环氧丙烷、丙烯酸和异戊二烯对仿刺参幼参的急性毒性

16~19℃水温下,采用静水式生物毒性试验法,研究了环氧丙烷、丙烯酸和异戊二烯对体质量(1.30±0.62)g的仿刺参幼参的急性毒性。研究结果表明,环氧丙烷、丙烯酸和异戊二烯对仿刺参幼参的24h半致死质量浓度分别为181.53、117.63、70.40mg/L,48h半致死质量浓度分别为148.91、109.81、68.28mg/L,72h半致死质量浓度分别为133.62、102.70、67.25mg/L,96h半致死质量浓度分别为98.89、100.34、66.55mg/L,24、48、72和96h安全质量浓度分别为9.89、10.03、6.66mg/L。毒性依次为:异戊二烯(中毒)环氧丙烷(中毒)丙烯酸(低毒)。本结果可为研究这三种化学品对海洋生物的生态毒理学及其应用提供参考。     

Pb2+和Cd2 对刺参幼参的急性毒性及其富集

采用静水试验法,研究了Pb2+(0.1、0.25、0.5、1.0、2.5、5.0 mg/L共6个浓度梯度)与Cd2+(0.2、0.4、0.8、1.0、2.5、5.0 mg/L共6个浓度梯度)对刺参幼参的急性毒性,并分析了其在幼参体内的富集状况。研究表明,幼参死亡率随暴露时间和Pb2+、Cd2+浓度增加总体呈升高趋势,而附壁率则反之。暴露于两组低浓度Pb2+的幼参死亡率差异不显著(P0.05),其他组死亡率均随暴露时间和Pb2+浓度增加而显著升高;最高浓度组在72 h时死亡率已达100%,在24 h时其附壁率低至6.7%,与其他浓度组差异均显著(P0.01)。暴露于Cd2+的幼参在72 h后的死亡率比48 h内明显升高,96h时0.8 mg/L浓度组的幼参死亡率即达100%;暴露于Cd2+的幼参附壁率均较低。Pb2+和Cd2+对幼参的安全浓度分别为0.061、0.018 mg/L。随着水体中Pb2+和Cd2+浓度的增加,幼参体内的重金属含量和累积速率均呈升高趋势,但富集系数呈波动性变化,幼参对Cd2+的富集系数和累积速率均高于Pb2+。结果表明,Cd2+对幼参的急性毒性作用强于Pb2+,且幼参对Cd2+的富集能力明显强于Pb2+。本研究将为阐明刺参在生态环境修复中的作用提供理论依据,并为刺参健康养殖与食用安全提供重要参考。     

Pb~(2+)和Cd~(2+)对刺参幼参的急性毒性及其富集

采用静水试验法,研究了Pb2+(0.1、0.25、0.5、1.0、2.5、5.0 mg/L共6个浓度梯度)与Cd2+(0.2、0.4、0.8、1.0、2.5、5.0 mg/L共6个浓度梯度)对刺参幼参的急性毒性,并分析了其在幼参体内的富集状况。研究表明,幼参死亡率随暴露时间和Pb2+、Cd2+浓度增加总体呈升高趋势,而附壁率则反之。暴露于两组低浓度Pb2+的幼参死亡率差异不显著(P0.05),其他组死亡率均随暴露时间和Pb2+浓度增加而显著升高;最高浓度组在72 h时死亡率已达100%,在24 h时其附壁率低至6.7%,与其他浓度组差异均显著(P0.01)。暴露于Cd2+的幼参在72 h后的死亡率比48 h内明显升高,96h时0.8 mg/L浓度组的幼参死亡率即达100%;暴露于Cd2+的幼参附壁率均较低。Pb2+和Cd2+对幼参的安全浓度分别为0.061、0.018 mg/L。随着水体中Pb2+和Cd2+浓度的增加,幼参体内的重金属含量和累积速率均呈升高趋势,但富集系数呈波动性变化,幼参对Cd2+的富集系数和累积速率均高于Pb2+。结果表明,Cd2+对幼参的急性毒性作用强于Pb2+,且幼参对Cd2+的富集能力明显强于Pb2+。本研究将为阐明刺参在生态环境修复中的作用提供理论依据,并为刺参健康养殖与食用安全提供重要参考。     

