降。