鱼类microRNA在先天免疫中的研究进展

先天免疫是宿主识别病原及消除病原感染的第一道防线。模式识别受体是参与识别病原入侵的主要分子，主要包括Toll样受体、RIG-I样受体、NOD样受体和C型凝集素受体等。模式识别受体在识别病原相关分子模式后，激活机体的先天免疫信号通路，诱导炎症细胞因子和干扰素的产生，从而启动抵抗病原入侵的免疫应答。越来越多的证据表明，免疫应答的激活、维持和终止受到了严格的调节，使机体在保持一定免疫强度的同时避免产生过度的免疫反应。microRNA是一类长度为18～23 nt的微小非编码RNA，是鱼类先天免疫应答网络中的重要调控因子。近年来，microRNA在鱼类免疫学领域已开展了大量的研究，但缺乏对其进行及时地全面性的总结。本文综述了近年来miRNA在鱼类先天免疫反应中的研究进展，以期为鱼类的分子抗病育种及疾病防控研究提供一些思路。     

海洋贝类Toll样受体及信号通路的研究进展

Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)是模式识别受体家族(PRR)中重要的一员,它可以特异地识别病原体相关的分子模式(PAMP),激活信号级联、诱发固有免疫反应,在抵御病原微生物过程中发挥重要作用。TLRs最早在果蝇胚胎中发现,是一类进化高度保守的免疫受体家族,在果蝇及脊椎动物中研究得较为透彻。海洋贝类具有较高的经济价值及重要系统进化地位,近年来,大量贝类的Toll样受体及信号通路相关因子被发现。本文综述了Toll样受体的结构、信号通路和海洋贝类TLR及信号通路相关因子的研究进展,有助于丰富海洋贝类固有免疫理论研究。     

中国明对虾C 型凝集素基因(Fclectin)的重组表达及活性分析

研究拟通过分析对虾C型凝集素的活性特点,探讨其在对虾先天免疫应答过程中的潜在功能以及在养殖生产实践中的应用。实验利用原核表达系统对中国明对虾C-型凝集素基因的两个串联的糖识别结构域(carbohydrate recognition domain,CRD)进行了重组表达,并通过纯化复性获得了重组目的蛋白(rFclectin-CRD1和rFclectin-CRD2)。活性分析结果显示,重组目的蛋白对多种病原菌有凝集和抑制生长的作用,并且具有Ca2+依赖活性;其凝集活性可被半乳糖、肽聚糖、脂多糖等多种病原相关分子模式所抑制,研究结果证实,Fclectin是一种典型的C-型凝集素,它可能作为中国明对虾先天免疫中重要的模式识别受体,在一定程度上参与了机体应答病原微生物的防御过程。     

斑节对虾Toll9受体基因免疫功能的研究与表达分析

Toll受体蛋白(Toll receptors)是一类重要的模式识别受体,在无脊椎动物先天性免疫系统中发挥重要作用。文章对斑节对虾(Penaeus monodon)新型Toll9受体基因(Pm Toll9)进行了研究:以人源胚胎肾细胞(HEK293T)成功构建体外细胞免疫模型,通过免疫印迹方法证实Pm Toll9重组真核蛋白可在HEK293T中成功表达。双荧光素酶报告系统检测发现在200 ng转染浓度处Pm Toll9对NF-κB报告基因的激活效果显著。q RT-PCR数据证明PmToll9成功激活HEK293T细胞Toll-like receptor(TLR)信号通路,促进通路下游髓样分化因子(My D88)、肿瘤坏死因子(TNF-α)和白介素(IL-10)的上调表达,同时酶联免疫吸附测定结果证明Pm Toll9可促进TNF-α蛋白表达水平显著上调。斑节对虾体内细菌刺激实验结果显示无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)可激活Pm Toll9在肝胰腺、肠、淋巴和鳃中的表达,哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)可显著抑制Pm Toll9在肝胰腺中的表达。提示无乳链球菌可通过Pm Toll9激活Toll信号通路,引起机体免疫防御反应,而哈维氏弧菌对此过程具有一定的抑制作用。     