刺参苗种越冬期水环境因子变化及对刺参急性效应的研究

对刺参(Appostichopus japonicus)苗种越冬期室内正常池和发病池的水环境因子变化进行了跟踪监测和比较.结果表明:正常池和发病池水环境中总氨氮和亚硝酸氮含量差异显著(P<0.05),发病池明显高于正常池.并进行了水环境因子变化对刺参急性效应的研究.结果表明:在水温为(11.0±1.0)℃、pH 8.0±0.2条件下,氨氮(NH3-N)对刺参幼参(3 cm左右)48 h、72 h和96 h的半致死浓度(LC50)分别为6.09 mg/L、3.29 mg/L和1.75 mg/L;水温为(13.0±0.5)℃,刺参幼参96 h能够耐受的pH范围为7～9,能耐受的盐度范围为16～42.     

刺参育苗系统中的敌害生物——玻璃海鞘的药物杀除试验

10种渔药对玻璃海鞘Ciona intestinalis的急性毒性试验结果表明,硫酸锌(≤3 mg/L)、碳酸氢钠(≤2.5%)、茶皂素(≤6.7 ml/L)、氯氰菊酯(≤0.2 ml/L)、精制敌百虫粉(≤4 mg/L)、敌百虫*辛硫磷粉(≤3 mg/L)和高锰酸钾(≤5 mg/L)对玻璃海鞘无致死作用.在24 h内,硫酸铜浓度≥1 mg/L、灭鞘灵(MQL)浓度≥5 mg/L和自制大蒜素复方药物灭鞘散(MQS)≥15 mg/L时,对玻璃海鞘有100%的致死作用,其24 h的LC50值分别为0.58、3.33和10.80 mg/L.硫酸铜浓度≥1 mg/L时,稚参在3 h内吐肠率达80%以上,对刺参能造成严重的生理伤害.因此,硫酸铜不适合在生产实践中使用.MQS浓度为20 mg/L或MQL浓度为10 mg/L对稚参的毒性实验表明,药物浸泡稚参96 h仍活动正常,对生存没有任何影响.因此,MQS和MQL可视为刺参养殖系统中杀灭玻璃海鞘的有效药物,分别采用15 mg/L和5 mg/L的浓度,药浴24 h后换水即可完成.     

异源铜盐对仿刺参幼参急性毒性及组织形态学影响

采用急性毒性试验方法研究异源铜盐对仿刺参（Apostichopus japonicus）幼参的毒性影响,通过24h、48h、72h和96h的致死数量统计分析硫酸铜（CuSO4）/氯化铜（CuCl2）对幼参的半致死质量浓度（LC50）和安全质量浓度（SC）;利用石蜡切片显微定性观察不同铜盐对刺参幼参后肠的毒性情况。结果表明,CuSO4来源的Cu^2＋对幼参24h、48h和72h的LC50均大于CuCl2来源的Cu^2＋对幼参24h、48h和72h的LC50,而CuCl2对幼参96h LC50大于CuSO4对幼参96hLC50;异源铜盐在暴露前48h内对刺参的毒性影响极其显著,随着暴露时间的延长其对刺参的毒性影响不显著;2种铜盐（以铜离子质量浓度为0.06 mg·L^-1计）对幼参的消化道均有不同程度的腐蚀作用,导致结缔层与上皮层分离,CuCl2对刺参肠道的毒性（类似腐蚀作用）大于CuSO4的毒性;不同的阴离子对Cu^2＋的毒性有拮抗作用。     

硫酸铜对刺参的急性毒性试验

采用静水法研究了硫酸铜对刺参幼参的急性毒性，结果表明：硫酸铜对平均体重9．2g刺参的96小时LC50为0．77mg／L，安全浓度为0．077mg／L（1）．2CuSO4计），明显低于硫酸铜在海水养殖中的常规用量（0．5～1．0mg／L），因此在刺参养殖中应严格控制硫酸铜的使用。     

