苏丹红Ⅲ对泥鳅的急性毒性、遗传毒性及生理毒性研究

以苏丹红Ⅲ为诱变剂,研究了其对泥鳅(Misgurnus anguillicandatus)的急性毒性效应,在此基础上研究了苏丹红Ⅲ在不同浓度和染毒时间对泥鳅红细胞微核率及其肝脏中谷草转氨酶(GOT)和谷丙转氨酶(GPT)活性的影响.试验表明,苏丹红Ⅲ对泥鳅的24h半致死浓度为1.020 g/L,48 h半致死浓度为0.740 g/L,48 h安全浓度为0.117 g/L.染毒一段时间后,泥鳅红细胞的微核率与对照组比较均显著升高,达最高值后趋于平缓；随着苏丹红Ⅲ浓度的升高,泥鳅红细胞微核率与对照组相比出现极显著差异的时间相应提前.染毒后各组的谷草转氨酶和谷丙转氨酶活性呈下降趋势,达到峰值后趋于平缓；染毒时间越长,酶活下降的幅度越大.泥鳅红细胞的微核率及其肝脏中的GOT和GPT活性均与苏丹红Ⅲ有明显的剂量-时间效应,研究结果为进一步明确苏丹红Ⅲ的危害提供了试验数据.     

四种除草剂对泥鳅红细胞微核及核异常诱导

采用红细胞微核和核异常测试法,研究了除草剂精禾草克、氟乐灵、扫艹弗特,2-甲-4氯钠水剂对泥鳅红细胞核的遗传毒性。泥鳅在各除草剂试验液中染毒24h,采血制片。结果表明,四种除草剂均不同程度地引起微核细胞率和核异常细胞率等遗传指标的上升,其中部分浓度组较对照组差异显著(P<0 05)或极显著(P<0 01)。除草剂浓度与微核率或核异常率无显著相关,不表现剂量-效应关系。四种除草剂对泥鳅红细胞具有明显的诱变效应,其中扫特的诱变效应要大于其它三种除草剂。     

三倍体与二倍体泥鳅的组织细胞学比较

为探明三倍体和二倍体泥鳅的组织细胞学差异,运用血液涂片及组织切片方法,对三倍体、二倍体泥鳅的红细胞及其细胞核的长轴和短轴,血液中血细胞的组成及仔鱼眼部构造等进行了比较.结果表明,三倍体泥鳅红细胞及其核的长轴均比二倍体的要大,其中前者红细胞核的长轴约为后者的1.12倍,红细胞体积、核体积分别约为后者的1.62和1.44倍.三倍体泥鳅红细胞的相对数量明显少于二倍体泥鳅,而嗜中性细胞、单核细胞及淋巴细胞则多于后者.此外,三倍体泥鳅眼部色素层细胞数量少于二倍体.     

池塘和稻田养殖模式对泥鳅营养品质的影响

为探究不同养殖模式对台湾泥鳅(Paramisgurnus dabryanus ssp.)和泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)营养品质的影响,本研究分析了池塘和稻田养殖模式下,台湾泥鳅和泥鳅的形体性状、营养成分和品质差异,并探讨了这些指标间的相关性。结果显示,台湾泥鳅的肥满度显著高于泥鳅,其中,池塘养殖模式下的台湾泥鳅(P. dabryanus ssp. pond-cultivated, PPOC)肥满度(1.00±0.01)显著高于池塘养殖模式下的泥鳅(M. anguillicaudatus pond-cultivated, MPOC) (0.50±0.01) (P<0.05)。泥鳅的粗蛋白含量显著高于台湾泥鳅(P<0.05),而粗脂肪含量显著低于台湾泥鳅(P<0.05),其中,稻田养殖模式下的泥鳅(M. anguillicaudatus paddy-cultivated, MPAC)粗蛋白含量最高,达(21.09±0.57)%。除内聚性外,台湾泥鳅的质构特性显著高于泥鳅(P<0.05);养殖模式对2种泥鳅的形体性状有显著影响,PPOC肥满度显著高于稻田养殖模式下的台湾泥鳅(P. dabryanus ssp. paddy-cultivated, PPAC) (P<0.05),MPOC肥满度显著低于MPAC (P<0.05)。池塘养殖模式下2种泥鳅的致动脉粥样化指数和血栓形成指数显著低于稻田养殖的相同品种(P<0.05),硬度(PPOC)>硬度(PPAC),弹性(MPOC)<弹性(MPAC) (P<0.05),稻田养殖模式的2种泥鳅的谷氨酸、精氨酸、组氨酸、缬氨酸和甲硫氨酸高于池塘模式的相同品种(TAV>1)。主成分分析结果显示,形体性状与营养品质密切相关,肥满度与体长体高比呈负相关(–0.996),与质构特征、粗脂肪含量呈正相关,与水分、灰分、粗蛋白含量呈负相关。基于肥满度、质构等指标,PPOC最适合作为泥鳅加工原料。     

