虹鳟鱼精液的冷冻保存

<正> 本研究探讨长期冷冻保存虹鳟鱼精液的可能性。用保存了343天的精液进行授精试验,卵子发眼率接近40%。精细胞内主要阳离子浓度的变化和冷冻解冻过程的关系被作为造成精子受精能力下降的可能因素进行研究。研究发现,在冷冻解冻过程中,精细胞中钠、钙离子增加,钾、镁离子减少。目前,精液长期保存技术为家畜育种工作带来了很多益处。鲑鱼精液保存技术发展也必将促进选育技术的发展。从1960年     

草鱼、鲢鱼、鳙鱼、鲮鱼冷冻精液授精试验

本文介绍了草鱼、鲢鱼、鳙鱼、鲮鱼冷冻精液人工授精试验。对33尾雌鱼的部份卵子进行了授精。各种鱼的平均受精率和最高受精率(括号内是最高受精率)分别是：草鱼44．21％(71.79％)，鲢鱼32．55%(49．78％)，鳙鱼16．55%(46．34％)，鲮鱼31．03％(91．13％)。试验用的冷冻精液一般在液氮中保存60-90天，最长保存时间超过700天。试验表明，在液氮中保存一年甚至两年的冷冻精液，受精能力没有受到显著影响。     

互动平台

畜禽业百事通咨询热线贵州读者赖安家:山区养牛分散,由于条件限制不能适时将母牛送到改良站配种。请问细管冷冻精液能否冷水保存异地输精?百事通:细管冷冻精液不能用冷水保存运输,要用液氮管保存,到达目的地后解冻后输精。细管精液解冻的方法:由液氮罐内迅速取出一支细管冷冻精     

不同冷冻保护剂在猪精液冷冻中的作用分析

本实验采用一定浓度的甘油、EG、DMA、DMSO及其两两组合物作为冷冻保护剂。用含冷冻保护制的稀释液将精液稀释后,常温保存,观察精子活率,比较精子生存指数。结果表明：在常温下对精子毒害作用最大的是DMSO,其次是甘油,EG和DMA对精子毒害作用最小。以一定浓度的10种冷冻保护剂将对精液冷冻后观察解冻活率,发现EG和DMA混合保护剂解冻后精子活率最高。     

鲤鱼精液的冷冻保存

<正> 现在许多国家都在研究大多数经济鱼类精液的冷冻保存方法。在低温保存精液方面,例如:大西洋鲱鱼及鲑科,外国科学家获得了可喜的结果。精液长期保存在冰冻状态用于卵的授精。首次成功低温冷冻鲤鱼精液试验应归于波兰科学家M·莫恰尔斯基(1978年)。以解冻精液给鲤鱼新鲜卵进行人工授精,但最成功的试验授精率不高于     

云纹石斑鱼精子冷冻保存

以云纹石斑鱼精液为实验材料,对精子稀释液、抗冻剂种类和适宜浓度、冷冻保存液进行了筛选。结果表明,利用9g/L NaCl、10g/L KHCO3和10%小牛血清配制而成的稀释液EM1-2适宜于云纹石斑鱼精子冷冻保存,以2ml冷冻管为精子容器,在60L液氮生物保存罐中冷冻保存精子,冷冻解冻精子活力可达56.67%±5.77%,要优于TS-2、ES1-3和其他EM系列稀释液冷冻保存精子活力。利用EM1-2为基础液对抗冻保护剂进行筛选,结果显示,10%~20%的二甲基亚砜(DMSO)和1-2-丙二醇(PG)冷冻保存后精子活力无显著差异(P0.05),其中15%的DMSO和10%PG冷冻保存精子效果最优,解冻后精子活力分别可达54.52%±7.81%和57.24%±3.69%。利用冷冻保存1年的精液与云纹石斑鱼卵进行受精,受精率和孵化率均达到80%以上,与新鲜精子无显著性差异(P0.05)。本研究表明,利用EM1-2配制15%的DMSO或10%的PG可用于冷冻保存云纹石斑鱼精液。在此基础上,建立了精子冷冻库,保存精子130ml,为人工繁育和杂交育种提供了丰富的精子源。     

云纹石斑鱼精子冷冻保存

以云纹石斑鱼精液为实验材料,对精子稀释液、抗冻剂种类和适宜浓度、冷冻保存液进行了筛选。结果表明,利用9g/L NaCl、10g/L KHCO3和10%小牛血清配制而成的稀释液EM1-2适宜于云纹石斑鱼精子冷冻保存,以2ml冷冻管为精子容器,在60L液氮生物保存罐中冷冻保存精子,冷冻解冻精子活力可达56.67%±5.77%,要优于TS-2、ES1-3和其他EM系列稀释液冷冻保存精子活力。利用EM1-2为基础液对抗冻保护剂进行筛选,结果显示,10%~20%的二甲基亚砜(DMSO)和1-2-丙二醇(PG)冷冻保存后精子活力无显著差异(P0.05),其中15%的DMSO和10%PG冷冻保存精子效果最优,解冻后精子活力分别可达54.52%±7.81%和57.24%±3.69%。利用冷冻保存1年的精液与云纹石斑鱼卵进行受精,受精率和孵化率均达到80%以上,与新鲜精子无显著性差异(P0.05)。本研究表明,利用EM1-2配制15%的DMSO或10%的PG可用于冷冻保存云纹石斑鱼精液。在此基础上,建立了精子冷冻库,保存精子130ml,为人工繁育和杂交育种提供了丰富的精子源。     

