3种虾超氧化物歧化酶部分理化性质比较

测定了Ca2+、Cu2+、Zn2+、Mn2+及SDS、EDTA不同浓度对日本对虾、克氏原螯虾、凡纳滨对虾肌肉组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响及其肌肉、鳃、肝胰腺组织中SOD活性的差异,并利用电泳技术研究了组织同工酶.结果发现.除Ca2+对日本对虾肌肉组织中SOD活性稍有抑制作用.Ca2+、Cu2+、Zn2+、Mn2+4种金属离子对3种虾肌肉组织中SOD活性则是低浓度起促进作用,高浓度具有明显的抑制作用,但抑制程度不同.除EDTA对凡纳滨对虾微有促进作用.SDS、EDTA具明显抑制作用.SOD在肌肉、鳃中差异不明显,与肝胰腺差异显著;肝胰腺中SOD表现出种属差异性.电泳结果表明,在这3种虾不同组织中SOD的条带数和电泳迁移速率明显不同.同工酶经乙醇一氯仿和H2O2处理后活性染色法表现出的电泳带主要为Cu.Zn-SOD.     

日本蟳同工酶组织特异性及生化遗传分析

以日本虫寻为研究材料,采用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳方法,分析了肌肉、眼球、鳃、心脏和肝胰腺5种器官或组织中LDH、ADH、MDH、ACP、AKP、GDH、R-AMY、α-AMY、MEP、EST和SOD共11种同工酶的表达情况。日本虫寻体内同工酶的表达具有明显的组织特异性。在实验中共检测了38个位点,其中Adh、Est-3、M ep-5、α-Amy-1、sMdh-3和Akp-4共6个多态位点,多态位点比例为15.79%,平均杂合度为0.09。     

泥鳅不同组织同工酶的特异性表达分析

应用垂直平板不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳方法研究了泥鳅成体的心脏、肝胰脏、肾脏、鳃、肌肉5种组织中酯酶、过氧化物酶、过氧化氢酶同工酶的表达情况。试验结果表明,泥鳅3种同工酶在肝胰脏中表达活性较高。酯酶同工酶在5种组织中均大量存在,且条带较多;过氧化物酶在肾脏中表达较强,肌肉中表达最弱;过氧化氢酶在鳃、肌肉组织中表达不强,且条带较少,不利于分析,但其表达差异性明显。     

银鲳不同组织中4种同工酶的表达差异

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,分析了银鲳(Pampus argenteus)脾脏、肝脏、肌肉、心脏、肾脏等5种组织中酯酶(EST)、乳酸脱氢酶(LDH)、谷氨酸脱氢酶(GDH)、乙醇脱氢酶(ADH)等4种同工酶的表达模式,并对各种同工酶的酶谱进行了分析。结果表明:这4种同工酶在银鲳5种组织中的分布均存在一定的组织特异性,其与各组织的生理机能密切相关。银鲳4种同工酶共记录出61条酶带,其中EST被检测出的酶带数量最多也较复杂,ADH同工酶酶带数量最少,只有6条酶带被检测到,LDH和GDH分别检测到16条和9条酶带;组织特异性主要表现在位点表达和酶活性强弱不同这两个方面,GDH1和ADH2只在肝脏中表达。     

日本(虫寻)同工酶组织特异性及生化遗传分析

以日本蟳为研究材料,采用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳方法,分析了肌肉、眼球、鳃、心脏和肝胰腺5种器官或组织中LDH、ADH、MDH、ACP、AKP、GDH、R-AMY、α-AMY、MEP、EST和SOD共11种同工酶的表达情况.日本蟳体内同工酶的表达具有明显的组织特异性.在实验中共检测了38个位点,其中Adh、Est-3、Mep-5、α-Amy-1、sMdh-3和Akp-4共6个多态位点,多态位点比例为15.79%,平均杂合度为0.09.将发育至卵裂期的金鱼胚胎暴露于不同浓度的微囊藻毒素中,结果显示,金鱼胚胎的孵化率逐渐降低,而畸形率升高,且毒素致畸的半数有效质量浓度EC50=2 866.2μg/L.主要畸形症状是：胚体浑浊、模糊或自行解体,弯体,弯尾,孵化异常,卵黄破裂逸出等.     

中国绿螂组织中同工酶表达的差异

运用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳方法研究了中国绿螂鳃、足、肝胰腺、外套膜、精巢和卵巢6种组织中ADH、MDH、ME、LDH、α-AMY、G6PD、SOD、SDH、EST和ACP同工酶的分化表达模式。除MDH外,其它同工酶具有明显的组织特异性。6种组织中肝胰腺同工酶系统最完善,具备所检测的10种同工酶,并且酶活性也最强,与其担任的重要生理功能相适应。精巢和卵巢组织中的同工酶表达有较大差异。     

