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相似文献
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1.
为确诊叉尾斗鱼肉瘤病,采集自然患病鱼进行病理学观察,基于淋巴囊肿病毒主要衣壳蛋白基因采用PCR方法对肉瘤状增生物进行检测和进化树分析。结果显示,患病叉尾斗鱼肉瘤状增生物是由大量囊肿细胞聚集在皮肤和鳍条上形成,鳃、肝、肾、脾、肠等内脏组织器官均未观察到囊肿细胞。囊肿细胞大小为正常细胞大小的57.9~1823.8倍,细胞核不规则,细胞质内可见嗜碱性包涵体;透射电镜观察可见囊肿细胞胞质内存在大量直径约171.5nm的病毒粒子。病理观察结果符合鱼类淋巴囊肿病毒感染的临床特征,PCR方法检测到1272bp的目的片段,测序结果显示,该基因与GenBank中的淋巴囊肿病毒KJ408271.1序列相似性达99%。试验结果表明,叉尾斗鱼肉瘤病为淋巴囊肿病毒感染所致,皮肤和鳍是病毒感染的靶器官。本研究为叉尾斗鱼肉瘤病临床诊断和预防提供了试验参考。  相似文献   

2.
军曹鱼淋巴囊肿的病理学研究   总被引:8,自引:0,他引:8  
应用病理组织学和电镜方法,对患疑似淋巴囊肿病的军曹鱼(Rachycentron canadum)的各器官进行观察.结果表明,患病军曹鱼的皮肤囊肿组织由一些淋巴囊肿细胞集合体组成,这些囊肿细胞排列紧密,直径为10~150 μm,细胞呈圆形、锥形不规则状;细胞外有一层厚的囊膜;细胞质内散布有大量的嗜碱性包涵体,且多数集中在细胞的边缘部分;电镜观察到囊肿细胞质中有大量二十面体的病毒粒子,病毒颗粒直径220 nm.据此确认该病为病毒性淋巴囊肿病.其他器官主要组织病理学变化有:在心脏、肝脏、脾脏和头肾中也存在囊肿细胞,心肌纤维水肿;肾间质淋巴细胞增生,巨噬中心出现,肾小管上皮细胞变性和坏死;脾淋巴细胞增生,脾髓质出血;肝脂肪变性;鳃上皮肿胀.根据观察结果可以认为,该病毒不仅损伤鱼的皮肤,致使病鱼外观异样而严重影响其商品价值,而且对鱼的内脏和免疫器官也造成严重的致命损伤.  相似文献   

3.
牙鲆淋巴囊肿病的病理和病原分离   总被引:9,自引:2,他引:7       下载免费PDF全文
应用常规显微和亚显微技术观察和分析患淋巴囊肿病养殖牙鲆(Paralichthys olioaceus)的病理学变化,利用差速离心和蔗糖密度梯度离心技术分离其病原——淋巴囊肿病毒,并利用牙鲆细组织细胞系FG—9307为感染基质,观察淋巴囊肿病毒引起的细胞病理变化。结果表明,患病牙鲆的囊肿组织是一些淋巴囊肿细胞的集合体,这些囊肿细胞排列紧密,直径为10—100μm,细胞近圆形,细胞质内散布有大量的嗜碱性包涵体,且多数集中在细胞的边缘部分;囊肿细胞内含有大量病毒粒子,其衣壳外形呈六角或五角形,直径为150—230nm,大多数病毒粒子中央有一致密的核,核外周包围着一双层核衣壳,核衣壳的表面可见一圈把手样亚单位。以患病牙鲆囊肿物制备的上清液接种细胞,7d内未见细胞异常,经盲传2—3代后,细胞出现较明显的细胞病变效应。  相似文献   

4.
通过系列优化实验,选出了适合于牙鲆淋巴囊肿病毒检测的聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)包埋切片法;运用牙鲆淋巴囊肿病毒单克隆抗体的问接免疫荧光抗体染色技术,首次用PEG切片成功地对牙鲆淋巴囊肿组织中的病毒进行了检测;并与新鲜组织冰冻切片的实验结果进行了对比;另外,还对石蜡切片、PEG切片及冰冻切片的优缺点进行了讨论。结果表明,将制片温度控制在52℃以下时,PEG切片中的淋巴囊肿病毒的抗原性能够得到较好的保存,经过间接免疫荧光染色后,囊肿细胞的细胞质内观察到强阳性绿色荧光,与冰冻切片中的荧光强度无明显差别,表明PEG切片同冰冻切片一样能很好地保存病毒的抗原性。另外.PEG切片与石蜡切片一样对组织细胞的形态保存良好;而冰冻切片的细胞形态变化大,细胞质发生弥散、皱缩。因此,聚乙二醇包埋切片法能够同时保存病毒的抗原性和组织细胞良好的形态结构,应用于免疫组织化学、免疫病理等研究可以获得较好的效果。  相似文献   

