黄姑鱼群体遗传多样性的AFLP分析

对青岛和厦门黄姑鱼群体的遗传多样性进行了AFLP分析，5对选择性引物在两个群体47个个体中，共扩增出461个位点，多态位点265个。青岛和厦门群体的多态位点比例、Nei遗传多样性指数和Shannon遗传多样性指数分别为51.70%、51.99%，0.1022、0.0996，0.1643、0.1622；两个群体遗传多样性在同一水平上。基因分化系数G_st、Shannon遗传多样性指数和AMOVA分析均显示黄姑鱼的遗传变异主要来源于群体内个体间，而群体间无明显的遗传分化。群体的显性基因型频率分布和位点差异数分布显示两个群体有基本相同的群体遗传结构。结果表明，黄姑鱼青岛和厦门群体间无明显的遗传差异，群体间有明显的基因交流。     

福建东山和广东阳江褐毛鳞养殖群体遗传多样性的AFLP分析

应用AFLP分子标记技术对福建东山和广东阳江褐毛鳞养殖群体进行了遗传多样性分析。采用6对选择性引物组合对2个群体60个个体进行扩增，共扩增出313个位点，多态位点85个。东山和阳江褐毛鳞养殖群体的多态位点比例、Nei’s基因多样性指数、Shannon遗传多样性指数分别为24．60％和25．56％、0．0795和0．0768、0．1210和0．1176，2个群体的遗传多样性均处于较低水平。遗传分化系数Gst及AMO．VA分析表明，2个群体的遗传变异主要来源于群体内个体间。UPGMA聚类图及PCA分析显示，群体间具有典型的地理特征，且出现了一定程度的遗传分化。     

长石爬鮡3个地理群体遗传多样性的RAPD分析

采用随机扩增多态DNA(RAPD)技术对李仙江流域景东、国庆和大寨长石爬鮡(Euchiloglanis longus)种群的遗传多样性进行了分析.从100条RAPD随机引物中筛选出20条引物,对长石爬鮡3个地理种群进行了分析；共检测到58个有效位点,其中多态位点36个,多态位点达62.07％,Nei基因多样性指数为0.2378,Shannon信息指数为0.3501.3个群体未检测到各自特有的扩增带.AMOVA分析结果显示,大多数(73.06％)的遗传变异由群体内不同个体间的遗传差异造成,26.94％的遗传变异来自于群体间.种群间的遗传分化系数(Gst)为0.2104,基因流Nm为1.8762.根据个体间遗传距离进行的PCoA分析显示,3个群体基本分开.     

文蛤养殖群体和野生群体遗传多样性的AFLP 分析

应用AFLP标记技术对辽宁和山东沿海文蛤（Meretrix meretrix）养殖群体和野生群体的遗传多样性进行分析。采用7对AFLP引物组合对5个群体（3个野生群体，2个养殖群体）150个个体进行扩增，共得到364个的位点。5个群体内的多态位点比例为84．3945％～87．6465％，总多态位点比例为99．6300％。群体的Nei’s基因多样性指数（H）为0．2301～0．2634；群体的Shannon多样性指数为0．3617～0．4248，群体间的遗传距离为0．0394～0．1609，群体内个体间的遗传距离为0．2592～0．5360。辽宁大洼野生群体和山东河口野生群体的多态位点比例、Shannon多样性指数和群体内遗传距离均高于辽宁盘山和辽宁庄河养殖群体，辽宁庄河野生群体的遗传多样性处于中等水平。用UPGMA方法构建的群体系统进化树显示，辽宁庄河野生群体单独成为一支，辽宁大洼野生群体与庄河养殖群体聚到一起，辽宁盘山养殖群体与山东野生群体聚到一起，但是用这5个群体的150个个体进行的聚类结果显示，所有个体基本是随机交叉聚类，不能形成明显的类群分支。分子变异分析（AMOVA）表明，文蛤群体94．04%的变异来源于群体内，群体间的变异仅占5．96％。以上结果表明，文蛤群体内遗传多样性非常丰富，群体间相似性较大，且存在较强的基因交流。[中国水产科学，2008，15（2）：215-221]     

