中间球海胆与光棘球海胆杂交及子一代人工育苗技术

研究结果表明，虽然中间球海胆与光棘球海胆的繁殖时间有差异。但通过筛选能够同时得到自然成熟的精卵，在比正常海胆自交精子量高20-40倍的精子作用下，中间球海胆为母本，光棘球海胆为父本，杂交受精率为47.1%，而反交的受精率为1.9%，正反交受精率均低于自交组。在适宜的水温，光照及饵料等培养条件下，两杂交组均能够生长，附着变态，并且变态时间与母本相近。     

光棘球海胆(♀)×中间球海胆(♂)杂交育苗试验

以光棘球海胆为母本,中间球海胆为父本进行杂交试验及苗种培育.试验结果表明,通过筛选同时得到自然成熟的父母本精、卵,在比正常海胆自交精子量高40倍以上的精子作用下,杂交受精率为2.5%.在适宜的水温、光照及饵料等的培养条件下,杂交海胆能够生长附着变态,变态时间与母本相近.培育出的杂交海胆外部颜色及棘色、棘长介于两亲本之间.杂交海胆经过6～7个月的中间暂养,出苗量为0.6×10~4个/m~3,个体壳径3～30 mm,平均壳径8.8 mm.     

5种经济海胆线粒体16SrRNA基因片段的序列分析

对光棘球海胆、中间球海胆、马粪海胆,海刺猬和紫海胆线粒体DNA 16SrRNA基因片段进行了PCR扩增和测序,得到395 bp的可信片段。通过ClustalX 1.83和Mega 3.0软件对所得线粒体16SrRNA片段序列进行比较,共检测到118个碱基变异,其中简约信息位点为33个。应用Mega 3.0计算各种间的相对遗传距离,以糙海参为外类群,得到NJ系统树和MP系统树,系统树各分支的置信度由“Bootstrap”1000次循环检验。结果表明,马粪海胆与光棘球海胆的亲缘关系较近,其次为中间球海胆,而紫海胆、海刺猬与这3种海胆的关系相对较远。     

用RAPD技术对5种经济海胆基因组DNA多态性的研究

利用随机扩增多态DNA技术对紫海胆(Anthocidaris crassispina)、海刺猬(Glyptocidaris crenularis)、马粪海胆(Hemicentrotus pulcherrimus)、光棘球海胆(Strongylocentrotus nudus)和中间球海胆(Strongylocentrotus intermedius)等我国最主要的5种经济类海胆基因组DNA的多态性进行初步研究一经20个随机引物扩增,共得到377条扩增片段．片段长度为200～1600bp。根据片段的共享度计算出平均遗传距离并采用CPTGMA和NJ两种聚类分析方法进行处理得到系统树。从聚类图得知长海胆科与疣海胆科有较近的亲缘关系,球海胆科的光棘球海胆与中间球海胆有较近的亲缘关系,其次是马粪海胆。本研究还讨沦了RAPD技术在海胆的遗传学研究中的广阔应用前景以及从分子生物学方法上为海胆传统分类方法提供科学依据。     

盐度对中间球海胆(♀)×光棘球海胆(♂)杂交子代受精卵孵化及浮游幼体生长发育的影响

试验结果表明,盐度对中间球海胆(♀)×光棘球海胆(♂)杂交子代的受精率、受精卵的孵化率、浮游幼体的生长发育均有重要影响.水温18 ℃、盐度为31时,受精率最高,为54%;盐度为23～37时受精卵可孵化至棱柱幼体,孵化适宜盐度为29~33,其中盐度为31时,孵化率最高,为89.5%;浮游幼体期适宜盐度为29～33,最适盐度为31.     