罗非鱼精液的冷冻贮存

本文叙述了莫桑比克罗非鱼的精液在以5％的甲醇和15％的奶粉作低温防护剂时的冷冻贮存方法。用此法冷冻精子解冻后精子的运动能力大约是以5％或10％的二甲亚砜(DMSO)代替甲醇作低温防护剂时的二倍。本文还详细描述了低温防护剂的最适浓度,冷却和解冻加温的最适速度以及稀释度和平衡时间对精子的影响。还报导了受精能力的试验:以冷冻贮存的精子受精后的胚胎有64.3％±34.2％可以正常发育到胚孔封闭期而未经冷冻的对照组为57.5±10.5％。     

中间球海胆精子的超低温保存技术

20 0 0年 10～ 11月 ,对大连龙王塘海区成熟的中间球海胆 (Strongylocentrotusintermedius)精子进行超低温保存研究。结果表明 :不同的抗冻保护剂 ,不同的体积分数 ,不同的冷冻方式 ,精子冻存的效果不同。以自然海水为基础溶液 ,以 12 %的二甲亚砜或 9%的甘油作为抗冻保护剂 ,稀释精液至 8× 10 7～ 11× 10 7个 /ml,距液氮表面 10cm处预冷 8min ,再浸入液氮中保存 ,解冻时直接移出液氮于 17～ 18℃自来水流水解冻 ,精子存活率分别是 95 % ,90 % ;受精率分别为 94 0 % ,86 5 %。     

马氏珠母贝精子的超低温保存

通过比较不同pH值（5．5-9．5）、不同盐度的海水等作为基础液对马氏珠母贝精子保存的影响，选择其中无激活精子作用又对其生理特性（活力，寿命，受精能力等）无影响者，加入二甲亚砜抗冻剂配制成超低温保存的抗冻保护液，精液与保护液按1：10和1：20的比例混合，样品按4组不同的降温程序平衡后转入液氮冷冻，比较其超低温冻存的效果。结果表明：以海水（pH7．5—8．0）为基础液，配制10％DMSO作为抗冻保护液，精液与保护液比例为1：20，在低温（0-4℃）中平衡约30min，在距液氮面15cm、5cm处分别停留5min、10min后转入液氮（-196℃），冻存精子效果良好。冷冻24h、48h及5个月后，在38—40℃下水浴解冻复苏后，用终浓度0．25‰的氨海水刺激，精子存活率可超过60％，受精率可达80％。     

刀鲚精子超低温冷冻保存技术的研究

本文对刀鲚精子的超低温冷冻保存技术进行了研究.以解冻后精子的运动力为参数,分别探讨了不同的稀释液、不同种类不同浓度的保护剂、不同的平衡时间以及不同的稀释比例对刀鲚精子进行超低温冷冻保存的保护效果.结果显示:采用D-15稀释液,将精液和稀释液按1:2稀释,4℃平衡20 rmin,加入10％ DMSO,混匀后液氮面上方6 cm处平衡10 min,接着在液氮面上平衡5 min,最后投入液氮中保存,一周后,液氮蒸气中平衡5min,37℃水浴解冻,活力效果最佳,达70％左右.     

猪冷冻精液的保存与使用

<正>猪精液有常温(15~25℃)、低温(2~5℃)和冷冻(干冰-79℃或液氮-196℃)三种保存方法,常温保存的精液在生产中应用最为广泛。猪冷冻精液因制备难度大、操作程序复杂,导致其推广应用受到极大限制,但冷冻精液保存时间长,可长途运输,对猪种资源保护、生猪育种和充分发挥优秀种公猪遗传潜力等都有重要的意义。近年来,国内一些原种猪场纷纷从国外引进优秀种猪冷冻精液繁育核心群种猪,保证种猪群遗传性     

国外猪人工授精技术研究进展

<正>新的授精方式如子宫颈后、子宫深部和腹腔镜的发展,将会有助于提高冷藏或冷冻-解冻精子效率,并可使冻精应用成为可能,同时可推进性控精液人工授精的推广。1子宫颈后授精子宫颈后授精,使用的是一个细的和半软的输精装置通过一个事先插入子宫颈皱褶的常规导尿管。WastonBehan(2002)在英国每次使用10亿精子通过子宫颈后授精     

虾夷扇贝精子的主要生理特性与低温保存

试验结果表明,虾夷扇贝精子的最适盐度为23.2～32,最适pH 7.0～8.5.4℃,未稀释精液样品保存5 d后,精子仍有(26±4)%的活力,而经海水稀释后的精液保存70 h后,最高活力仅为(11±1.41)%,用抗冻液稀释的精液,4℃保存5 h后,得到最高的精子活力仅为(24.7±4.16)%.添加抗冻剂后,-18℃的保存效果明显低于4℃保存的未稀释样品.用4℃保存的未稀释精液与栉孔扇贝卵子进行杂交试验,保存3 d内的精子获得的授精率与对照组差异不显著(P0.05).杂交组的幼虫可以正常发育至D形幼虫,与自交组无区别.     

