凡纳滨对虾高氨氮和低溶氧抗逆性状的杂交配合力分析

该研究利用3 个凡纳滨对虾( Litopenaeus vannamei) 引进群体, 采用完全双列杂交交配设计, 建立9 个自繁和杂交组合F1 代, 比较幼虾对高氨氮和低溶解氧的耐受性, 分析各交配组合杂种优势, 采用线性模型均数加权二乘分析法估算凡纳滨对虾高氨氮和低溶氧抗逆性状的配合力, 评估亲本及子代的耐受性能。结果表明, 9 个群体对氨氮( NH3-N) 和溶解氧( DO) 胁迫的耐受性均存在显著差异, 杂交子代耐高氨氮和耐低溶氧性状的中亲优势和超亲优势范围分别为14.09 42.57 和1.860～26.18、52.48～31.39 和54.34～24.66; 杂交后代耐受性的表现受到父本、母本一般配合力以及杂交组合特殊配合力共同影响, 美国夏威夷SIS 群体( UH) 耐高氨氮和低溶氧性状的一般配合力较高, 分别为0. 44 2 和0. 89 9; 特殊配合力分析表明, 美国迈阿密SIS 群体( UM) 和美国夏威夷SIS群体的杂交组合( UMUH) 为强优势组合, 存在较强的抗逆非加性效应, 杂交优势明显, 可为进一步家系选育提供候选材料。     

温度胁迫对凡纳滨对虾肝胰腺氧代谢及能量代谢的影响

为探究温度胁迫对凡纳滨对虾肝胰腺氧代谢和能量代谢的影响,本研究采用生物化学方法分析了低温及高温胁迫对凡纳滨对虾肝胰腺中超氧阴离子(O2-·)产生,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活力及谷胱甘肽(GSH)含量,一氧化氮合酶(NOS)活力及其催化的一氧化氮(NO)生成量,以及对三磷酸腺苷(ATP)含量的影响.结果表明,15℃低温及31与35℃的高温胁迫均会导致O2-·显著增加,在15 ～31℃内,SOD活力与O2-·含量变化趋势相似,低温胁迫导致CAT活力升高更为显著,低温与高温胁迫后,GSH含量均显著增加;高温胁迫会引起NOS活力及其催化的NO生成量显著增加;低温与高温胁迫均会引起ATP含量显著增加,但是随着温度回复至对照水平,ATP含量也回复至对照水平.结论:低温和高温胁迫均会引起凡纳滨对虾肝胰腺组织中氧代谢失衡,SOD、CAT及GSH在机体应对低温及高温胁迫导致的氧化损伤中可能扮演不同角色,NO介导的信号传导可能在应对高温胁迫中起着重要作用;低温及高温均会导致ATP含量增加,提示对虾在应对温度胁迫的过程中可能需要更多能量.推测环境温度过低或者过高时,可能由于超出凡纳滨对虾氧-温度忍受极限(OCLTT)而导致氧代谢失衡,并对凡纳滨对虾的能量代谢及其他生理活动产生重要影响.     

氨氮胁迫对凡纳滨对虾肠道免疫相关指标的影响

为研究急性氨氮胁迫对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)肠道免疫功能的影响,将对虾暴露于氨氮浓度为20 mg·L^-1的海水中72 h,测定了不同时间点肠道中抗病原感染指标如酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(ALP)、溶菌酶(Lys)、酚氧化酶原(proPO)以及抗氧化功能指标如总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、热休克蛋白70(HSP70)、热休克蛋白90(HSP90)等变化。结果显示,与对照组相比,氨氮胁迫后:1)ACP和ALP活性均于6 h显著升高(P<0.05),随后于48～72 h显著低于对照组(P<0.05);Lys活性于24 h显著升高至最大值(P<0.05),随后于72 h显著低于对照组(P<0.05)。2)T-AOC和SOD活性均于6 h和12 h显著高于对照组(P<0.05),随后于48 h和72 h显著降低(P<0.05)。3)HSP70基因表达水平于24 h显著升高至最大值,随后虽有降低,但仍显著高于对照组(P<0.05);HSP90和proPO基因表达水平均于12...     