患“红斑综合征”的海胆体腔液中菌群结构特征

为探究患“红斑综合征”海胆的细菌群落结构、功能，以及该病在海胆种间的传播性，采用16S r DNA高通量测序技术人工回归感染，从患病马粪海胆（Hemicentrotus pulcherrimus）体腔内分离、鉴定出一株灿烂弧菌（Vibrio splendidus），之后配置其菌悬液注射到光棘球海胆（Strongylocentrotus nudus）、中间球海胆（Strongylocentrotus intermedius）和海刺猬（Glyptocidaris crenularis）体腔内，构建海胆感染“红斑综合征”后体腔液菌群16S r RNA基因测序文库，分析不同种类海胆感染“红斑综合征”后体腔内菌群结构。结果显示：光棘球海胆、中间球海胆、海刺猬均可被灿烂弧菌感染，出现“红斑”病征，在10 d内均死亡，其中中间球海胆表现出围口膜周围变黑，体壁出现红色斑块；光棘球海胆体腔液变为紫黑色等。3种海胆注射感染后体腔液内优势菌门均为变形菌门（Proteobacteria），所占比例分别为99.94%、60.18%和92.38%；弧菌属（Vibrio）为优势菌属，所占比例分别上升到99.90%、...     

墨西哥湾扇贝与华贵栉孔扇贝的远缘杂交

为进一步研究扇贝属间远缘杂交的可行性,以墨西哥湾扇贝(Argopecten irradians concentricus)与华贵栉孔扇贝(Chlamys nobilis)作为亲本,建立了两种扇贝的正交组MH、反交组HM、墨西哥湾扇贝自交组MM和华贵栉孔扇贝自交组HH。对各实验组的胚胎发育速度、受精率、孵化率、D形幼虫发生率和幼虫生长速度进行比较,分析了不同温度、盐度和精子浓度对各实验组配子亲和力及合子育性的影响,并尝试运用BP神经网络模型预测杂交组浮游幼虫的生长趋势。结果表明,两种扇贝的正反杂交均可获得早期杂交子代(F_1)。从胚胎发育情况看,正反杂交组幼虫发育到D形幼虫的时间均少于两个自交对照组;其受精率、孵化率、D形幼虫发生率也低于两个自交对照组;即使在不同温度、盐度和不同精子浓度下正反交组的受精率和孵化率也均低于两个自交组。从浮游幼虫生长情况看,正反交组D形幼虫的壳长和壳高均高于两个自交组,具有显著的差异性(P0.01),表现出较明显的杂种优势。运用BP神经网络模型对正反交组的浮游幼虫进行预测,其预测值与实测值的误差率均小于4%。     

光棘球海胆与虾夷马粪海胆摄食与吸收的初步研究

在同等摄食条件下，虾民粪海胆的生长明显快于光棘球海胆；虾夷马粪海胆的平均日摄食率，粗同化率高于光棘球海胆；     

不同种海胆体腔细胞类型及体液中的酶活力

以中国主要经济海胆马粪海胆(Hemicentrotus Pulcherrimus)、虾夷马粪海胆(Strongylocentrotus intermedius)、光棘球海胆(Strongylocentrotus nudus)、紫海胆(Anthocidaris crassispina)以及杂交种海胆-马粪海胆(♀)×虾夷马粪海胆(♂)、虾夷马粪海胆(♀)×光棘球海胆(♂)、马粪海胆(♀)×紫海胆(♂)和紫海胆(♀)×光棘球海胆(♂)为对象,进行海胆的血细胞及体液中酶活力的研究。结果表明,海胆血细胞可分为4类,分别为色素细胞、纤毛游走细胞、变形吞噬细胞和无色球形细胞,比例分别为4.56%~10.96%、9.69%~12.18%、76.40%~85.36%和0.35%~1.03%;海胆血细胞体外有凝聚和吞噬现象。不同种海胆体液中酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(ALP)、超氧化物歧化酶(SOD)和溶菌酶(LSZ)的酶活力测定结果显示,紫海胆血清中各种酶的活性都较高,其中碱性磷酸酶、超氧化物歧化酶活性在6种海胆中都是最高的,分别为2.871 U/mg和182.149 U/mL。马粪海胆(♀)×虾夷马粪海胆(♂)的溶菌酶活性最高,为0.085 U/mL;虾夷马粪海胆(♀)×光棘球海胆(♂)的酸性磷酸酶活性最高,为1.070 U/mg,但差异均不显著(P>0.05)。[中国水产科学,2006,13(1):33-38]     

