鲫鱼造血器官坏死病(鳃出血)防控对策

<正>鲫鱼造血器官坏死病发病猛、传染快、致死率高;主要症状表现为大红鳃鳃出血,由疱疹病毒引起。最早出现于2008年,当时以为与渔药、养殖环境的应激反应有关。江苏、湖北2009-2010年发病率逐年递增,2009年有该病引起大量鲫鱼死亡的报道;2011年较大面积暴发,并引起大面积死亡;2012-2013年大规模暴发,发病率在40%左右,一些市、县的发病率高达60%~80%,发病面积10万亩以上,死亡率30%以上,部分池塘高达80%~     

国外传染性造血器官坏死病的研究概况(2)

另一例中,从一些看上去健康的溪红点鲑成鱼中分离到了病毒。此外,还对7条河流中的鲑鳟鱼类作了测试,仅从某溪流的肯氏红大麻哈鱼中检测到了IHN病毒。这些鱼类并不显示出IHN病的症状。患IHN病的鱼体其死亡率因鱼体年龄、健康生理状态及水温而异。一些2月龄的鱼苗群体,在10℃时死亡率通常高于90％;2—6月龄的鱼体死亡率通常高于50％;而1令鱼体可能仅为10％;2令或更高龄的鱼体未曾见到此病。水温15℃或15℃以上时,鱼体很少发生死亡。     

流行性造血器官坏死病

<正>流行性造血器官坏死病(Epizootic haematopoietic necrosis,E H N)是由一种虹彩病毒感染所引起的全身性疾病,主要感染赤鲈(Perca fluviatilis,俗名河鲈)     

一株传染性造血器官坏死病病毒的致病性研究

为了对分离于山东某虹鳟养殖场的一株传染性造血器官坏死病毒株(IHNV-Sn1203)进行致病性检测与研究,将该IHNV-Sn1203毒株进行虹鳟鱼苗人工回接感染实验。结果显示,8d内人工感染实验鱼累计死亡率高达100%。收集大批濒死的病鱼样本,制备病理组织切片;利用鲤上皮细胞(EPC)进行细胞感染实验、病毒电镜观察、空斑实验、病毒滴度检测和聚类分析。病理组织切片显示,该病毒可造成虹鳟造血器官广泛性坏死;细胞感染实验结果显示,接种24 h后EPC细胞出现葡萄串状典型细胞病变(cytopathic effect,CPE),72 h后大部分细胞崩解脱落形成网状孔洞;电镜下清晰可见弹状病毒粒子大量存在于细胞质内,其在EPC细胞上的滴度为108.36TCID50/mL,并能形成2~4 mm空斑。对病毒核蛋白氨基酸序列的聚类分析结果显示,该病毒与标准毒株RB-1和WRAC的同源性分别为97%和93%,与国内报道的zyx株具有最高的同源性(99%)。研究表明,IHNV-Sn1203毒株能够在鱼体及敏感细胞中稳定繁殖,产生典型病变,具有较高的病毒滴度,对虹鳟鱼苗有很高的感染性和致死性。     

传染性造血器官坏死病病毒参考蛋白的研制

为规避活病毒作参考物质存在的生物安全风险,本研究利用毕赤酵母表达系统表达了传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)的糖蛋白来制备参考蛋白,作为IHNV免疫学检测参考物质。本研究选用IHNV糖蛋白基因(IHNV-G)为目的基因,根据Gen Bank中IHNV全基因序列设计特异性引物,以IHNV-uk株病毒核酸为模板,通过RT-PCR获得糖蛋白基因片段,将其克隆至真核表达载体p PICZαA,转入毕赤酵母感受态细胞GS115中,使外源基因与酵母基因融合,通过1%甲醇诱导表达外源蛋白,SDS-PAGE分析显示获得可溶性表达蛋白,分子量大于70 ku。经Western Blot和ELISA分析,该表达产物可以被IHNV多抗特异性识别。0.1531 mg的重组蛋白与0.3125TCID50 IHNV在ELISA实验中反应原性相当,–20°C可稳定保存2个月,说明其在一定程度上可替代病毒作为参考物质。该研究为IHNV ELISA检测试剂盒的开发奠定基础。     

