细螯沼虾染色体的研究↑（*）

以精巢为材料，研究了细螯沼虾有丝分裂染色体及减数分裂二价体组型。细螯沼虾染色体数目２ｎ＝１００，ｎ＝５０；有丝分裂中期染色体小，呈点状，无法进行核型分析；减数分裂双线期二价体呈棒状，着丝点清晰，染色体总臂数ＮＦ＝１７２，核型公式为Ｎ＝３０Ｍ＋６ＳＭ＋１４ＳＴ，Ｔ。此外，本文还对沼虾属的核型演化关系进行了初步探讨。     

基于线粒体Cytb和COⅠ基因的洞庭湖区养殖克氏原螯虾遗传多样性分析

为了解洞庭湖区养殖克氏原螯虾的遗传多样性，从线粒体Cytb和COⅠ基因入手，经基因组DNA提取、PCR扩增、序列测定和拼接，比较分析了岳阳华容县和益阳南县2处主养殖区内共11个采集点的克氏原螯虾遗传结构。试验结果显示，在华容县的6个采集点中，基于Cytb基因的克氏原螯虾的单倍型多样性指数为0.506,核苷酸多样性指数为0.272 65;基于COⅠ基因的克氏原螯虾的单倍型多样性指数为0.258,核苷酸多样性指数为0.136 1。在南县的5个采集点中，基于Cytb基因的克氏原螯虾的单倍型多样性指数为0.467,核苷酸多样性指数为0.259 74;基于COⅠ基因的克氏原螯虾的单倍型多样性指数为0.244,核苷酸多样性指数为0.122 3。单倍型系统进化树和遗传距离分析表明，11个采集点的克氏原螯虾呈现交叉分布，遗传分化不显著。结果表明，洞庭湖区养殖克氏原螯虾近亲交配严重，遗传多样性低。     

湖北地区温棚养殖与稻田养殖克氏原螯虾生长特性研究

2018年12月—2019年3月间,定期从温棚养殖和稻田养殖的克氏原螯虾中采集599尾样本,测量克氏原螯虾的体质量(y)、全长(x1)、头胸甲长(x2)、头胸甲宽(x3)、腹节总长(x4)、第一腹节长(x5)、第一腹节宽(x6)、尾节长(x7)、第六腹节长(x8)、第六腹节宽(x9)和螯长(x10),探明温棚养殖幼虾与稻田养殖幼虾以及温棚养殖雌雄幼虾的生长特性,以期为克氏原螯虾温棚养殖及单性养殖提供参考。试验结果表明,克氏原螯虾全长(L)和体质量(m)呈幂函数,回归方程为:m=0.0209L3.1132;温棚养殖和稻田养殖克氏原螯虾幼虾均在2—3月生长最快,1月生长最慢;克氏原螯虾幼虾各时期各生长指标温棚养殖幼虾均大于稻田养殖幼虾,至3月,温棚养殖的克氏原螯虾体质量接近稻田养殖的2倍;在温度较低的12月—翌年2月期间,温棚养殖的克氏原螯虾幼虾的平均体质量增加率比稻田养殖的克氏原螯虾幼虾的平均体质量增加率高14.00%,温棚养殖的克氏原螯虾幼虾全长平均增长率比稻田养殖的高3.96%。温棚养殖的各时期雄虾体质量均略高于雌虾,但差异不显著(P>0.05);在所有生长指标中,只有雄性克氏原螯虾螯长一直大于雌性,且自12月后,雌、雄虾螯长间一直存在极显著差异(P<0.01)。     

克氏原螯虾含肉率及蜕皮周期中微量元素分析

以南京地区的克氏原螯虾为研究对象,测试了不同地点、不同月份的克氏原螯虾的含肉率,以及同时期部分小虾和超大型虾的含肉率,分析了螯虾的营养成份,并测试了蜕皮周期中的虾体不同部位的微量元素。结果表明:克氏原螯虾的含肉率与食料的丰欠、季节的不同有很大的关系,人工饲养的螯虾含肉率是野外生长的1.4倍,春季含肉率最高,可达(15.33±2.31)%,秋季含肉率最低,仅(5.38±2.15)%,雌雄螯虾含肉率总体差别不显著,雌性比雄性略高。另外,蜕皮周期中克氏原螯虾不同部位的几种微量元素含量变化明显,在螯虾饲料中添加适量的微量元素,有助于螯虾的生长、发育。文章最后还比较了红、青壳螯虾的含肉率及营养成份,青壳螯虾的含肉率较红壳螯虾的高出1.6倍,但红壳螯虾食用价值更高。     

