坛紫菜（Porphyra haitanensis）果孢子在液氮中保存的初步研究

初步研究了坛紫菜(Porphyra haitaneusis)果孢子在液氮(-196℃)保存后的存活率及萌发率。试验表明，甘油和脯氮酸在冷藏中作为低温保护剂是不适用的，二甲基亚砜(DMSO)有效，且以10％浓度为最佳。加入该种浓度DMSO，采用快速降温法，短期冷藏(一小时到五天)，孢子的存活率在25～30％。进行培养试验表明，生存下来的孢子萌发率为50％左右，接近未经冷藏的正常孢子的萌发率，而且幼苗生长健壮。     

不同种类冷冻保护剂对海带配子体及孢子的毒性评价

为筛选用于海带超低温保存的冷冻保护剂，采用10%二甲基亚砜(DMSO)、10%甘油、10%蔗糖、10%乙二醇、10%DMSO+10%甘油、10%DMSO+8%葡萄糖、10%DMSO+10%蔗糖、10%DMSO+10%甘油+8%葡萄糖、10%DMSO+10%山梨醇等9种单一或复合冷冻保护剂，在0～4℃条件下分别对海带配子体和孢子进行处理，对配子体处理30 min、60 min、24 h,对孢子处理15、30、60 min,通过统计配子体细胞的存活率以及孢子萌发成配子体的比例，对不同种类的冷冻保护剂进行毒性评价。结果表明：9种冷冻保护剂均对海带配子体和孢子有一定的毒性作用，并且毒性随着处理时间的延长而增强。10%DMSO对海带配子体细胞的毒性最小，处理60 min后配子体细胞的存活率为100%;其次是10%乙二醇，处理30 min后配子体的存活率为100%;含10%甘油的单一或复合冷冻保护剂对配子体细胞毒性较大，处理后配子体的成活率显著低于DMSO和乙二醇组(P<0.05)。单一冷冻保护剂对海带孢子的毒性显著低于复合冷冻保护剂，除10%甘油组处理30、60 min外，其他单一冷冻保护...     

坛紫菜种质品系表型性状的变异规律分析

坛紫菜(Pyropia haitanensis)的表型性状是遗传育种的主要考察指标。研究以福建省坛紫菜种质资源库保存的73份种质品系为实验材料,对藻体的5个形态特征和14个数量性状数据进行了统计分析,以探讨坛紫菜表型性状的遗传变异规律。结果表明,坛紫菜藻体的形状、颜色、锯齿大小和扭曲程度4个形态特征与藻体长度、宽度、重量和厚度4个数量性状极显著相关(P0.01),叶片基部形状与藻体长度、宽度、鲜重和厚度显著相关(P0.05);比较不同性状均值发现,线形藻体的平均长度增长速度最快,基部为心脏形的藻体平均重量增长速度最快,无锯齿的藻体厚度最薄。巢式方差分析结果显示,坛紫菜品系间的遗传变异(72.79%)远大于品系内(21.46%),说明品系间的变异是坛紫菜表型变异的主要来源。坛紫菜藻体各表型性状的变异系数为7.14%~35.99%,其中藻体厚度变异系数最低,而单株藻体重量的变异系数最高,说明藻体厚度的选择潜力相对较小,而重量的选择潜力则较大。这些数据为后续坛紫菜的遗传育种提供了基本资料。     

高温静水胁迫培养对坛紫菜品质的影响

以坛紫菜耐高温型品系Z-61 F4代叶状体为实验材料,野生型坛紫菜（WT）叶状体为对照,研究了常温（21℃）静水和高温（30℃）静水培养不同天数（0、2、4、6、8、10 d）后,坛紫菜藻体中光合色素含量、粗蛋白含量、总氨基酸含量和4种主要呈味游离氨基酸含量等品质指标的变化情况。结果表明,常温静水培养对坛紫菜耐高温型品系的品质没有显著影响,甚至短时间的常温静水培养还有利于提高野生型品系藻体的品质;但高温静水培养会显著降低耐高温型品系和野生型品系的品质,只是耐高温型品系的品质下降速度要慢于野生型。此外,本研究还发现,耐高温型坛紫菜品系还可以通过调节藻体细胞内别藻蓝蛋白（APC）和游离氨基酸的含量来增强自身对高温胁迫的抵抗能力。本研究结果为全面认识坛紫菜的抗逆性机理提供了基础资料,同时也为后续坛紫菜抗逆新品种的选育提供了理论指导。     

