气相色谱-质谱法测定水产品中氟胺氰菊酯残留量

本文建立了水产品中氟胺氰菊酯残留量的气相色谱-质谱测定方法。样品经正己烷-丙酮（体积比2：1）超声提取、冷冻除脂、中性氧化铝固相萃取柱净化后，用气相色谱-质谱法进行测定和确认，外标法定量。在优化实验条件下，氟胺氰菊酯在10．0～400．0μg·L^-1范围内线性关系良好，相关系数为0．9999，检出限为2．0μg·kg^-1，定量限为4．0μg·kg^-1。在4．0、8．0和40．0μg·kg^-1加标水平下，鲤（Cyprinus carpio）、草鱼（Ctenopharyngodon ideUus）和凡纳滨对虾（Penaeus vannamei Boone）可食部分为基质的平均回收率为87．92％～98．37％，相对标准偏差为0．96％～4．97％。该方法操作简单、灵敏度高、净化效果理想、重珊陛好，可满足水产品中氟胺氰菊酯的定性定量检测的要求。     

水产品中呋喃唑酮含量的高效液相色谱检测法

在传统法基础上 ,研究了测定草鱼、鳜、对虾、中华鳖等水产养殖动物肌肉中呋喃唑酮残留的快速HPLC法。用二氯甲烷提取样品中的呋喃唑酮 ,浓缩提取液至干 ,用乙腈水溶液溶解残渣并去脂肪后过滤 ,清液供HPLC分析 ,草鱼、鳜、对虾、中华鳖等水产养殖动物肌肉中杂峰都能很好地与药物峰分离 ,方法回收率稳定在70 %～ 75 % ,日内精密度与日间精密度均小于 3% ,本方法可检出的样品中呋喃唑酮低限为 0 0 0 1μg/g。     

水产品中替米考星残留量检测的条件优化

文章探讨了用高效液相色谱（HPLC）测定水产品中替米考星残留量的方法。通过对分析条件的优化，确定了最佳检测参数，并从提取和净化2个方面确立了前处理的最佳步骤与条件。通过验证不同基质试样的加标回收试验，结果显示，在20～200μg·kg-1的添加水平下回收率为77．22％～93．25％，相对标准偏差（RSD）小于5％，定量检出限（LOQ）为20μg·kg-1。分析结果表明，所建立的方法灵敏度高、准确性好且应用范围广，可用于日常水产品中替米考星残留量的检测分析。     

酶联免疫(ELISA)法测定水产品中呋喃唑酮代谢物AOZ的残留

采用MaxsignalTM AOZ快速检测试剂盒检测水产品中呋喃唑酮代谢物。通过对精密度、回收率和检测限等项目的测定，验证了方法的可行性。呋喃唑酮代谢物标准液在0．05ng／mL～4．5ng／mL范围内具有良好的线性，微孔板孔间变异系数为3．2％～7．7％。样品批内变异系数为5．2％～8．4％，批间变异系数为6．3％～8．9％，平均回收率为94．5％～98．4％。试剂盒的理论检测下限为0．05μg／Kg。该方法灵敏度高，重复性好，适用于水产品中呋喃唑酮代谢物残留的检测。     

酶联免疫法测定水产品中呋喃唑酮代谢物残留量

为测定水产品中呋喃唑酮代谢物(AOZ)的残留量,采用2-硝基苯甲醛进行衍生,乙酸乙酯提取AOZ。通过样品中残留的AOZ和酶标板上预包被的抗原竞争抗体,加入酶标二抗后与底物显色,测得样品中AOZ的残留量。测定了四组水产品中AOZ的残留量,测定浓度均小于1μg/kg,结果为阴性。向空白样品中分别添加0.5μg/kg、1.5μg/kg和2μg/kg的AOZ标准品,回收率为90%、109%和101%。因此得出结论:采用酶联免疫法测定水产品中AOZ残留量操作简单,检测时间短,结果准确,是一种适合大批量水产样品筛选的检测方法。     