饲料中添加酵母提取物对凡纳滨对虾免疫相关基因表达及抗菌机能的影响

为了评估饲料中添加酵母提取物对凡纳滨对虾免疫灵敏性和平衡性的相关基因表达的影响,以鱼粉含量为24.5%的基础饲料(对照组)及在基础饲料中添加2.5%酵母提取物的实验饲料,分别饲喂凡纳滨对虾56 d,检测两种饲料投喂的对虾在急性感染溶藻弧菌前后鳃组织Toll受体、IM D和溶菌酶mRNA表达量变化及感染后的对虾死亡情况。结果表明:摄食添加酵母提取物饲料的凡纳滨对虾鳃组织中Toll受体mRNA和溶菌酶mRNA表达量均显著高于对照组对虾(P0.05),IMD mRNA表达量与对照组无显著性差异(P0.05)。急性感染溶藻弧菌后,两组对虾鳃组织Toll受体、IMD和溶菌酶mRNA表达量随感染进程均出现显著变化,Toll受体、IMD和溶菌酶mRNA表达量峰值出现的时间分别为24、42和36 h,且摄食添加酵母提取物组对虾各基因的表达量峰值分别为对照组峰值的201.06%、481.46%和276.77%,均显著高于对照组对虾(P0.05)。摄食添加酵母提取物饲料组对虾鳃组织中Toll受体和IM D mRNA表达量在感染溶藻弧菌后12和24 h分别出现显著上调,而对照组对虾鳃组织中Toll受体和IMD mRNA表达量分别在感染弧菌后24和42 h才出现显著上调。两组对虾经溶藻弧菌人工急性感染后72 h内的累积死亡率无显著差异(P0.05)。实验表明,饲料中添加酵母提取物上调了溶藻弧菌感染前凡纳滨对虾Toll受体和溶菌酶mRNA的表达量,提早了溶藻弧菌感染后对虾Toll受体和IMD mRNA表达量上调时间,且增加了对虾Toll受体、IM D和溶菌酶mRNA表达量的峰值,在一定程度上提高了凡纳滨对虾免疫相关基因表达的灵敏性。     

硬骨鱼类鳃黏膜免疫相关分子的研究进展

鳃为鱼类重要的呼吸器官，是鱼类进行离子交换、酸碱调节和含氮废物排泄的重要结构基础，也是鱼类重要的外周黏膜免疫器官之一，在抵御病原微生物侵染过程中发挥重要的免疫屏障作用。当前，硬骨鱼类鳃黏膜免疫反应是研究热点之一。本文首先对硬骨鱼类鳃的结构和特点进行分析，之后综述了抗菌肽、干扰素、白细胞介素、Toll样受体、补体等先天性免疫相关分子以及T细胞受体和免疫球蛋白等适应性免疫相关分子在硬骨鱼类鳃黏膜中的表达规律、分子功能，最后探讨了化学因素(重金属、杀虫剂等)、生物因素(细菌、病毒、真菌、和寄生虫等)以及营养物质和疫苗等对硬骨鱼类鳃黏膜结构的影响，以期为深入研究鳃在鱼类黏膜免疫反应中的角色和应答机制提供指导，为硬骨鱼类病原性疾病的免疫防控策略的制定提供理论基础。     

凡纳滨对虾卵巢类围食膜蛋白基因克隆及其在早期胚胎发育中的表达

围食膜蛋白最早是从昆虫围食膜中解离得到的,在保护昆虫免受外源微生物侵染过程中发挥了重要作用。为了解围食膜蛋白在对虾免疫过程中的作用,实验前期进行了凡纳滨对虾转录组分析,并克隆获得了凡纳滨对虾2条类围食膜蛋白基因LvPT1和LvPT2,其编码的2条氨基酸序列相似性极高,同已报道的其他虾类围食膜蛋白具有较高同源性。利用Real-time PCR方法进行组织表达分析发现,LvPT1和LvPT2与对虾卵巢围食膜蛋白(SOPs)类似,在卵巢中高度表达,利用半定量PCR方法,分析LvPT2在对虾早期发育中的表达情况。结果显示,LvPT2在受精卵时期表达量最高,随着发育进行,表达量逐渐降低,至无节幼体孵出后无明显表达。研究表明,LvPT1和LvPT2与虾SOPs应为同一类围食膜蛋白,可能参与了受精卵细胞的形成,并在保护对虾早期胚胎发育时免受外界病原微生物的侵染中发挥着重要作用。     