雷州马尾藻幼体培育中丛簇羽藻的生态防治

采用弱光、低盐处理雷州马尾藻(Sargassun leizhouense)幼苗及其污染生物丛簇羽藻(Bryopsis caespitosa)。结果表明:盐度0～13,培养24h丛簇羽藻死亡率达100%;盐度20,培养24h后恢复培养2d,丛簇羽藻呈负生长,成活率由66.7%降为33.3%,而雷州马尾藻在盐度20以上呈正生长,成活率100%。光照强度0～2000lx培养3d丛簇羽藻死亡率达100%,而雷州马尾藻在光照强度300Lx以下,生长出现负增长,500～2000Lx光强时呈正生长,并随着光照强度增强其相对生长率加快,成活率为100%。因此,采用海水盐度20处理24h,光照强度300Lx培养3d,可有效防治雷州马尾藻幼苗培育中丛簇羽藻危害。     

保护剂对2种微藻超低温保存存活率的影响

以甘油作保护剂,亚心形扁藻和中肋骨条藻均在其体积分数10%时存活率最高,分别为51.17%、36.80%。以DMSO作保护剂,在体积分数为5%时亚心形扁藻的存活率最高,为21.95%;在体积分数为10%时中肋骨条藻存活率最高,为26.65%。在10%甘油和10%DMSO混合保护剂中,亚心形扁藻和中肋骨条藻的存活率分别为27.84%、23.88%。     

Vibrio mediterranei117-T6引发的坛紫菜黄斑病的初步研究

以一株黄斑病致病菌Vibrio mediterranei 117-T6感染坛紫菜的自由丝状体,研究了环境因子对该菌株生长的影响及其最易感条件,检测了该条件下V. mediterranei 117-T6引发的坛紫菜丝状体的抗氧化酶(SOD、POD)活性以及藻胆蛋白、叶绿素a(Chl. a)、可溶性蛋白、游离脯氨酸(Pro)和丙二醛(MDA)含量等生理指标的变化。结果显示,V. mediterranei117-T6的最优生长条件为30°C、pH 7.0、盐度20,最易感条件为30°C、pH 6.0、盐度20。在易感条件下培养12 h后,感染组坛紫菜丝状体的SOD和POD的活性,藻胆蛋白、可溶性蛋白以及游离Pro含量等指标均显著高于对照组;MDA含量峰值出现在6 h,显著高于对照组;在24 h后,感染组的Chl. a含量达到峰值,亦显著高于对照组。研究表明,短期内弧菌感染虽然可以刺激坛紫菜丝状体产生胁迫应激反应,但是随着感染时间的延长,致病菌感染引发的藻体内活性氧及渗透压胁迫加剧,最终导致紫菜死亡。高温和酸化等不良的环境会加剧V. mediterranei 117-T6引发的坛紫菜黄斑病的恶化,其作用程度依次为温度、pH和盐度。     

坛紫菜诱变及F1代叶状体表型性状分析

突变体是开展坛紫菜(Neoporphyra haitanensis)良种选育和性状遗传调控机理研究的重要材料。为获得坛紫菜突变体，本研究利用不同强度的γ射线辐照(辐射剂量梯度：700、900、1100、1300、1500 Gy)处理野生品系NSD35的幼苗，恢复培养结果显示，γ射线照射导致叶状体部分细胞死亡，且藻体细胞的死亡量随着诱变剂量的增加而升高；同时，突变的细胞数量随着辐射剂量增加呈先增后降的趋势。其中，经1300 Gy处理后藻体的突变细胞最多。之后利用体细胞酶解技术和单克隆技术获得了突变体的纯系藻体，从中初步筛选出性状各异的株系67个，并利用14个表型性状对其中21个株系的F1代进行相关性分析和聚类分析。结果显示，相较于对照组，突变体F1代群体中大部分性状的变异系数增加。突变体的多个性状间存在显著相关性，其中，藻体长度与宽度、鲜重没有显著相关性(P>0.05)；宽度与鲜重、叶形态呈极显著正相关(P<0.01)；鲜重与颜色呈显著负相关(P<0.05)；藻体不同部位的厚度之间存在极显著正相关；叶型与藻体中部、尖端的厚度呈显著负相关。进一步采用系统聚类的方法(遗传距离为20)，将21份材料分成4个主要类群，分别为颜色偏红的藻体组、宽而生物量大的藻体组、薄而日均增长快的藻体组和长而窄的藻体组。综上所述，γ射线对坛紫菜叶状体具有良好的诱变效果，本研究为开展坛紫菜经济性状的遗传调控机理研究以及优良新品种选育提供了基础材料。     