5.
一种真鲷球形病毒的形态及细胞病理学电子显微镜观察   总被引:3,自引:1,他引:2  
姜明 《水产学报》2000,24(1):52-55
对1995年青岛地区患病真鲷肝脏、肠上皮组织、贤脏、鳃等组织进行电镜观察,发现一种球形病毒,该病毒具有囊腊,直径为80 ̄100nm,在核和细胞质中均形成不规则形态包涵体;细胞病理变化表现为核内染色质变性,核膜水肿变形且部分溶解,内质网膨胀,胞质内有大量游离核糖体分布,线粒体外膜及内嵴变形且有少量溶解。  相似文献   

6.
淋巴囊肿病毒(Lymphocystis virus)属于虹彩病毒科(I ridoviridae),病毒粒子含DNA正二十面体,直径一般200-250nm,该病毒的感染性在18~20℃水中能保持5d以上,是感染高峰期。淋巴囊肿病是一种慢性皮肤瘤。牙鲆淋巴囊肿主要症状表现在鱼类的皮肤上、鳍上和眼球等处出现小水泡状的肿状物,这些肿状物多呈白色、淡灰色、灰黄色、个别囊肿物因寄生部位充血而略显红色,囊肿大小1~10mm并紧密相连呈桑椹状。淋巴囊肿病全年可见,  相似文献   

7.
赤点石斑鱼病毒性神经坏死症的组织病理和电镜观察   总被引:5,自引:3,他引:2  
林蠡 《水产学报》2005,29(4):519-523
用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测患病赤点石斑鱼苗,呈Beta诺达病毒阳性。光学显微镜下观察到病鱼的脑、视网膜、脊髓有空泡.在脑部,空泡主要分布在端脑、间脑和小脑。受感染的细胞明显收缩、致密变化和嗜碱性。包涵体常为圆形,大小不一。透射电镜下,在感染细胞的细胞质可观察到含有病毒粒子的致密体。病毒粒子呈等面体,无外膜,直径为25~28nm,随机分布在细胞质或在致密体内排列成品格状。致密体大小不一。偶尔观察到较大致密体的外膜已破裂,病毒粒子被释放到细胞质。  相似文献   

8.
1993年对虾暴发性流行病的患病对虾经光镜组织病理学研究和电镜观察,在对虾的皮下组织(包括前肠上皮、后肠上皮、真皮和鳃等)、结缔组织、造血组织、触角腺及血淋巴细胞等的细胞核均发现核肿大和深的嗜酸性着色。在电镜下,病变组织的细胞核内为一种杆状病毒充满,病毒大小为120nm×360nm,有囊膜,在细胞内不形成核型多角体或颗粒体类包涵体,属于杆状病毒属的无包涵体型杆状病毒亚群,即C型杆状病毒亚群。根据该对虾暴发性流行病的症状、病毒感染的靶组织和病毒的特征,该病毒被认为是一种新的对虾病毒,暂定名为皮下及造血组织坏死杆状病毒。  相似文献   

9.
2000~2002年,应用光镜和电子显微技术对AVND发生期间栉孔扇贝(Chlamys farreri)各主要组织器官病理变化进行了连续观察。光镜观察显示,除生殖腺、闭壳肌外,濒死栉孔扇贝的外套膜、鳃、肾、消化腺和肠组织都有不同程度的组织病理变化。病灶主要出现在上述各器官的结缔组织以及上皮组织,病理变化表现为细胞核肿大、固缩、破裂,核染色质边缘化或空泡化,受感染细胞崩解、脱落,留下大片均质无结构的空白区域,形成凝固性坏死,结缔组织细胞质中有嗜碱性包涵体样颗粒存在。电镜观察显示,在病灶出现的组织细胞内,细胞核染色质异常凝集和边缘化、核膜周隙扩张或溶解。细胞器病理变化明显,内质网扩张,核糖体脱落,有髓鞘样小体出现;线粒体肿大、嵴融解,整个细胞出现解体现象。病变的结缔组织细胞与间质细胞细胞质中有大量直径为130~170nm、具有囊膜的球形病毒粒子存在,负染电镜观察表明,病毒囊膜表面覆有长20nm放射状纤突。病毒的发生基质在细胞质内,并被一膜性结构所包围。病毒在宿主细胞中的繁殖分为3个阶段,即病毒发生期、病毒装配期和病毒释放期。病理学观察证明,病毒感染与病理变化具有明显的相关性。  相似文献   

