温度、pH对克氏原螯虾血清酚氧化酶活力及稳定性的影响

以克氏原螯虾(Procam barus clarkii)为材料,研究温度、pH对其血清酚氧化酶活力及稳定性的影响。实验以L-dopa为反应底物,在试验设计的温度范围(20,30,40,50,60,70℃)内,测得酚氧化酶活力的最适温度为20℃,随温度升高酶活力迅速下降,该酶在20~40℃范围内表现出较高的热稳定性,而30℃时最稳定;该酶的最适pH 7.0,在pH 6.0和7.0的缓冲系统中表现出较强的稳定性。     

栉孔扇贝血淋巴中酯酶活性及其性质

采用紫外分光光度法测定栉孔扇贝（Chlamysfarreri）血淋巴中酯酶的活性，并研究底物、抑制剂、激活剂、温度、pH对酯酶活力的影响及酶的热稳定性。结果表明，栉孔扇贝血清与血细胞中均存在酯酶，且血细胞中的酶活力高于血清。血清与血细胞中酯酶的最适作用底物有所不同，血清中为α-醋酸萘酯，而血细胞中为α-丁酸萘酯。当以α-醋酸萘酯为底物时，血清中酯酶的最适温度为45℃，最适pH值为7．5；以α-丁酸萘酯为底物时，血清中酯酶的最适温度为40℃，最适pH值为8．0。以α-醋酸萘酯及α-丁酸萘酯为底物分别测定酶的热稳定时，酶活力变化相似，在20℃时活力最高，而后缓慢下降。栉孔扇贝血淋巴中酯酶属中温型中性酶类，低温下较稳定，底物专一性不强，血清中的酯酶可能来自血细胞，该酶在贝类的免疫防御中町发挥重要的作用。     

罗非鱼肌肉乙酰胆碱酯酶的纯化、性质及农药敏感性研究

以罗非鱼脑组织为材料，研究了乙酰胆碱酯酶的分离纯化方法、性质及杀虫剂对酶的抑制作用。结果表明，当脑组织的TritonX-100抽提物采用(NH4)2SO4分级盐析、Sephadex G-100凝胶过滤和DEAE-纤维素DE23离子交换柱层析的分离纯化步骤后，可获得纯化的乙酰胆碱酯酶，酶的比活力达到20.628U.mg-1, 纯化倍数139，回收率22.1%。酶作用最适温度为35～40℃，最适pH为7.5～8.0，对碘化硫代乙酰胆碱的Km值为0.183mmol.L-1，有过量底物抑制现象，最佳底物浓度为6mmol.L-1。被测4种农药中，有机磷类杀虫剂对罗非鱼脑AChE的抑制能力高于氨基甲酸酯类，抑制能力分别为：敌敌畏 > 辛硫磷 > 三唑磷 > 灭多威， 4种杀虫剂对罗非鱼脑AChE的I50值均小于5μg.mL-1。     

凡纳滨对虾精氨酸激酶的分离纯化及性质研究

经过CM-纤维素批量层析、Separdex G-100柱层析、DEAE_纤维素柱层析等步骤,从凡纳滨对虾肌肉组织分离得到精氨酸激酶,经SDS-PAGE检测达到电泳纯,分子量约为40kDa.对该酶的性质进行分析结果表明,精氨酸激酶的最适作用温度为55℃,当温度高于65℃时,酶活力显著下降;pH 8时酶活力较高,低浓度的精氨酸对酶活力有促进作用,高浓度时表现抑制作用,而底物类似物精胺和氨基胍则对酶促反应表现出完全的抑制.NaCl,KCl对酶的活力具有促进作用,低浓度(10 mmol·L-1)MgCl2对酶活力表现出激活作用,而CuCl2与MnCl2则表现出完全抑制酶活力,CaCl2与ZnCl2在低浓度时对酶活力无明显影响,但是随着浓度升高,对酶具有抑制作用.     