坛紫菜不同色素突变体的初步研究

初步探讨了坛紫菜Porphyra haitanensis褐色、褐绿色、翠绿色、红棕色、棕褐色、桔红色和紫色7种色素突变体的子一代叶状体形态特征、生长及4种主要色素含量的变化.3～4cm长的不同色泽幼苗经20d培养后的结果显示:(1)各色素突变体从长度、宽度、鲜重量和细胞厚度方面较野生坛紫菜均具有显著优势;在培养时间内,各色素突变体的长度日增长量均显著高于野生型坛紫菜;褐绿色、棕褐色和红棕色突变体在鲜重日增重率上表现出明显的优势,在第11～15天所有色素突变体的平均日增重率均高于野生型;(2)红棕色、棕褐色和紫色突变体的总藻胆蛋白含量明显高于野生型.紫色突变体的藻红蛋白、藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白含量均为最高,其中藻红蛋白、别藻蓝蛋白含量为野生型的3倍.叶绿素含量均无明显变化.本研究结果为有效利用坛紫菜的不同色素突变体进行种质改良奠定了良好基础.     

高温下芽孢杆菌对坛紫菜生长及生理的影响

坛紫菜是我国东海区栽培的重要经济海藻,其生长适温为20°C,极限高温为29°C。高温和病原菌均会导致坛紫菜生长受抑、藻体病烂。为研究高温下藻际微生物对坛紫菜生长的影响,本文以坛紫菜叶状体和藻际芽孢杆菌(实验证明该菌株在20°C下为紫菜的益生菌)为材料,检测了在28°C下藻际芽孢杆菌对坛紫菜相对生长率(RGR),抗氧化酶(SOD、POD)活性,可溶性蛋白、游离脯氨酸(Pro)、丙二醛(MDA)和藻胆蛋白含量等生理指标的影响。结果显示,28°C下,在实验初始阶段,菌藻共培养组坛紫菜比纯培养对照组有较高的RGR,但随着培养时间的延长,两组的RGR无显著性差异;4 d后两组坛紫菜均出现腐烂,菌藻共培养组的藻体腐烂程度更为剧烈;培养24 h后,菌藻共培养组的SOD、POD活性和MDA水平均显著高于对照组,而渗透调节物质可溶性蛋白和Pro显著低于对照组;共培养组中,坛紫菜的藻胆蛋白含量均显著高于对照组。该研究表明,28°C下,虽然在短期内藻际芽孢杆菌会促进坛紫菜的生长,但随着培养时间的延长反而不利于坛紫菜的生长,且加剧活性氧和渗透压胁迫,表明该菌的生态功能因环境变化而发生了改变。     

Cryogenic and Refrigerated Storage of Rainbow Smelt Osmerus mordax Spermatozoa

The effects of extender composition, cryoprotectant, and freezing rate on post-thaw rainbow smelt Osmerus mordax sperm motility were examined, and the fertilization capacity of fresh and post-thaw sperm were compared. The highest post-thaw motility (75%) was obtained when milt was diluted 1:3 with an extender containing 600 mM sucrose supplemented with 10% dimethyl sulfoxide and 1.5% bovine serum albumin and frozen at a rate of –20 C/min. Post-thaw motility for sperm stored in this extender was similar to fresh sperm and did not change after 90 d of storage. Furthermore, there were no differences in fertilization rate or embryo survival to the eyed stage between fresh and post-thaw sperm frozen in this extender. The lowest post-thaw motility was observed when sperm were frozen with methanol at a rate of -30 C/min. Refrigerated sperm diluted 1:3 with the 600 mM sucrose extender remained motile for 30 d. These data demonstrate that rainbow smelt spermatozoa can be effectively used following short and long-term storage using a simple, sucrose-based extender.     