福建东山和广东阳江褐毛鲿养殖群体遗传多样性的AFLP分析

应用AFLP分子标记技术对福建东山和广东阳江褐毛鲿养殖群体进行了遗传多样性分析。采用6对选择性引物组合对2个群体60个个体进行扩增,共扩增出313个位点,多态位点85个。东山和阳江褐毛鲿养殖群体的多态位点比例、Nei’s基因多样性指数、Shannon遗传多样性指数分别为24.60%和25.56%、0.0795和0.0768、0.1210和0.1176,2个群体的遗传多样性均处于较低水平。遗传分化系数Gst及AMO-VA分析表明,2个群体的遗传变异主要来源于群体内个体间。UPGMA聚类图及PCA分析显示,群体间具有典型的地理特征,且出现了一定程度的遗传分化。     

银鲳4个地理种群遗传多样性的初步研究

采用随机扩增多态DNA(RAPD)技术对取自海南(HN)、浙江(ZJ)、江苏(JS)、河北(HB)等近海海域的4个地理群体银鲳进行遗传多样性分析。从20个随机引物中筛选出10个,利用POPGEN Version 1.31软件对多态位点比例和遗传距离进行统计分析。共检测出总位点数56个,其中多态位点有39个,多态位点比例为69.64%。4个海域银鲳群体的Shannon多样性指数分别为0.123 2~0.158 7,Ne i基因多样性指数分别为0.077 6~0.100 4。JS群体与HN群体的遗传距离最远,为0.321 6;JS群体与HB群体的遗传距离最近,为0.231 6。结果表明,RAPD技术具有较高的灵敏性和多态性,是分析评估银鲳遗传多样性较为适宜的分子标记之一;JS群体保持着最高的遗传多样性,而HN群体多态性比例最低、ZJ群体Shannon多样性指数最低,应采取一些有效的保护措施,以避免HN群体遗传多样性的进一步丧失。     

三疣梭子蟹莱州湾、舟山野生个体定向交配产生F2代家系的AFLP分析

以三疣梭子蟹莱州湾、舟山野生群体杂交（莱州湾♀×舟山♂）产生F2代家系63个个体及F1代亲本为实验群体，采用AFLP分子标记对其进行遗传分析。35对选择性引物共扩增出1742个位点，其中分离位点为417个，不分离位点为1325个，多态位点比例为23．9％。在分离位点中，符合1：1孟德尔分离比例的位点为226个，占总分离位点数的54．2％；偏离1：1孟德尔分离比例的位点为31个，占总分离位点数7．4％。符合3：1孟德尔分离比例的位点为128个，占总分离位点数的30．7％；偏离3：1孟德尔分离比例的位点为32个，占总分离位点数的7．7％。家系内基因多样性指数为0．130，Shannon指数为0．193。遗传距离分析显示，子代个体与母本Nei’s遗传距离介于0．064～0．111之间，与父本Nei’s遗传距离介于0．065～0．107之间。其中，63号个体与48号个体分别与父、母本亲缘关系最远。本实验中，偏分离位点比例属正常范围，杂交F2代家系遗传多样性偏低。本研究结果为三疣梭子蟹野生群体及家系遗传多样性分析，遗传连锁图谱构建等方面提供一定的技术支持。     