屠宰检疫中猪淋巴结的病理变化及剖解意义

淋巴结是机体外周的免疫器官和防御机构,具有吞噬异物和各种病原微生物的功能,并产生免疫应答。当机体某一器官或局部组织受病原微生物侵害时,就会很快被局部淋巴结阻截,并发生相应的各种反应,导致淋巴结呈现充血、水肿、出血、坏死、化脓、急性或慢性等不同病理变化,反映病原体入侵机体的途径和病害程度。因此,淋巴结检验可以反映机体的病变情况和分析肉尸可能感染的病原性质、病     

一种凡纳滨对虾新的C型凝集素基因（LvLc2）的克隆及免疫应答特征

为有效地进行凡纳滨对虾病害防治和健康养殖,探究对虾天然免疫机制,为其免疫防控提供新思路,实验根据本课题组前期转录组结果提示,在凡纳滨对虾血细胞中克隆获得了一个新的C型凝集素基因(LvLc2, GenBank登录号KR020738)。生物信息学分析显示,LvLc2的ORF区全长465 bp,编码154个氨基酸(aa),5′-UTR为11 bp,3′-UTR为126 bp;其预测的分子量为17.16 ku,理论等电点为4.54;推断其氨基端含有一个由17个aa组成的信号肽序列,羧基端含有一个保守的糖识别结构域(CRD)。该基因在凡纳滨对虾各种组织中有不同程度的表达,其中在肠道中表达量最高,其次为胃、肝胰腺、血细胞等组织或细胞,在肌肉中表达量最低。利用脂多糖(LPS)和肽聚糖(PGN)刺激对虾后,比较分析了LvLc2的表达变化特征,不同类型的病原表面多糖可在刺激后不同时期引发LvLc2基因的应答改变,表明其具有潜在的广谱应答模式,同时针对不同病原又具有不同的表达特征,显示了其识别结合和间接免疫效应的差异。对其作用特征的探讨有助于更好地了解对虾C型凝集素在病原感染过程中的功能和作用机制。研究结果为深入探讨对虾天然免疫调控机制提供了参考,在对虾健康养殖及病害防治方面具有潜在的应用价值。     

多糖类免疫增强剂在鱼类养殖中的应用研究进展

多糖类免疫增强剂是一种可以激活机体免疫系统，提高固有免疫和适应性免疫水平，增强机体抵御病原微生物入侵能力的活性物质，具有免疫调节性、生物可降解性、低毒性和安全性等优点，已成为水产养殖领域的研究热点之一。本文综述了近年来植物、微生物和动物来源的多糖类免疫增强剂的结构、免疫机制和在水产养殖中的应用研究进展和前景，以期为鱼类健康养殖提供参考。     

饲料中花生四烯酸水平对凡纳滨对虾免疫相关基因表达及抗菌能力的影响

为了评估饲料中花生四烯酸(arachidonic acid,ARA)水平对凡纳滨对虾免疫相关基因表达及抗菌能力的影响,分别以鱼油和混合植物油为脂肪源,设计了2个系列共9组不同ARA含量的等氮等能,且具备相同饱和脂肪酸(SFA)、单不饱和脂肪酸(MUFA)、多不饱和脂肪酸(PUFA)和n-3/n-6比例的实验饲料,投喂对虾6周后,检测各组对虾在急性感染溶藻弧菌0、24、36和42 h时鳃组织中Toll受体、IMD(immune deficiency)和溶菌酶m RNA表达量,并统计感染后96 h内对虾的死亡情况。结果表明:1对虾摄食以鱼油为脂肪源的饲料[饲料DHA(22:6n-3)和EPA(20:5n-3)含量分别为5.85和3.83 mg/g饲料],其鳃组织中Toll受体、IMD和溶菌酶m RNA表达量均随饲料中ARA含量的升高呈现先升高后下降的变化;0.56(B组)和0.87 mg ARA/g饲料组(C组)对虾溶菌酶m RNA表达量显著高于0.44(A组)、1.02(D组)和0.28 mg ARA/g饲料组(E组)(P0.05);对虾摄食以植物混合油为脂肪源的饲料(DHA和EPA含量分别为3.28和1.87 mg/g饲料),其鳃组织中Toll受体、IMD和溶菌酶m RNA表达量随饲料中ARA含量的升高而升高;1.44 mg ARA/g饲料组(I组)对虾Toll受体m RNA表达量显著高于0.19 mg ARA/g饲料组(F组)(P0.05)。2人工急性感染溶藻弧菌后,各组对虾鳃组织中Toll受体、IMD和溶菌酶m RNA的表达量随感染进程均出现显著变化。摄食以鱼油为脂肪源的饲料时,对虾鳃组织中Toll受体、IMD和溶菌酶m RNA表达量峰值均出现在0.56 mg ARA/g饲料组(B组),且峰值分别出现在感染后24、42和24 h。摄食以混合植物油为脂肪源的饲料时,对虾鳃组织中Toll受体、IMD和溶菌酶m RNA表达量峰值均出现在1.44 mg ARA/g饲料组(I组),且峰值分别出现在感染后24、42和36 h。3各实验组对虾急性感染溶藻弧菌后96 h累积死亡率无显著差异。本研究表明,饲料ARA水平影响凡纳滨对虾免疫相关基因(Toll受体、IMD和溶菌酶)的表达,且ARA调控免疫基因表达的效果受饲料EPA和DHA水平的影响。     