Cd2+对泥鳅外周血红细胞微核及核异常的影响

将泥鳅分别暴露于0.005、0.025、0.05、0.1 mg/L的Cd2+溶液中,常规方法制备血涂片,统计泥鳅外周血红细胞微核率、核异常率.结果显示,Cd2+对泥鳅红细胞微核率的影响具有质量浓度-效应和时间-效应关系.随Cd2+质量浓度的增加,红细胞微核率显著上升.随暴露时间的延长,红细胞微核率呈现增加-降低-增加的趋势.Cd2+对泥鳅红细胞核异常率的影响具有明显的质量浓度-效应关系.随Cd2+质量浓度增加,红细胞核异常率显著上升.随暴露时间的延长,0.1 mg/L组核异常率表现出较为明显的增加-降低-增加的时间-效应关系.     

三倍体与二倍体泥鳅的组织细胞学比较

为探明三倍体和二倍体泥鳅的组织细胞学差异，运用血液涂片及组织切片方法，对三倍体、二倍体泥鳅的红细胞及其细胞核的长轴和短轴，血液中血细胞的组成及仔鱼眼部构造等进行了比较。结果表明，三倍体泥鳅红细胞及其核的长轴均比二倍体的要大，其中前者红细胞核的长轴约为后者的1．12倍，红细胞体积、核体积分别约为后者的1．62和1．44倍。三倍体泥鳅红细胞的相对数量明显少于二倍体泥鳅，而嗜中性细胞、单核细胞及淋巴细胞则多于后者。此外，三倍体泥鳅眼部色素层细胞数量少于二倍体。     

镉对鲤遗传毒性和外周血细胞数量的影响

将鲤(Cyprinus carpio)分别暴露于0.16、0.31、0.63、1.26 mg/L Cd2+溶液中,研究Cd2+对鲤外周血红细胞微核率、核异常率、红细胞和白细胞数量的影响,探讨Cd2+对鲤遗传毒性和外周血细胞数量影响的变化规律和趋势。结果显示:Cd2+对鲤红细胞微核率和核异常率的影响存在浓度-效应和时间-效应关系。与对照组相比,1.26 mg/L Cd2+组鲤在不同暴露时间的红细胞微核率和核异常率均极显著(P<0.01),核异常率在72 h显著(P<0.05)增加,72 h后表现为极显著(P<0.01)增加。Cd2+对鲤外周血淋巴细胞、单核细胞和嗜中性粒细胞比例的影响存在浓度-效应和时间-效应关系。相同Cd2+浓度下,鲤淋巴细胞比例随暴露时间增加先降低后上升,同一暴露时间淋巴细胞比例随Cd2+浓度增加而降低。相同Cd2+浓度下,鲤单核细胞和嗜中性粒细胞比例随暴露时间增加先升高后降低,同一暴露时间嗜中性粒细胞比例随Cd2+浓度增加而升高。研究表明,Cd2+对鲤具有遗传毒性效应,且随Cd2+浓度增加而增强。     

Cr6+对泥鳅外周血细胞微核率的影响

利用六价铬离子(Cr6+)染毒泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus),采用微核试验法,以外周血红细胞的微核率为指标,研究Cr6+对泥鳅的遗传学毒性。结果显示,Cr6+对泥鳅具有一定的毒性;当浓度增加或染毒时间延长,均会引起微核率增加,而且高浓度(160～200 mg/L)和长时间染毒(8 d)均出现了显著性差异,微核率与染毒浓度以及与处理时间之间均有较为明显的正相关性,即具有剂量效应和时间效应;研究表明含铬废水排入环境对水生生物会造成不同程度的影响。     