日本紫海胆春季苗种培育技术研究

海胆是一种具有很高食用价值和药用价值的海珍品。在我国北方具有增养殖价值的海胆品种为大目形的正形目海胆,主要有:马粪海胆、光棘球海胆(大连紫海胆)等,其鲜活品和加工制品相当畅销,因此具有很大的发展潜力。 在经济海胆类增养殖过程中,苗种来源包括:人工     

杂交海胆性腺氨基酸组成的研究

测定了父本、母本性腺丰满期三个月的杂交海胆(Strongylocentrotus intermedius×S.nudus)氨基酸组成。结果表明,杂交海胆氨基酸含量(400.5~490.8 mg/g)、必需氨基酸含量占氨基酸总量的百分比(46.33%~51.09%)和鲜味氨基酸含量(169.5~228.4 mg/g)均较高,鲜味氨基酸含量占总氨基酸含量超过41%。杂交海胆中甘氨酸含量最高(41.1 mg/g~56.1 mg/g),谷氨酸含量(33.9~49.1 mg/g)次之。杂交海胆棘颜色深浅与氨基酸组成差别不大。杂交海胆蛋氨酸含量、蛋氨酸与缬氨酸含量均略高于父本、母本,海胆味较浓。     

中间球海胆与马粪海胆杂交家系早期生长比较和亲本配合力估计

为比较中间球海胆(Strongylocentrotus intermedius)与马粪海胆(Hemicentrotus pulcherrimus)杂交家系间的生长差异,评估杂交家系亲本在体重上的配合力,构建了种间杂交家系共42个。采用动物模型、约束性最大似然法(REML)和最佳线性无偏预测(BLUP)等方法估计了杂交海胆250、295和340日龄体重的育种值,以及各亲本的一般配合力(GCA)和各亲本组合的特殊配合力(SCA)。采用方差分析方法,比较了体重表型值和育种值在杂交家系间的差异。结果表明,3个生长阶段杂交家系间体重的表型值和育种值差异均达到极显著水平(P0.01),体重育种值在家系间的差异大于表型值,在50%家系留种率下,育种值选择和表型值选择的家系相同率介于88.89%~94.44%,育种值选择具有0.93%~4.83%的选择效率优势;250、295和340日龄各父本的一般配合力分别介于–0.22~0.33,–0.31~0.41和–0.29~0.31,各母本的一般配合力分别介于–0.24~0.33,–0.31~0.41和–0.28~0.28,各父母本组合的特殊配合力分别介于–0.07~0.09,–0.10~0.13和–0.32~0.32,M5、M6和M17等父本的一般配合力始终较高,F9、F11和F19等母本的一般配合力始终较高,M5F9和M6F11等杂交组合的特殊配合力始终较高。     

Inhibitory effect of 2,4-dibromophenol and 2,4,6-tribromophenol on larval survival and metamorphosis of the sea urchin <Emphasis Type="Italic">Strongylocentrotus nudus</Emphasis>

ABSTRACT:   As a possible factor leading to the low recruitment level of sea urchins in kelp forests, the inhibitory effect of 2,4-dibromophenol (DBP) and 2,4,6-tribromophenol (TBP) released from the large perennial brown algae Ecklonia kurome and Eisenia bicyclis on survival and metamorphosis of eight-armed larvae of the sea urchin Strongylocentrotus nudus was examined. The percentage of larvae that underwent metamorphosis in filtered sea water after 1 h exposure to one-half dilution of saturated dibromomethane solution (∼60 ppm) as a chemical inducer reached approximately 100% after 1 h, while that in filtered sea water containing 1 ppm TBP was reduced to 73%. This was further reduced to less than 40% in the presence of 10 and 20 ppm TBP after 2 h. In filtered sea water containing 1 and 10 ppm DBP, the proportion of metamorphosed larvae was reduced markedly to 43 and 5% after 2 h, respectively. All larvae exposed to 50 ppm TBP and to 20 and 50 ppm DBP died after 1 h. These findings suggest that DBP is more toxic than TBP for sea urchin larvae, strongly inhibiting their metamorphosis.     