仿刺参MyD88依赖途径基因的序列比较和表达分析

为探索仿刺参体内免疫调控机制,对TLR信号通路MyD88依赖途径中Toll、MyD88、IRAK4、TRAF6、P105和Rel的氨基酸序列保守结构域进行了比较分析,找到上下游基因之间可能的互作位点。采用实时荧光定量PCR的方法检测仿刺参体腔细胞中这6个基因在灿烂弧菌刺激后4个时间点的表达模式。试验结果显示,Toll在12 h表达小幅上调,在其他时间点都处于被抑制的状态;MyD88和TRAF6的表达模式基本一致,在12 h表达水平最高;IRAK4在12 h表达上调,在48 h恢复到初始状态;P105和Rel是NFκB的两个同源物,具有相似的结构域,并且这两个基因表达模式一致。通过基因序列和表达模式的对比分析发现,仿刺参体内存在一条高度保守的TLR信号通路。在应对灿烂弧菌入侵时,该通路上的6个基因协同合作参与了机体信号转导和免疫应答的过程。     

南美白对虾亲虾暴发性传染病病原调查

对福建、广东沿海对虾育苗场的南美白对虾亲虾暴发性传染病进行病原学研究,结果表明大部分亲虾感染了白斑综合症病毒,还有一些亲虾同时感染桃拉综合症病毒。发病对虾体色发红,部分对虾体表可见大小不一的白色斑点。对这些病毒的PCR扩增产物进行测序,并进行同源性比较,结果表明导致本次对虾传染病的WSSV基因片段与基因库已报告的WSSV具有很高的同源性。结合流行病学特点,可确定这些亲虾主要因感染了WSSV和TSV而发病死亡。     

Current status and prospects of farming the giant river prawn Macrobrachium rosenbergii (De Man) in Bangladesh

Giant river prawn (Macrobrachium rosenbergii) farming plays an important role in the economy of Bangladesh. Presently, it is cultured in around 50 000 ha area with total annual production of 23 240 t. Traditional extensive prawn farming has been expanding over the last three decades through the introduction and adoption of improved culture systems, such as culture of prawn‐carps, prawn‐shrimp‐fish and prawn‐fish‐rice as concurrent and rotational systems. Efforts for the development of improved techniques on broodstock management, seed production and rearing and grow‐out of prawn have been made over the last decade. The outcomes are low‐cost feed for broodstock, production of post‐larvae in net cages (hapa), all‐male prawn culture, periphyton based prawn‐tilapia culture, C/N based prawn culture, organic prawn farming, prawn‐mola culture and prawn‐carp‐mola polyculture. Despite the development of culture technologies, a number of challenges for sustainable development of prawn farming need to be overcome to realize the potentials of this promising sector. Good aquaculture practises at all levels and application of measures for quality control and food safety would ensure sustainable development of prawn farming in Bangladesh.     