草鱼酸性磷酸酯酶的性质及金属离子对其活性的影响

以草鱼肝脏为材料提取一种酸性磷酸酯酶(ACPase,EC.3.1.3.2),进一步用(NH4)2SO4沉淀分离,Sephadex G-200柱纯化,经聚丙烯酰胺凝胶电泳纯度鉴定呈现单一酶蛋白带,该酶紫外吸收峰为240nm和280nm,等电点为4.8,相对分子质量为100046.1。该酶水解对硝基苯磷酸二钠(pNPP)的最适pH值为4.4,最适温度为45℃,并有热激活现象,热激活温度为60℃。耐热实验表明,该酶在最适温度下耐热时间为33min,最适温度下20min时表现出最大活性。在60℃下耐热时间为25min,15min时表现最大活性。酶促反应初速度为0.0475μmol/min,最大反应速度为0.153μmol/min。米氏常数Km值为3.56×10-3mol/L。金属离子对酶活性影响的研究结果表明,K+对酶有激活作用,Li+、Na+对酶的活性没有明显影响;碱土金属离子Mg2+、Ca2+和Ba2+对酶有激活作用,其激活程度由大到小依次为:Ba2+、Mg2+、Ca2+;Mn2+对酶有激活作用,Zn2+、Cu2+、Co2+则有抑制作用;重金属离子Hg2+、Pb2+、Ag+和Cd2+对酶有抑制作用,其中Hg2+的抑制效应最强。Mg2+和Cu2+的作用机制研究结果表明,Mg2+对酶具有混合型激活作用,Cu2+对酶具有竞争性抑制作用。     

大菱鲆消化道蛋白酶的初步研究

以-龄大菱鲆为材料,研究养殖水温下不同pH条件胃、幽门盲囊、前肠、中肠、后肠中蛋白酶的活性,确定饵料中蛋白质的主要消化部位为胃和前肠,各部位主要蛋白酶的最适作用pH依次为2.0、8.0、8.0、8.5、8.0;蛋白酶单位酶活力从高到低依次为幽门盲囊＞胃＞前肠＞中肠＞后肠.以大菱鲆胃为材料,经Tris-HCl缓冲液抽提、硫酸铵分级分离,DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析、Sephadex G-100凝胶过滤层析分离纯化,获得大菱鲆胃蛋白酶的电泳纯制品,并对该酶的性质进行了研究.结果显示:纯酶的分子量为39900Dal,纯酶最适反应pH为2.0,最适反应温度40℃;pH稳定范围1.0-9.0,40℃以下酶活性稳定;Mn2+和Cu2+可激活大菱鲆胃蛋白酶,Fe3+对酶活性有抑制作用.     

黄海黄杆菌YS-9412-130低温碱性蛋白酶性质鉴定

对黄海黄杆菌YS-9412-130菌株产低温碱性蛋白酶的理化性质研究表明，该酶由256个氨基酸组成，分子量为33000Dar，等电点pI为9.45，米氏常数Km为5×10-3mmol/L；酶的最适作用pH范围为9.5～10.5，最适作用温度30℃，具有一定的抗氧化稳定性。Ca2+、Mn2对酶有激活作用，而Hg2+、Ag+对酶有抑制作用。DFP、NBS严重抑制酶的活性,而同时该酶也能被EDTA抑制。结果表明该低温碱性蛋白酶为一新型的丝氨酸蛋白酶。     

大菱鲆肠道蛋白酶的分离纯化及性质的初步研究

以大菱鲆肠道为材料,对大菱鲆消化生理中起重要作用的肠蛋白酶的分离纯化条件和理化性质进行了研究。经Tris-HCl缓冲液抽提,硫酸铵分级分离,DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析、Sephadex G-100凝胶过滤层析分离纯化,获得大菱鲆肠蛋白酶Ⅰ的电泳纯制品,并对该酶的性质进行了研究。结果显示:纯酶的分子量约为58kD。纯酶最适反应pH为9.0,最适反应温度50℃;pH稳定范围6.0~11.0,30℃以下酶活性稳定;Mn2 可激活大菱鲆肠蛋白酶Ⅰ,Cu2 、Zn2 、Ag 、Fe3 则对酶活性有抑制作用;巯基蛋白酶抑制剂显著抑制大菱鲆肠蛋白酶Ⅰ的活性,金属蛋白酶抑制剂对大菱鲆肠蛋白酶Ⅰ无影响。50℃、pH9.0条件下以双倒数作图法得大菱鲆肠蛋白酶Ⅰ催化酪蛋白水解的Km值为2.92g.L-1。     

美国红鱼血清溶菌酶性质及其应用

用硫酸铵沉淀法对美国红鱼(Sciaenops ocellatus)血清溶茵酶进行初提,采用分光光度法研究pH和温度对该溶茵酶活力的影响,同时研究溶茵酶在高温条件下的稳定性及金属离子对其活性的影响.并试验该溶茵酶对奥尼罗非鱼生长和存活的影响.结果表明,美国红鱼血清溶茵酶的最适pH为6.84,最适温度为31℃;该酶在60℃以下活性稳定;Cd2 、Pb2 、Ag 、Mn2 等对美国红鱼血清溶茵酶具有非常明显的抑制作用,而Ca2 和Na 对美国红鱼血清溶茵酶具有激活作用.结果有助于该酶活力测定条件的进一步完善.以有效地测定鱼体非特异性免疫水平.同时发现用该溶茵酶处理奥尼罗非鱼,可提高其成活率.     

