大海马育苗池水华发生期间细菌动态及相关理化参数

大海马(HippocampuskudaBleeker)育苗池为水泥池,规格为4.0m×6.0m×1.6m,分设正常池与水华发生池,各设3个平行池,每池养殖幼海马约1000尾,测定水体水华发生时水体细菌数量和理化因子变化的规律。结果显示,当水温高于24℃时,育苗池易发生水华,形成水华的优势藻为铜绿微囊藻(Microcysticaeruginosa)。正常育苗池水体中异养细菌总量平均比水华池的高出近1个数量级。正常池和水华池表层异养细菌变动范围分别为2.50×103～7.23×104CFU/mL和4.75×102～6.90×103CFU/mL,水华池比正常池减少了60%～99%;底层异养细菌变动范围则分别为4.75×103～7.53×104CFU/mL和6.25×102～1.50×104CFU/mL,水华池比正常池降低了73%～97%。水华池与正常池底层异养细菌数量的差异极显著(P<0.01)。两组池表层弧菌数量变动范围分别为0.85×102～7.19×103CFU/mL和0.33×102～8.92×102CFU/mL,水华池比正常池减少5%～93%;底层弧菌数量变动范围则分别为8.30×102～1.16×104CFU/mL和0.53×102～2.04×103CFU/mL,水华池比正常池降低2%～97%。水华发生池的底层和表层的细菌数量与正常池的差异均显著(P<0.05)。同时,水华池平均水温比正常池约低1℃,溶解氧(DO)比正常池的降低了22%～33%;而水华池中的氨氮含量则为正常育苗池的1.41～2.34倍。水华发生时,育苗池表层和底层水体中弧菌数量比正常池的分别减少了61%～87%和82%～93%。     

三峡水库小江回水区水华期间水环境因子对微囊藻丰度的影响

小江是三峡库区北岸流域面积最大的一条支流，其回水区富营养化备受关注。2016年4月下旬至5月，中旬小江回水区高阳断面和双江断面爆发了水华。以高阳断面和双江断面为监测区域，采用冗余分析方法，探究水华爆发期微囊藻丰度与水环境因子的关系，以期找出水华应急阶段关键水环境因子，为小江回水区微囊藻水华预警监测和防控提供科学依据。结果表明，随着水深逐渐增加，微囊藻的丰度逐渐减少，高阳断面上表层（水下0.5 m）、中层（1/2水深）、底层（底部以上0.5 m）微囊藻丰度为2467.67×104个/L、792.58×104 个/L和729.72×104 个/L；双江断面表、中、底层分别为1337.57×104个/L、298.75×104个/L和108.79×104个/L；高阳断面微囊藻丰度明显高于双江断面。高阳断面的水温、溶解氧和高锰酸盐指数明显高于双江断面，其他水环境指标的差异性不显著。冗余分析Monte Carlo检验结果显示，高阳断面溶解氧（P=0.045）与微囊藻丰度呈显著正相关，电导率（P=0.047）与微囊藻丰度呈显著负相关，双江断面水温（P=0.002）与微囊藻丰度呈极显著正相关，透明度与微囊藻丰度呈显著负相关（P=0.011）。     

勤得利湾浮游植物群落结构特征

2003年5、7、9、11月对勤得利湾浮游植物的种类组成结构特征进行了研究。结果表明:浮游植物共计7门69种,以绿藻、硅藻为主,分别占52.36%和20.11%。近亲鱼腥藻、铜绿微囊藻、普通小球藻、柱形栅列藻、四尾栅列藻、颗粒直链藻、细长锥囊藻、四角十字藻、浮球藻、含糊囊裸藻、针形纤维藻、尺骨针杆藻等为优势种。浮游植物数量为1750.8×104ind./L,以硅藻为主,数量为517.3×104ind./L,占29.55%;生物量为16.082mg/L,硅藻最高,为7.285mg/L。浮游植物季节变化比较明显,数量夏季最高为2801.4×104ind./L,生物量以夏季最高28.235mg/L;水平分布采样点Ⅲ最高,平均为2158.6×104ind./L,采样点Ⅳ生物量最高为12.296mg/L。多样性指数变化是夏季>秋季>冬季>春季。均匀度指数变化是秋季>夏季>冬季>春季。     