养殖克氏原螯虾体内白斑综合征病毒的绝对定量分析

近年来克氏原螯虾的养殖受到WSSV的威胁,病毒在宿主组织中的绝对定量对于了解病毒的致病性具有重要意义,但克氏原螯虾组织中WSSV的绝对定量分布还有待研究。实验调查了湖北省5个主养区克氏原螯虾WSSV的感染率,结果表明80%以上克氏原螯虾都携带有WSSV。采用WSSV-VP28蛋白特异性抗体对克氏原螯虾提取蛋白进行Western Blot检测,在WSSV-PCR阳性样品中可检测到VP28特异性条带,在WSSV-PCR阴性样品中没有检测到相应条带。采用实验室建立的WSSV绝对定量PCR方法,对携带病毒的克氏原螯虾6个组织(鳃、胃、肠、血淋巴细胞、肝胰腺和心脏)进行检测。结果表明,在鳃、胃和肠可检测到较多病毒量(约108拷贝/mg),其次是血淋巴细胞(107拷贝/mg)、肝胰腺(106拷贝/mg),在心脏中病毒的含量最低(103拷贝/mg),表明病毒的复制存在组织特异性。结果显示WSSV主要存在于消化系统中,预示着克氏原螯虾可能主要在摄食过程中感染WSSV;不同地区克氏原螯虾组织病毒携带量表现出一定差异,预示着WSSV感染可能受到环境因素的影响。     

池塘和稻田养殖模式下克氏原螯虾肌肉和肝脏营养成分比较

通过对池塘和稻田2种养殖模式下克氏原螯虾(Procambarus clarkii)的肌肉常规营养成分进行测定,同时,对肌肉和肝胰腺的氨基酸和脂肪酸组成进行测定,从而对其营养品质进行分析评价。结果显示,2种养殖模式下克氏原螯虾粗蛋白和粗脂肪无显著性差异(P>0.05),池塘养殖模式下水分显著高于稻田模式(P<0.05),而粗灰分显著低于稻田模式(P<0.05)。在2种模式下肌肉和肝胰腺中均检测出17种氨基酸,包括7种必需氨基酸和4种鲜味氨基酸。2种养殖模式下肌肉的必需氨基酸总含量占氨基酸总量(WEAA/WTAA)值无显著性差异(P>0.05),而肝胰腺中池塘养殖模式WEAA/WTAA值显著高于稻田模式(P<0.05)。根据氨基酸评分(AAS)和化学评分(CS),克氏原螯虾肌肉和肝胰腺中第一限制氨基酸均为甲硫氨酸＋胱氨酸,肌肉中第二限制氨基酸为缬氨酸,肝胰腺中第二限制氨基酸为亮氨酸。另外,在肌肉中检测出20种脂肪酸,而在肝胰腺中检测出24种脂肪酸,其中,肌肉和肝胰腺中饱和脂肪酸含量最高的是棕榈酸(C16:0);单不饱和脂肪酸含量最高的是油酸(C18:1n9c)。研究表明,池塘和稻田2种养殖模式下的克氏原螯虾,肌肉和肝胰腺均具有较高的食用价值和营养价值。     

感染桃拉综合症病毒的凡纳滨对虾体内4 种同工酶酶谱的变化

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳法，对凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）成体的复眼、肝脏、心脏、鳃和肌肉等5种组织中的酸性磷酸酶（ACP）、碱性磷酸酶（AKP）、酯酶（EST）和过氧化物酶（POD）4种同工酶进行研究，并将健康虾与感染桃拉综合症病毒（TSV）病虾的同工酶酶谱进行比较。结果表明，这4种同工酶在凡纳滨对虾体内的不同组织均有分布，但在酶活性和条带数量上存在不同程度的组织特异性，其中4种同工酶均在肝脏组织中表达最强，ACP和POD在肌肉中、EST在复眼中表达最弱，AKP在复眼中不表达。感染TSV后，病虾的ACP和AKP均出现酶带数量减少和酶活性降低，如病虾的ACP酶谱在肝脏、心脏和鳃中缺失的酶带数分别为2、1和1条，酶活性也呈现下降；AKP酶谱在肝脏、心脏和肌肉中缺失的酶带数分别为3、4和3条，且酶活性均明显降低；而病虾的EST和POD表达的酶带数和酶活性却均有明显增加，尤其是在肝脏和心脏中，EST分别新增3条和5条酶带，POD各新增1条酶带。总之这4种同工酶的表型在健康虾和病虾之间存在着明显的差异，尤其是在肝脏中的变化最为明显，说明肝脏中这4种同工酶的特异性变化可以作为研究凡纳滨对虾桃拉综合症的生理生化指标。     

洞庭湖鲇不同组织SOD同工酶的比较研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法,研究了洞庭湖鲇(Silnrus asotus)5种组织或器官(肌肉、肾脏、肝脏、胰脏和心脏) 中超氧化物歧化酶( SOD) 同工酶的表达情况.结果表明,在鲇组织中共检出SOD同工酶带5条 ( SOD-1、SOD-2、SOD-3、SOD-4和SOD-5),其中SOD-5仅在肝脏中表达,不同组织中SOD同工酶的表达存在差异,表现出明显的组织特异性.