鳙内源性转谷氨酰胺酶特性的研究

文章研究了温度、pH、二硫苏糖醇（DTT）以及不同的金属离子和抑制剂对鳙（Hypophthalmichthys nobilis）鱼肉中内源性转谷氨酰胺酶（transglutaminase,TGase）活性的影响。结果表明,鳙内源性TGase的最适温度在37～45℃之间,最适pH为6.5～7.5,适量的钙离子（Ca^2＋）（0～2.2 mmol·L^-1）可以激发酶活性,低浓度（0～0.2mmol·L^-1）的DTT可以提高酶活性,但高浓度的钠离子（Na^＋）和钾离子（K^＋）会降低酶活性,镁离子（Mg^2＋）、铜离子（Cu^2＋）、锌离子（Zn^2＋）、钡离子（Ba^2＋）、铁离子（Fe^3＋）、亚铁离子（Fe^2＋）、铅离子（Pb^2＋）和乙二胺四乙酸（EDTA）也会抑制酶的活性。     

理化因子对杂色鲍血蓝蛋白酚氧化酶活性影响的研究

以邻苯二酚为底物研究部分理化因子对杂色鲍（Haliotis diversicolor）血蓝蛋白酚氧化酶活性的影响。结果表明，血蓝蛋白酚氧化酶活性最适温度34℃、最适pH6．4；铜离子（Cu^2＋）能极其显著增强血蓝蛋白的酚氧化酶活性，增强率为264％，而乙二胺四乙酸二钠（EDTA）、镁离子（Mg^2＋）和锌离子（Zn^2＋）则能极其显著地抑制其活性，EDTA的抑制效率最高，抑制率为52．8％，Mg^2＋和Zn^2＋的抑制率分别为27．8％和25％。钙离子（Ca^2＋）对血蓝蛋白酚氧化酶活性影响不显著。     

温度和pH值对斜带髭鲷蛋白酶、淀粉酶活性的影响

研究了温度和pH值对斜带髭鲷Hapalogenys nitens蛋白酶、淀粉酶活力的影响。结果表明，斜带髭鲷胃内pH值范围为4.9～5.4；肝胰脏pH值为5.8～6.2；肠道pH值为6.5～6.9。蛋白酶活性随温度的上升而增加，在40℃达最大，40℃以上酶活性随温度的上升而下降。在不同消化器官中，蛋白酶活性大小顺序为：胃〉前肠〉幽门盲囊〉后肠〉肝胰脏。在15～50℃范围内，斜带髭鲷消化道不同部位淀粉酶活性的最适温度均为35℃，淀粉酶活性由高到低顺序为：肝胰脏〉幽门盲囊〉前肠〉后肠〉胃。在pH值为2.2～7.6范围内，胃蛋白酶活性的最适pH值为2.8；在pH值为4.8～8.0范围内，其他消化器官蛋白酶的最适pH值均为7.2；在最适pH值下，各消化器官中的蛋白酶活性由高到低顺序为：前肠〉幽门盲囊〉后肠〉肝胰脏。在pH值为4.8～8.0范围内，胃淀粉酶活性的最适pH值为6.0，肠、肝胰脏与幽门盲囊淀粉酶的最适pH值均为6.8，活性由高到低顺序为：肝胰脏〉幽门盲囊〉前肠〉后肠〉胃。在最适温度和pH值下，蛋白酶活性由高到低顺序为：胃〉前肠〉幽门盲囊〉后肠〉肝胰脏；淀粉酶活性由高到低顺序为：肝胰脏〉幽门盲囊〉前肠〉后肠〉胃。     

低温速冻处理对养殖大黄鱼冻藏品质的影响

研究了养殖大黄鱼分别用-20℃空气冻结和-65℃低温速冻处理后,在-18℃冻藏过程中肌肉蛋白质生化特性、质构特性以及组织结构的变化情况。结果表明,无论是-20℃空气冻结还是-65℃低温速冻,随着贮藏时间的延长,养殖大黄鱼的盐溶性蛋白含量、Ca2+-ATPase活性、硬度均呈下降趋势,pH值先下降后上升。低温速冻处理冻结速率快,组织细胞产生的冰晶小且均匀,细胞形态基本保持完整,对盐溶性蛋白质含量和Ca2+-ATPase活性影响极显著(P0.01),低温速冻更有利于保持养殖大黄鱼的品质。     

