水及水产品中微生物快速检测技术研究进展

研究和建立水及水产品中微生物快速检测方法对人们的身体健康和食品安全风险控制有着重要意义。文章介绍了水及水产品中的主要病原微生物及其快速检测技术,其中包括微生物试纸片检测技术、PCR检测技术、等温扩增检测技术、多样性快速检测技术、生物传感器检测技术等。分析和梳理了各类快速检测技术的原理、优缺点及其应用,并对水及水产品中微生物快速检测新技术进行了展望。     

食品安全兽药残留快速检测系列产品

中国检验检疫科学研究院是以检验检疫应用研究为主，同时开展相关基础、高新技术开发和软科学研究的公益性事业单位。本院自行开发的食品安全兽药残留快速检测试剂盒及设备；甲醛检测系列产品；水质检测系列产品；化验室检测仪器、试剂在国内享有很高的信誉。     

食品安全兽药残留快速检测系列产品

中国检验检疫科学研究院是以检验检疫应用研究为主，同时开展相关基础、高新技术开发和软科学研究的公益性事业单位。本院自行开发的食品安全兽药残留快速检测试剂盒及设备；甲醛检测系列产品；水质检测系列产品；化验室检测仪器、试剂在国内享有很高的信誉。     

食品安全兽药残留快速检测系列产品

中国检验检疫科学研究院是以检验检疫应用研究为主，同时开展相关基础、高新技术开发和软科学研究的公益性事业单位。本院自行开发的食品安全兽药残留快速检测试剂盒及设备；甲醛检测系列产品；水质检测系列产品；化验室检测仪器、试剂在国内享有很高的信誉。     

生物芯片技术及其在水产动物病原检测中的应用

生物芯片是近年来迅速发展的一项新技术,以高通量、高灵敏性和特异性的优势,在生物大分子功能研究、食品安全检测、病原微生物检测和鉴定、药物筛选等方面发挥着越来越重要的作用。本文对生物芯片技术的原理、种类、发展历程及其在水产动物病原检测领域的应用做一综述,以期为水产动物疾病快速诊断的研究提供新思路。     

豚鼠气单胞菌快速检测间接ELISA法的建立

应用从患败血症的鳗鲡中分离、纯化出的豚鼠气单胞菌(Aeromonas caviae)菌株AB40511NA1,制备了兔抗血清,建立了快速检测豚鼠气单胞菌的间接ELISA方法.研究结果显示:AB40511NA1兔抗血清的效价为1:16000.该法对AB40511NA1最低检测量为6×104 cfu·mL-1;与水产养殖动物主要致病菌嗜水气单胞菌(A. hydrophila)、温和气单胞菌(A. sobria)、鳗弧菌(V. anguillarum)、溶藻弧菌(V.alginolyticus)、副溶血弧菌(V. parahaemolyticus)及非O1-群霍乱弧菌(Non-O1 Vibrio cholerae)均无交叉反应,特异性强;能快速、准确、方便地检测出豚鼠气单胞菌.     

渔业海水中铅的快速定量检测方法

以导电炭黑糊电极（CCBPE）为工作电极,建立了海水中重金属铅的阳极溶出伏安检测新方法.实验研究了支持电解质种类、pH、富集电位、富集时间、干扰物质等相关影响参数.结果表明,在最优条件下铅的检测限为0.1 μg/L.据之建立了海水中重金属铅的快速检测方法,并将其应用于青岛近海渔业海水样品中铅含量的检测.检测结果与原子吸收光谱法所测结果一致,表明这种操作简单、快速、免汞、低费用的检测模式具有潜在的应用价值.     