氨氮胁迫前后凡纳滨对虾组织中抗氧化酶和脂质过氧化产物的分布

为了弄清抗氧化酶、脂质过氧化产物在凡纳滨对虾体内分布特点，以及离子氨氮胁迫后这些指标在该对虾体内的变化情况，选择了南方有代表性的凡纳滨对虾（6．322±0．221g），分别测定了氨氮胁迫前后体内抗氧化酶SOD、CAT、GSH—Px和GSH、MDA的分布特点，丰富和发展了对虾的自由基和抗氧化防御理论，为外源抗氧化剂在对虾饵料中应用打下了基础。试验结果表明，肝胰腺和血清是凡纳滨对虾对氨氮造成胁迫的敏感组织，各项抗氧化酶、总抗氧化能力、组织GSH含量以及MDA含量可作为衡量凡纳滨对虾氧化应激状态的指标。     

盐度和营养对凡纳滨对虾蜕壳和生长的影响

采用实验生态学方法以初始体质量为(2.01±0.02) g的凡纳滨对虾为研究对象,投喂不同蛋白水平饲料,实验周期30 d,研究了盐度和饲料蛋白水平对凡纳滨对虾蜕壳和生长的影响。实验采用5×3析因设计,盐度梯度设置为6、12、18、24、30五个水平,饲料蛋白水平梯度设置为30%、36%、42%三个水平。结果表明:(1) 对虾蜕壳相对增重率呈现出随盐度上升而降低的变化趋势,以盐度为6时蜕壳相对增重率为最高。盐度和饲料蛋白水平及其交互作用对实验对虾蜕壳相对增重率影响差异显著(P＜0.05);对虾的特定生长率随盐度升高而上升,盐度和饲料蛋白水平对特定生长率影响差异显著(P＜0.05),其交互作用对特定生长率影响差异不显著。(2) 实验对虾的蜕壳频率,在低盐度水平下随盐度的增加而显著增加(P＜0.05),盐度18时蜕壳频率达到最高,之后随盐度的升高蜕壳频率下降,差异不显著。各盐度水平下,以中等蛋白质水平饲料组(36%)对虾蜕壳频率较高。方差分析表明,盐度和饲料蛋白水平对蜕壳频率影响差异显著(P＜0.05),其交互作用对蜕壳频率影响差异不显著。(3) 对虾蜕壳间期随盐度升高呈先延长后缩短的变化趋势。盐度对对虾蜕壳间期影响差异显著(P＜0.05),饲料蛋白水平单因子以及它和盐度的交互作用对对虾蜕壳间期影响不显著。     

氨氮和亚硝基氮共同胁迫对凡纳滨对虾感染WSSV的影响

为了评价养殖水环境中氨氮和亚硝基氮对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)的危害性,开展了氨氮和亚硝基氮共同胁迫对凡纳滨对虾感染WSSV后的死亡率、WSSV在患病对虾体内增殖速率和对虾主要免疫相关酶活性影响的研究。实验设置氨氮(NH+4)和亚硝基氮(NO-2)的共同胁迫浓度均为20 mg·L-1,分别注射10-4和10-5稀释度的WSSV提取液。结果显示,胁迫下感染10-4WSSV的凡纳滨对虾144 h死亡率达到100%,显著高于无胁迫组(76.67%),相同实验条件下高浓度病毒感染组死亡率高于低浓度组。对虾鳃组织WSSV荧光定量PCR检测结果显示,氨氮和亚硝基氮共同胁迫下凡纳滨对虾体内WSSV的增殖加快,感染48 h后胁迫组病毒量是无胁迫组的1.6倍,72 h时病毒量达到无胁迫组的2.0~3.7倍。此外,免疫相关酶活性结果显示,氨氮和亚硝基氮浓度突变会促使对虾血清中酚氧化酶(PO)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)活性先短暂升高然后降低。由此可见,氨氮和亚硝基氮共同胁迫会加快WSSV在患病凡纳滨对虾体内的增殖,导致更高死亡率,这可能是因为胁迫造成了对虾免疫相关酶活性的降低和抗病原感染能力下降所致。     