10.
应用免疫技术检测牙鲆组织内的淋巴囊肿病毒   总被引:12,自引:0,他引:12  
应用免疫荧光抗体技术(IFAT)和标记链亲和素-生物素(LSAB)免疫组化法对患淋巴囊肿病牙鲆(Paralichthys olivaceus的肝、脾、肾、胃、幽门、肠、心脏、性腺、鳃、表皮10种组织进行了检测,结果发现体表有囊肿症状病鱼的胃、肠、鳃和表皮组织内有淋巴囊肿病毒存在;体表未见囊肿症状病鱼的胃、肠和表皮组织内也检测到了病毒,说明这两种免疫技术可以应用于牙鲆淋巴囊肿病的检测与诊断。同时本文还对淋巴囊肿病毒通过消化道感染的可能进行了探讨。  相似文献   

11.
Grouper Epinephelus spp. is one of the most important mariculture fish species in China and South-East Asian countries. The emerging viral diseases, evoked by iridovirus which belongs to genus Megalocytivirus and Ranavirus, have been well characterized in recent years. To date, few data on lymphocystis disease in grouper which caused by lymphocystis disease virus (LCDV) were described. Here, a novel LCDV isolate was identified and characterized. Based on the sequence of LCDV major capsid protein (MCP) and DNA polymerase gene, we found that the causative agents from different species of diseased groupers were the same one and herein were uniformly defined as grouper LCDV (GLCDV). Furthermore, H&E staining revealed that the nodules on the skin were composed of giant cells that contained inclusion bodies in the cytoplasm. Numerous virus particles with >210 nm in diameter and with hexagonal profiles were observed in the cytoplasm. In addition, phylogenetic analysis based on four iridovirus core genes, MCP, DNA polymerase, myristoylated membrane protein (MMP) and ribonucleotide reductase (RNR), consistently showed that GLCDV was mostly related to LCDV-C, followed by LCDV-1. Taken together, our data firstly provided the molecular evidence that GLCDV was a novel emerging iridovirus pathogen in grouper culture.  相似文献   

12.
程顺峰 《水产学报》2006,30(4):544-548
以牙鲆淋巴囊肿病毒(LCDV)为抗原免疫Balb/c小鼠,而后将小鼠脾细胞与P3U1骨髓瘤细胞融合,以囊肿组织冰冻切片的免疫荧光染色筛选杂交瘤细胞,阳性结果显示特异性块状荧光信号集中在囊肿细胞的细胞质边缘部分,且多个荧光信号相连呈现链圈状,有限稀释 法克隆阳性杂交瘤细胞,三次克隆后获得4株稳定产生抗LCDV抗体的单克隆杂交瘤细胞株(1A8、1D7、2B6、2D11)。应用Western-blotting法分析单抗识别蛋白的分子量,结果显示,单抗1D7 和2B6均能特异性结合一条分子量116 kD病毒多肽;应用免疫电镜技术定位单抗识别的抗原决定簇,结果发现胶体金颗粒集中吸附在病毒粒子衣壳周围,且背景清洁,无散在的金颗粒或其他污染物。实验结果说明分子量约为116 kD的蛋白多肽为LCDV病毒衣壳蛋白,且具有线性抗原决定簇。  相似文献   

13.
Abstract. A lymphocystis infection is described from aquarium-held snakeskin gourami, Trichogaster pectoralis (Regan). The cytoplasm of the hypertrophic cells revealed virus particles of extended hexagonal profiles with thin two-layered capsids. Subsequent examination of the fish 4 months later revealed hypertrophic cells showing varying degrees of collapse and degradation. The virus particles loading such cells were of regular hexagonal profiles with thick three-layered capsids.  相似文献   