中华鲟胚胎细胞的冷冻保存及其核移植

为了保存濒危鱼类中华鲟种质资源,对其囊胚细胞和原肠细胞进行了冷冻保存和核移植试验。用二甲亚砜(DMSO)、1,2-丙二醇(PG)、羟乙基淀粉(HES)3种抗冻剂,配制4种冷冻保护液:CP1(12%D)、CP2(10%P)、CP3(8%D 6%E)、CP4(7%P 6%E),冷冻细胞存活率分别为47.4%±4.7%、64.4%±3.6%、54.7%±4.7%、76.7%±5.7%,CP4保存效果最好,说明添加非渗透型抗冻剂羟乙基淀粉能提高冷冻保存细胞的存活率。比较了两种冷冻方法,发现细胞在-7℃平衡30min之后直接投入液氮的一步冷冻降温法是可行的。对不同发育时期的胚胎细胞冷冻存活率进行了比较,结果表明原肠细胞冷冻存活率(64.4%±11.8%)明显比囊胚细胞的(57.1%±11.2%)高(P<0.05)。用冷冻复苏后的囊胚细胞和原肠细胞作供体,以中华鲟未受精卵作受体进行核移植,各移植了469和392枚卵,分别获得了5尾和2尾克隆鱼,核移植成功率分别为1.1%和0.5%。表明可通过冷冻保存胚胎细胞结合核移植技术保存鱼类种质资源。     

家鱼冻精技术的研究

鱼类精液冷冻保存的关键，并不在于精子能否长期忍受低温，而是在于如何防止冷冻和解冻过程中，精子在安全地降温至-196℃，以及回升到常温时，不受或少受温差(冷、热)袭击，仍能保持精子的正常受精能力。本实验对鲢、鳙、鲤、鲮等几种家鱼精液的冷冻保存、解冻技术及授精育苗进行了研究。于1980年4月至1981年7月，共进行81批次实验。其中对鲢鱼进行了27批次，     

液氮冷藏鲥鱼精液的初步试验报告

利用液氮冷藏技术保存鱼类精子的研究工作，在近数年来已取得较大的进展，国内学者梁荣计(1978)、王洪(1983、1984)，宗毫侣等(1983)分别对几种常见的鲤科鱼类精液进行保藏试验，并将冷藏过的精液应用于授精，同时孵出了幼鱼。     

日本蟳精子超低温冷冻保存技术的研究

以精子存活率作为评价指标,采用两步降温法研究了稀释剂、抗冻保护剂和预冷时间对日本蟳精子超低温冷冻保存效果的影响。结果表明:以采用稀释剂II、15%二甲基亚砜(DMSO)作为抗冻保护剂的保存效果最佳。在液氮中保存24 h后,精子存活率可达83.76%,保存一年后可达73.81%。精液的第一次预冷时间以25 min为宜。     

双斑东方鲀精子冷冻保存方法探究

双斑东方鲀(Takifugu bimaculatus)在福建已形成较大规模的养殖产业,但其精卵成熟同步率低、自然交配受精率低等繁殖特点已成为养殖规模化发展的最大制约因素。而精子超低温冷冻保存技术作为直接保存细胞遗传物质的一种有效方法,为双斑东方鲀规模化人工繁育问题的解决提供了方案。研究以复苏后的精子活力为选择指标,开展双斑东方鲀精子冷冻保存方法的研究,对抗冻剂、基础液、精子稀释浓度和降温程序等几个关键影响因素进行了筛选,获得了双斑东方鲀精子的最适冷冻方法:以含5%二甲亚砜(DMSO)的MPRS溶液与精子按1∶1比例稀释,样品在4℃冰箱中平衡30 min,液氮上方10 cm处熏蒸5 min,再下降到5 cm处熏蒸5 min,之后投入液氮。按此方法保存的双斑东方鲀精子在解冻激活后,其活力可达(83±3)%,与相应卵子受精,可得到平均70%的孵化率,可以满足双斑东方鲀规模化人工繁育的需求。研究结果也可为其他东方鲀鱼类的相关研究提供参考。     

珍珠龙精子超低温保存的初步研究

为研究适合珍珠龙精子的短期超低温保存方法,比较了不同保存液、保护剂、降温方式、解冻方式对珍珠龙(Scleropages jardini)精液超低温保存后精子活力的影响,初步解释了经超低温短期保存后珍珠龙精子活力明显较鲜精低的原因.结果显示:采用Ringer's液作为保存液,以浓度为16％的二甲亚砜作为保护剂,选取五步法超低温冷冻保存精子[精子缓慢降温至-150℃→液氮面上3 cm(约-170℃),停留4min→液氮面(约-190℃),停留1 min→液氮],40℃水浴解冻,可取得最好的冻后活力,解冻后精子的活力为(36.7±4.1)％.