副溶血弧菌对文蛤的致病性及其防治

八十年代以来,江苏南部沿海屡次发生文蛤大批死亡现象,使文蛤资源量急剧下降,生产遭受重大损失。关于文蛤大批死亡的原因研究,目前已有几篇报道。郑国兴等[1991]从病文蛤体内分离到溶藻弧菌并证实其致病性。王广和等(1991)研究证实弗尼斯弧菌是引起文蛤大批死亡的病原菌。杨美桂等(1978)报道了1977年引起台湾新竹区养殖丽文蛤大量死亡的病原菌——副溶血弧菌。但有关文蛤病     

杂色蛤病原菌—溶藻弧菌的分离与回接感染试验

1991年7月下旬至10月上旬,辽宁东沟县沿海出现杂色蛤大批死亡,从病杂色蛤体内分离到病原菌,经人工感染试验得到证实。病原菌为革兰氏阴性短杆菌,以极生单鞭毛运动,在TCBS琼脂平板上形成黄色大菌落,在固体培养基上能游动。发酵葡萄糖产酸不产气,精氨酸—碱反应阴性,赖氨酸、鸟氨酸脱羧阳性,对弧菌抑制剂0/129(150μg)敏感,被鉴定为溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)。通过回接试验证明此溶藻弧菌使杂色蛤死亡。     

文蛤增养殖技术讲座 第七讲 文蛤弗尼斯弧菌病的研究与防治技术

第七讲文蛤弗尼斯弧菌病的研究与防治技术随着文蛤养殖集约化程度的提高，海洋富营养化程度的日趋加重，文蛤的病害也跟着发生，发病的情况越来越重，受灾的面积越来越大，损失惨重，仅1989年，江苏南部沿海文蛤死亡数量高达6000多吨，造成的直接经济损失达数千万元人民币。通过广泛调查，实地考察，数百次室内的对比试验，证实：江苏南部沿海多年来文蛤发生大批死亡的主要致病菌是一种海洋弧菌，学名叫弗尼斯弧菌（V凡rnjksii）。文蛤患上弗尼斯弧菌病，一般的症状为：钻出滩面，闭壳肌松驰，出水管喷水无力，贝壳光泽暗淡，不吃食、瘦弱…     

山西省虹鳟鱼弧菌病病原菌的分离与鉴定

1985年6～9月间,山西省虹鳟鱼实验场鱼种爆发了一起细菌性疾病,从病鱼的肝、脾、肾中分离到细菌,用此菌人工感染虹鳟能得到与天然发病病鱼相似的症状,并从被感染鱼的体内重新分离到这种菌,证实为该病病原菌。经鉴定为鳗弧菌生物变种Ⅲ(V.anguillarum biovarⅢ,biovar nov)隶属于弧菌Ⅰ组中的淡水亚组弧菌。     

文蛤浮游期发病幼虫细菌群落分析和致病菌的分离鉴定

为研究文蛤育苗过程中幼虫病害及其主要致病菌，实验通过构建细菌16S rDNA克隆文库、病原菌分离纯化、人工感染和药敏实验等方法对育苗场发病的浮游期文蛤壳顶幼虫样品进行了系统分析。结果显示，发病的文蛤壳顶幼虫细菌群落多样性低，地中海弧菌占比高达75%以上，推断其可能为引发此次幼虫发病的主要致病菌。从发病幼虫的匀浆组织中分离获得该优势菌株，测序及系统发育鉴定为地中海弧菌。人工感染实验确定了其致病性，菌株US2-01在1.0×10⁶ CFU/mL的菌液浓度下浸泡感染文蛤浮游幼虫，96 h累计死亡率为84%。药敏实验表明，地中海弧菌菌株US2-01在12种抗生素的测试中对常用的青霉素、氨苄西林、红霉素等抗生素具有一定的耐药性，对四环素和多西环素中度敏感，对头孢他啶、庆大霉素、卡那霉素等其余7种抗生素呈现高度敏感。本研究首次报道了地中海弧菌为文蛤浮游期幼虫致病的一种潜在病原，研究结果可为文蛤幼虫疾病研究及贝类苗种培育过程中的病害防控提供科学依据。     

