蛋白核小球藻浓缩制品低温保藏技术研究

本研究以离心和重悬工艺获得的蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)浓缩藻膏(8×10¹⁰ cells/mL)和浓缩藻液(1×10⁸ cells/mL)为研究对象,系统评价了巴氏杀菌以及保藏温度[室温(25℃)和4℃]对短期避光保藏下细胞相对活性和营养保持率的影响。结果显示,巴氏杀菌处理会引起2种蛋白核小球藻浓缩制品褐变,室温保藏会加速其腐败。浓缩制品可在4℃低温下直接保藏15 d,浓缩藻膏中总叶绿素、总类胡萝卜素和蛋白质含量分别为保藏前的97.20%、100.00%和98.20%;浓缩藻液中总叶绿素、总类胡萝卜素和蛋白质含量无变化,均与保藏前的含量相同。本研究还建立了荧光探针法检测蛋白核小球藻细胞活性的最优条件:细胞浓度为2.6×10⁵ cells/mL,二醋酸荧光素工作浓度为60μmoL/L,染色时间为30 min。结果显示,4℃条件下直接保藏15 d后,浓缩藻膏和浓缩藻液的细胞相对活性分别为保藏前的48.26%和61.36%。本研究建立的蛋白核小球藻浓缩制品的低温保藏技术,为微藻新鲜浓缩制品的下游水产应用提供了重要技术支撑。     

超低温冷冻对俄罗斯鲟精子顶体酶活性及DNA损伤的影响

选取6 ind健康的雄性俄罗斯鲟(Acipenser gueldenstaedti),经人工催产后获得成熟的精子,研究超低温冷冻(-196℃)对俄罗斯鲟精子顶体酶活性及DNA损伤影响。结果显示:俄罗斯鲟鲜精中顶体酶的平均活性为(36.18±2.54)μIU·10-6,经过超低温冷冻后,精子顶体酶活性显著降低,添加抗冻保护液精子中顶体酶活性降至(21.55±0.79)μIU·10-6,未添加抗冻保护液精子中顶体酶活性降至(9.58±1.08)μIU·10-6,且三者间有显著性差异(P0.05)。单细胞凝胶电泳结果表明,俄罗斯鲟鲜精彗星率为(37.33±7.77)%,添加抗冻剂后冻精的彗星率为(63.67±5.13)%,未添加抗冻剂直接冷冻彗星率高达(86.00±3.61)%,三者间有显著差异(P0.05)。用CASP分析软件分析测量彗星拖尾长度(L tail)、彗星尾部DNA的相对含量(Tail DNA)、尾动量(TM)、Olive尾动量(OTM)等各项表征DNA损伤的指标,发现冻精组的各项指标均显著高于鲜精组,未添加抗冻剂直接冷冻组又高于添加抗冻剂组,3组间有显著性差异(P0.05)。本研究结果表明:超低温冷冻能导致精子顶体酶活性下降和DNA损伤,抗冻剂对精子具有保护作用。     

鲤、鲢、鳙精子低温短期保存研究

本文对鲤(Cygrinus carpio)、鲢(Hypophthalmichthys molitrix)和鳙(Aristichthys nobilis)精液在2—4℃的短期保存进行了实验研究。筛选出了几种较为理想的稀释保护液配方;确定了精液与稀释液的适宜稀释比例为1:1;研究了抗冻剂二甲亚砜(DMSO)对低温保存条件下精于活力的影响,确定了DMSO的适宜添加浓度为6％左右。鲤精在2—4℃保存10天,活力仍高达70％,少数精子存活时间长达12天;鲢和鳙精子在2—4℃保存7天后活力仍高达60％,达到了生产应用的水平。为水产养殖和鱼类育种研究提供了一种简便易行的精液短期保存技术。     

麒麟菜多糖的研究——Ⅰ.琼枝多糖的性质及其红外光谱

琼枝多糖是琼枝(Eucheuma gclatinae)分离得到的一种硫酸酯化半乳聚糖。构成这种多糖的单糖主要是 D-半乳糖和3,6-脱水-D-半乳糖。分子量为 1.99×10~5,比旋光度为正值。大多数碱金属阳离子和碱土金属阳离子能使此多糖的胶凝能力提高。用碱或石灰处理时,琼枝多糖便部分脱去硫酸酿基团,3,6-脱水-D-半乳糖的含量增加。红外光谱分析证明,琼枝多糖在1240cm~(-1) 、930cm~(-1)和845cm~(-1)有吸收峰。用氯化钾分级时,琼枝多糖可分为溶于氯化钾溶液和不溶于氯化钾溶液两个级分;前者的红外光谱除了同后者一样在 1240cm~(-1),930cm~(-1)和845cm~(-1)有吸收峰外,在 820cm~(-1)处还有吸收峰。根据琼枝多糖的组成,性质和红外光谱,可以推断,溶于氯化钾溶液的级分是类 mu-卡拉胶;不溶于氯化钾溶液的级分是类 kappa—卡拉胶。     