四种因子对仿刺参幼参生长的影响

以益生菌、水温、寡糖和配合饲料为因素,仿刺参幼参的特定生长率为指标,通过L9(34)正交试验方法,研究4种因子对仿刺参幼参生长的影响,获得各因子的最佳组合参数。试验结果显示,4种因子对幼参特定生长率的影响均极显著(P0.01),影响因素为益生菌水温寡糖配合饲料。最佳的因素搭配为益生菌5mL/m3,水温24℃,壳寡糖+褐藻胶寡糖混合0.002g/L,幼参B型配合饲料。各因素水平对仿刺参幼参特定生长率影响为益生菌5 mL/m315 mL/m310 mL/m3,水温24℃17℃10℃,壳寡糖+褐藻胶寡糖褐藻胶寡糖壳寡糖,幼参饲料B型幼参饲料加强型稚参饲料。     

四种因子对仿刺参幼参牛长的影响

以益生菌、水温、寡糖和配合饲料为因素,仿刺参幼参的特定生长率为指标,通过L9(34)正交试验方法,研究4种因子对仿刺参幼参生长的影响,获得各因子的最佳组合参数.试验结果显示,4种因子对幼参特定生长率的影响均极显著(P＜0.01),影响因素为益生菌＞水温＞寡糖＞配合饲料.最佳的因素搭配为益生菌5 mL/m3,水温24℃,壳寡糖+褐藻胶寡糖混合0.002 g/L,幼参B型配合饲料.各因素水平对仿刺参幼参特定生长率影响为益生菌5 mL/m3＞15 mL/m3＞10 mL/m3,水温24℃＞17℃＞10℃,壳寡糖+褐藻胶寡糖＞褐藻胶寡糖＞壳寡糖,幼参饲料B型＞幼参饲料加强型＞稚参饲料.     

茶皂素在刺参苗期对玻璃海鞘杀除效果的研究

为寻求刺参苗种生产期间清除玻璃海鞘的有效方法,以天然环保的茶皂素作为杀虫药物,研究了不同质量浓度的茶皂素溶液对玻璃海鞘的杀除效果及对参苗的影响。试验结果显示,茶皂素对玻璃海鞘具有致死作用,用质量浓度为5、10、20 mg/L的茶皂素溶液浸浴处理12 h,玻璃海鞘的杀除率分别为32.3%、67.7%、83.3%,用质量浓度30 mg/L的茶皂素溶液处理6 h,或用40 mg/L的茶皂素溶液处理3 h,玻璃海鞘的杀除率均可达到100%,而用质量浓度为50、60 mg/L的茶皂素药液只需处理2 h,玻璃海鞘杀除率即可达100%;刺参苗种在质量浓度5~40 mg/L的茶皂素溶液中药浴,6 h内无明显异常,将其重新置于新鲜海水中12 h即可恢复正常活动状态;在质量浓度为50、60 mg/L的茶皂素溶液中药浴8 h,刺参苗种出现轻度化皮现象,12 h时损伤率分别为6.7%和13.3%,但将其重新置于新鲜海水中后未出现死亡,经过一段时间刺参即能够恢复到正常状态。结果表明,茶皂素对玻璃海鞘具有很好的杀除效果,在质量浓度为30~40 mg/L的茶皂素溶液中药浴2~3 h,玻璃海鞘的杀除率接近100%,而且茶皂素绿色安全、经济高效、生态环保,适合在刺参苗种生产中推广应用。     

氨氮胁迫对不同规格刺参(Apostichopus japonicus)存活及非特异性免疫酶活性的影响

本实验以小[(6.05±0.44)g/头]、中[(14.68±1.76)g/头]、大[(25.64±3.27)g/头]的3种不同规格刺参(Apostichopus japonicus)为研究对象,研究了氨氮胁迫浓度为0、2、4、6、8、l0 mg/L时对刺参体腔液中溶菌酶(LSZ)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响.结果显示,在氨氮浓度为8 mg/L时,第10天后,3种不同规格刺参均出现吐肠、化皮,直至死亡.氨氮浓度为10 mg/L时中规格刺参存活率最低,为86.7％.在氨氮浓度为2 mg/L和4 mg/L时,小、中、大规格刺参的3种非特异性免疫酶活性在第4天显著升高,与对照组(氨氮浓度低于0.05 mg/L)差异显著(P＜0.05);第7、10、13天时,LSZ、CAT、SOD酶活性与第4天相比,差异不显著(P＞0.05).在氨氮浓度为6、8、10 mg/L时,LSZ、CAT、SOD酶活性在第7天达到最高,与对照组差异性显著(P＜0.05).氨氮胁迫对3种不同规格刺参的非特异性免疫酶活性的影响存在差异,在同一氨氮浓度胁迫下,敏感性依次为中规格＞大规格＞小规格.研究表明,氨氮胁迫会对刺参存活与免疫产生一定影响,在刺参养殖过程中,水环境中氨氮浓度最好控制在6 mg/L以内.     