The case for all‐female freshwater prawn,Macrobrachium rosenbergii (De Man), culture

The prevailing notion in the prawn (Macrobrachium rosenbergii) culture industry is that the large male prawns that dominate the product value in research and commercial populations should, alone, be the target of commercial mono‐sex (all‐male) culture. However, studies have shown that the male prawn's response to increasing density (intensification) is controlled by a strong hierarchical dominance‐based social structure resulting in a large, disproportionate, increase in low value small animals in the ‘lower’ modal class of the male prawn size distribution. In contrast, prawn females and other aquatics, such as marine shrimp, display a moderate and uniform response to intensification in all size classes. Indeed, the densities in which prawn male superiority has been demonstrated are well below those used in intensive marine shrimp culture. This article: (1) discusses the background to the issue, (2) discusses the notion that because female prawns appear to be ‘marine shrimp‐like’ – with a normal size distribution indicating a lack of a strong social dominance – this will render them superior to all‐males under intensive growing conditions, (3) presents a ‘rate‐of‐response‐to‐density’ model projecting a female‐superior response to high previously untested densities, (4) summarizes results of a pond field test conducted at Auburn University (Auburn, AL, USA) to test the model's results whereby hand‐sexed prawns in treatment‐replicated in‐pond cages at densities of 10, 25, 40 and 55/m² showed that all‐female prawns give higher production and product value than males under intensive conditions, (5) discusses the use of biotechnological methods to sex‐reverse brood‐stock to produce all‐females and (6) discusses the notion that the potential of genetic selection to increase prawn production is only possible using females.     

环形网在黑鲷与日本对虾混养池中的使用效果

为在虾池中混养黑鲷(Sparus macrocephalus),特在虾池中设置环形网.在环形网内养殖黑鲷,并设置集鱼网箱以驱赶的方式将黑鲷集中捕捞;在环形网外边养殖日本对虾(Penaeus japonicus),通过移植藻钩虾(Amphithoe japonica)、拟沼螺(Assiminea sp.)等为对虾提供生物饵料.在2 hm2的虾池中养殖黑鲷产量4 330 kg,捕捞成活率100%,对虾产量为1 100 kg,获利6万余元.     

对虾虾头、虾壳副产品综合利用的研究概况

对虾在加工过程中会产生大量的虾头及虾壳等副产品,其副产品中含有丰富的营养物质.近年来,随着对虾产量的递增,其副产品的产量也越来越多,但产生的副产品大多被低值化利用或直接被废弃.既浪费资源又对环境造成了污染.为解决这一问题,本文就虾副产品在食品、化工、医学等方面的综合利用作简要概述,以期为对虾食品加工企业提高虾的综合利用...     

Immune responses of whiteleg shrimp,Litopenaeus vannamei (Boone, 1931), to bacterially expressed dsRNA specific to VP28 gene of white spot syndrome virus

In this study, dsRNA specific to VP28 gene of white spot syndrome virus (WSSV) of shrimp was synthesized in Escherichia coli in large scale and studied the immune response of shrimp to dsRNA‐VP28. The haematological parameters such as clotting time and total haemocytes counts, and immunological parameters such as prophenoloxidase (proPO), superoxide dismutase (SOD), superoxide anion (SOA) and malondialdehyde content, as well as the mRNA expression of ten immune‐related genes were examined to estimate the effect of dsRNA‐VP28 on the innate immunity of Litopenaeus vannamei. The activities of proPO, SOA and SOD significantly increased in haemocyte after dsRNA‐VP28 treatment, whereas MDA content did not change significantly. Among the ten immune‐related genes examined, only the mRNA expression of proPO, cMnSOD, haemocyanin, crustin, BGBP, lipopolysaccharides (LPs), lectin and lysozyme in haemocytes, gill and hepatopancreas of L. vannamei, was significantly upregulated at 12 h after dsRNA‐VP28 treatment, while no significant expression changes were observed in Toll receptor and tumour receptor genes. The increase of proPO and SOD activities, and SOA level and mRNA expression level of proPO, cMnSOD, haemocyanin, crustin, BGBP, LPs, lectin and lysozyme after dsRNA‐VP28 stimulation indicate that these immune‐related genes were involved in dsRNA‐VP28‐induced innate immunity in shrimp.     

A bibliography of shrimp and prawn nutrition

This paper contains a bibliography of papers published on dietary and nutritional work with shrimps and prawns. In addition, selected papers on related topics, such as the nutrition of other crustacea, the natural food of shrimps and prawns, and physiology, are included. The bibliography is intended to be an aid to existing workers in the field of shrimp and prawn nutrition, to be a launch pad for scientists entering this field for the first time, and to assist those wishing to review specific aspects of this subject.