温度、盐度对凡纳滨对虾精荚再生和精子质量的影响

研究了3种不同温度和盐度对凡纳滨对虾精荚再生和精子质量的影响。通过称量精荚以及采用染色或显微镜观察养殖在不同温、盐度条件下的雄虾的精子数量和正常率来评价精子质量。结果表明:随着实验养殖时间的延长和精荚再生次数的增加,26℃组的精子质量明显好于22℃组和30℃组,30℃组的活精子数由第1次再生的14.0×106个下降到4.3×106个,畸形精子百分率由6.1%增加到56.6%。温度越高,蜕皮周期越短,精荚再生时间也越短,但精子质量下降也很迅速。盐度30组的精荚重量显著高于盐度5组和15组,但盐度15的精子总数和活精子数却显著高于盐度5组和30组,随着时间的延长,3组盐度的畸形精子百分率都有所增加,其中盐度5组增加得最快。     

凡纳滨对虾群体杂交与自交 F1低溶氧与高氨氮耐受性比较

利用6个遗传背景不同的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)群体,通过群体间自交与杂交建立了8个交配组合。对不同交配组合F1,在幼虾和成虾阶段,进行低溶氧与高氨氮48 h胁迫试验,比较不同交配组合群体在不同生长阶段的高氨氮与低溶氧耐受性。结果显示,低溶氧胁迫,YH♀×ZX♂、SS♀×SS♂、HD♀×YH♂交配组合幼虾存活率分别为76.23%、74.61%、74.38%,显著高于其他交配组合存活率(P0.05),成虾的存活率分别为83.08%、65.57%、71.12%,可作为耐低溶氧优良品系选育的候选材料;高氨氮胁迫,YH♀×KN♂、HD♀×YH♂、YH♀×ZK♂交配组合幼虾存活率分别为97.71%、86.43%、80.01%,显著高于其他交配组合(P0.05),成虾存活率分别为85.53%、74.18%、69.23%,可作为耐高氨氮优良品系选育的候选材料;HD♀×YH♂交配组合低溶氧与氨氮耐受性均较好,但不同交配组合低溶氧与氨氮耐受性间相关性检验不显著(P0.05)。研究发现,亲本中雌虾来源为YH,子代低溶氧耐受性优良,推断抗低溶氧性状为母系主导遗传;对虾低溶氧的耐受性随着生长发育的进行而降低,高氨氮耐受性随着生长发育的进行而增强;各交配组合高氨氮和低溶氧耐受性,在幼虾阶段和成虾阶段均呈极显著相关(P0.01),表明凡纳滨对虾低溶氧与高氨氮耐受性适宜在幼虾阶段进行遗传评估。     

生物絮团对凡纳滨对虾养殖过程中氨氮和亚硝酸氮含量的影响

本实验以非生物絮团养殖模式作为对照,研究了生物絮团凡纳滨对虾养殖模式中,水质因子氨氮和亚硝酸氮的变化规律。结果表明:试验组的生物絮团沉积量至第35天达到峰值(15.93±0.31)m L/L,而后保持相对稳定状态,对照组的生物絮团量一直处于极低水平(1.5 m L/L),两组之间差异显著(P0.05);对照组氨氮含量至第35天达到峰值(1.05±0.19)mg/L,试验组氨氮含量增加缓慢,至第60天时仅为(0.37±0.04)mg/L,显著低于对照组(P0.05);在实验的前15天,实验组和对照组的亚硝酸氮含量无显著差异(P0.05),随后试验组亚硝酸氮含量增速减慢并趋于稳定,而对照组则直线上升,对照组亚硝酸氮含量显著高于试验组(P0.05)。     

Effect of salinity on survival, growth, oxygen consumption and ammonia-N excretion of juvenile whiteleg shrimp, Litopenaeus vannamei