养殖对虾中氯霉素残留的放射免疫分析

采用放射免疫分析法，测定了湛江市水产市场3份新鲜养殖对虾及2份出口养殖对虾氯霉素残留量。结果表明，本方法的检测限量为0．15ppb，3份新鲜养殖对虾体内氯霉素残留量均大于0．15ppb，2份出口养殖对虾氯霉素残留量均小于0．15ppb。提示放射免疫分析法可作为水产品中氯霉素残留量的有效检测手段。     

高效液相色谱-荧光检测法测定水产品中15种多环芳烃

建立了高效液相色谱荧光检测法同时测定水产品中15种多环芳烃（polycyclic aromatic hydrocarbons，PAHs）的方法。通过液相色谱柱、荧光激发和发射波长等条件的优化，实现了15种多环芳烃组分基线完全分离和荧光高灵敏度检测。在优化的试验条件下，检测的15种多环芳烃中萘、苊和芴的检出限为0．5μg·kg^-1，苯并[b]荧蒽、二苯并[a．h]蒽和苯并[g,h，i]茈的检出限为2．0μg·kg^-1，其余化合物的检出限为1．0μg·kg^-1；在检测的15种多环芳烃中，菲、蒽、芘、苯并[a]蒽、崫、苯并[a]芘、茚并[1，2，3-cd]芘在0．001～0．500mg·L^-1质量浓度范围，其余化合物在0．002～1．000mg·L^-1质量浓度范围，呈良好的线性相关，相关系数R^2〉0．995；样品加标水平分别为2．0μg·kg、10．0μg·kg^-1和100．0μg·kg^-1时回收率为71．1％-98．4％，相对标准偏差（RSD）〈10％。该检测方法重现性高，检测灵敏度和准确度均满足分析要求。     

液相色谱质谱联用法测定水产品中泰乐菌素残留方法的研究

为了建立鱼、虾中泰乐菌素残留量的液相色谱串联质谱检测方法，文章通过对液相色谱和质谱条件、预处理、分离、纯化方法的探讨，确定了以罗红霉素为内标，先用乙腈提取，中性氧化铝柱净化，加异丙醇旋转蒸发至于，定容，过膜，上机测试。所建立的分析方法，泰乐菌素在1．0～500ng·mL。质量浓度范围内呈良好的线性关系，相关系数均大于0．998，检出限为0．5μg·kg-1，定量限为1．0μg·kg-1。经过验证，在鲫（CarassiusauFatus）、对虾（Penacusorientalis）和草鱼（Ctenopharyngodonidellus）3种样品中的加标试验，3个不同质量浓度水平的加标回收率为82．40％-100．70％，相对标准偏差为0．86％～5．82％，符合对水产品中药物残留检测的技术要求。     

高效液相色谱-串联质谱法测定水产品中玉米赤霉醇类激素药物残留量

文章建立用高效液相色谱-串联质谱法（HPLC—MS／MS）测定水产品中玉米赤霉醇类激素药物残留量的方法。用乙腈提取水产品中6种玉米赤霉醇类药物，正己烷脱脂，氨基固相萃取柱净化。采用电喷雾电离，负离子扫描，选择反应监测模式（SRM）监测，外标法定量。该法对6种玉米赤霉醇类药物标准曲线的线性回归系数均在0．99以上，线性范围0～25μg·kg^-1，方法定量限1．0μg·kg-1。6种玉米赤霉醇类激素药物回收率75．9％～103．8％，相对标准偏差3．90％～13．5％。该法简单、灵敏，结果可靠，可满足实验室批量样品分析的需求。     

dcELISA检测泥鳅、鲫肌肉中氯霉素残留方法的应用

应用直接竞争酶联免疫吸附试验方法（dcELISA）快速定量测定泥鳅、鲫肌肉中氯霉素（CAP）残留量。氯霉素浓度在0．05～10ng/g范围内具有良好的线性关系，线性方程为y=-0．33—1．88x，r^2=0．995，向样品中分别添加0．1、0．3、0．9ng/g3个浓度水平的氯霉素标准品，泥鳅样品的平均回收率分别为87．2％、88．9％、93．0％，鲫样品的平均回收率分别为86．1％、79．9％、99．0％，最低检测限为O．05ng/g，批内变异系数为8．0％，批间变异系数为7．2％，结果表明该方法灵敏度高，重复性好，适合在泥鳅、鲫肉样中氯霉素残留筛选检测。     