石家庄市开展水产品质量安全快速检测技术练兵

随着迎奥运保障食品安全活动的开展及《河北省农产品市场准入办法》的实施。为确保水产品的安全供给。6月12日-13日，石家庄市水产品质量检测中心检测人员到平山县开展水产品质量安全快速检测活动。这次活动针对平山县的中华鳖养殖，共抽测了平山东冶甲鱼养殖场等13个养殖场的15个样品。对孔雀石绿、氯霉素两项指标进行了现场检测。15个样品的检测结果全部为合格。通过这次活动，不仅使我市检测人员的快速检测技术有了一个提高，也标志着我市对水产品质量安全的监管手段、监管力度达到了一个新的高度，     

四环素残留的免疫学检测方法探究

针对四环素残留的危害、最高残留限量进行简单论述,探究四环素残留的免疫学检测方法。以放射免疫测定、酶联免疫测定及分子印迹技术等方式,快速检出四环素残留成分,对畜牧食品安全检测工作奠定良好基础,保证畜禽食品安全及畜禽相关行业的科学发展。     

动物源性食品安全检测技术探析

当前，在乡村振兴背景下，我国养殖业迅猛发展，动物源性食品供给量逐年提升，但随之而来的激素、抗生素、兽药、添加剂等安全问题层出不穷，因此做好动物源性食品安全检测极为重要。主要探究了动物源性食品安全检测技术，并以贵州地区兽药检测实践为例，总结食品安全检测技术应用措施，旨在为各界提供更加方便、高效且准确的检测方法。     

PCR技术在对虾病毒病检测上的应用及研究进展

聚合酶链式反应PCR具有特异性强、灵敏度高、快速简便及重复性好等优点,多种临床样品均可用PCR进行检测,现已开发出多种PCR新技术,用于生物学科的各个领域。本文对PCR技术的原理及其在动物疫病尤其是对虾病毒病的检测中的应用及研究进展做一综述,以期对对虾病毒病的诊断与防治有所帮助。     

重组酶快速检测十足目虹彩病毒1方法的建立

为建立十足目虹彩病毒1的快速检测方法,根据十足目虹彩病毒1的ATP酶基因(ORF114R)保守序列设计特异性引物,通过条件优化,建立基于重组酶聚合酶扩增技术的十足目虹彩病毒1检测方法。重组酶聚合酶扩增技术的最优扩增温度为30 ℃,恒温反应20 min内即可完成。特异性试验结果显示,该方法与其他常见虾类感染病毒无交叉反应。敏感性试验结果显示,该方法对十足目虹彩病毒1的最低检出限为7 拷贝/μL,低于传统的巢式PCR方法。利用已建立的重组酶聚合酶扩增技术方法和PCR方法对采集的509批临床样品进行检测,试验结果表明,重组酶聚合酶扩增技术能够有效检出PCR方法的弱阳性样品,表明重组酶聚合酶扩增技术可以用于临床检测。笔者建立的检测十足目虹彩病毒1的重组酶聚合酶扩增技术具有快速、简便、特异性强、灵敏度高的特点,适合基层实验室及现场检测。     

Development of real‐time and quantitative QCM immunosensor for the rapid diagnosis of Aeromonas hydrophila infection

Since bacterial infection cause a significant economic loss in fish farms, it is necessary to develop rapid diagnostic tools. Interests on label‐free biosensors have been raised for the rapid detection of aquatic pathogenic bacteria but have not been extensively studied yet. Here we report a quartz crystal microbalance (QCM) immunosensor system for the rapid and simple detection of Aeromonas hydrophila, a pathogen for fish and human, in comparison with a conventional indirect ELISA method. In QCM immunosensor system, an antibody against A. hydrophila was covalently cross‐linked to the gold surface of sensor chip and bacterial attachment was monitored as real‐time frequency shifts within 5 min. The frequency shifts were very positively related to the amounts of bacterial cells between 6.25 and 100 μg corresponding to 6 × 10⁶ to 10⁸ CFU with a high specificity. The QCM immunosensor was also able to detect bacterial cells in fish tissue extract in a dose‐dependent manner. Indirect ELISA also showed the dose‐dependent reaction and the amplified signal may allow a lower detection limit. However, QCM immunosensor system showed a more linear and reliable standard curve with R² value of almost 1 (0.9999). Moreover, detection of the bacteria was much quicker and simpler.     

