烟台四十里湾栉孔扇贝、海带和刺参负荷力的模拟测定

利用模拟养殖系统,实测了四十里湾海区对栉孔扇贝（Ｃｈｌａｍｙｓ ｆａｒｒｅｉ）、海带（Ｌａｍｉｎａｒｉａ ｊａｐｏｎｉｃａ）和刺参（Ａｐｏｓｔｉｃｈｏｐｕｓ ｊａｐｏｎｉｃｕｓ）的负荷力。结果表明,模拟养殖系统,单养和贝藻参混养系统对栉孔扇贝的负荷力分别为１８４．６和２０１．７ｇ／ｍ＾２;混养系统对海带和刺参的负荷力分别为１０６．８和７４７．７ｇ／ｍ＾２。该海区对单养和贝藻参混养系统栉孔扇贝的负荷     

栉孔扇贝能量收支的研究

报道了在模拟自然条件下栉孔扇贝能量收支研究的实验结果。实验数据显示,在实验的温度范围内（８～１７．２℃）栉孔扇 贝的个体耗氧率和个体排氨率随壳长的增大和水浊的升高而增大,呈下相关关系。栉孔扇贝的个体大小是影响能量收支各组分比例的主要因素。随个体的增大,扇贝的呼吸能增大,而生长能减小。在能量收支方程中,呼吸能占的比例最大（４４．２％～５１．７）,其次是排粪能（３１．４％～３６．８％）,第三为生长能（     

墨西哥湾扇贝与华贵栉孔扇贝的远缘杂交

为进一步研究扇贝属间远缘杂交的可行性,以墨西哥湾扇贝(Argopecten irradians concentricus)与华贵栉孔扇贝(Chlamys nobilis)作为亲本,建立了两种扇贝的正交组MH、反交组HM、墨西哥湾扇贝自交组MM和华贵栉孔扇贝自交组HH。对各实验组的胚胎发育速度、受精率、孵化率、D形幼虫发生率和幼虫生长速度进行比较,分析了不同温度、盐度和精子浓度对各实验组配子亲和力及合子育性的影响,并尝试运用BP神经网络模型预测杂交组浮游幼虫的生长趋势。结果表明,两种扇贝的正反杂交均可获得早期杂交子代(F_1)。从胚胎发育情况看,正反杂交组幼虫发育到D形幼虫的时间均少于两个自交对照组;其受精率、孵化率、D形幼虫发生率也低于两个自交对照组;即使在不同温度、盐度和不同精子浓度下正反交组的受精率和孵化率也均低于两个自交组。从浮游幼虫生长情况看,正反交组D形幼虫的壳长和壳高均高于两个自交组,具有显著的差异性(P0.01),表现出较明显的杂种优势。运用BP神经网络模型对正反交组的浮游幼虫进行预测,其预测值与实测值的误差率均小于4%。     

桑沟湾栉孔扇贝养殖容量的研究

通过计算单位面积的初级生产量生产的有机碳供应量、单位面积滤食性附着生物量及其对有机碳的需求量，首次对桑沟湾栉孔扇贝养殖容量进行了估算。结果显示，当栉孔扇贝壳高为３￣４ｃｍ时，其养殖总容量为１１０亿粒左右，单位面积养殖容量估算值为９０粒／ｍ＾２；当壳高为４￣５ｃｍ时，其养殖总容量降为７５亿粒，单位面积养殖容量估算值为６０粒／ｍ＾２；当壳高为５￣６ｃｍ时，其养殖总容量仅为４０亿粒，单位面积养殖容量为３     

ELISA分析技术在华贵栉孔扇贝与墨西哥湾扇贝病毒检测的应用

运用ELISA分析技术,对湛江地区不同时期的华贵栉孔扇贝和墨西哥湾扇贝体内感染的病毒粒子的季节性变化进行了研究。结果表明1龄华贵栉孔扇贝体内病毒粒子的含量在11月份最高,其P/N值和OD值分别为0.8558和2.51,相比华贵栉孔扇贝大规模死亡提前10-20d。1龄墨西哥湾扇贝的OD值在10、11月份的检测中大于1,即表示墨西哥湾扇贝中可能存在华贵栉孔扇贝病毒粒子,其他月份的检测结果均为完全阴性,即没有检测到华贵栉孔扇贝病毒粒子。     

栉孔扇贝生殖活动前后的滤食和生长

在桑沟湾用模拟现场流水法对栉孔扇贝的摄食生理进行了比较研究。结果表明，栉孔扇贝在进行生殖活动前后滤水率无明显的差异，但进行生殖活动前的摄食量较大。尽管栉孔扇贝的滤水率和摄食量随着个体的增大而增加，它的吸收率却与个体大小无关。在３００￣６００ｍｌ／ｍｉｎ的水流范围内栉孔扇贝的滤水率没有明显的变化，水流小于３００ｍｌ／ｍｉｎ时扇贝的滤水率则明显降低。根据实验数据，用计算机模拟得出了栉孔扇贝在生殖活动前     