光、氮和半连续培养更新率对微绿球藻生长与采收量的影响

对水产养殖中的主要饵料微绿球藻(Nannochloropsis oculata (Droop) Hibberd)进行了5×3×2析因试验,培养液NO-3-N水平分别设置为0、3、6、12、24 mg/L,光照强度分别为22.9 μmol/(m2·s)、43.2 μmol/(m2·s)、80.4 μmol/(m2·s),更新率分别为10%和25%,研究了光、氮和半连续培养更新率对微绿球藻生长、采收量的影响.协方差分析结果显示,NO-3-N水平、光照强度、更新率及其交互作用对细胞密度、生长率和采收量的影响均存在显著差异(P<0.001),以更新率影响最大,其次是光照强度,影响最弱为NO-3-N水平.更新率25%时,平均细胞密度(753.2×104/mL)显著低于10%更新率下的细胞密度(1 737.5×104/mL),但平均生长率和采收量都显著高于更新率10%时的生长率和采收量,分别为0.349/d和4.69×108/d.在光照强度22.9 μmol/(m2·s)下,细胞密度、生长率和采收量都显著低于其他组,其最大值均在80.4 μmol/(m2·s)光照强度组,该组细胞密度、生长率和采收量分别为1 721.1×104/mL、0.283/d和6.51/×108/d.在不同NO-3-N水平处理下,不添加NO-3-N时的细胞密度、生长率和采收量都最低,3 mg/L时次之,6 mg/L以上组(包括6 mg/L组)最高.研究结果还表明,更新率增加时,不仅光衰减变小,生长率随之变大,而且培养液中NO-3-N浓度也随之增加,从而促进了光、氮间的平衡利用,使采收量相应增加;但更新率增加细胞密度下降.显然,更新率是影响采收量的最主要因素,且存在一个最适更新率使采收量最大,这些结果对微藻半连续培养的合理更新与科学施肥有一定的应用价值.     

光照历史对小檗碱化感抑藻效应的影响

蓝藻水华频发严重制约淡水养殖业的健康发展,铜绿微囊藻(Microcystic aeruginosa)为富营养化水体中的优势种;中草药黄连的主要化感物质小檗碱(C20H18NO4)能够有效抑制铜绿微囊藻的生长,并具有环境友好和毒副作用小的特点,光照强度会影响小檗碱对铜绿微囊藻的抑杀效果。将铜绿微囊藻在光照和黑暗条件下分别培养8 d后重新接种至相同的初始密度,添加不同浓度小檗碱(2 mg/L和4 mg/L)后置于光照条件下继续培养6 d,通过分析测定铜绿微囊藻细胞密度和叶绿素荧光参数,研究施药前光照历史对小檗碱化感抑藻效应的影响。结果表明,铜绿微囊藻在黑暗胁迫8 d后表现出超补偿生长效应;2 mg/L小檗碱不能有效抑杀铜绿微囊藻,藻细胞密度和叶绿素荧光参数(Fv/Fm、ΦPSⅡ、ETRmax、Yield’)均随培养时间延长先下降后升高,6 d时施药前黑暗处理组的藻细胞密度显著高于施药前光照处理组(P<0.05);4 mg/L小檗碱能够有效抑藻,6 d时藻细胞全部死亡,且施药前黑暗处理组与施药前光照处理组藻细胞密度和叶绿素荧光参数下降趋势相同;黑暗胁迫诱导的超补偿生长效应不会影响高浓度(4 mg/L)小檗碱的化感抑藻效应,但会影响低浓度(2 mg/L)小檗碱的化感抑藻效应。     