In this study, we tested the lower salinity tolerance of juvenile shrimps (Litopenaeus vannamei) at a relatively low temperature (20 °C). In the first of two laboratory experiments, we first abruptly transferred shrimps (6.91 ± 0.05 g wet weight, mean ± SE) from the rearing salinity (35 000 mg L^?1) to salinities of 5000, 15 000, 25 000, 35 000 (control) and 40 000 mg L^?1 at 20 °C. The survival of L. vannamei juvenile was not affected by salinities from 15 000 to 40 000 mg L^?1 during the 96‐h exposure periods. Shrimps exposed to 5000 mg L^?1 were significantly affected by salinity, with a survival of 12.5% after 96 h. The 24‐, 48‐ and 96‐h lethal salinity for 50% (LS₅₀) were 7020, 8510 and 9540 mg L^?1 respectively. In the second experiment, shrimps (5.47 ± 0.09 g wet weight, mean ± SE) were acclimatized to the different salinity levels (5000, 15 000, 25 000, 35 000 and 40 000 mg L^?1) and then maintained for 30 days at 20 °C. Results showed that the survival was significantly lower at 5000 mg L^?1 than at other salinity levels, but the final wet weight under 5000 mg L^?1 treatment was significantly higher than those under other treatments (P<0.05). Feed intake (FI) of shrimp under 5000 mg L^?1 was significantly lower than those of shrimp under 150 00–40 000 mg L^?1; food conversion efficiency (FCE), however, showed a contrasting change (P<0.05). Furthermore, salinity significantly influenced the oxygen consumption rates, ammonia‐N excretion rates and the O/N ratio of test shrimps (P<0.05). The results obtained in our work provide evidence that L. vannamei juveniles have limited capacity to tolerate salinities <10 000 mg L^?1 at a relatively low temperature (20 °C). Results also show that L. vannamei juvenile can recover from the abrupt salinity change between 15 000 and 40 000 mg L^?1 within 24 h.     

温度对不同体质量灰海马耗氧率、排氨率及窒息点的影响

为探究温度对不同体质量灰海马耗氧率、排氨率和窒息点的影响,设置13、18、23、28、32℃5个温度梯度,用大(L)、中(M)、小(S)3种体质量分别为(3.63±1.42)、(1.23±0.22)、(0.47±0.24)g的灰海马进行代谢试验.试验结果:在13～32℃范围内,随着水温的升高,灰海马的耗氧率和排氨率呈现...     

温度与盐度对云龙石斑鱼幼鱼耗氧率和排氨率的影响

为了研究饱食和饥饿状态下温度(24、27、30和33℃)、盐度(15、20、25、30和33)对云龙石斑鱼幼鱼(Epinephelus groupers)耗氧率(OCR)和排氨率(AER)的影响,采用密闭流水式呼吸实验方法对OCR和AER进行了测定。结果显示:饱食和饥饿状态下,温度、盐度对云龙石斑鱼幼鱼OCR和AER影响均显著(P0.05);当温度为24℃~33℃时,饱食状态下的OCR和AER分别比饥饿状态的提高30.29%~131.84%和131.82%~316.19%。饱食状态下,氧氮比(O∶N)、蛋白质供能比(PSR)、Q10(呼吸)、Q10(代泄)分别为12.54~20.18、27.74%~48.48%、1.21、1.60;而在饥饿状态下分别为25.77~35.90、19.49%~27.19%、1.87、3.41;当盐度为15~33时,饱食状态下OCR和AER分别比饥饿状态的提高100.41%~128.21%、182.19%~382.83%。饱食状态下,O∶N、PSR分别为13.32~20.72、39.47%~49.42%,而在饥饿状态下分别为29.18~30.98、22.59%~23.98%。研究表明,云龙石斑鱼幼鱼的最适生长温度为24℃~27℃,最适生长盐度为30~33。     