克氏螯虾染色体研究

本文以克氏螯虾精巢为材料，用改良常规气干法进行染色体制片并显微照相，观察结果表明，克氏螯虾精母细胞染色体数为９４，中期染色体呈颗粒状。     

发酵饲料对克氏原螯虾生长性能、肌肉品质、抗氧化能力和肠道微生物群落的影响

为探究克氏原螯虾配合饲料经发酵处理后的饲喂效果，分别用未发酵和发酵饲料在室内循环水系统中饲养体重为(4.91±0.18) g的克氏原螯虾幼虾8周，采样分析发酵饲料对克氏原螯虾生长、肌肉品质、消化力、抗氧化能力及肠道菌群结构的影响。结果显示，(1)发酵饲料水中溶失率显著低于未发酵饲料；(2)发酵饲料显著提高克氏原螯虾增重率和特定生长率，降低饲料系数，但对存活率、肝体比、含肉率和体成分无显著影响；(3)发酵饲料显著提高克氏原螯虾肌肉硬度、弹性、咀嚼性和胶黏性，降低了黏附性；(4)发酵饲料显著提高克氏原螯虾肝胰腺及肠道中胰蛋白酶和脂肪酶活性，血清和肝胰腺中超氧化物歧化酶、酸性磷酸酶和碱性磷酸酶活性，以及肝胰腺总抗氧化能力；(5)发酵饲料显著提高了肠道绒毛长度和宽度；(6)发酵饲料改善了克氏原螯虾肠道微生物结构，显著升高了厚壁菌门和放线菌门相对丰度，同时提高了肠道菌群多样性。研究表明，饲料经发酵处理后可以有效提高克氏原螯虾生长性能、肌肉品质、消化力和抗氧化能力，改善了肠道组织结构，改变了肠道微生物结构，为克氏原螯虾新型环保饲料的生产提供理论依据。     

罗氏沼虾核型及长臂虾亚科核型演化关系的探讨

以略作改进的空气干燥法制备染色体标本，研究罗氏沼虾精巢细胞染色体数目，首次报道了其有丝分裂中期的详细核型。罗氏沼虾染色体数目ｎ＝５９，２ｎ＝１１８，依着线点位置及相对长度不同共划分为Ａ、Ｂ、Ｃ三个染色体组。     

克氏原螯虾捕捞网目研究

由于克氏原螯虾(Procambarus clarkii)生存能力强,天敌少,加之其有一定的经济价值,为了更好地捕捞克氏原螯虾种群且尽量少伤害水域中其他渔获种类,有效控制克氏原螯虾种群数量,防止形成外来物种入侵,通过基本情况调查和室内试验等方法对克氏原螯虾捕捞网目进行研究。对6,20,30,40,50,60,70 mm七种网目的地笼网进行了室内试验,经比较对克氏原螯虾的捕捞能力和鱼类释放效果,结合线性拟合曲线与克氏原螯虾体长的关系,推算出20 mm网目为春季克氏原螯虾最佳捕捞网目, 30 mm网目为秋季克氏原螯虾捕捞最佳捕捞网目。     

白斑综合征病毒(WSSV)在市售克氏原螯虾中携带情况调查

近年来白斑综合征成为制约克氏原螯虾养殖的重要病害。对市场销售的克氏原螯虾抽样调查,采用PCR仪检测白斑综合征病毒(WSSV)的携带情况,结果为:湖泊养殖的克氏原螯虾不携带WSSV,池塘单养的克氏原螯虾及江河野生克氏原螯虾携带WSSV。     

鄱阳湖区克氏原螯虾外部形态的解剖特征

克氏原螯虾是鄱阳湖区重要的经济虾类。描述了鄱阳湖区克氏原螯虾外部形态特征,分部系统解剖描述附肢形态与特征,为鄱阳湖区克氏原螯虾增加基础研究资料。     

三疣梭子蟹核型分析

实验用三疣梭子蟹于2003年3月－2004年6月购自浙江象山石浦港。以成熟卵、精巢、胚胎及溞状幼体等为材料进行三疣梭子蟹染色体数目和核型的研究。染色体制片采用组织切片法和气干法，用Olympus显微镜进行观测、摄影，依据Levan等的染色体分类标准进行核型分析。结果表明，精巢最适宜进行三疣梭子蟹染色体计数，卵内溞状幼体最适宜做核型分析。三疣梭子蟹染色体的数目是2n=106，n=53。核型分析显示，三疣梭子蟹有20对（第1～20号）中部着丝粒染色体（m）、3对（第21－23号）亚中部着丝粒染色体（sm）和30对（笫24～53号）端部着丝粒染包体（t）。因此，三疣梭子蟹核型为2n=106=40m＋6sm＋60t，染色体臂数NF=152；没有检查出异形性染色体的存在。     