离子液体［Ｃ８Ｍｉｍ］Ｃｌ对泥鳅毒性效应的研究

以泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)为受试动物,采用急性毒性、遗传毒性及生理毒性试验,研究了[C8Mim]Cl对生物体的毒性效应.结果表明,[C8Mim] Cl对泥鳅有一定的毒性,其对泥鳅24h、48 h的LC50分别为324.13 mg/L、262.77mg/L,安全浓度为51.80 mg/L;各处理组的微核率均高于对照组(P＜0.05),且随着处理浓度的升高和时间的推移,红细胞微核率都有明显的升高；处理组血清中的谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)活力均明显高于对照组(P＜0.05),且随离子液浓度升高以及时间的推移而增高；[C8Mim] Cl对泥鳅有显著的毒性作用.     

不同浓度氟化物对鸡红细胞微核形成的影响

为研究氟化物对鸡红细胞微核形成的影响,选用36只1日龄罗曼褐公鸡,随机分为6组,每组6只,第六组为对照组,第一到第五组为实验组,在饮水中添加不同水平的氟化物,使水中氟的含量分别为2.5、1.25、0.625、0.3125、0.1563mg/mL,试验期为3个月。生物统计结果表明,0.1563mg/mL剂量组,红细胞微核细胞率与对照组无明显差异,其他各组微核细胞率随氟剂量的增高而升高(P<0.01)。结果表明氟化物为潜在的诱变物。     

铜、锌对泥鳅细胞DNA损伤及金属硫蛋白表达的影响

采用0、100、200、400、800μmol/L的硫酸铜和0、200、400、800、1600μmol/L的氯化锌分别处理泥鳅鳍细胞系,培养24 h后,用单细胞凝胶电泳检测其DNA损伤情况,同时对金属硫蛋白基因的表达进行研究。试验结果表明,随着两种重金属浓度的增加,泥鳅鳍细胞的DNA损伤程度呈现明显的剂量依赖性。当硫酸铜浓度≥200μmol/L、氯化锌浓度≥400μmol/L时,细胞的拖尾率、彗尾DNA比例、彗星尾长、彗星尾距和Olive尾矩均显著增大(P<0.05)。泥鳅细胞金属硫蛋白基因的表达量随着硫酸铜浓度的升高呈现出短暂稳定后显著下降的趋势,而随着氯化锌浓度的增大呈现出显著上升再显著下降的趋势,表明氯化锌浓度≤400μmol/L时可显著诱导泥鳅鳍细胞系金属硫蛋白的转录表达。综合来看,与锌相比,泥鳅鳍细胞对铜的解毒能力和耐受力更差。因此,铜污染对泥鳅细胞的遗传毒性更加明显。本研究将为探讨重金属对生物的毒性效应及生物学监测提供理论依据。     

饲料中绿原酸对泥鳅生长性能、消化酶活性、免疫功能及抗氧化能力的影响

（目的）本试验以泥鳅为研究对象，探究饲料中添加不同浓度绿原酸（Chlorogenic acid）对泥鳅生长性能、消化酶活性、免疫功能及抗氧化能力的影响。（方法）试验选用无病无伤初始体重为（3.50±0.01 g/尾）的泥鳅，随机分为5组，在基础饲料投喂中分别添加0、200、400、600和800 mg/kg的绿原酸试验饲料，每组3个重复，饲养56 d 。饲养试验结束后，测定泥鳅生长性能、消化酶活性、生化指标、免疫功能及抗氧化能力。（结果）试验表明，与对照组相比较饲料中加入绿原酸可以显著增高泥鳅的终末体质量（FBW）、增重率（WGR）和特定生长率（SGR） （P <0.05）；且显著提高肝脏和肠道中蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶的活性（P <0.05）以及肝脏与肠道中总抗氧化能力（T-AOC）、过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活性，丙二醛（MDA）的生成被降低。肝脏中谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）活性随绿原酸浓度增加而提高，分别在400 mg/kg和600 mg/kg时达到最大值。随着绿原酸浓度的升高，血清中AST、ALT活性均显著下降（P <0.05）。随着绿原酸浓度的增加，血清中乳酸脱氢酶（LDH）逐渐下降，在浓度400 mg/kg时达到最低值；血清补体3（C3）和补体4（C4）含量先升高后下降，分别在绿原酸浓度为400 mg/kg和600 mg/kg时达到峰值含量；血清中免疫球蛋白M（IgM）水平显著升高（P <0.05），在浓度为600 mg/kg时达到最大；血清中溶菌酶（LYS）含量先上升后下降，在浓度为400 mg/kg时含量为最大值。（结论）结果表明，在饲料当中添加400～600 mg/kg绿原酸可显著提高泥鳅生长性能和消化酶活性（P <0.05），增强泥鳅的免疫功能和抗氧化能力。     