克氏原螯虾酚氧化酶部分生化特性的研究

以克氏原螯虾(Procambarus clarkii)酚氧化酶(PO)为材料,采用L-DOPA为反应底物,分光光度计测定不同温度和pH条件下PO活力,研究克氏原螯虾PO的特性,为其免疫学研究及优化PO准确测定方法提供依据。结果显示PO活力最高时的温度为35℃,低于和高于35℃活力逐渐下降,45℃以上活力迅速下降;0℃仍具有最高活力的24%。在pH4.0～9.5内PO均具有活力,鳃组织最佳pH5.5,血清最佳pH6.5。因此测定克氏原螯虾PO活力的最佳参数为温度35℃,pH5.5(鳃)或6.5(血清)。以上结果说明冰浴终止反应法测定克氏原螯虾PO活力会影响结果的准确性,要慎用。     

pH、温度和盐度对单环刺螠消化酶和溶菌酶活力的影响

采用L25(56)正交试验法测定了不同pH(6、7、8、9、10)、温度(10、15、20、25、30℃)和盐度(15、20、25、30、35)对体质量为(71.2±8.5)g的单环刺螠肠蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶和脂肪酶活力的影响,以及不同盐度对单环刺螠血液溶菌酶活力的影响。试验结果表明,单环刺螠肠消化酶活力的最适环境条件分别为,蛋白酶:pH 8、温度30℃、盐度35;淀粉酶:pH 9、温度25℃、盐度25;纤维素酶:pH6、温度30℃、盐度35;脂肪酶:pH 6、温度25℃、盐度30。盐度15和20两组单环刺螠血液溶菌酶活力均先降后升再降,而盐度30和35两组则先升后降。至处理第4d,各试验组溶菌酶活力依次为:盐度3025352015,盐度15和20两组溶菌酶活力显著低于盐度较高试验组(P0.05)。盐度25~35、pH 6~9为单环刺螠适宜的环境条件,高温(25~30℃)下其消化酶活力较高,而低盐度(15~20)下其消化酶活力和免疫能力明显降低。     

温度和营养盐胁迫对龙须菜氨氮吸收速率及生长速率的影响

以龙须菜（Gracilaria lemaneiformis）为试验材料,分别研究了温度和营养盐协迫对其生长及氨氮吸收速率的影响。结果表明,2个环境因子对龙须菜生长和吸收氨氮速率均有显著影响。龙须菜在20℃条件下生长较其在10℃和30℃条件下生长快速（P〈0.01）;营养盐含量过高和过低均不利于龙须菜的生长;营养盐水平越...     

贡氏红圆尾鲻人工繁殖实验研究

实验观察了20℃、23℃、26℃、29℃和32℃等不同水温条件下鳝鱼的产卵情况，结果表明水温26℃条件下，鳝鱼的日均产卵量最大，受精率最高，26℃是鳝鱼产卵的最佳水温；实验设置了10种不同的雌雄鱼配组方式，结果发现16＋1辛组、2艿＋1早组、46＋1早组的雌雄鱼配组方式雌鱼产卵量最大且受精率最高，是鳝鱼产卵的最佳配组方...     

温度和金属离子对干扰素诱导剂 聚肌胞配对的影响

为提高聚肌胞（Polyinosinic-polycytidylic acid，polyI：C）的配对效果，本文研究了温度和金属离子对聚肌胞配对的影响。实验结果显示，在45℃条件下合成的聚肌胞减色效应最强，说明在该温度下聚肌苷酸（Polyinosinic acid，PI）和聚胞苷酸（Polycytidylic acid，PC）配对最紧密；Na^＋、Ca^2＋、Mg^2＋、Mn^2＋和Zn^2＋能够增强聚肌胞双链结构的紧密性，当Na^＋浓度增加到0．085mol／L后，聚肌胞的配对接近饱和；Ca^2＋、Mg^2＋、Mn^2＋和Zn^2＋对聚肌胞结构的保护效果基本一致，而Cu^2＋对聚肌胞结构具有明显破坏作用。建议采用45℃合成聚肌胞并添加适当浓度的Na^＋和Ca^2＋等增强其结构的紧密性，以避免机体内高活性RNA酶的降解而失去药效。