Karyotype analysis of the yellowtail kingfish Seriola lalandi lalandi (Perciformes: Carangidae) from South Australia

The karyotype and chromosomal characteristics of the yellowtail kingfish Seriola lalandi lalandi were investigated by examining metaphase spreads from kidney cells of 4-month-old fish artificially bred using wild-captured broodstock from the coast of South Australia. A total of 80 mitotic metaphases from 10 individual fish were analysed, with 52 spreads having a mode of 2 n =48 chromosomes, representing 65% of the metaphases observed. The diploid consisted of two metacentric, two submetacentric, six subtelocentric and 38 telocentric chromosomes, with the fundamental number of chromosome arms being 52. The total haploid chromosome length was approximately 44.412 μm. This study shows that the karyotype of S. lalandi lalandi differs from those reported previously for other Seriola species in having one pair of metacentric chromosomes.     

Karyological analysis of endangered Caspian salmon, Salmo trutta caspius (Kessler, 1877)

The karyotype and chromosomal characteristics of endangered Caspian salmon, Salmo trutta caspius, in the southern part of the Caspian Sea were investigated. From the total of 60 mitotic metaphases achieved from 15 individuals, 15, 9 and 36 metaphases were with the mode <76, 76 and 80 representing 25%, 15% and 60% of metaphases respectively. So, the most common pattern of chromosome number was 80 (36 metaphases, 60%) and the number of diploid chromosomes was thus confirmed as (2n=80) of this subspecies. The karyotype consists of seven metacentric, five submetacentric and 28 telocentric pairs. The karyological parameters of the Caspian salmon, the centromic index, arm ratio, relative length and length variation range of chromosomes, were 0–0.5, 1–∞, 0.011–0.045 and 0.507–2.028 μm respectively. The total length of chromosomes in haploid series was 44.776 μm and fundamental number of chromosome arms was 104. This study may provide the first knowledge on chromosome analysis in Caspian salmon and add basic information useful for its chromosomal manipulations.     

秀丽白虾染色体核型的初步分析

以抱卵雌虾的受精卵、眼点明显可见的胚胎以及雄虾精巢为材料,空气干燥法制备染色体,进行秀丽白虾的细胞遗传学研究.结果显示,秀丽白虾胚胎细胞染色体数目2N=90,核型组成是2N=56M 8SM 12ST 14T,染色体总臂数NF=154,染色体数略少于长臂虾属和沼虾属,但核型组成相似.     

黄带拟鲹染色体核型特征分析

鱼类染色体核型分析在种质资源保护、遗传图谱构建、鱼类分类和育种等方面发挥着重要作用。黄带拟鲹 (Pseudocaranx dentex, Bloch & Schneider, 1801)是具有较高经济价值和遗传育种价值的水产资源物种, 目前与该物种遗传背景相关的研究尚属空白。本研究采用热滴片法制备了黄带拟鲹鳃和鳍条组织的染色体标本, 经 Giemsa 染液染色, 观察其染色体核型特征。分析了 4 尾黄带拟鲹幼鱼的 106 个中期细胞染色体核型, 经统计二倍体染色体数目为 48 条的中期细胞分裂相占所观察细胞分裂相的 86.79%, 48 条染色体均为端部着丝粒染色体, 核型公式为 2n=48t, 染色体臂数 NF=48; 染色体相对长度最大为 5.921±0.276, 最小为 2.052±0.210; 未观察到异型性染色体, 也未观察到随体和次缢痕。与已报道的其他 14 属 33 种鲹科鱼类染色体核型特征比较, 认为黄带拟鲹为鯵科鱼类系统进化中的高位类群。本研究结果不仅丰富了鲹科鱼类染色体核型数据库, 也为系统开展黄带拟鲹细胞遗传学研究提供了基础资料。     