高效液相色谱法测定池塘底泥中呋喃西林的研究

文章研究了池塘底泥中呋喃西林残留量的提取和检测方法，以上V（甲醇）：V（二氯甲烷）=3：7混合溶剂提取，提取效果较好；比较了振荡提取和超声波辅助加热提取法，后者提取能力较强；优化了高效液相色谱测定的色谱条件，在C18反相色谱柱上分离，梯度洗脱比等度洗脱能获得更好峰形，分离效果更好。以V（甲醇）：V（二氯甲烷）=3：7作为提取溶剂、超声波辅助加热法（35 kHz，强度100%，40 ℃）提取，回收率为80%~95%，相对标准偏差小于10%，检测限达到0.250 μg？kg-1。该方法回收率高、稳定性好、灵敏度高、操作简便。     

微生物制剂对养殖池塘细菌群落影响的PCR-DGGE分析

为了解微生物制剂在水产养殖环境修复中的作用机制,采用聚合酶链式反应—变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)方法,研究不同微生物制剂对养殖池塘上覆水和沉积物中细菌群落的影响。结果显示,施用微生物制剂前后,试验塘上覆水样品中细菌的DGGE优势条带无明显变化,细菌群落组成没有明显差异,提示微生物制剂对试验塘上覆水中的细菌群落组成影响很小。相对而言,施用过微生物制剂的池塘相对于对照池塘其细菌群落结构发生的变化较大;泼洒EM菌原粉3 000 g/hm2加芽孢杆菌原粉750 g/hm2的试验塘沉积物中细菌群落2 d内发生了较大变化,之后相对稳定,对照池塘和泼洒EM菌原粉3 000 g/hm2加光合细菌原粉1 500 g/hm2的试验塘沉积物中细菌群落组成变化很小。     

上覆水类型及流速对养殖池塘底泥耗氧速率的影响

为了探究上覆水类型及流速对养殖池塘底泥耗氧速率(SOD)的影响,在实验室进行6组水池平行实验,实验期为2 d,采用6个装置相同的玻璃缸进行对照实验,分别选取自来水和池塘原水作为上覆水体,在实验过程中利用水泵对上覆水进行循环流动,调节水泵循环流量以得到不同的上覆水流速,并采用2台溶氧仪测定不同实验条件下的上覆水水温和DO浓度,记录每次测量的对应时间点,测量间隔约为30 min。结果表明,当上覆水体为自来水和池塘原水时,在不同的循环流速下,SOD的范围为0.042~0.426 g/(m~2·d)。实验第2天各水池的SOD值较第1天均有一定下降,说明SOD随着水体中DO降低也相应减小,表明SOD与DO浓度有显著相关性。当上覆水处于静止状态时,其类型对SOD值有较大的影响,池塘原水在第1天和第2天的SOD值分别为0.426 g/(m~2·d)和0.297 g/(m~2·d),而自来水在第1天和第2天的SOD值均为0.258 g/(m~2·d),与上覆水体为自来水相比,有机物质含量高的池塘原水在第1天和第2天的SOD值分别高出65.12%和15.12%;当上覆水处于流动状态时,池塘原水的SOD为0.042~0.237 g/(m~2·d),自来水的SOD为0.045~0.252 g/(m~2·d),增幅仅为5.9%~15.0%,表明在此条件下上覆水体类型对实验水池的SOD值影响不显著。SOD与上覆水流速存在一定的相关性,对应最小的SOD值有一个流速较低值。     