哈氏弧菌文蛤分离株WG1702培养条件优化研究

于2007年9月在江苏吕泗文蛤发病高峰期,从发病文蛤体内和养殖水体中分离到1株哈氏弧菌WG1702,培养条件优化试验结果表明,菌株WG1702在32 h时达到生长高峰,最适温度为28℃,最佳初始pH为7,最佳盐度为40,最佳装液量为60 ml/150 ml,促进生长的金属离子是NH4+、Fe2+、Fe3+,最佳C、N源为葡萄糖和蛋白胨;pH、温度、不同菌龄正交试验证明最佳组合为pH 7.11,温度28℃,菌龄24 h,通过方差分析结果可以看出三因素中pH对生长影响显著(P<0.05)。     

鳗弧菌铁吸收系统的毒力作用研究进展

鳗弧菌(Vibrio anguillarum)是鱼类弧菌病的主要病原菌,是具有极生鞭毛[1]、弯曲杆状的革兰氏阴性细菌,可经消化道、鳃及皮肤侵入鱼体[2],导致多种海水鱼(如牙鲆、鲈鱼等)和淡水鱼(例如鳗鲡等)的死亡[3]。在长期的进化过程中,鳗弧菌发展出特有的铁吸收系统(iron uptake sys-tem     

中国对虾病原菌(鳗弧菌)的研究

1987年7～10月福建省平谭县对虾养殖场发生了一起严重的流行病。病虾活动力减弱,食欲下降,个体消瘦,头胸甲心区附近呈白色或浅桔红色,血淋巴液稀薄、混浊、不能凝固。因病虾步足、游泳肢及尾扇呈鲜红色,被称为“红腿病”。死亡率可高达90％以上。从五只垂死病虾的心脏血淋巴液中分离到细菌作纯焙养,经肌肉注射和浸泡的人工感染方法,得到了与虾池中患病虾相同的症状。菌原菌是革兰氏阴性短杆鼠。以极生单鞭毛运动。发酵葡萄糖,产酸不产气。氧化酶、过氧化氢酶阳性。能还原硝酸盐成亚硝酸盐。精氨酸脱羧;鸟氨酸、赖氨酸不脱羧。V.P.阳性.在42℃中不能生长。不能在无盐和含有8％NaCl 的胨水中生长,但在含有3％和6％NaCl的胨水中生长良好。对弧菌抑制剂0/129敏感。经鉴定为鳗弧菌(Vibrio anguillarum Bergman)。     

广西沿海文蛤及其生境中细菌菌群的初步调查

对广西沿海文蛤及其养殖场的细菌菌群用ＶＩＴＥＫ微生物自动分析仪进行了初步检测，发现文蛤体内有腐败假单胞菌（Ａｌｔｅｒｏｍｏｎａｓｐｕｔｒｅｆａｃｉｅｎｓ）、河弧菌（Ｖｉｂｒｉｏｆｌｕｖｉａｌｉｓ）、副溶血弧菌（Ｖ．ｐａｒａｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓ）、溶藻弧菌（Ｖ．ａｌｇｉｎｏｌｙｔｉｃｕｓ）、非发酵性革兰氏阴性芽胞菌（ＮｏｎｆｅｒｍｅｎｔｉｎｇＧｒａｍ－ｎｅｇａｔｉｖｅＢａｃｉｌｌｕｓ）、假单胞菌属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｐｐ．）以及一些未知菌。从海水中亦经常检测到腐败假单胞菌、溶藻弧菌、河弧菌、温和气单胞菌（Ａｅｒｏｍｏｎａｓｓｏｂｒｉａ）等细菌。分析表明，副溶血弧菌可能为文蛤的一种病原菌。药敏试验显示．上述所有细菌几乎都对环丙沙星、庆大霉素和氯霉素敏感。     

文蛤病原菌——需钠弧菌的鉴定和生物学特性分析

从患病文蛤Meretrix meretrix体内分离出一优势菌株WT01，回归感染试验证明是文蛤的致病菌。对该菌形态、生理生化特征、盐度、温度和PH值生长条件以及16S rRNA基因序列进行了研究。结果表明，该菌为革兰氏阴性菌，发酵葡萄糖产酸不产气，氧化酶阳性，生长需NaCl，无色素，不发光，在TCBS平板上形成圆形黄色菌落，对弧菌抑制剂O／129敏感，具有弧菌属的典型特征。16S rRNA基因序列分析表明，该菌与需钠弧菌Vibrio natriegen的亲缘关系最为接近，其同源性达999／6以上。因此，将该菌鉴定为需钠弧菌。实验显示其半数致死量为5．5×10^6CFU／g。19种抗菌药物药敏试验结果表明，该菌对氟哌酸、复方新诺明、菌必治、先锋必、链霉素、氯霉素和庆大霉素等抗生素较为敏感。并对其胞外产物的生物学特性进行了分析。     