14.
Abstract. Viral erythrocytic necrosis (VEN) has been associated with large epizootics and high mortality in Pacific herring, Clupea harengus pallasi (Valenciennes), from two different locations in south-eastern Alaska, USA. Clinical signs of disease included whirling, pale gills, watery colourless blood, discoloured livers, pathog-nomonic magenta erythrocytic inclusion bodies and histopathological changes consistent with other infectious haemolytic anaemias in higher animals. Transmission electron microscopy confirmed the presence of iridovirus-type particles associated with the cytoplasmic erythrocytic inclusion bodies. Other apparently healthy herring of various age classes from four additional areas in south-east Alaska also had clinical signs of VEN suggesting a wide distribution of the virus in Alaskan Pacific herring populations. Evidence regarding the two herring epizootics indicated that osmoregulatory stress may have precipitated mortalities in fish having severe anaemia caused by the VEN virus. This is the first reported occurrence of VEN in Alaska and the first natural epizootic known to be associated with the disease.  相似文献   

15.
淋巴囊肿病毒结构蛋白及其抗原性分析   总被引:4,自引:1,他引:3       下载免费PDF全文
病鱼为威海水产养殖场感染淋巴囊肿病的牙鲆(Paralichthys olivaceus),收集病鱼的囊肿组织,匀浆破碎,采用差速离心和蔗糖密度梯度离心方法,分离纯化淋巴囊肿病毒粒子.负染后,电镜观察证实获得的病毒纯度高,杂质极少,病毒粒子呈近似于圆形的多角形,结构完整.纯化的淋巴囊肿病毒粒子经SDS-PAGE,硝酸银染色后,电泳图谱清晰显示病毒结构蛋白带共有22条,且分子量主要集中在123~26 kD.应用Western blotting法分析病毒结构蛋白的抗原性,结果显示,分子量分别为123.55 kD、65.292 kD和54.438 kD的3条蛋白带发生了免疫反应,其中分子量为65.292 kD的蛋白带反应强度明显高于其他2条蛋白带.本研究旨为确定淋巴囊肿病毒主要衣壳蛋白提供基础依据.[中国水产科学,2006,13(3):415-420]  相似文献   

16.
中华绒螯蟹小核糖核酸病毒病及其组织病理学   总被引:40,自引:3,他引:37  
陆宏达 《水产学报》1999,23(1):61-68
本文对所谓“抖抖病”的中华绒螯蟹病蟹病因进行了分析研究。经电镜观察,病蟹的心脏、了、鳃、肠和肝脏胰腺中存在着球状病毒粒子,病毒无囊膜,直径为28-32nm左右,分布在细胞浆内,不形成包涵体。从病毒形态和染色反应特性确定该病毒为小RNA病毒科病毒。经人工注射病蟹组织浆除菌上清液,被感染的健康蟹出现在自然发病蟹足严重抖动等一样的症状,表明病囊中的小RNA病毒为该病原。病蟹病理特征为:细胞肿大,核溶解七  相似文献   

17.
A new marine fish cell line, TK, derived from turbot (Scophthalmus maximus) kidney, was established by the method of trypsin digestion and subcultured for more than 50 passages over a period of 300 days. The TK cells were maintained in Minimum Essential Medium Eagle (MEM) supplemented with HEPES, antibiotics, fetal bovine serum (FBS), 2-Mercaptoethanol (2-Me), and basic fibroblast growth factor (bFGF). The suitable growth temperature for TK cells was 24°C, and microscopically, TK cells were composed of fibroblast-like cells. Chromosome analysis revealed that the TK cell line has a normal diploid karyotype with 2n = 44. Two fish viruses LCDV-C (lymphocystis disease virus from China) and TRBIV (turbot reddish body iridovirus) were used to determine the virus susceptibility of TK cell line. The TK cell line was found to be susceptible to TRBIV, and the infection was confirmed by cytopathic effect (CPE) and transmission electron microscopy, which detected the viral particles in the cytoplasm of virus-infected cells. Finally, significant green fluorescent signals were observed when the TK cells were transfected with pEGFP-N3 vector, indicating its potential utility for fish virus study and genetic manipulation.  相似文献   

18.
任素莲 《水产学报》2002,26(3):265-269
在患“红肉病”文蛤的消化盲囊上皮细胞中发现了一种球形病毒及其发生基质。病毒粒子呈球形,无囊膜,直径约50-80nm,在细胞质内形成多泡状的包涵体并进行病毒粒子的装配。受感染的细胞具有明显的病理变化,主要表现为核固缩或肿胀并出现核空泡,内质网膨胀、大部分转化泡状,线粒体溶解或固缩,溶酶体数量增多等。  相似文献   

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