池塘养殖牙鲆肠道和环境菌群结构对益生菌制剂的响应

为研究益生菌制剂对池塘养殖牙鲆(Paralichthys olivaceus)肠道及环境菌群结构的调控效果,采用高通量测序技术和生物信息学分析手段构建牙鲆肠道、养殖水体、饵料和池塘底泥的16S rDNA基因测序文库,分析不同样品中菌群组成和多样性在益生菌制剂调控过程中的变化趋势。结果显示,添加益生菌制剂后,池塘底泥和牙鲆肠道的菌群多样性升高,且池塘底泥的菌群多样性依然最高;而养殖水体的菌群多样性明显下降,并低于牙鲆肠道的。牙鲆肠道中的肠杆菌属(Enterobacter)、芽孢杆菌属(Bacillus)相对丰度呈上升趋势,不动杆菌属(Acinetobacter)、发光杆菌属(Photobacterium)相对丰度先上升后下降;池塘养殖水体中NS3a_marine_group代表的菌属相对丰度先下降后上升;底泥中芽孢杆菌属相对丰度变化最为明显,由最初的3.78%增加到33.64%。养殖牙鲆肠道、养殖水体和底泥中的弧菌属(Vibrio)相对丰度在益生菌制剂添加后出现不同程度的降低。而在水产养殖中,不动杆菌属和弧菌属中的部分菌株通常被认为是重要病原菌。说明益生菌制剂的添加能在一定程度上优化鱼体肠道和环境(养殖水体和池塘底泥)的菌群结构。相似性分析发现,在饵料不变的条件下,牙鲆肠道菌群结构与底泥的更相近;且益生菌产品对池塘底泥和牙鲆肠道菌群的影响较为明显。本研究结果可为池塘养殖过程中微生态制剂筛选和使用提供参考。     

呋喃唑酮降解菌株的分离鉴定及降解特性研究

从污染鱼塘底泥中筛选分离出一株能有效降解低浓度呋喃唑酮的细菌F5,经16S rDNA同源性序列分析,鉴定为铜绿假单胞菌(Pseudom onas aeruginosa)。30℃静置避光培养30 d后,该菌株对0.75、1.0和2.5 mg/L呋喃唑酮的降解率分别为58.8%、64.1%和38.2%。温度为20~25℃更有利于该菌株的降解作用,对1.0 mg/L呋喃唑酮降解率均能达85%。碳源和氮源浓度的提高均能促进该菌株的生长和对呋喃唑酮的降解。在0.5 mg/L低磷浓度下,该菌株生长受抑制但降解活性增加,对1.0 mg/L呋喃唑酮降解率达71.8%。     

冻融期刺参养殖池塘沉积物菌群结构特征及其影响因素

本研究以我国北方典型岸基半开放刺参(Apostichopus japonicus)养殖池塘为对象，利用高通量测序技术构建冻融期刺参养殖池塘沉积物菌群16S rRNA基因测序文库，解析封冰期、融冰期和化冰期刺参养殖池塘沉积物菌群结构特征，并查明影响菌群结构的主导环境因子。结果显示，冻融期刺参养殖池塘沉积物菌群丰度和多样性表现为整体下调趋势，在融冰初期呈现显著性波动(P<0.05)。冻融期刺参养殖池塘沉积物菌群结构呈现显著性差异，封冰期、融冰期和化冰期差异菌群分别隶属于厚壁菌门(Firmicutes)、酸杆菌门(Acidobacteria)和软壁菌门(Tenericutes)。尽管不同阶段微生物相对丰度比例不同，但第一优势菌门均隶属于变形菌门(Proteobacteria)，相对丰度高于49.04%；次优势菌门则呈现出显著性变化，其中，封冰期为拟杆菌门(Bacteroidetes)，融冰期为绿弯菌门(Chloroflexi)和放线菌门(Actinobacteria)，化冰期为浮霉菌门(Planctomycetes)。环境因子与菌群相关性分析表明，冻融期刺参养殖池塘沉积物菌群结构与环境因子具有显著相关性(P<0.05)，温度、盐度、总氮和总有机碳是沉积物菌群的主导环境因子。本研究将为刺参养殖池塘精细化管理提供理论依据。     

