罗非鱼与鲢乳酸脱氢酶及酯酶同工酶的电泳研究

<正> 运用电泳技术研究鱼类同工酶国内外报道较多,但对我国引进的几种罗非鱼各种组织中的乳酸脱氢酶(LDH)同工酶和酯酶同工酶的电泳研究,国内还少见。本文采用了聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳,对两种罗非鱼和鲢的LDH同工酶及酯酶同工酶进行了电泳研究。材料和方法一、材料由于鱼源的限制,本文仅对性腺发育Ⅲ～Ⅳ期的尼罗罗非鱼和加利略罗非鱼,性腺发育Ⅰ～Ⅱ期的鲢鱼LDH同工酶和酯酶同工酶进行电泳研究。     

毛蚶同工酶组织表达差异研究

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板不连续电泳,对毛蚶的肝胰脏、斧足、外套膜、闭壳肌、鳃等5种不同组织进行了6种同工酶(EST、LDH、MDH、α-AMY、POD、CAT)的电泳研究,并对各种酶的同工酶位点及酶谱表型差异进行了分析.结果表明:毛蚶的同工酶系统具有明显的组织特异性,并对同工酶的组织特异性分布及其生理意义进行了讨论.     

微卫星产物变性与非变性PAGE-银染方法比较

用哲罗鱼的微卫星引物对哲罗鱼的2个微卫星位点进行PCR扩增。将扩增产物在变性与非变性聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)上电泳,银染后发现微卫星扩增产物在二者上的电泳结果存在明显差异。在非变性凝胶中存在较多非特异条带,而在变性凝胶中微卫星扩增产物条带清晰,易于鉴定。     

农药敌敌畏对泥鳅肌肉中水溶性蛋白质的影响及分析

用聚丙烯酰胺垂直板电泳法对健康泥鳅与被污染的泥鳅体内肌肉中水溶性蛋白质进行分析,结果二者水溶性蛋白质的谱带存在明显不同。     

藏香猪血液多态性的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳和圆盘电泳法,对45只藏香猪Tf、Po、ALB、ES1、ES2、ES3、CAT、LDH、AMY1、AMY2和AKP11个基因位点进行了检测,并计算基因杂合度,进行变异遗传的分析。结果表明:(1)藏香猪血液蛋白(酶)的11个基因位点都存在多态性。(2)在遗传变异系数中,平均基因杂合度、平均基因均质度和平均有效等位基因数分别为0.4413、0.1770和1.8538。     

鱼类血清免疫球蛋白的分离与鉴定

经饱和硫酸铵盐析——葡聚糖凝胶G—25层析柱脱盐——DEAE纤维素柱纯化——冷冻干燥离心浓缩,从鱼血清中分离出免疫球蛋白。并用聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳和紫外线扫描分析其电泳特性和主要成分的相对含量。     

聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳在鱼类分类及雌雄鉴别上的初步研究

<正> 聚丙烯酰胺凝胶电泳这项技术,兼有电泳和分子筛层析的双层作用,电泳系统的不连续性,大大提高了分离物质的分辨力和敏感性,是分离和分析蛋白质及核酸等高分子物质的一种好方法。这项技术发展很快,自1959年首次被应用后,广泛应用于生物学的各个领域,当前已成为研究分子生物学、分子遗传学、医学等不可缺少的工具。用聚丙烯酰胺凝胶电泳研究人、动物以及鱼的血清,国内外已有不少报道。至于加利略罗非鱼和莫桑比克罗非鱼的血清的比较研究,尚未见报道。本文用聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳对这两种罗非鱼的血清进行对比分析,并观察血     

制备方法对琼脂糖得率和质量的影响

研究了聚乙二醇法、硫酸铵法、EDTA-Na2法及尿素法提取的琼脂糖在得率和品质上的差异。结果表明,4种方法提取的琼脂糖在得率和品质方面都具有较大的差别;EDTA-Na2法琼脂糖的得率最高,为62．3％;聚乙二醇法琼脂糖中的硫酸根和灰分含量最低,分别为1．39％和O．42％;尿素法琼脂糖的结晶紫电泳性能最好,其电泳长度为8．6cm;EDTA-Na2法琼脂糖的聚乙二醇电泳性能最好,电泳长度为3．9cm。随着聚乙二醇法提取次数的增加,琼脂糖纯度和质量显著提高。用聚乙二醇法提取3次所获得的琼脂糖的各项质量指标比其他3种方法获得的琼脂糖都好。     

草鱼鳃组织蛋白双向电泳技术的建立及优化

为建立并优化草鱼鳃蛋白质组双向电泳的技术体系,实验将草鱼鳃经裂解处理后,通过固相p H梯度胶条进行一向等电聚焦和SDS聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳进行蛋白分离,对不同的裂解液配方、蛋白纯化方法、IPG胶条的分离范围、上样量和染色方法等进行了探索和优化,并应用lmage Master 2D Platinum 7.0软件对电泳图谱进行了分析。结果表明:采用裂解液中添加DTT来取代Tris和TBP、选择分离范围为pH4-7的IPG胶条和150μg的主动水化上样,电泳结束后对凝胶进行硝酸银染色,获得了覆盖范围广、低背景、高分辨率、适合差异蛋白分析的双向电泳参考图谱。     

尼罗罗非鱼肌肉蛋白质双向电泳体系的建立

为建立1种尼罗罗非鱼肌肉组织蛋白质的双向电泳体系,实验将尼罗罗非鱼肌肉组织蛋白质提取后,用双向电泳(2-DE)分离蛋白质,分别对蛋白质样品的制备方法、IPG胶条长度及p H范围、SDS-PAGE凝胶浓度及染色方法4个关键因素进行了探索和优化。结果显示,采用液氮研磨-丙酮沉淀法制备样品蛋白质,使用24 cm p H 4~7的IPG胶条进行第一向等电聚焦电泳,第二向SDS-PAGE电泳采用浓度为12.5%的凝胶进行,双向电泳后的凝胶采用硝酸银染色法进行染色处理,该条件下扫描所得尼罗罗非鱼肌肉蛋白质二维电泳图谱具有蛋白质分离程度好、斑点清晰、分辨率高及横纹少等优点。研究表明,技术体系适用于尼罗罗非鱼肌肉蛋白质的分离,可用于后续罗非鱼肌肉蛋白质组学研究。