厚壳贻贝早期幼虫低温保存的影响研究

探讨低温(4 ℃)条件下的厚壳贻贝早期幼虫保存可能性,同时调查了不同培育密度对低温保存的影响。在正常条件下,继续培育低温保存后的幼虫,并调查其存活率和生长的变化。 结果表明,在低温保存后,早期幼虫存活率较高,超过95%;厚壳贻贝早期幼虫的壳长和壳高出现显著性的增长。不同培育组间,培育密度对厚壳贻贝早期幼虫的存活和生长影响不同,表明密度是幼虫低温保存的一个重要因素。在正常培育条件下,低温保存后的幼虫,3周后其存活率明显低于对照组,但仍超过50%,且其生长速度明显高于对照组。因此,低温培育是保存厚壳贻贝早期幼虫的有效方法,可用于今后贝类幼虫生物学实验和人工育苗技术的改善研究。     

Effects of Conservation Method and Time on Fatty Acid Composition,Taste, and Microstructure of Southern King Crab (Lithodes santolla Molina, 1782) Meat

This study reports the changes in fatty acids, taste, and microstructure of cooked southern king crab meat (Lithodes santolla) during storage at 0°C for 10 days and at ?20°C for 90 days. At the end of both storage times, the iodine value decreased by 16.5%, while 83.5% of the initial fatty acid quality remained unchanged. The polyene ratio decreased by 32% at 0°C and 35.9% at ?20°C, whereas the atherogenic and thrombotic indices remained at values that do not represent any risk to human health. Free amino acids that contribute to taste (taste activity value, TAV > 1) were: glycine and alanine (sweetness), arginine (bittersweetness), and histidine (bitterness). The bittersweet taste imparted by arginine (initial TAV = 16.4) was prevalent even at the end of frozen storage (TAV = 7.9). The umami taste was elicited by disodium 5′-adenosine monophosphate (AMP) nucleotide. The equivalent umami concentration in g MSG/100 g meat changed from 0.031 to 0.045 in refrigerated samples and to 1.6 in frozen samples. A loss of the original fibrous structure of the meat was evidenced during both treatments. Refrigerated samples presented a disintegrated and homogeneous texture at 10 days, while freezing formed a spongy tissue at 90 days.     

光裸星虫对盐度和温度的耐受性研究

试验结果表明,(1)盐度从20突变为5时,其成活率为60%;盐度由20突变至50时,成活率为0.求得光裸星虫96 h半致死盐度上限为41.7.(2)盐度由25每隔12 h上升5至盐度50时,其成活率由100%降至60%,盐度逐渐由25降至5,光裸星虫成活率由100%降至85%.(3)当水温由25 ℃急骤降至20、15、10、5 ℃时,光裸星虫的成活率依次为100%、100%、100%、70%;当水温由25 ℃急骤升至30 ℃时,光裸星虫的成活率仅为10%;当突变温度急骤升至35 ℃时,其成活率为0.求得其96 h急性半致死温度上限为27.5 ℃.(4)水温由22 ℃每隔12 h逐渐升至25、30、35、40 ℃时,光裸星虫成活率下降幅度不大,分别为100%、100%、85%、85%.水温由22 ℃每隔12 h逐渐降至20、15、10、5 ℃时,其成活率均为100%.根据试验结果可知,光裸星虫属广温、广盐种.     