Effects of cell-cycle arrest agents on cleavage and development of loach (Misgurnus anguillicaudatus) embryos

The aim of this study was to determine the lowest concentration of nocodazole and colchicine to arrest blastomere division during the cleavage stage of loach embryos and to assess the reversibility and toxicity of the treatments in the treated embryos. Eight-cell loach embryos were incubated for 4, 8, 12, or 16 h in 1/10× Holtfreter supplemented with either nocodazole, an inhibitor of tubulin polymerization, or colchicine, an inhibitor of tubulin assembly. Complete arrest of cell cycle was observed, at a colchicine concentration of 0.996 mM and at a nocodazole concentration of 0.275 μM, respectively (the lowest effective concentration). No major morphological alteration in chromatin was observed. Reversibility and toxicity of both agents were dose and exposure period dependent. For both agents, prolonging cleavage arrest for more than 4 h (at the effective concentrations) is detrimental to development of embryos. Nocodazole treatment was less cytotoxic, whereas the concentrations of colchicine which induce cleavage arrest were detrimental to development beyond the blastula stage. Toxic effects beyond the blastula stage could be minimized for both agents by reducing the period of treatment and concentration. This revised version was published online in August 2006 with corrections to the Cover Date.     

重铬酸钾对不同倍性泥鳅鳍细胞系的毒性效应

以二倍体和三倍体泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)鳍细胞系(DIMF和TRMF)为实验材料,研究了重铬酸钾对细胞的氧化损伤、微核形成以及金属硫蛋白表达情况的影响,旨在多角度探讨重铬酸钾对细胞系的毒性效应,建立适合监测其污染情况的指标。采用MTT法测定了细胞的半数抑制浓度;使用试剂盒测定了3种主要抗氧化酶活性;吉姆萨染色后观察了细胞微核的变化,并通过实时定量PCR方法测定了金属硫蛋白的表达情况。结果表明,24 h急性毒性实验两种细胞系的半抑制浓度分别为(25.3±1.2)μmol/L、(27.9±0.6)μmol/L,DIMF对重铬酸钾的敏感性要高于TRMF。当重铬酸钾浓度为0~30μmol/L时,二个细胞系的超氧化物歧化酶(SOD)活性随染毒浓度升高而升高。当重铬酸钾浓度为0~20μmol/L时,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性逐渐升高,浓度为30~40μmol/L时,其活力开始下降。两种细胞系的谷胱甘肽S转移酶(GST)活性随重铬酸钾浓度增大逐渐降低。二倍体细胞系氧化酶活性均低于三倍体。微核试验显示,重铬酸钾可引起细胞核损伤,形成微核。当重铬酸钾浓度为40μmol/L时,DIMF、TRMF微核率达到最大,分别为7.33‰和8.00‰,DIMF微核率要低于TRMF。实时定量PCR结果显示,对照组金属硫蛋白(MT)基因表达量很低,但经重铬酸钾胁迫后,MT基因表达量显著升高(P0.01)。     

二倍体泥鳅与大鳞副泥鳅及杂交F1精子结构与活力

二倍体泥鳅与大鳞副泥鳅杂交能够顺利获得杂交后代,其正反交核型都为（2n=49）,但杂交后代精巢表现出明显的发育迟缓现象,杂交泥鳅自交与回交实验表明,其雄性不可育。为了解二倍体泥鳅和大鳞副泥鳅杂交F₁雄性不育的原因,实验通过计算机辅助精子活力分析系统（CASA）、光学显微镜、扫描电镜、透射电镜、流式细胞技术分别对二倍体泥鳅（DD）、大鳞副泥鳅（PP）、其正反杂交F₁（DP）和（PD） 4种泥鳅精子的形态结构与活力进行了分析。结果显示,激活30 s时,DD和PP的精子运动率分别为76.50%±0.70%和75.17%±8.60%,极显著高于DP （3.65%±1.75%）和PD （2.68%±0.63%）,且杂交泥鳅的精子的平均运动速度（VAP）、平均曲线速度（VCL）、平均直线运动速度（VSL）等运动参数也极显著低于DD和PP,说明杂交泥鳅精子的活力极其低下。应用流式细胞技术对4种泥鳅精巢内细胞进行倍性鉴定,发现DD和PP精巢内大多为1N精子,而DP和PD精巢内除了正常单倍体精子外,还有大量的2N和4N以及少量的8N细胞。通过扫描电镜和透射电镜...     