温度和盐度对橄榄蚶耗氧率和排氨率的影响

测定不同温度(15℃、20℃、25℃、30℃)和盐度(16、21、26、31、36)对橄榄蚶(Estellarca olivacea)呼吸和排泄的影响。结果表明,温度和盐度对橄榄蚶的耗氧率和排氨率都有显著影响(P<0.05)。在15~30℃范围内,橄榄蚶单位软体干质量耗氧率(OR)、排氨率(NR)都随温度的升高而升高,变化范围分别为0.37~0.65 mg/(g.h)和1.74~3.15μmol/(g.h);耗氧率和排氨率与温度(t)之间的相关方程分别为:ORT[mg/(g.h)]=0.323 4e0.1765t(R2=0.9755,P<0.05);NRT[μmol/(g.h)]=1.3788e0.1986t(R2=0.9784,P<0.05)。在16~36盐度范围内,橄榄蚶单位软体干质量耗氧率和排氨率开始时随盐度的升高而降低,在盐度26时达到最小值,然后随盐度的升高而升高,变化范围分别为0.43~0.60 mg/(g.h)和1.75~3.26μmol/(g.h);耗氧率和排氨率与盐度(s)之间的相关方程分别为:ORS[mg/(g.h)]=0.0014s2-0.0751s 1.4312(R2=0.9455,P<0.05,n=30);NRS[μmol/(g.h)]=0.0105s2-0.5728s 9.7114(R2=0.9285,P<0.05,n=30)。     

温度和盐度对虾夷马粪海胆耗氧率和排氨率的影响↑（*）

采用封闭式呼吸器研究了虾夷马粪海胆（Ｓｔｒｏｎｇｙｌｏｃｅｎｔｒｏｔｕｓｉｎｔｅｒｍｅｄｉｕｓ）的耗氧率和排氨率与温度和盐度的关系。结果表明：在温度１５～２５℃的范围内,耗氧率和排氨率随温度的升高而增加;相同温度下,随个体重量的增加耗氧率和排氨率下降,呈负指数关系;虾夷马粪海胆的适宜盐度为３０左右,此时的耗氧率最大,为０．０９１ｍｇ／ｇ·ｈ,排氨率最低,为２３．６２μｇ／ｇ·ｈ。     

温度、盐度和 pH 对鲻幼鱼耗氧率、排氨率以及窒息点的影响

采用封闭流水式实验方法,研究了不同温度(12、16、20、24、28、32℃)、盐度(5、10、15、20、25、30)和pH(7.2、7.7、8.2、8.7、9.2、9.7)对体质量(0.21±0.03)g的鲻(Mugil cephalus)幼鱼耗氧率和排氨率的影响.结果表明,温度(X)对鲻幼鱼耗氧率(Yo)和排氨率(YN)的影响显著,其两两间的相关关系可分别用一元二次方程Yo=-0.0256x2+0.2191X-0.1054(P＜0.05)和YN=-0.0054X2+0.044 1X-0.0082(P＜0.01)表示.随着温度的升高,鲻的耗氧率和排氨率呈现相同的变化趋势,均为先升高后降低,在24℃时,耗氧率和排氨率都达到最大值.经单因素方差分析得出盐度对鲻幼鱼耗氧率的影响极显著(P＜0.01),当盐度在5～30时,随着盐度的升高,耗氧率先下降再升高,然后再下降;排氨率则先升高后降低.经方差检验,盐度对鲻幼鱼排氨率的影响差异极显著,两者之间的相关关系式为YN=-0.0013X2+0.0027X+0.047(P＜0.01).pH对鲻幼鱼耗氧率的影响差异极显著,随着pH的升高,耗氧率呈先升高后下降的趋势,两者之间的关系可用一元二次方程Yo=-0.02583X2+0.198X+0.0775(P＜0.01)表示;pH对鲻排氨率的影响差异极显著,两者之间的相关关系式为YN=-0.0032X2+0.0217X+0.003(P＜0.01).温度和pH对鲻幼鱼窒息点的影响极显著(P＜0.0),盐度对鲻幼鱼窒息点的影响显著(P＜0.05),但对鲻的窒息时间没有显著影响(P＞0.05).     

Effect of dietary protein and energy levels on growth,oxygen consumption,haemolymph and digestive gland carbohydrates,nitrogen excretion and osmotic pressure of Litopenaeus vannamei (Boone) and L. setiferus (Linne) juveniles (Crustacea,Decapoda; Penaeidae)