蛋氨酸硒含量对食用仿刺参生长和体壁营养成分的影响

在水温10.2~12.4℃、p H 7.8~8.0、盐度24~28条件下,将平均体质量为(45±5)g的仿刺参Apostichopus japonicus饲养在室内养殖池的网箱中,投喂蛋氨酸硒添加量分别为0mg/kg、0.2mg/kg、0.4mg/kg、0.6mg/kg、0.8mg/kg和1.0mg/kg的6组饲料。饲养60d后,测定仿刺参的特定生长率(SGR)和体壁中常规营养成分含量。结果表明:当蛋氨酸硒添加量为1.0mg/kg饲料时,仿刺参的特定生长率、粗蛋白、粗灰分含量最大,较对照组分别高155.56%、5.65%和2.9%(P0.05),而仿粗脂肪含量最低,较对照组低10.61%(P0.05)。     

盐度和溶解氧对刺参非特异性免疫酶活性的影响

测定了不同盐度(20、25、30、35、40)和不同溶氧水平(充空气,DO 7~9mg/L)充纯氧,DO15~20mg/L;不充气,DO 2~5mg/L)对刺参体腔液中酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、溶菌酶(LZM)和超氧化物歧化酶(SOD)活性变化的影响。盐度试验结果表明,盐度急性变化会引起刺参体腔液ACP、AKP、LZM活性的升高和SOD活性降低,其中第10天时盐度对酶活性的影响最大。溶氧试验显示,过饱和溶氧(DO 15~20mg/L)可使刺参体腔液ACP、AKP、LZM、SOD活性维持在较高水平,不充气组(DO 2~5mg/L)刺参体腔液中ACP、AKP、LZM活性出现短暂升高。恢复性试验中,盐度20、25组对AKP活性和盐度20、40组对SOD活性的影响未恢复到初始水平,其余实验组均能恢复至初始水平,说明低盐对刺参免疫力的影响较大。充纯氧组刺参的AKP活性显著高于充空气组,表明高溶解氧水平在一定程度上提高了刺参免疫力。     

氯苯对四种海洋生物的急性毒性研究

采用半静水法研究了氯苯对三疣梭子蟹、黄姑鱼、脊尾白虾和菲律宾蛤仔4种海洋生物的急性毒性作用.试验结果表明,在海水pH 7.9～8.2、水温24.1～24.5 ℃、盐度27.8～29.2条件下,氯苯对三疣梭子蟹、黄姑鱼、脊尾白虾和菲律宾蛤仔的96 h LC50分别为52、15、0.39、91 mg/L.综合氯苯对4种海洋生物的毒性机理和急性毒性数据,氯苯对海洋生物的毒性依次为:脊尾白虾>黄姑鱼>三疣梭子蟹>菲律宾蛤仔.氯苯对三疣梭子蟹、黄姑鱼、脊尾白虾和菲律宾蛤仔的安全质量浓度分别为0.52、0.15、0.0039、0.91 mg/L.     

Effects of Fish Size and Water Temperature on the Acute Toxicity of Copper for Japanese Flounder,Paralichthys olivaceus,and Red Sea Bream,Pagrus major

The acute toxicities of copper were examined for Japanese flounder, Paralichthys olivaceus, and red sea bream, Pagrus major, in terms of fish size and water temperature. Artificial seawater of low pH of 5.4–6.7 was used as testing water to keep dissolved copper concentration at 0.04–41 mg Cu/L. Japanese flounder of 0.3–17 g and red sea bream of 0.5–13 g were exposed to different concentrations of copper for 96 h at 20 C under semistatic condition. Median‐lethal concentration for 96 h of Japanese flounder and red sea bream were 8.7–12.2 and 2.0–5.2 mg Cu/L, respectively. No significant relationships were observed between median‐lethal concentrations for 96 h and fish size for Japanese flounder, while the value decreased significantly with increasing fish size for red sea bream. Effect of water temperature on the acute toxicity was examined for Japanese flounder of 0.3 and 0.4 g at 10, 15, 20, and 25 C and red sea bream of 0.5 and 1.0 g at 12, 15, 20, and 25 C. Ninety‐six‐hour median‐lethal concentrations for Japanese flounder and red sea bream were 5.1–11.2 and 1.0–5.3 mg Cu/L, respectively. No significant relationships were observed between median‐lethal concentrations for 96 h and water temperature for both fish species.     