塔里木裂腹鱼群体遗传多样性的AFLP分析

采用AFLP技术对喀拉喀什河、塔什库尔干河、阿克苏河多浪渠首、木扎提河4个群体共80尾塔里木裂腹鱼(Schizothorax biddulphi Günther)个体进行了遗传多样性分析。6对选择性扩增引物共扩增得到212个位点,其中多态性位点141个,多态位点比例为66.51%。4个群体的Shannon多样性指数(I)为0.316 9-0.544 3,Nei’s遗传多样性指数(H)为0.213 9-0.376 2,群体间的遗传距离为0.078 1-0.250 2。塔什库尔干河群体的多态位点比例、Shannon多样性指数和Nei’s遗传多样性指数均高于其它三个群体。AMOVA分析结果显示,群体总遗传变异85.17%来自群体内差异,而14.83%来自群体间差异,表明塔里木裂腹鱼遗传变异主要来源于群体内个体间,但群体间已存在一定程度的遗传分化。用UPGMA方法构建的群体系统进化树显示,多浪渠首群体和木扎提河群体首先聚类,然后依次与塔什库尔干河群体、喀拉喀什河群体聚类,这一方面与地理位置有关,另一方面与河流的自然环境有关。     

斑节对虾养殖群体遗传多样性的同工酶和RAPD分析

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）和RAPD方法对厦门养殖斑节对虾（Penaeus monodon Fabricius）群体的遗传多样性进行分析。9种同工酶共检测到21个座位，其中多态座位13个，多态座位比例为61．90％，预期杂合度0．151，观察杂合度0．120，Hardy—Weinberg遗传偏离指数（d）为-0．208，存在杂合子缺失。经x^2拟合度检验，多数座位偏离Hardy—Weinberg平衡，表明群体未达到随机交配。14个10bp引物共获得了83个标记，单个引物获得的标记数为2～11个，平均每个引物扩增出5．93个座位，其中多态标记数68个，多态位点比例为81．93％，杂合度为0．246，基因多样性为0．260，Shannon’S信息指数为0．397。两种方法均表明该斑节对虾养殖群体的遗传多样性水平较高，但可能已有近交衰退发生。     

中国境内松江鲈鱼群体遗传变异的ISSR分析

运用ISSR分子标记技术,分析中国境内松江鲈鱼浙江(Z)、山东(S)、河北(H)、辽宁鸭绿江(Y)等4个不同群体间的遗传变异。从100个ISSR引物中筛选出多态性引物15个,对每群体各30个个体进行分析。每引物的扩增条带为6~17条,共得到有效位点181个,其中多态位点136个,多态位点百分率为75.14%。4群体中,H群体的有效等位基因数、Nei氏基因多样性、Shannon氏信息指数及多态位点百分率为最低,分别为1.258 5、0.153 0、0.2322、49.17%;而Y群体的相应值为最高,分别为1.479 4、0.277 7、0.411 2、74.03%;Z和S两群体的值明显高于H群体、略低于Y群体。若将4群体作为一个整体,则总的Nei氏基因多样性指数为0.269 1、Shannon氏信息指数为0.400 9,显示松江鲈鱼的遗传多样性较丰富。群体间的遗传分化系数(GST)为0.131 3,基因流(Nm)为3.309 4,表明松江鲈鱼群体间存在中等程度的遗传分化和一定程度的基因交流。分子方差分析(AMOVA)表明:在总的遗传变异中,85.54%的变异来自种群内个体间,14.46%的变异来自种群间;同样,群体间存在显著(P<0.05)或极显著的遗传分化(P<0.01)。根据群体间Nei氏遗传距离构建的UPGMA树中,Z群体首先与S群体聚类、再与Y群体聚类,呈现出从南向北的地理分布格局,但H群体却单独为一支,与其他群体间的距离较远。     

Cu~(2+)对南美蓝对虾无节幼体的急性致毒研究

研究了Cu2+对南美蓝对虾(Penaeus stylirostris)无节幼体的急性毒性影响。当Cu2+浓度不同时,无节幼体的活性和死亡率均有较大变化,其中12h和24h的半致死浓度(LC50)分别为0.132mg/L和0.102mg/L。实验结果及与其他种类毒性实验的比较表明,Cu2+对南美蓝对虾无节幼体毒性作用明显,并产生畸形现象及对变态率的影响。从而得到Cu2+对南美蓝对虾无节幼体的24h LC50和安全浓度,所得值高于国家海水水质标准值。     