Isolation and identification of a phosphate-solubilizing bacterium Pantoeastewartii subsp. stewartii g6, and effects of temperature, salinity, and pH on its growth under indoor culture conditions

In South China, certain problems exist in some of aquaculture pond ecosystems, where the concentrations of total phosphorus are high in the sediment but the concentrations of phosphate are low in the overlying water. It is very important and necessary to isolate and screen some phosphate-solubilizing bacteria (PSB) that can adapt to the pond environment for enhancing the utilization of phosphorus in the aquaculture systems. To reach the objective, one PSB, named g6, was isolated using modified Pikovskaya and Pikovskaya medium. By 16S rDNA sequencing analysis and BIOLOG auto-identification system, this strain was identified as Pantoea stewartii subsp. stewartii. After 144 h strains cultivation in liquid National Botanical Research Institute’s phosphate growth medium, its activity resulted in accumulations of soluble phosphate 543 mg l⁻¹. Based on the aquaculture pond ecosystems in South China, effects of temperature, salinity, and pH on g6’s growth were also conducted under indoor culture conditions. Results indicated that Pantoea stewartii subsp. stewartii g6 could tolerate wide range of temperature 15–35°C, salinity 5–35‰, and initial pH 6–10. The results showed that g6 had high solubilization efficiency in vitro and could be expected to adapt well to different aquaculture pond environments, based on culture results.     

上海地区池塘沉积物中氮、磷、有机碳及重金属风险评价

为综合评估上海地区池塘沉积物环境质量状况，2016-2019年对上海地区36个养殖场池塘采集沉积物样品360个，检测和分析沉积物中总氮（TN）、总磷（TP）、总有机碳（TOC）及重金属Cu、Zn、Pb、Cd、Cr、Hg和As含量。研究结果表明，池塘0~10 cm层和10~20 cm层沉积物中TN、TP、TOC及各重金属均值分布无显著差异（P>0.05），0~20 cm层沉积物（干重）中TN、TP和TOC平均含量分别为（873.37±352.45）mg/kg、（685.66±199.66）mg/kg和（6.62±3.05）mg/g，三者相关性显著。综合污染指数法和有机指数法评价结果表明，池塘沉积物中氮和有机物质的累积量较低，磷累积量相对较高，均低于其他地区高产池塘。池塘沉积物中Cr、Cd、Cu和Hg样品超标率分别为6.42%、3.21%、4.13%和1.38%，Zn、Pb和As无超标现象。地质累积指数、潜在生态危害指数法和一致性沉积物质量基准评价结果表明，上海地区池塘沉积物中重金属整体上处于清洁等级、低潜在生态危害状态，预测不会引发生物毒性效应。     

Influence of sediment phosphorus on utilization efficiency of phosphate fertilizer: a mesocosm study

Influence of initial sediment phosphorus content of the pond sediment on P dose efficiency was examined in a laboratory experiment using four types of sediments collected from ponds located along a nutrient gradient in a sewage‐fed fish farm. Each sediment type (500 g) was dispensed in a glass jar with water and treated with single super phosphate (SSP) treatment at 1.25, 2.5, 5.0 and 10.0 mg L^?1 in triplicate. Determination of orthophosphate (OP) and soluble reactive phosphorus (SRP) in water and available and total P in sediment showed increased response in relation to dose and time. At a given dose, the rate of increase for all species of phosphate in sediment or water was maximum in the case of local pond (LP) soil followed by stocking pond (SP), facultative pond (FP) and anaerobic pond (AP) soil, suggesting that utililization of phosphate fertilizer was much better under oligotrophic conditions than under eutrophic states. The SSP‐induced OP peak at 10 mg L^?1 in LP sediment was similar to that of 5.0 mg L^?1 in AP sediment containing 59% enhanced initial phosphate, implying that fertilizer application can be profitably reduced by 18% in the former without limiting the OP level in the water phase. It is concluded that dosage selection of phosphorus fertilizer in aquaculture ponds should be based on an evaluation of the initial P status of the system.