传染性造血器官坏死病防控试验研究

正传染性造血器官坏死病(Infectious hematopoietic necrosis,IHN)是鲑科鱼类常见的急性病毒性传染病,病原是传染性造血器官坏死病毒(Infectious hematopoietic necrosis virus,IHNV)。在我国,IHN病毒于1985年首次随进口鱼带入国内,并在辽宁本溪暴发IHN,死亡率近100%。随后扩散到东北和华北一带,呈散在性流行,近几年来流行有逐渐扩大和日趋严重的倾     

传染性造血器官坏死病防控技术

正(上接2017年第5期)技术简介:各地区虹鳟鱼因感染IHNV导致苗种大量死亡已经成为阻碍虹鳟鱼产业健康发展的主要因素。目前IHN主要危害的是3月龄以内的虹鳟苗种,这阶段苗种主要在孵化车间内进行培育。已有研究表明IHNV附着在卵的表面,结合对IHN传播途径的分析,在孵化车间内苗种有可能与IHNV接     

两种检测传染性造血器官坏死病(IHNV)方法的比较

传染性造血器官坏死病(IHNV)是一种危害极其严重的鱼类疾病。本实验用一步RT-PCR法和套式PCR法对IHNV的基因进行扩增,通过扩增片段的琼脂糖电泳分析,来判定病鱼是否携带IHNV。实验结果表明,通过一步法RT-PCR可扩增出IHNV的693bp片段;通过套式PCR法可扩增出IHNV的786bp片段和323bp片段。两种方法均能够检测待测样品中含有IHNV。比较发现一步RT-PCR法比套式PCR法更加快速、简便、敏感,减少了被污染机会。     

虹鳟传染性造血器官坏死病的防控

传染性造血器官坏死病毒是一种严重危害鲑鳟鱼类养殖的重要病原,具有传播快、发病急等特点,主要损伤鱼类的造血器官,因此称为传染性造血器官坏死病。结合国内外研究现状对其临床症状、病理损伤、流行规律、传播途径、诊断方法和预防措施进行总结,以期为该病的防控提供理论基础和实践经验。     

传染性造血组织坏死病病毒(IHNV)的流行病学及检测技术研究进展

<正>传染性造血器官坏死病是感染鲑鳟鱼类的一种严重的传染性疾病。传染性造血组织坏死病病毒(Infectious Hematopoietic Necrosis Virus,IHNV)是传染性造血组织坏死病的病原体,主要感染鲑鱼科的各种鱼类,常造成鱼苗或幼鱼70%～90%的死亡率,在某些病例中甚至接近100%,对世界鲑鱼养殖业造成了巨大的经济损失。过去IHN只流行于北美洲和欧洲一些国     

我国虹鳟传染性造血器官坏死病防控研究现状

虹鳟Oncorhynchus mykiss是我国主要冷水鱼养殖种类之一。传染性造血器官坏死病(infectious hematopoietic necrosis, IHN)是世界性的鲑科鱼类传染性疾病和制约我国冷水鱼产业发展的瓶颈之一。我国对IHN陆续开展了流行病学、病原学及防控技术等研究,取得了较大进展。本文简要综述了我国虹鳟IHN病害防控研究现状,主要包括IHN病毒基因型、分布、流行规律及疫苗研制等研究进展,以期为相关研究和我国虹鳟养殖业健康发展提供参考。     

虹鳟传染性造血器官坏死病分析及防控措施

<正>虹鳟原产于北美太平洋沿岸,1959年引入我国,现已成为我国重要的养殖品种。但近年来由于养殖密度增大、健康养殖意识缺乏,再加上抗生素和化学药品的滥用等原因,使得养殖病害频发,给虹鳟养殖行业带来重大损失。其中传染性造血器官坏死病(Infectious Hematopoietic Necrosis, IHN)是最常见也是最严重的急性病毒性传染病,该病死亡率高、传染性强,被世界动物卫生组织(OIE)列为必须申报的鱼的疫病。2008年11月农业部发布的《一、二、三类动物疫病病种名录》中,IHN被列为二类动物疫病。     