鳗鱼养殖常用药物对铜绿微囊藻繁殖的影响

本文研究了鳗鱼养殖常用6种药物对铜绿微囊藻繁殖的影响,结果表明,二氧化氯、二氯海因、土霉素、敌百虫和高锰酸钾对铜绿微囊藻的96EC50依次为：2.09g/L、66.26mg/L、93.85mg/L、153.54mg/L、1.62mg/L,其对铜绿微囊藻繁殖的抑制效应强度分别为：高锰酸钾〉二氯海因〉土霉素〉敌百虫〉二氧化氯;而甲苯咪唑在0.25-50mg/L验浓度范围内对铜绿微囊藻的繁殖表现出积极的效应,随着浓度的增大铜绿微囊藻的繁殖逐渐递增。     

3种微藻对海水集约化对虾养殖尾水氮磷的去除效果

基于对虾生物絮团集约化养殖尾水含有高浓度硝态氮和磷酸盐的特征，比较分析钝顶螺旋藻（Spirulina platensis）、牟氏角毛藻（Chaetoceros muelleri）、盐藻（Dunaliella sp.）3种微藻在配制尾水中的存活生长状况及其对无机氮磷的去除效果，以期筛选出适宜的微藻用于后续尾水净化技术。采用显微镜计数法测定藻细胞密度，国标法测定总无机氮、氨氮、硝态氮、亚硝态氮和磷酸盐的含量。结果显示，钝顶螺旋藻在实验前后的藻细胞密度变化不大（P>0.05），约为3.32×106 个/mL和5.88×106 个/mL；牟氏角毛藻和盐藻细胞密度有明显增加（P<0.05），分别从初始的4.00×104 个/mL和2.50×105 个/mL升高至实验结束时的1.66×106 个/mL和1.06×107 个/mL。经过16 d实验，钝顶螺旋藻组对硝态氮和总无机氮去除率分别为79.60%和46.06%，显著高于其他各组（P<0.05），第8天时对磷酸盐的去除率可高达98.55%；牟氏角毛藻组16 d的磷酸盐去除率为98.25%，显著高于其他各组（P<0.05）。研究表明，3种微藻均可在对虾养殖尾水环境中存活，且对尾水氮磷具有较好的净化效果。     

铜绿微囊藻对克氏原螯虾幼虾存活及成虾几种酶类的影响

为研究铜绿微囊藻对克氏原螯虾的影响,将克氏原螯虾幼虾及成虾暴露在不同浓度的铜绿微囊藻溶液中,研究了铜绿微囊藻对幼虾存活率、外部形态及肝胰腺超微结构的变化和成虾总血细胞密度(THCs)、血清中血蓝蛋白含量、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化物酶(POD)、酚氧化物酶(PO)以及鳃丝Na⁺/K⁺-ATP酶活性的影响。结果表明,(1) 高浓度的铜绿微囊藻能显著降低幼虾的存活率。(2) 显微观察表明,1.0×10⁷/mL及以上浓度的铜绿微囊藻液中培养7 d后,幼虾肝胰腺呈现暗红色,并伴有一定的肿大现象,透射电镜显示其肝胰腺细胞受到损伤。(3) 高浓度的铜绿微囊藻能造成应激反应,THCs在暴露1 d后显著升高并稳定在较高水平;血蓝蛋白含量变化不明显,只在5 d时显著低于对照组(P<0.05),PO活性都表现出先显著性增强(P<0.01),回落后又有所增加的波动趋势;血清中的T-SOD活力在1 d后受到抑制,5 d时被激活至较高水平;POD活性都表现出先显著性增强(P<0.01),回落后又有所增加的波动趋势;鳃丝中Na⁺/K⁺-ATP酶活性在暴露1 d后显著降低(P<0.01)后回升,并最终维持在较高水平。研究结果表明,高浓度的铜绿微囊藻能造成克氏原螯虾幼虾存活率显著降低并影响其肝胰腺超微结构;而克氏原螯虾成虾对铜绿微囊藻有相对较强的耐受力,血淋巴的酶学变化表明,暴露在铜绿微囊藻水体的成虾经历过应激反应并有逐步适应的过程。     