珍珠龙精子超低温保存的初步研究

为研究适合珍珠龙精子的短期超低温保存方法,比较了不同保存液、保护剂、降温方式、解冻方式对珍珠龙(Scleropages jardini)精液超低温保存后精子活力的影响,初步解释了经超低温短期保存后珍珠龙精子活力明显较鲜精低的原因.结果显示:采用Ringer's液作为保存液,以浓度为16％的二甲亚砜作为保护剂,选取五步法超低温冷冻保存精子[精子缓慢降温至-150℃→液氮面上3 cm(约-170℃),停留4min→液氮面(约-190℃),停留1 min→液氮],40℃水浴解冻,可取得最好的冻后活力,解冻后精子的活力为(36.7±4.1)％.     

猪精液冷冻保存技术工艺流程

正精液冷冻保存(Semen freezing)是利用液氮(-196℃)、干冰(-79℃)或其他冷源,将精液经过适当处理后,保存在超低温下,以达到长期保存精液的目的。1采精及精液品质检查做好采精前的各项准备工作,特别是应尽可能做到精液品质纯净而不受污染,同时要认真熟练进行采精技术操作,力争做到采得的精液质高量多。特别是精子活力要高,密度要大,因为精液品质与冷冻效果密切相关。     

二倍体和三倍体虹鳟精液低温保存寿命的研究

与二倍体(2n组)精原液做比较,以不同密度为组别,研究了4℃下两组(3n-HD和3n-LD)三倍体虹鳟(Oncorhynchus mykiss)精原液的保存时限。结果发现,随着保存时间的延长,精液中精子的活力和寿命逐渐降低。2n组、3n-HD组和3n-LD组虹鳟精原液中精子分别在保存5d、4.5d和12.5d后失去活力;在7d、15d和14.5 d后死亡,即三倍体虹鳟精原液4℃保存时间约为二倍体的2倍,说明低温短期保存三倍体虹鳟精原液可以取得较好效果。     

不同冷冻温度对藏獒冷冻精液品质的影响

为探讨藏獒细管冻精最佳冷冻曲线,利用全自动细管精液程控冷冻仪控制冷冻温度变化,测定藏獒精液在不同冷冻曲线下冻精品质。结果表明:冷冻曲线4~-10℃(降温速率3℃/min)、-10~-100℃(降温速率40℃/min)、-100~-140℃(降温速率20℃/min),冻精解冻后精子活力最高,冻精精子顶体完整率最高,冻精品质最好。     

翡翠贻贝的耐冷性

采用持续性降温(在海水中从)和突发性降温(在-1℃下的冷海水中冷处理1h)对翡翠贻贝进行冷处理,然后在室温下复苏,观察其复苏情况:采用持续性降温(在海水中,从21℃持续性降沮10h 9℃,从21℃持续性降沮18h 3℃)和突发性降沮(在-1.5℃、0℃、5℃、9℃的冷海水中冷处理10min)后进行冰藏,然后,每隔24h随机取出部分样品检定其存活情况,并观察其复苏情况,对翡翠贻贝的耐冷性进行了研究,结果证明翡翠贻贝具有较强的耐冷性,在≤0℃时,仍能存活,通过冰藏可达到保活保鲜之目的。     

水产品中孔雀石绿、结晶紫药物残留检测方法的优化

对《水产品中孔雀石绿和结晶紫的残留量的测定高效液相色谱荧光检测法》(GB/T 20361—2006)中提取、浓缩等前处理过程进行了优化。结果表明，硼氢化钾的体积为4 mL、二氯甲烷为25 mL，且样品浓缩至近干时孔雀石绿、结晶紫回收率均较高，孔雀石绿回收率达91.0%以上，结晶紫回收率在72.5%以上。指出，优化后的方法回收率高，分离效果好，可用于水产品中孔雀石绿、结晶紫药物残留检测。