铜、锌离子对尾草履虫的急性毒性试验

试验结果表明,随着离子浓度增高,Cu2 、Zn2 对尾草履虫的毒性增大,且呈现出明显的剂量效应关系。回归分析表明,两种离子的概率单位与浓度对数之间存在着极显著的正相关。Cu2 、Zn2 的1 h半致死浓度(LC50)分别为0.32 mg/L、11.48 mg/L,95%置信区间分别为0.29~0.36 mg/L,8.98~14.88 mg/L。Cu2 对尾草履虫的毒性大于Zn2 的毒性;尾草履虫对Cu2 浓度变化比Zn2 更为敏感。     

汞离子暴露下草鱼肝胰脏过氧化氢酶活性动态变化

研究了暴露在不同汞离子浓度下的草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肝胰脏过氧化氢酶(CAT)的活性变化。实验中汞离子浓度设5组,分别为0 mg/L、0.1 mg/L、0.3 mg/L、0.5 mg/L和0.7 mg/L,每组分别于1 d、5 d、12 d和21 d取样,测定肝胰脏过氧化氢酶活性。结果显示,0.1 mg/L组暴露1d时CAT活性显著低于对照组(P<0.01),然后增加,12 d显著高于对照组(P<0.01);在21 d时下降至正常水平。0.3 mg/L下暴露不同时间均显著高于对照组(P<0.01或P<0.05)。0.5 mg/L组和0.7 mg/L组在暴露1 d和21 d时酶活性显著高于对照组(P<0.01);5 d和12 d时与对照组之间未有显著差异。     

Visualization of the respiring bacteria in sediments inhabited by Capitella sp. 1

ABSTRACT:    We used the tetrazolium salt 2-( p -iodophenyl)-3-( p -nitrophenyl)-5-phenyl tetrazolium chloride (INT) to locate sites of active (respiring) bacterial populations in sediments inhabited by the deposit-feeding polychaete Capitella sp. 1. In sediment microcosms, this organism created typical protruding tubes on the sediment surface and burrows from day 1. Within a couple of hours after adding INT into the overlying water, the red color of the reduced form of INT (INT-formazan) became apparent in the water column and on the sediment surface. During the following 24 h, part of the subsurface burrows turned red and the color of formazan intensified with time during incubation. Spatial heterogeneity of the distribution of the formazan deposits along burrows also was recognized. Microscopic observations revealed that the tubes and feces produced by Capitella sp. 1, as well as detrital particles, were the sites of intensive formazan deposition. Observation with higher magnification (up to ×1250) revealed that INT-formazan was present either as bacterial intercellular deposits or as microgranules covering entire bacterial cells. In situ application of INT into a sediment microcosm provides a simple and sensitive way to visualize the impact of burrow structures created by small macrobenthos, such as Capitella , on the distribution of metabolically active bacteria.     

三角帆蚌不同蚌龄外套膜细胞的增殖能力及其矿化功能

研究了淡水珍珠贝——三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)在不同蚌龄下外套膜组织的细胞增殖及生物矿化相关因子活性。选择5组不同蚌龄三角帆蚌(0.5龄、1龄、2龄、3龄、4龄),通过流式细胞技术分析了外套膜细胞的增殖指数(proliferation index,PrI)和胞内Ca~(2+)浓度,并应用实时荧光定量PCR检测了与生物矿化相关的碳酸酐酶(carbonic anhydrase, CA)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)基因的表达并测定其酶活性。结果表明, 2龄蚌的外套膜细胞PrI及胞内Ca~(2+)浓度显著高于其他蚌龄(P0.05);生物矿化相关基因在不同蚌龄的外套膜组织中表达量不同, 1龄三角帆蚌CA基因表达量和CA酶活性最高(P0.05), ALP基因表达量和ALP酶活在0.5龄三角帆蚌中显著高于其他蚌龄(P0.05)。本研究旨为深入探讨三角帆蚌外套膜细胞增殖能力及人工育珠过程中供体蚌的选择奠定基础。     

