外套膜上皮细胞与组织块的离体珍珠囊形成试验

通过对三角帆蚌外套膜上皮组织块培养和上皮细胞培养存包硬核、无包硬核的情况下的钙代谢进行比较分析,用偏光显微镜观察.结果发现,外套膜上皮组织块、上皮细胞在有硬核时与埘照的无硬核培养钙含量无明显差别,外套膜组织块经培养迁移和增值,能形成珍珠囊的上皮细胞,其结缔组织细胞共同围绕珍珠囊上皮细胞组成完整的珍珠囊.偏光显微镜下能观察到舣折射现象,表明产生由碳酸钙结晶形成的片层叠加构成珍珠质.该研究进一步探讨了体外培育珍珠(试管珍珠)的技术,为试管珍珠的研究提供了实验依据.     

三角帆蚌与池蝶蚌育珠性能比较

三角帆蚌,隶属于瓣鳃纲,真瓣鳃目,蚌科,帆蚌属,是中国特有的优质淡水育珠蚌。三角帆所产的珍珠产量佳,珠质细腻、光滑、色泽鲜艳、形状较圆,但珍珠生长比较缓慢。池蝶蚌与三角帆蚌同属帆蚌属(日本称为池蝶蚌属),是中国大陆近年来从日本、台湾引进的优良珠贝类。与三角帆蚌相比,池蝶蚌具有壳、珍珠层、外套膜较厚,珍珠质分泌能力强等优点。     

体外培养三角帆蚌外套膜细胞的生物学特性及有核珍珠培育

通过光学显微镜、透射电镜、流式细胞仪等方法对体外培养的三角帆蚌(Hyriopsis cumingiiLea)外套膜细胞进行观察和检测,证明其具有与蚌体内细胞相同的生物学结构、分裂增殖能力和分泌珍珠质的生物活性。在此基础上,对三角帆蚌有核珍珠培育技术进行探讨。将培养细胞黏附在表面经过促黏壁物质处理的珠核表面,再插入育珠蚌体内培育,120 d后,蚌体内可形成完备的珍珠囊,并在珠核表面有明显的珍珠质沉积;6个月后,珍珠质可将整个珠核包裹起来形成有核珍珠。本研究初步证明了细胞法培育有核珍珠的可行性。[中国水产科学,2007,14(1):149-154]     

淡水优质珍珠培育及加工技术

<正>一、培育技术1.育珠蚌种选择为生产淡水优质珍珠,江西抚州洪门水库开发有限公司于1997年底成功地从日本引进了池蝶蚌原种,并于1998年繁殖成功。池蝶蚌原产日本琵琶湖,日本以该蚌培育优质淡水珍珠产品享誉世界珍珠市场。经过近十年研究,池蝶蚌的壳宽是三角帆蚌的1.23倍,外套膜的厚度是三角帆蚌的1.78倍,贝壳珍珠层的厚度是三角帆蚌的2.08倍,珍珠生长速度是三角帆蚌的1.62倍,大规格、优质珍珠的比例是三角帆     

三角帆蚌珍珠囊形成的研究

本文报道了对三角帆蚌珍珠囊形成过程的研究结果。方法是把石蜡制成的核和一块细胞小片插入蚌的外套膜中，在不同时期取样，进行组织切片。结果表明珍珠囊的形成是细胞小片细胞先形成一层“初生珍珠囊”上皮细胞，由于细胞小片是异体细胞(来源于供片蚌)，因而受到育珠蚌(受体蚌)细胞的“识别”而被排斥，结果初生珍珠囊上皮细胞与基部的细胞脱离，造成死亡并溶解．其后育珠蚌结缔组织最内层细胞再转化为上皮细胞，形成一层“次生珍珠囊”上皮细胞。所以在珍珠囊形成过程中，插入小片细胞和育珠蚌结缔组织细胞在发生一系列形态结构和位置变化的同时，还有细胞“识别”的现象。在水温20℃左右条件下珍珠囊形成约需30天；在尾部插核的蚌，珍珠囊形成比在中部插核的要快；5月手术的珍珠囊形成比10月手术的要快。     