低温对栉孔扇贝能量收支的影响

研究低温下栉孔扇贝 (Chlamysfarreri)摄食、呼吸代谢、排泄及能量分配情况 ,为栉孔扇贝的反季节养殖提供生物学依据。在实验室条件下采用静水法 ,测定 3、5和 8℃时栉孔扇贝的能量收支。结果显示 ,在 3～ 8℃时 ,栉孔扇贝的耗氧率、排氨率、摄食率及生长率 (净生长率、毛生长率 )随温度的升高而增大 ;3℃时 ,栉孔扇贝虽然能摄食 ,但是生长率却很低 ;温度对能量分配影响较大 ,生长、排泄分配率随温度的升高而增大 ,呼吸、排粪的分配率与温度呈负相关。在能量收支方程中 ,生长能所占比例变化较大 ,为 17.61%～ 5 3 .2 7% ,代谢能为 2 1.4 8%～3 5 .91% ,排粪能为 2 2 .5 2 %～ 4 5 .99% ,排泄能所占的比例最小 ,低于 3 %。     

养殖栉孔扇贝对桑沟湾碳循环的贡献

通过室内实验、数学模拟的方法研究了桑沟湾养殖栉孔扇贝通过呼吸、钙化等活动对湾内碳循环的影响,并与生物沉积碳相比较发现,养殖扇贝每年通过呼吸和钙化分别放出碳1.22×104t和7.57×102t;但通过生物沉积作用每年有8.71×104t碳被沉降到沉积物界面,这些碳绝大部分被埋藏从而脱离了地球化学循环。尽管养殖扇贝通过呼吸和钙化释放出部分碳,但有更多的碳通过生物沉积作用被埋置因此,从整体上看,养殖栉孔扇贝在湾内碳循环中参与了碳汇的作用。     

栉孔扇贝对单细胞藻类生长间接作用的研究

采用室内实验生态学方法研究了栉孔扇贝对藻类生长的间接促进作用，结果显示，栉孔扇贝对浮游植物有明显的促长作用，并且浮游植物的增长与栉孔扇贝的密度呈正相关，符合如下模式：Y＝40．85lnX 44.87(r^2=0.979,p=0.05,n=15)。栉孔扇贝对浮游植物的促长作用随藻类种类的不同具有较大的差别，主要取决于藻类对营养盐的需求量。     

栉孔扇贝的滤食率与同化率

自青岛近海扇贝养殖区取栉孔扇贝(Chlamys farreri)暂养2周,壳长达25.01～73.92 mm.实验前停食24 h,实验温度梯度为8、13、18、23、28℃,其间投喂不同密度的小球藻(Chlorella spp.),静态实验.结果显示,栉孔扇贝的滤食率与温度和体重成正比,且与体重呈幂函数关系.在实验的温度范围内栉孔扇贝滤食率为1.07～11.66 mg/(ind     

贝壳上污损生物的重量对栉孔扇贝生长和存活的影响

对网笼养殖的栉孔扇贝壳上污损生物的数量进行了研究,发现9～11月贝壳上污损生物的湿重分别为1．47、0．49和2．09g,与上壳重的比值分别为28．16％、10．24％和31．29％。通过在栉孔扇贝上壳添加上壳干重0．5、1、2和3倍重的水泥,用以模拟附着在扇贝壳上的污损生物,设不添加水泥的对照组,对贝壳上污损生物的重量对栉孔扇贝生长和存活的影响进行了研究。结果表明,实验组扇贝壳长、闭壳肌和剩余软体组织的特定增长率及存活率与对照组均没有显著差异（P〉0．05）,说明贝壳上的污损生物的重量没有影响扇贝的生长和存活。     