HACH速测法与国标法测定对虾养殖水体氮磷含量的比较

为探讨HACH速测法检测对虾养殖水体氮磷含量的可行性,应用HACH速测法和国标法(GB 17378.4-2007)检测对虾池塘水体NH_3-N、NO_2~--N和PO_4~(3-)含量,分析两种方法测定结果及其相互关系;并研究了对虾养殖池塘水样直接过滤测定、过滤低温冻存和低温冻存过滤三种处理方法对NH_3-N、NO_2~--N和PO_4~(3-)检测结果的影响。结果显示,HACH速测法检测NH_3-N、NO_2~--N和PO_4~(3-)的标准曲线线性良好,检测结果与国标法检测结果差异显著(P0.05),但两者之间有显著的线性关系,线性方程分别为Y(NH_3~-N)=0.891X(NH_3~-N)-0.006;Y(NO_2--N)=1.657X(NO_2~--N)+0.004;Y(PO_4~(3-))=0.901X(PO_4~(3-))-0.018(Y为国标法检测值,X为HACH速测法检测值);HACH速测法检测养殖水体的结果利用建立的函数方程进行换算,获得的计算值与国标法检测值无显著性差异;经三种方法处理后的对虾池塘水体NH_3~-N、NO_2~--N检测值之间无显著差异,但经冻存处理两组水样的PO_4~(3-)含量显著低于直接过滤检测组PO_4~(3-)含量,冻存处理组之间PO_4~(3-)含量无明显差异。结果表明,HACH速测法可用于检测养殖水体NH_3-N、NO_2~--N和PO_4~(3-)含量,但检测结果需要经函数转化;为保证水样检测结果的准确性,待检水样需要采取合适的保存方式或者立即进行测定。     

Generation and characterization of aptamers against grass carp reovirus infection for the development of rapid detection assay

Grass carp reovirus (GCRV) causes devastating viral haemorrhagic disease in farmed grass carp (Ctenopharyngon idellus). As novel molecular probes, aptamers have been widely applied in rapid diagnosis and efficient therapies against virus or diseases. In this study, three single‐stranded DNA (ssDNA) aptamers were selected against GCRV‐infected CIK cells via SELEX (systematic evolution of ligands by exponential enrichment technology). Secondary structures predicted by MFOLD indicated that aptamers formed stem‐loop structures, and GVI‐11 had the lowest ΔG value of ?30.84 KJ/mol. Three aptamers could specifically recognize GCRV‐infected CIK cells, with calculated dissociation constants (Kd) of 220.86, 176.63 and 278.66 nM for aptamers GVI‐1, GVI‐7 and GVI‐11, respectively, which indicated that they could serve as specific delivery system for antiviral therapies. The targets of aptamers GVI‐1, GVI‐7 and GVI‐11 on the surface of GCRV‐infected cells could be membrane proteins, which were trypsin‐sensitive. Furthermore, FAM‐labelled aptamer GVI‐7 could be applied to detect GCRV infection in vivo. It is the first time to generate and characterize aptamers against GCRV‐infected cells. These aptamers have great potentials in development of rapid diagnosis technology and antiviral agents against GCRV infection in aquaculture.     