大型溞和金鱼藻对三种微藻增殖的影响

为了解生物操纵和恢复水生植被的抑藻效果,分别以大型溞(Daphnia magna)和金鱼藻(Ceratophyllum demersum)作为浮游动物和大型沉水植物的代表,以小环藻(Cyclotella sp.)、小球藻(Chlorella vugaris)和铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)作为浮游植物的代表,在温度25℃、光照度2 600-3 000 lx和光暗比14 h∶10 h的条件下,研究三种藻共培养和单一加入大型溞、金鱼藻以及同时加入大型溞和金鱼藻时各自生物量的变化。结果表明:三种藻共培养时,最终铜绿微囊藻占总藻细胞数的95.9%,成为优势种;单一加入大型溞或金鱼藻时,三种藻的增长被显著抑制,特别是铜绿微囊藻,最终小球藻占优势,单一加入大型溞的抑制效果更好;同时加入大型溞和金鱼藻时,大型溞的数量增加了55.6倍,金鱼藻的质量增加了42%,三种藻提前进入衰减状态,小环藻、小球藻和铜绿微囊藻达到最大藻细胞密度时的增殖抑制率分别为36.02%、-5.46%、99.91%,大型浮游动物和沉水植物的联合作用能更好地控制浮游藻类的增殖。     

Fe~(3+)对鳗池中铜绿微囊藻和小球藻生长的影响

以铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)和小球藻(Chlorella vulgaris)为研究对象,分别测定了初始Fe3+摩尔浓度为0、1、10、15、20、25、50、100μmol·L-1时铜绿微囊藻和小球藻的生长曲线和叶绿素a含量。结果表明,2株藻均存在铁限制,其中缺铁对铜绿微囊藻生长的限制较为显著,当初始Fe3+浓度为0,1μmol·L-1时,其生长曲线呈现出负增长的趋势;铜绿微囊藻的μmax出现在25μmol·L-1,小球藻的μmax则出现在20μmol·L-1;当浓度为100μmol·L-1时,2株藻的生长均受到了一定的抑制,但此时的生长速度仍高于低Fe3+组。     

Comparison of Growth and Fatty Acids Composition of Freshwater Rotifer, Brachionus calyciflorus Pallas, Fed with Two Types of Microalgae at Different Concentrations

As algae and their concentrations are important factors for mass culture of rotifer, two experiments were conducted to find the effects of two types of algae, Chlorella sp. and Scenedesmus obliquus, and three concentration of chosen algae (0.1 × 10⁶, 1 × 10⁶, and 10 × 10⁶ cells/mL) on growth and fatty acid composition of freshwater rotifer, Brachionus calyciflorus. The result of the first experiment showed that the maximum density of rotifer was significantly higher when fed with Chlorella sp. (478 individuals/mL) than fed with S. obliquus (328 individuals/mL). Mean population growth rate (r) was 0.61 and 0.44 for rotifer fed with Chlorella sp. and S. obliquus, respectively. The amount of highly unsaturated fatty acid (HUFA) in rotifer fed with Chlorella sp. (3.32%) was relatively more than those fed with S. obliquus (2.65%). Then, Chlorella sp. was selected based on better performance. In the second experiment, the maximum rotifer density of 108 ± 8, 489 ± 47, and 493 ± 51 individuals/mL was reached after 5 d for the respective Chlorella sp. concentrations; at concentration of 10 × 10⁶ cells/mL, the maximum density of 1820 ± 47 individuals/mL was obtained. Mean growth rate at mentioned concentrations was 0.18, 0.42, and 0.51/d, respectively. Increase in algal concentration was associated with a relative increase in HUFA and decrease in monounsaturated fatty acid.     

太空搭载小球藻（Chlorella vulgaris）子代群体新品系的筛选、培养及其营养组成分析

本文以经过太空搭载返回地面后保存的小球藻（Chlorella vulgaris）藻种T0为实验材料,从提高小球藻生长速度和促进小球藻油脂富集两个方面考虑,对小球藻生长的环境因子和培养基成分进行探讨和研究;最终经过两次筛选获得速长-油脂高产的株系TY31.实验结果表明,小球藻在140 μmol·m-2·s-1光照强度、23℃培养温度、以3.75 mmol/L的NH2 CONH2为氮源、以0.12 mmol/L的K2HPO4为磷源的最佳培养条件下,细胞生长速度加快,生长期变长,蛋白、脂肪及脂肪酸含量增加.研究发现,以第一次筛选的小球藻藻株T9为出发株,采用改良的BG-11培养基进一步选育的速长-油脂高产株系TY31,其最终细胞密度增加11.06×106 mL-1,脂肪含量增加6.50％,脂肪酸含量增加3.76％,具有应用于生物能源研究的潜力,为海洋微藻的开发利用奠定了基础.     