栉孔扇贝鳃和唇瓣过氧化物酶活性

采用组织化学、电镜细胞化学和分光光度技术对栉孔扇贝(Chlamys farreri)鳃和唇瓣内的过氧化物酶(EC1.11.1.7;POD)进行研究,以探讨扇贝的鳃和唇瓣在免疫防御中的作用。组织化学显示,鳃轴、鳃丝和唇瓣上皮细胞均呈POD强阳性,结缔组织呈弱阳性;病毒感染后酶活力逐步增强。电镜细胞化学定位表明,鳃和唇瓣上皮细胞内有数量和大小不等的POD强阳性颗粒,阳性颗粒多为圆形,直径为150-220 nm;次级溶酶体也呈POD强阳性;内质网和空泡膜等细胞内膜系统以及细胞表面的微绒毛和纤毛呈POD弱阳性。结缔组织中部分血细胞呈POD强阳性。鳃轴上皮细胞内POD高电子密度阳性颗粒较少,而低电子密度阳性颗粒较多;主鳃丝上皮细胞内POD阳性颗粒较少,普通鳃丝上皮细胞内POD高电子致密阳性颗粒和呈POD强阳性的次级溶酶体均较多;唇瓣上皮细胞内POD阳性颗粒较鳃的略少。生化测定显示,鳃轴的POD酶活力最高,鳃丝次之,唇瓣最低;病毒感染24 h后,各部分的酶活力均显著增强。栉孔扇贝鳃和唇瓣内大量的POD可在抵抗病原微生物感染方面发挥重要的作用。     

栉孔扇贝血淋巴中酯酶活性及其性质

采用紫外分光光度法测定栉孔扇贝（Chlamysfarreri）血淋巴中酯酶的活性，并研究底物、抑制剂、激活剂、温度、pH对酯酶活力的影响及酶的热稳定性。结果表明，栉孔扇贝血清与血细胞中均存在酯酶，且血细胞中的酶活力高于血清。血清与血细胞中酯酶的最适作用底物有所不同，血清中为α-醋酸萘酯，而血细胞中为α-丁酸萘酯。当以α-醋酸萘酯为底物时，血清中酯酶的最适温度为45℃，最适pH值为7．5；以α-丁酸萘酯为底物时，血清中酯酶的最适温度为40℃，最适pH值为8．0。以α-醋酸萘酯及α-丁酸萘酯为底物分别测定酶的热稳定时，酶活力变化相似，在20℃时活力最高，而后缓慢下降。栉孔扇贝血淋巴中酯酶属中温型中性酶类，低温下较稳定，底物专一性不强，血清中的酯酶可能来自血细胞，该酶在贝类的免疫防御中町发挥重要的作用。     

微卫星评价栉孔扇贝雌核发育二倍体纯合性

采用筛选获得的5对多态性微卫星引物对栉孔扇贝（Chlamys farreri）减数分裂雌核发育家系A和家系B、有丝分裂雌核发育家系A和家系B各30个个体、双亲及对照组40个个体进行了遗传变异分析,并对减数分裂和有丝分裂雌核发育后代的纯合性进行了比较。电泳结果表明,5对微卫星引物在减数分裂雌核发育和有丝分裂雌核发育个体中均能稳定重复地扩增出相应的序列;各雌核发育家系中均有部分个体出现父本基因,表明精子遗传物质失活不彻底,雌核发育组中存在正常受精个体;有丝分裂雌核发育二倍体在所有检测位点全部纯合,减数分裂雌核发育二倍体在部分位点纯合,但未发现在所有位点全部纯合的个体,在CFMSP007、CFMSP075、CFMSM009、CFMSM014和CFMSM020位点,杂合子比例分别为0．3400、0．3611、0．4884、0．4750和0．7500,平均杂合子比例为0．4829。研究结果显示,栉孔扇贝有丝分裂雌核发育二倍体均为纯合子,如精子的灭活率达到100％,有丝分裂雌核发育二倍体一代即可实现纯合,如再进行一次减数雌核发育即可建立纯系;减数分裂雌核发育二倍体由于具有较高的重组率,其与母本的遗传同质性较高。     

栉孔扇贝一种球形病毒的分离纯化及其超微结构观察

栉孔扇贝是我国北方沿海贝类养殖的重要经济种类 ,目前已成为我国北方海洋经济的支柱性产业之一。但随着近年来病害的不断加剧 ,养殖期栉孔扇贝的大规模死亡现象频繁发生 ,极大地威胁着这一产业的可持续发展。因此 ,国内围绕扇贝大规模死亡的致病因子及病原学的探讨已引起养殖界各方的高度关注[1-4] 。2 0 0 0年我们对山东省内主要扇贝养殖海区开展了系统的病原学和流行病学调查。通过病贝组织超薄切片的电镜观察 ,在病害高发期的病贝体内大量发现一种球形病毒样颗粒。在此基础上 ,我们进一步完成了该病毒粒子的分离和纯化 ,现将有关结果报…     

Physiological and biochemical responses of Zhikong scallop,Chlamys farreri,to different thermal stressors