盐度与pH对花鲈孵化、初孵仔鱼成活及早期幼鱼生长性能的影响

为探究我国北方海域花鲈繁育适宜盐度和pH处理的设定,及促进早期花鲈苗种推广,本研究针对不同盐度(0、15、20、25、30、35和40)与pH(5.5、6.5、7.5、8.5和9.5)条件下,北方人工繁殖花鲈受精卵的孵化率、畸形率及饥饿10 d后的存活情况进行了分析,并对花鲈初孵仔鱼进行不投饵耐饥饿实验,记录每日存活率(SR)及最终生存活力指数(SAI)。最后观测低盐0、养殖盐度30与高盐45对花鲈早期幼鱼生长性能的影响。结果显示,北方海域花鲈受精卵适宜孵化盐度为20~35,以盐度25组孵化率最高,适宜pH为6.5~7.5,以pH 6.5组孵化率最高。低盐15组中,具最低的孵化率及最高的畸形率,但在最终饥饿SR的统计中,低盐15组的SR及SAI明显高于盐度30与35组,推测低盐15接近花鲈体液等渗点,降低了渗透调节中的能量消耗,更利于存活。初孵仔鱼饥饿实验中,盐度20组SR下降相对平缓,在第8天仍有12.66%的SR(其他组已为0)。饥饿1 d时,各pH组SR均小于90%,以pH 6.5组SR最高,为89.11%。与盐度处理组相比,花鲈初孵仔鱼对pH变化较为敏感,其孵化率及最终SR显著低于盐度处理组。花鲈早期幼鱼盐度处理组中,低盐0与高盐45将对此规格花鲈幼鱼产生较大损伤,以高盐45抑制最显著,应为苗种盐度推广的上限,而花鲈生长盐度30与各处理盐度相比,较适合花鲈早期幼鱼的生长。研究结果将为北方海域花鲈繁育适宜盐度和pH处理的设定,及提高花鲈孵化率、育苗成活率与早期苗种推广提供基础资料。     

盐度对斑节对虾蜕壳、存活、生长和饲料转化率的影响

对平均体重1.20±0.05g的斑节对虾（Penaeus monodon）稚虾进行为期30d的养殖试验,分别测定其在不同养殖盐度条件下的蜕壳间期、成活率、特定增长率和饲料转化率。斑节对虾的成活率在盐度5时最低,低于60%,与其它盐度试验组差异显著,而其它试验组之间差异不显著。在5～25盐度范围内,蜕壳间期随着盐度升高而延长,盐度达30以上后又缩短,25时为最大值;盐度5、10和15之间差异显著,15、20、30和35之间差异不显著。特定增长率和饲料转换率随盐度升高呈现双峰的波浪式变化趋势;特定增长率在盐度20（3.18±0.14）%·d^-1和25（2.98±0.26）%·d^-1时达到最高。蜕壳间期与生长率存在极显著的正相关关系（P〈0.001）。在盐度20、25、30时饲料转化率高,分别为（52.76±3.06）%、（54.90±5.14）%和（51.56±7.58）%,与其它盐度试验组之间差异显著。因此,斑节对虾养殖的适宜盐度应为20～30,在此条件下可实现较高的成活率、特定增长率和饲料转换率。     

温度和盐度对鞍带石斑鱼受精卵发育及仔鱼成活率的影响

研究了在8个盐度梯度(18.3‰、19.7‰、21.2‰、23.5‰、25.6‰、27.1‰、29.5‰和31.7‰)下鞍带石斑鱼Epinephelus lanceol受精卵和仔鱼在水中的分布状态、出膜率和仔鱼存活率;在9个温度梯度(18℃、20℃、22℃、24℃、26℃、28℃、30℃、33℃和35℃)下,其受精卵孵化率、畸形率和仔鱼成活率。结果表明:(1)在水温为25~26℃,当盐度≤25.6‰时,受精卵表现为沉性;当盐度≥27.1‰时,受精卵表现为浮性。仔鱼的分布与受精卵有相似的特点,当盐度≤21.2‰时仔鱼分布在底层水体;当盐度≥27.1‰时,仔鱼集中分布在上层水体。(2)以孵化率和成活率为指标,鞍带石斑鱼孵化的适宜盐度范围为21.2‰~31.7‰,最适盐度范围为25.6‰~31.7‰。在盐度为31.7‰时仔鱼成活率最高达到75.9%。(3)鞍带石斑鱼胚胎发育的适温范围是26~30℃。28℃时受精卵孵化率、仔鱼成活率均最高,畸形率最低。     