Measuring density effects on growth and survival of two size classes of juvenile sea urchins (Strongylocentrotus droebachiensis) held in sea‐based holding systems and impacts on holding system design and management

Assessing density in intensive sea urchin culture systems by measuring the percentage coverage of available surface area is an effective means of calculating the available space within a holding system, the proximity of the animals in the system to each other and the probable effects of the stocking density. The results of this study show that density plays a critical role in regard to both somatic growth (increase in test diameter measured in millimetres) as well as mortality of juvenile sea urchins ranging in size from 5 mm to 26 mm test diameter (the size range tested in the current experiments). These effects appear to be greater for smaller urchins. The critical percentage coverage densities are in the order of 50%‐60% coverage for juvenile sea urchins, and the authors advise farmers growing Strongylocentrotus droebachiensis to maintain stocking densities below this point and to reduce the stocking densities as and when stocks reach these critical density points. Percentage cover must be constantly monitored as the results from this study indicate that the growth rates of juvenile urchins can alter percentage coverage rapidly and reductions in density may be required as frequently as every 3‐4 months at the early juvenile stage. Holding system design should take these factors into account and incorporate a method of rapidly reducing stocking densities with minimal stress and handling of sea urchin stocks.     

虾夷马粪海胆不同家系和性别间性腺性状的比较

对来自虾夷马粪海胆20个家系的600枚海胆的性腺湿重、指数、颜色、水分和脂肪酸组成进行了测量和分析,结果显示性腺湿重和性腺指数在家系间均有极显著差异,但在性别间差异不显著,两个性腺产量性状在整个群体内均具有较大的变异;虾夷马粪海胆性腺颜色介于黄色和橙红色之间,且色泽鲜艳,经CIEL*a*b*标准量化和方差分析,L*和a*在家系间无显著差异,但b*、亮黄色差(ΔE1)和亮橙黄色差(ΔE2)在家系间均具有极显著差异,在性别间,雌性海胆的L*、a*和b*值以及两个色差均极显著优于雄性;性腺水分在家系和性别间有极显著和显著差异;性腺总脂中含有较高的EPA(12.11±2.65)%和AA(10.27±3.40)%,而DHA含量较低(0.49±0.64)%,但其在群体内变异极大(130.77%),高不饱和脂肪酸在家系间具有极显著差异,而在性别间仅AA有显著差异(雄性较高)。研究结果表明,对性腺产量和品质进行家系或性别选择均可达到提升性腺产量和品质的目的。     

适温条件下盐度对海刺猬活力、摄食和存活的影响

海刺猬(Glyptocidaris crenularis)是海胆中经济价值较高的一种,因其性腺品质较高,具有很大的市场潜力。然而,其生长发育却极易受到环境因素的影响,这也就制约了海刺猬人工养殖的开展。在适温(18.5~23.6℃)条件下,对41‰、38‰、35‰、32‰、29‰、26‰、23‰、20‰、17‰九个盐度下,海刺猬的活力、摄食和存活状况进行了初步的观察和分析。实验结果表明,盐度会对海刺猬的活力、摄食和存活产生影响。在盐度为29‰、32‰、35‰组中海刺猬的状态良好,活力较强;盐度过高或过低,都会抑制海刺猬的摄食。而在出现死亡的各组中,高盐度组(38‰、41‰)出现死亡现象的时间早于低盐组(17‰),同时其存活率低于低盐组。因此,相对于高盐度来说,海刺猬具有一定的低盐耐受力。研究表明,在适温(18.5~23.6℃)条件下,海刺猬的最适盐度为29‰~32‰。     

饵料对中间球海胆品质的影响

饵料种类对中间球海胆的品质有显著影响。长期摄食鲜海带或裙带菜的海胆生殖腺呈橘红色和橘黄色,摄食孔石莼为浅橘红色和橘黄色,摄食人工配合饲料为土黄色和乳白色。长期摄食鲜海藻类的海胆生殖腺味道甜美,口感上佳;而摄食人工配合饲料的则有苦涩味。饵料种类及其交替方式决定了海胆生殖腺色泽和口感的转变速度,其中鲜海藻类间转换速度基本一致,均需60d可完成;而人工配合饲料则需80d方能完成。中间球海胆消化道的颜色更易受饵料种类的影响,其转换速度与饵料种类和交替方式无关,20d即有明显表现,40d可完成。