Water temperature is a significant environmental stressor that affects physiology and biochemical activities of bivalves. Here, temporal variations in physiological and biochemical parameters of Zhikong scallop, Chlamys farreri, under three water temperature treatments were investigated. For the first treatment, scallops were transferred from rearing temperature (15°C, control temperature) to 5, 10, 20 and 25°C, respectively. The second group of scallops was gradually acclimated to above experimental temperatures at a rate of 1–2°C day^?1. The third group was transferred directly between 15 and 7°C every 12 h and for six times. Results showed that significantly higher oxygen consumption and ammonia‐N excretion together with a significant lower ingestion rate was observed for the acute temperature change treatment compared to those in the equivalent gradual temperature variation treatment (P < 0.05). In acute temperature change treatment, hepatopancreas antioxidant enzyme activities, that is, superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT), immune enzyme activities, that is, acid phosphatase (ACP) and lysozyme (LSZ), and heat‐shock protein 70 gene (Hsp70) expression levels of scallops increased substantially within 48 h. Significant increases in SOD, CAT, ACP and LSZ activities, and malondialdehyde content occurred under exposure to fluctuating temperatures (P < 0.01). Gill and hepatopancreatic Hsp70 expression levels also increased significantly in response to water temperature fluctuations (P < 0.05). The study provides basic knowledge about thermal stress in Zhikong scallop and may contribute to the management of scallop mortalities.     

异源精子诱导栉孔扇贝雌核发育二倍体适宜参数的探索

采用照射强度为1500μw/cm2的紫外线对长牡蛎(Crassostrea gigas)精子照射60s,将处理后的精子分别与长牡蛎和栉孔扇贝(Chlamys farreri)的卵子进行受精试验,受精后11.5h用浓度为60mg/L的6-DMAP对栉孔扇贝受精卵分别持续处理15、20、25、30min,运用热滴片法对各实验组进行倍性检测。结果表明,长牡蛎同源单倍体组中单倍体率为75.6%;栉孔扇贝异源单倍体组中单倍体率为14.7%,最佳药物持续处理时间为20min,其二倍体率为24.1%;异源诱导栉孔扇贝单倍体组和二倍体组中胚胎均可以发育到D形幼虫期,其单倍体组中的D形幼虫率为5.0%,20min药物加倍二倍体组D形幼虫率最高为6.1%。本实验结果为异源精子诱导栉孔扇贝雌核发育提供了诱导参数依据。     

扇贝精子及卵子的受精生物学特性

采用扫描电子显微镜和普通光学显微镜观察方法,结合全光谱扫描分析方法,对栉孔扇贝和虾夷扇贝的精子及卵子的受精生物学特性进行了详细的观察,包括精卵产出后形态学变化、卵水的特性、精子顶体反应、卵子皮层反应以及精子分级分离组分对卵子的作用5个方面.结果表明,这两种扇贝精卵生物学特性没有本质的区别,扇贝精子排入海水中10min以内,外形没有太大的变化,但30min以后约有1/4的精子出现头部膨大变成圆球形的现象,受精能力明显下降;扇贝卵子产入海水中1h以内受精能力没有变化,但2h以后,约1/3的卵子出现卵裂现象,未见极体的排放,且卵裂多停止在2细胞期,少数达到4细胞期,基本属于均等卵裂,并失去受精能力;滴入卵水中的精子极易发生自溶解体,未解体的精子发生凝集,10min之后卵水中基本检测不到完整的精子,卵水和钙离子载体A23187均能诱导精子发生顶体反应;精子分级分离组分分别为精浆、精子头部和精子尾部,这三部分除了少数精子头部能够附着在卵子表面外,其他都不具备激活卵子的作用.对扇贝精子和卵子的生物学特性的研究将为解释不同种扇贝的精卵相互识别并受精的现象提供基础资料.     

栉孔扇贝雄核发育二倍体的人工诱导

研究了利用6-二甲基氨基嘌呤(60μg/mL;6-DMAP)抑制第1卵裂诱导栉孔扇贝[Chlamys farreri(Jones et Pre-ston)]雄核发育二倍体的条件。雄核发育单倍体是将强度为2.8 mW/(cm2.s)的紫外线照射20 s的卵子与正常精子受精后得到的。6-DMAP不仅可以有效地抑制减数分裂,还可以有效地抑制有丝分裂;抑制第1卵裂的适宜起始时间为受精后80 min,诱导率为21.0%~22.6%。细胞学观察显示,6-DMAP抑制第1卵裂产生的雄核发育二倍体主要来源于第1卵裂中期的受精卵,由于阻止了染色体分离和原核移动,导致一个融合的二倍性雌性原核的形成;经紫外线照射的卵核在第1卵裂中期没能形成染色体,而是形成1个浓缩的染色质小体,没有参与第1卵裂后期的核分裂。尽管倍化率和D形幼虫发生率较低,但本研究证实了栉孔扇贝雄核发育二倍体人工诱导的可行性。[中国水产科学,2006,13(4):585-590]