菲律宾蛤仔的生长发育

本文以菲律宾蛤仔的受精卵孵化、蛤苗培育至成贝生长等阶段的发育生长速度为主要研究对象。文中系统地记述了菲律宾蛤仔的胚胎发育、浮游幼虫培育、幼苗至成贝诸阶段的生长发育速度、生长特点以及亲蛤的繁殖能力。经1978—81年三年暂养试验表明，9月底将亲蛤暂养于池塘内并适当地控制生态条件，能使亲蛤的性腺保持三个月不排放精卵，从而可延长繁殖期，做到有计划地分批催产和育苗。1至3龄亲蛤都能繁殖后代，但以3龄亲蛤为好。     

波纹巴非蛤的性腺发育和生殖周期

根据波纹巴非蛤生殖细胞发育的规律和它们在滤泡中所占的比例,把波纹巴非蛤生殖腺发育过程分为增殖期、生长期、成熟期、排放期和休止期五个阶段。根据相对重量、鲜出肉率、干出肉率等指标的变化,并结合性腺的组织切片确定,波纹巴非蛤的性腺发育在闽南海区一年—个周期。繁殖期在5月中旬——10月下旬,但其繁殖高峰则有两次,分别在5月下旬和10月上旬。这表明波纹巴非蛤的成熟期和生殖期是相互重叠的。此外还观察到该种有雌雄同体现象。     

温度和盐度对菲律宾蛤仔稚贝生长及发育的影响

本文叙述了，在室内控制条件下，温度和盐度对菲律宾蛤仔稚贝生长及发育的影响。蛤仔稚贝生长的适宜水温为15—30℃，其中以25℃为最好。在此温度范围内，稚贝生长迅速，成活率高达80％以上。稚贝对10℃以下的低温有强的忍耐性，也能忍耐35℃的高温，其死亡的临界温度在40℃左右。稚贝生长的适宜盐度为14．0—33．5‰，最适盐度是20．5‰左右。在此盐度范围内，稚贝发育整齐，成活率高达85％以上。生长的盐度下限和上限分别为7．5‰和40．0‰左右。幼虫变态的适宜盐度在20．5～33．5‰之间，在此盐度范围内，幼虫成活率为65％以上。盐度在27‰时幼体的成活率最高，达到92．5％。幼虫变态的盐度下限为7．5‰左右，而上限则在于40．0—46．5‰之间。     

青蛤养殖技术

一、生态与繁殖习性 1.生态习性 青蛤(Cyclina sinensis)为帘蛤科双壳底栖贝类,广泛分布于我国沿海泥砂质的潮间带,以高潮区的下部为多。埋栖深度与个体大小、季节及底质有关,幼苗在表层0.5cm左右,2～3龄可埋栖6～8cm,大个体甚至深达15cm;炎夏或严冬栖息较深;含砂量大的底质,埋栖较浅。迁移性很小。     

MARKET DELINEATION OF THE SPANISH CLAM MARKET

This article analyzes the long-term relationship among prices of the most consumed clams in Spain. The clams considered are: the striped venus (Chamelea gallina) from Spain and Italy, the Japanese carpet shell (Ruditapes philippinarum) and the grooved carpet shell (Ruditapes decussatus). The striped venus and grooved carpet shell are wild-caught whereas the Japanese carpet shell is from aquaculture farms. Unit root tests were used to check for stationarity and cointegration and the Law of One Price (LOP) were analyzed. Also short-run and long-run causality among prices is studied. The empirical results show that the markets for the Italian and Spanish striped venus and the Japanese carpet shell are interrelated and to some extent these clams can be considered to be substitutes. However, only the Japanese carpet shell and the Spanish striped venus are perfect substitutes.     