三角帆蚌钙网蛋白基因cDNA的分子特征与表达分析

为研究淡水珍珠形成相关基因及调控机理,以三角帆蚌为研究对象,借助cDNA末端快速扩增(RACE)技术获得了三角帆蚌的钙网蛋白基因(calreticulin,HcCRT) cDNA序列,该序列长1 437 bp,包含231 bp的5'非编码区(untranslated region,UTR)和615 bp 3'UTR以及591bp的开放阅读框(ORF),共编码196个氨基酸残基,包含一段由21个氨基酸组成的信号肽和一段由175个氨基酸的成熟肽,分子量约为22.4 ku,理论等电点5.01.氨基酸序列分析表明,该序列不存在跨膜结构,疏水性分析显示该蛋白整体为亲水性蛋白.氨基酸列比对分析显示,HcCRT具有保守的钙网蛋白家族结构,具有2个保守的钙网蛋白家族标签序列:KHEQNIDCGGGYLKVF和IMFGPDICG,与其他已知物种的CRT具有较高保守性,其中与斑马鱼的相似度为77％,与长牡蛎和马氏珠母贝的相似度为70％.对三角帆蚌HcCRT蛋白序列的二级结构和三级结构进行预测分析,显示该蛋白同时含螺旋和折叠.实时荧光定量PCR分析结果显示,HcCRT在外套膜、血液、鳃、斧足、肝脏、肾脏、肠和闭壳肌等8个组织中均有表达,其中在外套膜中表达量最高,血液次之,在其他组织的表达量极少.初步推测HcCRT参与了三角帆蚌珍珠形成的生物矿化过程.     

三角帆蚌EFCB1基因cDNA序列克隆及表达研究

为了发掘更多三角帆蚌具有EF-hand结构域的功能基因及其蛋白质,本研究运用RACE-PCR技术,克隆得到了三角帆蚌包含EF-hand结构域钙结合蛋白1基因(EF-hand calcium-binding domain-containing protein 1,EFCB1)的cDNA全长并进行了生物信息学分析;通过real-time Q-PCR技术,分析了EFCB1基因在三角帆蚌10个组织,以及内脏团、外套膜插核后不同时间点的时空表达特点。结果表明三角帆蚌EFCB1基因cDNA序列全长981 bp,ORF为531 bp,编码176个氨基酸残基,5'-UTR 239 bp和3'-UTR 211 bp。EFCB1分子式为C₈₇₇H₁₃₄₈N₂₃₈O₂₇₀S₁₀,分子量约19.9 ku,等电点为4.70,不稳定系数为62.65,属亲水蛋白。其序列无信号肽序列,存在1个跨膜区域和2个EF-hand结构域,EF-hand模块分别为DLNDDKLISPEE(98-109)和DTNGDDKLDGEE(129-140)。荧光定量结果显示三角帆蚌EFCB1基因在各组织中均有表达,其中在肠和鳃中表达量最高(P<0.05),外套膜中表达量显著高于内脏团(P<0.05)。EFCB1基因在插核后不同时期的外套膜和内脏团育珠部位组织中表达具有显著差异(P<0.05),在外套膜中的表达量均显著高于内脏团(P<0.05),在插核后第20 天时表达量显著高于各时期(P<0.05)。研究表明,EFCB1在三角帆蚌Ca²⁺的吸收过程中发挥调节作用,在珍珠囊形成过程中以及珍珠形成初期具有重要功能。     

同种异龄蚌珍珠的氨基酸分析

淡水产的珍珠,是由河蚌外套膜表皮细胞分泌形成的。珍珠的用途较多,一般人们用它来制做工艺品,或者做中药材。 1983年春季,我们曾用不同年龄(即2、4、6龄)的三角帆蚌[Hyriopsiscumingii(Lea)]做人工育珠试验。经试验后发现,不同年龄的三角帆蚌所形成的珍珠,在形态等方面出现了差异。但这仅仅是从珍珠的外表面所见到的差别。至于在珍珠内部,在氨基酸的组成和含量上是否也有差异,这乃是作者需要进一步加以研究的问题。一、材料和方法     

三角帆蚌筛选及其产珠量分析

为了提高珍珠产量,降低生产成本,建立生产上简便易行的选蚌方法。通过三角帆蚌池塘养殖试验表明,三角帆蚌的主要生长期为4月—10月中,此期间的平均水温>20℃。对415只体长(a)(7.74±0.42)cm,体宽(b)(1.69±0.14)cm,体高(h)(3.98±0.22)cm的三角帆蚌育珠蚌进行分类统计,分析其体形与产珠量之间的关系。结果表明,三角帆蚌群体的体积(V)大于1.29■或者体长大于(1.29·(ā)~3)～1/3时,珍珠产量高于平均值50%以上。     

三角帆蚌消化酶的分布特性和晶杆的形态结构

三角帆蚌(Hyriopsis cumineii)隶属瓣鳃纲、真瓣鳃目、蚌科,是我国的特有种[1],也是我国生产淡水珍珠的主要贝类[2],产出的珍珠以其品质高而享誉全球.