鲫鱼自然感染对虾偷死野田村病毒(CMNV)的初步研究

对虾病毒性偷死病(Viral covert mortality disease,VCMD)是由偷死野田村病毒(Covert mortality nodavirus,CMNV)引起的一种新发疫病,近年来使中国对虾养殖业遭受了严重的经济损失。为筛查对虾池塘养殖系统中CMNV的自然宿主种类,本研究在山东潍坊一个发生VCMD的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)养殖场排水渠中采集了野生鲫鱼(Carassius auratus)样品,对其携带和感染CMNV的情况进行了系统分析。逆转录套式PCR检测结果显示,鲫鱼样品的总RNA能扩增出与预期大小一致的CMNVRNA依赖的RNA聚合酶目标基因片段。组织病理和原位杂交分析显示,鲫鱼脑部神经组织空泡化严重,脑皮层锥体细胞和二叠体颗粒细胞核固缩明显,心肌呈现典型的溶解样坏死病理变化,脑和心肌组织的病变部位均可见淡紫色CMNV探针杂交信号。透射电子显微镜观测显示,鲫鱼脑中可见神经组织空泡化,心肌组织坏死严重,CMNV样病毒颗粒占据了心肌细胞内大部分区域。本研究表明,CMNV在自然条件下能够跨越物种障碍、感染对虾养殖池塘排水渠中的野生鲫鱼,并导致靶组织明显的病理损伤,同时也提示,CMNV感染其他鱼类尤其是淡水鱼类的风险值得高度关注。     

牙鲆、大菱鲆传染性造血器官坏死病病毒检测报告

<正>牙鲆、大菱鲆是我省海水养殖主要品种,近年来在养殖生产过程中发生疫病时,使用抗菌类药物往往效果不佳。为摸清上述鱼病是否因病毒引起,今年4-5月,笔者采集了部分人工养殖的牙鲆、大菱鲆样品,进行了鱼传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)实验室检测,有关情况报告如下。1采样4月中下旬,从我省沿海6个海水鱼养殖单位采集了牙鲆、大菱鲆成鱼样品11个,其中牙鲆样品5个,大菱鲆样品6个,每个样品1.5kg,冷     

国外传染性造血器官坏死病的研究概况（3）

Clark和Soriano曾报导了一些有趣的工作。他们描述了IHN病毒及两种其它鱼类的病毒(SVC和VHS)在非鱼类细胞培养物中的复制现象。这些病毒能在人体两倍体细胞株WI—38，在BHK／21以及一种或多种爬行类动物的细胞系中杂制，并产生CPE。SVS和VHS病毒在BHK／21细胞中复制的最适温度与在变温脊椎动物细胞培养物中测得的结果相一致。作者们指出，     

鱼类传染性造血器官坏死病临床诊断及检测

<正>鱼传染性造血器官坏死病(Infectious haematopoietic necrosis of fish,IHN)。是一种毒力很强的弹状病毒所引起的的急性、全身性的严重传染病。该病主要侵害虹鳟,包括硬头鳟、大鳞大马哈鱼、红大马哈鱼和大西洋大马哈鱼,银大马哈鱼(银鳟)在自然条件下对IHN病毒有抵抗力。     

虹鳟传染性造血器官坏死病核酸疫苗工程菌发酵工艺研究

急性传染性造血器官坏死病(infectious hematopoietic necrosis,IHN)严重威胁虹鳟Oncorhynchus mykiss养殖业,造成严重的经济损失,核酸疫苗已成为虹鳟IHN疾病预防的研究热点。本研究首先检测虹鳟IHN核酸疫苗工程菌的遗传稳定性,结果显示工程菌在连续培养30代后,仍能保持稳定的质粒拷贝数。质粒酶切结果表明:连续培养30代后的质粒依然保持良好的完整性。在筛选高拷贝工程菌的基础上,又研究核酸疫苗的高密度发酵培养基、补料及发酵时间。结果表明:最优的发酵培养基配方为:1.2%胰蛋白胨(Tryptone)、2.4%酵母提取物(Yeast Extract)、0.5%甘油、0.017 mol·L~(-1)KH_2PO_4、0.072 mol·L~(-1)K_2HPO_4;补料配方为:3%胰蛋白胨、1.5%酵母提取物、50%甘油,最佳发酵时间为16h。本研究可为虹鳟IHN核酸疫苗的规模化生产提供参考。     

北京市鱼类传染性造血器官坏死病免疫诊断技术达到国际标准

<正>日前,由北京市水产技术推广站承担的"鱼类传染性造血器官坏死病免疫诊断技术研究及应用"课题,在免疫诊断试剂盒的诊断率和检测时间上均达到了国际标准。鱼类传染性造血器官坏死病是一种严重危害渔业生产并能造成毁灭性打击的疫病,主要感染虹鳟、硬头鳟等冷水鱼类,急性感染时死亡率达90%~95%,并可垂直传播给子代。该课题针对此病研制了一株能