sodA、sodB和KatG在嗜水气单胞菌抗氧化胁迫中的协同作用

以嗜水气单胞菌野生株B11和基因稳定沉默株sodA-RNAi、sodB-RNAi和KatGRNAi为研究对象,比较野生株和沉默株在不同氧化胁迫条件下sodA,sodB和KatG表达的相关性及与细菌生长和存活的相关性,以探讨抗氧化胁迫基因在细菌抵御氧化胁迫过程中的作用和机制。结果显示,无氧化胁迫条件下sodA、sodB和KatG中任何一个基因被沉默后,其余两个基因的表达均受到显著抑制,说明这些抗氧化胁迫基因在表达上密切相关。在外源H2O2胁迫下,sodA、sodB和KatG中任何一个基因被沉默后,其他两个抗氧化胁迫基因的表达均表现为显著上调;在甲基紫晶(MV)诱导的内源性活性氧(ROS)胁迫下,各沉默株中sodA或sodB的表达水平总体表达为上调,但是在KatG的表达却呈现下调,说明sods的表达在细菌抵御内源性ROS的损伤中更具重要性。在H_2O_2胁迫下,随着H_2O_2浓度的增加,野生株B11的存活率仍然保持在较高的水平,而沉默株sodA-RNAi、sodB-RNAi和KatG-RNAi的存活率则显著降低;此外,菌株生长曲线显示,sodA、sodB和KatG的表达可影响嗜水气单胞菌生长曲线延滞期的长短。在不同浓度MV诱导的ROS胁迫下,野生株B11和沉默株KatG-RNAi的存活率仍然保持在较高的水平,沉默株sodA-RNAi和sodB-RNAi的存活率则显著降低,但4株菌仍然能保持一定的生长能力。研究表明,在不同氧化胁迫条件下,细菌可通过不同抗氧化胁迫基因的协同作用,共同抵御ROS的损伤,在H_2O_2的胁迫下,KatG对嗜水气单胞菌的生存更为重要,而在MV诱导的内源性ROS胁迫下,sod的表达对嗜水气单胞菌生存的贡献更为突出。     

团头鲂tf和tfr1a基因启动子克隆及转录调控分析

为探索鱼类转铁蛋白基因tf和转铁蛋白受体基因tfr1a的转录调控机制,本实验以团头鲂为研究对象,在其全基因组数据库中获取tf和tfr1a基因序列,对2个基因候选启动子区转录因子结合位点及CpG岛进行预测,通过PCR方法克隆得到tf和tfr1a基因近端启动子区不同长度片段,连接至pGL3-Basic/pEGFP-1载体,瞬时转染入Hela细胞,并采用双荧光素酶报告基因检测系统进行检测。结果发现,团头鲂tf基因启动子区无CpG岛位点,而tfr1a基因启动子区有2个CpG岛位点。成功构建9个tf和10个tfr1a不同长度启动子片段的重组质粒,经双荧光素酶报告基因系统检测发现,tf启动子核心区域为-268^+56 bp,且-1 308^-1 102 bp片段可能存在正调控该基因表达的转录因子结合位点;tfr1a启动子核心区域为-224^+48 bp,且+48^+92 bp可能存在抑制该基因转录的负调控元件,而-1 229^-1 219 bp区域可能存在促进tfr1a基因表达的正调控转录因子结合位点。     

凡纳滨对虾JAK和STAT基因在苏云金芽孢杆菌侵染过程中的表达变化分析

为了分析凡纳滨对虾JAK(Lv-JAK)和STAT(Lv-STAT)基因应答病原菌侵染的表达变化特征,本实验利用半定量PCR技术分析了Lv-JAK和Lv-STAT基因的组织表达特征,并利用实时荧光定量PCR技术分析了其在苏云金芽孢杆菌侵染过程中的表达变化特征。结果显示,Lv-JAK和Lv-STAT基因在凡纳滨对虾的9种组织中有不同程度的表达,均在鳃、肠道和心脏中表达量较高。苏云金芽孢杆菌感染后,在鳃组织中,Lv-JAK和Lv-STAT基因的相对表达量在感染的中晚期(24~72 h)显著上调表达;在肠道组织中,Lv-JAK基因的相对表达量在感染后的6和24 h显著上调,Lv-STAT基因的相对表达量在感染后的24和72 h显著上调。综上表明,JAK和STAT基因在一定程度上参与了凡纳滨对虾体内由苏云金芽孢杆菌引发的天然免疫应答过程,探讨凡纳滨对虾JAK和STAT基因应答苏云金芽孢杆菌感染的表达变化特征,有助于研究对虾JAK/STAT通路在应答病原菌侵染过程中的功能和作用机制。     

胶州湾菲律宾蛤仔的性腺发育

１９９６年４～６月，对胶州湾内的菲律宾蛤仔连续取样，将性腺用１０％福尔马林液固定，组织切片４～６μｍ，Ｈ．Ｅ染色，显微照相显示菲律宾蛤仔卵巢和精巢的发育是同步进行的，性腺在４月初开始进入繁殖初期的快速发育，４月中和４月底生殖细胞已明显增大，至５月上旬染滤已被成熟的生殖细胞充满，５月中旬前后生殖细胞被分批排放，５月下旬和６月上旬性腺进入休止状态，至此，形成了一个繁殖期，在繁殖期内，高龄贝比低龄贝发育