Ca~(2+)对鱼类EOG的影响及其解毒作用的探讨

研究四种浓度Ca~(2+)溶液对罗非鱼嗅电图(electro-olfactogram,简称EOG)的影响,探讨Ca~(2+)对重金属中毒鱼的解毒效应,并讨论其可能机制。结果表明,①Ca~(2+)对罗非鱼EOG具双重效应;②Ca~(2+)能使重金属中毒鱼的EOG幅值增高,反映其具有一定的解毒作用,效果顺序为Hg~(2+)>Cu~(2+)>Zn~(2+)>Cd~(2+);③Ca~(2+)对Cu~(2+)+Zn~(2+)混合液也具一定解毒作用。     

HDPE双管圆形深海抗风浪网箱的研制

通过网箱结构的对比分析、材料选择和网箱模型试验，并针对进口网箱在我国海区使用中存在的问题，采用自主开发的HDPE网箱框架专用管材和六边形网目尼龙网衣，在网箱结构设计和制作技术上进行了多项创新性改进，自行研制了HDPE双管圆形结构的抗风浪网箱。波浪水槽模型试验表明，网箱抗浪能力可达7m波高以上，在原型流速102．9cm／s时，网箱容积损失率约为19．8％。研制的周长50m，水体2000m^3的试验网箱，经两年海区养殖验证，经历8～9级大风38次，10级以上大风3次，最大流速72cm／s，网箱系统和养殖鱼类安全。     

CaCl2对鲫鱼血清Ca^2＋浓度的影响

鲫鱼体腔注入０．６８ＭＣａＣｌ２后２－１６小时血清Ｃａ＾２＋浓度显著高于正常对照组，但其数值随时间的延长而逐渐降低，１６小时后继续降低，到４８小时其值显著低于正常对照组，低血钙状态持续到９６小时，我们认为Ｃａ＾２＋浓度的这种变化特征与斯坦尼小体的功能密切相关。     

草鱼胰岛素样生长因子—I的融合表达、纯化和抗血清制备

采用PCR方法改造已克隆到的草鱼胰岛素样生长因子-I（IGF-I）cDNA。使其成为成熟肽cDNA并亚克隆到pGEX-4T-1载体中,构建草鱼IGF-I融合蛋白表达质粒pGEX-IGF。质粒转化大肠杆菌BL21菌株,该菌株经IPTG诱导可表达分子量约34kD的特异蛋白。在不同的温度条件下分别产生以可溶性的和包涵体形式为主的特异蛋白,经30℃诱导的菌体经溶菌酶消化、超声破碎及高速离心后,裂解液上清经glutathione sepharose亲和层析纯化获得高纯度的GST-IGF。以此纯化的融合蛋白为抗原制备兔抗草鱼IGF-I的抗血清,凝胶双扩散试验显示抗血清效价为1：64,说明表达产物具免疫原性。     

氯化汞胁迫下硒对中华米虾SOD活性的影响

研究了在氯化汞胁迫下,饲料中的硒对中华米虾(Caridina denticulata sinensis)超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响。实验表明,氯化汞对中华米虾的24 h、48 h、72 h和96 h的半致死浓度分别为145、132、130和127μg/L。中华米虾在127μg/L以下几种不同浓度氯化汞胁迫下,SOD活性受到明显影响,但饲料中添加硒0.45μg/g的实验组米虾SOD活性较对照组明显提高。因此,在一定浓度氯化汞胁迫下,饲料中添加适量的硒可提高中华米虾SOD活性,利于提高虾体的抗氧化酶活力。