光照强度对香溪河水华类型影响的模拟实验

探究光照强度对小球藻生长的影响,为香溪河水华预测提供理论依据。小球藻藻种为香溪河河水中平板分裂后逐步纯化所得。培养箱为40 L的方形塑料箱,四周用遮光布严实包裹。培养液30 L。培养液为用放置24 h后的自来水稀释25倍后的BG-11标准培养基,磷浓度0.285 mg/L,氮浓度9.48 mg/L,p H值7.3~7.8。恒温加热棒控制水温24℃。以平行布置的8根日光灯管作为光源,开关不同数量的日光灯管设定光强梯度,光照梯度为0、800、1 500、2 400、3 200、4 500、6 000 lx。采用电磁式真空泵曝气,曝气比率设置为10%。设置2组平行实验,每个培养箱中加入处理后的藻液10 m L。实验过程为期12d,每天上午8∶00取样,监测指标为光密度、叶绿素a、溶解性总磷、溶解性总氮。结果表明,光照强度在800~1 500 lx时易发生长周期的绿藻水华,绿藻水华转变为蓝藻水华的可能性低;3 200~4 500 lx时易发生短周期的绿藻水华;6 000 lx时发生蓝藻水华的风险很大。香溪河在光照强度小于3 200 lx时不必做蓝藻水华防御措施;光照强度大于4 500 lx时,需提前做适当的蓝藻水华防御措施。     

２株污染小球藻的除菌技术

本论文在考察了普通小球藻(Chlorella vulgaris)和蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)对青霉素、硫酸链霉素和制霉菌素三种抗生素敏感性的基础上，研究了对已污染藻种进行无菌化的几种分离方法。结果表明，两株小球藻对抗生素的敏感性有明显差异；青霉素、链霉素与制霉菌素的联合使用与单独使用对藻生长的影响差别不是很大；液体培养中加入组合抗生素能够暂时抑制藻液中杂菌的生长，但并不能得到纯培养藻种；离心清洗与抗生素结合使用能够大量除掉细菌，却使霉菌旺盛生长，说明藻菌间存在复杂的相互关系；连续两次使用添加合适浓度混合抗生素的固体平板最终得到藻的纯培养物。     

小球藻固定化培养的初步研究

用海藻酸钙作固定化载体，初步探讨了海藻酸钠浓度、CaCl2浓度、胶球密度、胶球直径等固定化条件对小球藻（Chlorella vulgaris)生长的影响。确定了优化的固定化条件为：4＃针头、2％的海藻酸钠溶液和0．15mol/L的CaCl2溶液制备固定化小球藻，在含50mL培养液的150mL三角烧瓶内放置250个小球藻胶球时，其生长速度较高，生长周期较长。与游离的小球藻相比，固定化小球藻生长速率慢，但生长周期长。实验结果为微藻固定化技术的应用和发展提供了必要的实验数据和理论基础。     

绿色微囊藻等不同食物对大型生长和脂类成分的影响

The growth and reproduction of Daphnia magna fed with Microcystis viridis and Chlorella spp respectively and 20% fish oil + 80% yeast and yeast were studied. The intrinsic rate of natural increase of Daphnia magna (rm) was 0.243 fed with Microcystis viridis, 0.301 with Chlorella spp., 0.244 with 20% fish oil + 80% yeast and 0.193 with yeast. The result showed that：Daphnia magna fed with Microcystis viridis had lower growth rates than that fed with Chlorella spp. an d 20% fish oil + 80% yeast which both had full fatty acids. And the Daphnia magna fed with yeast was the lowest. So the fatty acids composition of diet may affect the growth of Daphnia magna. This paper further examined total lipids and main HUFA (EPA and DHA) compositions of the continuous three generations of Daphnia magna (in order to get rid of t he effects of former diet) fed with different of above diets (except the yeast). The result showed that:the three generations of the D. magna fed with Microcystis viridis had the lowest total lipids and the percentages of the HUFA (EPA, and no DHA) have a significant decrease and get the lowest EPA in the final experiment because of the very low HUFA especially EPA and DHA in Microcystis viridis. So the results indicate that Microcystis viridis with low HUFA made the lower growth rate, spawn ing rate and hatching rate of Daphnia magna.     