The influence of protein and energy levels on growth rate, survival, pre- and post-prandial oxygen consumption, ammonia excretion, haemolymph glucose (HG), glycogen in digestive gland and osmotic pressure (OP) in white shrimp Litopenaeus vannamei (Boone) and L. setiferus (Linne) juveniles was studied. Diets containing a high-quality protein at a protein/energy (P/E) ratio of 16, 26, 31 and 36 mg kJ⁻¹ were fed at 20% of shrimp body weight of two sizes: < 1 g and > 1 g. Both species showed a optimum P/E ratio of 36 mg kJ⁻¹ (33–44% protein and 6–23% carbohydrate) in juveniles < 1 g. For shrimp > 1 g, L. setiferus showed a higher growth rate in the diet with 16 mg kJ⁻¹ (27% protein; 32% carbohydrate) and L. vannamei between 26 and 36 mg kJ⁻¹ (33–44% protein and 6–23% carbohydrate). In both experiments, the growth rate of L. vannamei was 2–3 times that observed in L. setiferus. Routine oxygen consumption and apparent heat increment (AHI) of L. setiferus juveniles was two times higher than that observed in L. vannamei juveniles, which could indicate that L. setiferus has a higher metabolic rate. The O/N ratio varied according to protein level, with higher values (O/N = 180) with a 16-mg kJ⁻¹ diet and lower values (O/N = 73) with a 36-mg kJ⁻¹ diet in L. setiferus juveniles. A similar variation in O/N ratio was obtained in L. vannamei fed with all diets with an interval between 22 and 50. An inverse relation between ammonia excretion and HG, and digestive gland glycogen (DGG) in relation to an increase in the P/E ratio indicate that both shrimp species are well adapted to use carbohydrates and/or proteins from their diet. The higher values of hyper-osmotic capacity (hyper-OC) were observed in L. setiferus < 1 g fed with 36 mg kJ⁻¹ and the lowest in L. vannamei < 1 g fed with 31 mg kJ⁻¹. Intermediate values of hyper-OC were observed in both species fed all diets indicating that osmotic factors of juveniles < 1 g of both species are more affected by the P/E ratio than juveniles > 1 g. All results showed that juveniles > 1 g of both species are less dependent of P/E ratio than juveniles < 1 g. Litopenaeus vannamei is a most tolerant shrimp species with a high capacity to use a wide range of dietary P/E ratios for growth, which may be due to its lower energy requirements. Litopenaeus setiferus showed a lower capacity to accept different P/E ratios but the optimum P/E ratio obtained with this species shows that L. setiferus accept diets with a high carbohydrate level as well. These results demonstrate that there are nutritional and physiological differences that explain the differences that have been observed when both species were cultured in commercial ponds.     

温度对黑鳍棘鲷耗氧率与排氨率的影响

对体重为240.9±27.1 g的黑鳍棘鲷在不同水温(10℃、15℃、20℃、25℃、30℃)条件下的耗氧率和排氨率进行了测试分析。结果表明:黑鳍棘鲷在一定温度范围内的耗氧率和排氨率均随温度的升高而升高,但当水温超过一定值后,其耗氧率和排氨率均随温度的升高而下降。在实验条件下,黑鳍棘鲷的耗氧率与温度的回归方程为Y=-0.489 7X2+27.39X-147.39;排氨率与温度的回归方程为Y=-0.009 3X2+0.508 2X-1.247;耗氧率的最大值为235.61μg/g.h(温度为28.0℃),排氨率的最大值为5.70μg/g.h(温度为27.3℃)。黑鳍棘鲷快速生长期的最适温度为25~28℃。     

温度对黄金鲈(Perca flavescens)耗氧率和排氨率的影响

在不同水温(15、20、25和30℃)下,对体重(46.1±4.5)g黄金鲈(Perca flavescens)的耗氧率和排氨率进行了测定与分析。结果显示:黄金鲈的耗氧率和排氨率均随温度的升高而显著增加(P<0.01);耗氧率和排氨率与温度的关系可用指数方程拟合,其方程分别为:RO=0.0682 e0.0633t,R2=0.9879;RN=2.4593 e0.0904t,R2=0.9703;随着温度的升高氧氮比(O:N)逐渐降低;耗氧Q10值和排氨Q10值均在20~25℃之间最小。结果表明:在各温度水平下黄金鲈基础代谢消耗底物主要均以蛋白质为主,脂肪其次,然而随着温度的升高,黄金鲈利用糖类和脂肪供能的比例逐渐下降,而蛋白质供能的比例逐渐增加。黄金鲈的最适生长温度为20~25℃。