Nitrite Toxicity to Litopenaeus vannamei in Water Containing Low Concentrations of Sea Salt or Mixed Salts

The uptake, depuration and toxicity of environmental nitrite was characterized in Litopenaeus vannamei exposed in water containing low concentrations of artificial sea salt or mixed salts. In 2 g/L artificial sea salts, nitrite was concentrated in the hemolymph in a dose-dependent and rapid manner (steady-state in about 2 d). When exposed to nitrite in 2 g/L artificial sea salts for 4 d and then moved to a similar environment without added nitrite, complete depuration occurred within a day. Increasing salinity up to 10 g/L decreased uptake of environmental nitrite. Nitrite uptake in environments containing 2 g/L mixed salts (combination of sodium, potassium, calcium and magnesium chlorides) was similar to or lower than rates in 2 g/L artificial sea salt. Toxicity was inversely related to total dissolved salt and chloride concentrations and was highest in 2 g/L artificial sea salt (96-h medial lethal concentration = 8.4 mg/L nitrite-N). Animals that molted during the experiments did not appear to be more susceptible to nitrite than animals that did not molt. The shallow slope of the curve describing the relationship between toxicity and salinity suggests that management of nitrite toxicity in low-salinity shrimp ponds by addition of more salts may not be practical.     

Effect of Bacteriophages on Vibrio alginolyticus Infection in the Sea Cucumber,Apostichopus japonicus (Selenka)

Vibrio alginolyticus is an important pathogen that causes a variety of diseases in marine animals including the sea cucumber, Apostichopus japonicus. Herein, we describe a two‐phage mixture which may have potential for use as an antibacterial agent to prevent V. alginolyticus infection in the sea cucumber. A Z1210 bacterial isolate was cultured from diseased sea cucumber suffering from skin ulcerations and viscera ejection. The isolate was identified as V. alginolyticus by morphology and sequence similarity analysis. Subsequently, two bacteriophages infecting isolate Z1210 were isolated from the drainpipe of an aquatic market. Morphologically, these two phages were classified as members of Podoviridae (PVA1) and Myoviridae (PVA2) and each phage showed high virulence in an in vitro experiment. Additionally, an experiment conducted in a marine environment showed that a mixture of the two phages increased the survival of sea cucumbers (10 ± 2 g) to 73, 50, and 47% when it was used with a multiplicity of infection of 10, 1, or 0.1, respectively. This result differed markedly from the control without phage (3% survival) while there was no significant difference between the 80 and 47% survival observed for two antibiotic treatments (5 mg/L doxycycline and 10 mg/L kanamycin, respectively).     

三种常用水产药物对卡拉白鱼的急性毒性

在水温(23±1)℃和pH6.9~7.3下,采用半静态法研究敌百虫、二氧化氯和聚维酮碘三种常用药物对平均体质量(6.1±0.23)g的卡拉白鱼Chalcalburnus chalcoides的急性毒性。结果表明:敌百虫对卡拉白鱼的24h、48h、72h、96h半致死质量浓度分别为0.40mg/L、0.34mg/L、0.31mg/L和0.29mg/L,安全质量浓度为0.07mg/L;二氧化氯对卡拉白鱼24h、48h、72h、96h的半致死质量浓度分别为28.18mg/L、27.16mg/L和24.93mg/L、23.00mg/L,安全质量浓度为7.57mg/L;聚维酮碘对卡拉白鱼24h、48h、72h、96h的半致死质量浓度分别为119.91mg/L、83.87mg/L、72.78mg/L和64.61mg/L,安全质量浓度为14.13mg/L。三种药物对卡拉白鱼的毒性由高至低依次为:敌百虫二氧化氯聚维酮碘。敌百虫对卡拉白鱼毒性较强,在生产中需谨慎使用;二氧化氯和聚维酮碘的安全质量浓度高于生产中常用的泼洒浓度,可安全使用。