光合细菌对多刺裸腹溞培养的影响

在实验室条件下,采用静止培养法对多刺裸腹溞进行培养实验,研究在以酵母和小球藻为饵料的多刺裸腹溞培养中,添加不同浓度光合细菌对其生长繁殖的影响。结果表明:光合细菌(菌液浓度为48×108cell/ml)添加量为1 mg/L(组2)、2mg/L(组3)、64 mg/L(组8)、130 mg/L(组9)和260 mg/L(组10)时,实验组中多刺裸腹溞的生殖量与空白对照(组1)相比均无差异(P>0.05);光合细菌添加量分别为4 mg/L(组4)和8 mg/L(组5)时,实验组中多刺裸腹溞的生殖量明显多于对照组,差异较明显(P<0.05),其对多刺裸腹溞的增长具有明显的促进作用;在16 mg/L(组6)和32 mg/L(组7)时,实验组中多刺裸腹溞的生殖量达到最高峰,分别为对照组的1.54倍和1.40倍,差异十分显著(P<0.05);而当添加量过高,在520~800 mg/L(组11~组14)浓度范围内,实验组中多刺裸腹生殖量呈现急剧下降趋势,显著低于对照组(P<0.05);在本实验设计范围内,浓度等于或高于900 mg/L(组15)时,幼溞在12 d后仍没有达到性成熟,光合细菌对多刺裸腹溞的繁殖明显起抑制作用。以上结果显示,在以酵母与小球藻为饵料的多刺裸腹溞培养中,16~32 mg/L的光合细菌添加量最为适宜,该浓度范围的光合细菌对多刺裸腹溞的生长繁殖具有显著的促进效果。     

盐碱水中地衣芽孢杆菌对铜绿微囊藻生长抑制研究

盐碱地养殖池塘铜绿微囊藻等蓝藻极易爆发,危害养殖生物。基于菌藻平衡原理控制蓝藻是较为有效的措施之一,但在盐碱水中的可行性鲜有报道。本文研究了实验室条件下盐碱水中地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)对铜绿微囊藻生长抑制效果,并探索了其抑藻途径。结果表明：在碳酸盐碱度6.4 mmol?L_^-1、盐度3.5,pH 8.9的盐碱水中,经驯化地衣芽孢杆菌对铜绿微囊藻生长抑制效果明显,地衣芽孢杆菌对初始密度1.0×10_⁶ cells?mL_^-1、6.0×10_⁶ cells?mL_^-1和20×10_⁶ cells?mL_^-1铜绿微囊藻均有明显抑制作用,抑制率分别达到51.8%、65.7%和71.1%。地衣芽孢杆菌无菌滤液对铜绿微囊藻生长也表现出显著的抑制效果,其中无菌滤液加入量为实验水体2%时抑制量最高。2%无菌滤液处理组叶绿素a含量较对照组降低58.8%,铜绿微囊藻光合作用相关基因PSBA1与PSBD1基因表达下调,光合作用途径受到抑制。本实验表明盐碱水中地衣芽孢杆菌对铜绿微囊藻具有较好的抑制效果,为盐碱地水产养殖中蓝藻控制提供理论支撑。     

不同食物组合与投喂方法对蒙古裸腹溞生长和生殖的影响

蒙古裸腹(Moina mongolica Daday)是旧大陆上分布的一种盐水裸腹溞[1],1988年在我国被首次报道[2].有关该溞的生物学和培养技术已被较为系统地研究[3].20世纪90年代以来,该溞在我国沿海地区逐渐被用做海水和半咸水鱼、虾、蟹人工育苗生产中的活饵料.