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本研究以凡纳滨对虾为研究对象,取其肌肉组织28℃下保存于不同饱和度和不同pH的铵盐保存液中,保存一定时间后,通过组织总RNA提取、RT-PCR法及荧光定量RT-PCR法鉴定比较选择方便有效的保存方法。结果显示,从含25mmol/L柠檬酸钠和20mmol/L EDTA的饱和醋酸铵保存液和饱和硫酸铵保存液中保存的组织中提取的RNA较完整。通过调节pH进行保存液的优化,提取RNA后的凝胶电泳、RT-PCR及荧光定量RT-PCR确定的基因拷贝数显示,从含25mmol/L柠檬酸钠和20mmol/L EDTA的饱和醋酸铵保存液(pH 6.0)和饱和硫酸铵保存液(pH 5.2)保存的组织中能成功地提取出大量的RNA,且RNA分子完整;通过荧光定量RT-PCR法显示新鲜组织的18S rRNA拷贝数为107Copies/mg组织,保存28d后的组织18S rRNA拷贝数可达到105Copies/mg组织,而空白对照组的18S rRNA拷贝数只有103Copies/mg组织。说明保存液对于抑制核酸降解有较好的效果。这种简便有效的保存液为样品的保存、现场采集标本及后续的分子实验奠定了基础。 相似文献
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氨在世界河口和海洋中是一项重要的微量营养物。它是许多异养的海洋生物排泄物,而且对海洋初级生产力有很大的影响。但是它在海洋中浓度很低(很少超过1.0微克分子浓度),并在小范围和空间里变化很大。所以测定海水中氨浓度一直是一个困难问题。过去测定的方法有: 相似文献
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正北方尤其是黑龙江地区,每年11月份结冰封泡至第二年4月份开泡历时5个多月,鱼儿经过一个漫长的冬季停食,鱼体消瘦,鱼体重不同程度减少。随着春季的到来,水体温度增加,鱼类开始渐渐吃食。同时,各种细菌和寄生虫开始活动,鱼病也开始发生,此时鱼体比较虚弱,极易感染各种疾病。所以抓好开春池塘管理工作,及时采取必要的技术措施至关重要,笔者根据自己多年来实践及工作经验总结以下建议,供同行参考。一、采取措施,促进池塘冰层尽早开化 相似文献