盐度对棘头梅童鱼胚胎发育和仔鱼存活的影响

观察比较了11个盐度梯度[0、5、10、15、20、25、30(自然海水)、35、40、45、50]下,棘头梅童鱼(Collichthys lueidus)胚胎的沉浮情况、孵化时间、孵化率和畸形率,并测定了初孵仔鱼的不投饵存活系数(SAI)。结果表明:(1)棘头梅童鱼胚胎在海水盐度为30及以上时100%漂浮;盐度为25时,95%漂浮,5%悬浮;盐度为20时95%悬浮,5%沉底;盐度为15时95%沉底,5%悬浮;盐度为10及以下时100%沉底。在水温18～20℃的条件下,棘头梅童鱼胚胎在盐度5～40范围内经28～32 h能孵化出仔鱼,盐度对孵化时间影响不显著(P>0.05)。但孵化率和畸形率因盐度不同而有显著差异。综合分析表明棘头梅童鱼胚胎孵化的适宜盐度范围为15～35,孵化最适盐度范围在20～30之间。(2)在可孵出鱼苗盐度范围(5～40)内,棘头梅童鱼仔鱼SAI值为(1.80±0.03)～(11.85±0.02),与卵的孵化率呈正相关关系。仔鱼生存的适宜生长盐度为10～30,最适盐度范围为20～25。     

不同盐度下凡纳滨对虾生长和存活性状遗传评估

为揭示不同盐度环境对凡纳滨对虾家系体质量和存活性状的影响,本研究标记来自72个家系的4348尾对虾,在盐度30(HS组)和盐度15(LS组)条件下混养60 d,分析体质量和存活性状的遗传参数以及基因型与环境互作效应。结果显示,HS组的凡纳滨对虾平均体质量和存活率均高于LS组。估算体质量、存活性状遗传参数,结果显示HS和LS组体质量的遗传力估计值分别为0.51±0.08和0.30±0.07,属高遗传力;转换后存活性状遗传力估计值分别为0.22和0.39,也表现为中高遗传力水平。综合HS和LS组的数据,估算的体质量和转换后存活性状遗传力分别为0.45±0.07和0.31,均表现为高遗传力水平。然而由于收敛原因,在估计模型中未能包括共同环境效应,上述遗传参数估计值偏高。估算基因型与环境互作效应(G×E),结果显示两个盐度间体质量和存活性状均表现为高度遗传相关(0.81~0.90),G×E方差组分与加性遗传方差组分比值均小于0.5,G×E效应均不显著。研究表明,尽管凡纳滨对虾的生长和存活性状在两个盐度下存在一定差异,然而基因型与盐度的互作效应并不显著,由此认为在盐度15~30的范围内,不需要针对不同的盐度建立不同的选育系。     

盐度对杂交东方鲀存活和摄食的影响

采用盐度骤变和渐变的方法,研究了盐度0、5‰、10‰、15‰、20‰、25‰、30‰、35‰、40‰、45‰、50‰、55‰、60‰共13个梯度对菊黄东方鲀(♀)×红鳍东方鲀(♂)杂交F1代存活和摄食的影响。研究表明,盐度从30‰骤变到15‰～50‰时,杂交F1存活率最高,显著高于盐度0、5‰、10‰、55‰和60‰梯度的存活率(P<0.05),其中盐度10‰的梯度中杂交F1代存活率约为33.3%,而盐度0、5‰、55‰和60‰梯度的存活率均低于1%;盐度5‰～50‰为杂交F1可摄食盐度,其中20‰～35‰是最佳摄食盐度。盐度渐变时,盐度5‰～50‰梯度中杂交F1代存活率最高,显著高于盐度0、55‰和60‰梯度的存活率(P<0.05),其中盐度0的梯度中杂交F1代存活率最低,约为12%;盐度0～60‰为杂交F1可摄食盐度,其中盐度20‰、25‰、30‰、35‰和40‰时,杂交F1摄食率无显著差异,在盐度30‰时摄食量和摄食率均达到最大。表明,菊黄东方鲀(♀)×红鳍东方鲀(♂)杂交F1代是广盐性鱼类,对盐度适应能力较强,而且适应盐度渐变的能力强于盐度骤变。