泥鳅养殖水体中一株芽孢杆菌的筛选及其净水效果研究

从泥鳅（Misgurnus anguillicaudatus）养殖池塘水体中分离到4株芽孢杆菌，筛选后获得1株优势目的菌株NQ1；根据形态学特征和生理生化特性结果，将其鉴定为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。安全性试验证实，试验浓度（最高为1×107 cfu/mL）的枯草芽孢杆菌NQ1对泥鳅是安全的。水质净化试验结果显示，在泥鳅养殖水体中加入1×107 cfu/mL浓度的NQ1，14天后氨氮和亚硝酸盐含量较对照组分别降低34.97%和89.46%，表明该菌的净水效果明显，具有作为水质改良微生态制剂开发应用的潜力。     

铬对鲤嗜多染红细胞微核的诱变效应

在实验室条件下以不同浓度Cr^6 (0．122、0．670、1．219、3．657、10．971和32．913mg／L)水体染毒鲤鱼种40d，微核试验结果表明：处理组铬浓度的提高，其嗜多染红细胞微核率相应提高。鲤暴鳝于Cr^6 3．66～32．91mg／L时，铬处理鱼微核细胞率较对照组鱼有明显差异。鱼肌肉、鳃、肝和肾组织内的Cr^6 残留量同其微核率呈正相关关系。     

四倍体和二倍体泥鳅及大鳞副泥鳅营养成分分析

利用常规肌肉营养分析方法测定了四倍体泥鳅、二倍体泥鳅和大鳞副泥鳅的肌肉营养成分。结果表明: 四倍体泥鳅、二倍体泥鳅和大鳞副泥鳅肌肉中蛋白质含量(鲜重) 分别为18. 68%、18. 69%和18. 20%; 脂肪含量分别为0. 796%、0. 106%和1. 203%; 水分含量分别为79. 81%、79. 52%和78. 40%; 灰分含量分别为0. 951%、11188%和1. 162%。3种泥鳅肌肉中都含有常见的17种氨基酸, 其中包括9种人体必需氨基酸。氨基酸总量(占鲜重)分别为17. 57%、18. 11%和17. 47%; 必需氨基酸总量分别为7. 84%、7. 98% 和7. 76%, 必需氨基酸的构成比例符合FAO /WHO 的标准。鲜味氨基酸含量分别为6. 98%、7. 33%和6. 95%。经比较分析, 四倍体泥鳅和二倍体泥鳅肌肉中蛋白质含量、17种氨基酸含量、氨基酸总量和必需氨基酸总量均很接近, 但都明显高于大鳞副泥鳅。     

四倍体泥鳅、二倍体泥鳅和大鳞副泥鳅营养成分分析

利用常规肌肉营养分析方法测定了四倍体泥鳅、二倍体泥鳅和大鳞副泥鳅的肌肉营养成分。结果表明：四倍体泥鳅、二倍体泥鳅和大鳞副泥鳅肌肉中（鲜重）蛋白质含量分别为18．68％、18．69％和18．20％；脂肪含量分别为0．796％、0．106％和1．203％；水分含量分别为79．81％、79．52％和78．40％；灰分含量分别为0．951％、1．188％和1．162％。三种泥鳅肌肉中都含有常见的17种氨基酸，其中包括9种人体必需氨基酸；氨基酸总量（占鲜重）分别为17．57％、18．11％和17．47％；必需氨基酸总量分别为7．84％、7．98％和7．76％；必需氨基酸的构成比例符合FAO／WHO的标准。鲜味氨基酸含量分别为6．98％、7．33％和6．95％。经比较分析，四倍体泥鳅和二倍体泥鳅肌肉中蛋白质含量、17种氨基酸含量、氨基酸总量和必需氨基酸总量均很接近，但都明显高于大鳞副泥鳅。