水产品重金属污染检测技术及去除方法研究进展

鱼类等水产品因消费水平的提升而进入千家万户,但随着城镇化进程的推进,水产品受到严重的重金属污染。重金属污染具有较长的生物半衰期和潜在毒性,通过食物链对人体健康造成不容小觑的风险。因此,研究人员也广泛关注水产品重金属污染检测及去除技术。文章阐述了重金属对水生生物和人类的危害,对现有检测技术的优缺点进行比较,也对开发快速检测技术提出展望,结合水产品重金属污染现状,采取技术手段去除重金属,旨在为水产品重金属污染相关研究提供科学参考。     

养殖刺参腐皮综合征 2 种致病菌间接荧光抗体快速检测方法

以养殖刺参(Apostichopus japonicus)腐皮综合征的2种致病菌:灿烂弧菌(Vibrio splendidus)和假交替单胞菌(Pseudoalteromonas nigrifaciens)为抗原,分别制备兔抗血清。以载玻片为介质,建立了2种病原菌的间接荧光抗体检测技术(IFAT)。交叉反应、阻断试验和吸收试验结果均表明本方法特异性强。对人工感染实验中的养殖水体及发病刺参溃烂组织检测,可以检出水体和患病刺参溃烂组织中的相应病原菌,病原菌被染成明亮的黄绿色,检测灵敏度2.4×104cell/mL。冰冻切片检测结果显示,在刺参肿胀嘴部与溃烂肌肉处有大量染成黄绿色的细菌颗粒。结果表明:采用IFAT可以对刺参腐皮综合征2种致病菌进行准确快速的检测。该方法的建立对刺参腐皮综合征的流行病学调查及快速诊断具有重要意义。     

国外渔业研究机构主要研究内容与方法概述

简要介绍了近年国外渔业研究机构在海洋生态系统、生态系统修复、海洋资源可持续利用、环境监测、污染物监管与控制、优化捕捞技术、生态化与工业化养殖、应用生物遗传技术培育优良品种、重要物种的基因数据库、鱼类早期发育及性成熟等方面的研究内容和研究方法，并对中外渔业研究机构的研究领域与研究方法作了简略的比较分析。     

Ultra highly sensitive method for detecting Flavobacterium psychrophilum using high‐gradient immunomagnetic separation with a polymerase chain reaction

We attempted to develop an ultrahigh sensitive method for detecting Flavobacterium psychrophilum using high‐gradient immunomagnetic separation (HGIMS) with a polymerase chain reaction (PCR). HGIMS is a magnetic separation method in which the magnetic force is strengthened by introducing a magnetic gradient between the magnetic filter and nearby column. Because immunomagnetic beads specifically react with target cells, target cells are collected efficiently. Accumulated beads are released from the filter by removing the external magnetic force. After concentrating the samples using the HGIMS system, DNA was extracted from the samples, and PCR was applied to detect F. psychrophilum. Our primers did not react with reference bacteria and reacted specifically with F. psychrophilum. The detection sensitivity using the HGIMS system was higher than that of the method without the HGIMS system, and the total assay time, including sample preparation, was <3.5 h. PCR products of the expected size were obtained from samples of concentrated 4 × 10^?1 to 4 × 10³ cfu mL^?1F. psychrophilum more than 80% of the time using the HGIMS system. Furthermore, our proposed method could be useful for the specific detection of F. psychrophilum from actual samples. Our proposed method is suitable for the highly sensitive detection of F. psychrophilum.     

基于TensorFlow的水族馆鱼类目标检测APP开发

近年来深度学习在图像识别研究中取得突破进展,带动了目标检测技术的快速发展。利用目标检测技术开发水族馆鱼类目标检测APP,可以增强游客参观体验,提升科普效果。针对水族馆拍摄的80种鱼类,首先,使用LabelImg软件进行目标标记,再利用标记的目标导出成tfrecord数据;其次,选择ssd_mobilenet_v1模型进行数据训练,通过20万次的迭代训练获取到鱼类目标检测模型;最后,利用TensorFlow多目标检测API调用模型,定义2个接口和12个类,开发出Android系统手机APP。经过80种鱼类1620张图片测试,正确率为92.59%,华为MHA-AL00手机目标检测平均时间40 ms。使用鱼类目标检测APP,能实现水族馆鱼类快速识别、多鱼类目标实时检测,可提升游客的参观体验,辅助科普量化评价。