皱纹盘鲍染色体C带和rDNA定位

为了提高对皱纹盘鲍染色体的辨识水平,实验利用 Ba(OH)₂ 处理显示了皱纹盘鲍染色体的C带,并用荧光原位杂交分析(fluorescence in situ hybridization,FISH)研究了核糖体大亚基rDNA在皱纹盘鲍中期染色体上的数目与位置。核型结果显示,皱纹盘鲍染色体组包含7对中部着丝粒染色体和8对亚中部着丝粒染色体,另有3对染色体介于中部着丝粒染色体与亚中着丝粒染色体之间(m/sm)。C显带结果显示,8对染色体有稳定的着丝粒C带,5～7对染色体上有中期相间多态的端部C带,3对染色体上有同源染色体异态的臂间C带。FISH 分析显示,皱纹盘鲍中期染色体上分布着4个大亚基 rDNA位点,分别位于2号短臂(2S)、7号短臂(7S)、12号短臂(12S)和18号长臂(18L)的端部。研究结果为皱纹盘鲍染色体辨识提供了新的特征与标记,为进一步研究皱纹盘鲍种群的染色体多态和鲍属染色体进化提供了基础资料。     

灰海马染色体制备及核型分析

为了解灰海马的细胞遗传学特征,便于今后开展灰海马的种质评价与鉴定、规模化人工繁育、亲缘关系研究及人工选育等工作,实验以雌雄灰海马的背鳍为材料,采用秋水仙素浸泡和常规热滴片法制备染色体标本。借助Photoshop图像软件,将同源染色体配对、拼贴,做出染色体核型图。采用Image J软件的自定义曲线测量功能,以着丝粒的中心位置为起点,顺着染色体弯曲的形态,到染色体臂末端为终点,测量线段长度,得出图片中染色体的臂长,根据相同放大倍数下标尺的测量值,换算出染色体的实际臂长。根据臂比值,将染色体进行配对、分类后,得出灰海马的染色体核型公式。结果显示,灰海马的背鳍组织可作为其染色体制备的理想材料,实验选用的染色体制备方法能获得图像清晰、形态良好的细胞分裂相。此法简单、效果好,解决了海龙科鱼类染色体制备的难题;灰海马具有22对染色体,二倍体染色体数目2n=44,雄鱼的染色体核型公式为2n=2sm+20st+22t,雌鱼的染色体核型公式为2n=1m+2sm+20st+21t,雌鱼存在性染色体异型的现象,因此灰海马的性染色体为ZW/ZZ型。     

青蛤染色体制备及核型分析

以青蛤成体鳃组织和性成熟的雌、雄青蛤性腺为材料,采用常规制片方法,分别制备青蛤二倍体染色体和单倍体染色体,统计染色体数目。结果显示,青蛤二倍体与单倍体染色体数目分别为2n=38和n=19;核型分析发现,青蛤核型组成为11m+6sm+2st,NF=76,未发现性染色体和随体染色体。本研究以青蛤成熟性腺为制备材料,成功制备单倍体染色体,与青蛤二倍体染色体互相印证,弥补了以往研究的不足,进一步丰富了对青蛤染色体数目及核型组成的认知。同时,也为青蛤染色体水平全基因组测序组装提供更加科学的基础资料。     

中间球海胆卵膜与受精膜去除方法及染色体核型分析

去除卵膜及受精膜是成功制备棘皮动物染色体的关键步骤。为找到高效去除海胆卵膜与受精膜的方法，使用三氮唑（2 g/L）、盐酸海水溶液（pH 4.75）、二硫苏糖醇（3×10^-3 mol/L）和对氨基苯甲酸（3×10^-3 mol/L）等4种化学试剂分别对中间球海胆（）卵子及各时期胚胎进行处理，比较了不同试剂、处理时间或处理时期的去膜率、去膜后受精率和胚胎畸形率等指标的差异；利用常规空气干燥法对经去膜处理的囊胚期胚胎制备染色体，并进行核型分析。结果表明，三氮唑、盐酸海水溶液、二硫苏糖醇和对氨基苯甲酸等4种试剂对中间球海胆的卵膜和受精膜均有去除效果，其中2 g/L三氮唑处理未受精卵30 min的去膜率为85.50%，去膜后受精率为97.25%，畸形率为1.75%，去膜效果优于其余处理组。利用经该方法去膜后的早期囊胚进行染色体制备效果较好，获得了61个分散良好、形态完整的染色体中期分裂相。核型分析表明，中间球海胆的二倍体染色体数为2n=42，核型公式为：2n=20m+20sm+2st，NF=84，即有10对中部着丝粒染色体，10对亚中部着丝粒染色体，1对亚端部着丝粒染色体，染色体臂数为NF=84。本研究可为海胆染色体制备及染色体操作育种提供技术参考。