灭多威防治棉铃虫药效试验

１９９３～１９９５年，用灭多威进行了防治棉铃虫田间药效试验。试验结果表明：用２４％万灵水剂７５０～１１２５ｍｌ·ｈｍ￣（－２），喷后３天防效达８９．４％～９３．６％；喷后７天防效达６６．１％～７７．６％，明显高于４０％久效磷用１５００ｍｌ·ｈｍ￣（－３）的防效。灭多威与辛硫磷、久效磷混用防治棉铃虫具一定的增效作用，灭多威与辛硫磷混用的ｃ·ｆ值高于与久效磷混用的ｃ·ｆ值。     

苏云金芽胞杆菌制剂及其与小卷蛾斯氏线虫对腰果重要害虫的作用效果

室内测定了苏云金芽胞杆菌（Bacillus thuringiensis,Bt）对腰果重要害虫腰果细蛾(Acrocercops syngramma)和腰果云翅斑螟（Nephopteryx sp.）幼虫的作用效果。研究表明,在500或1000倍浓度下,Bt对低龄（1~3龄）腰果细蛾幼虫的致死作用较强,致死率为70%~100%,但对高龄（4龄和5龄）腰果细蛾幼虫致死作用较低（20.0%~52.5%）。Bt对腰果云翅斑螟3龄幼虫的致死作用相对较慢,在500倍浓度下作用120 h后致死率为75%。2000倍Bt与200 IJs/皿小卷蛾斯氏线虫Steinernema carpocapsae All对腰果云翅斑螟联合作用48 h后表现为增效作用,致死率达90%。     

两个EoNPV毒株对茶尺蠖和灰茶尺蠖的毒力差异

通过确定不同茶尺蠖核型多角体病毒（Ectropis obliqua nucleopolyhedrovirus,EoNPV）毒株对茶尺蠖（Ectropis obliqua）和灰茶尺蠖（Ectropis grisescens）毒力水平的差异,为有效提高茶尺蠖病毒的防效提供理论基础。采用浸渍法,测定EoNPV浙江毒株（EoNPV-ZJ）和江西毒株（EoNPV-JX）对茶尺蠖和灰茶尺蠖3龄幼虫的毒力水平;通过克隆测序,多重比较分析EoNPV-ZJ和EoNPV-JX毒株同源重复区（hrs）。结果表明,EoNPV-JX对灰茶尺蠖和茶尺蠖3龄幼虫14 d的LC₅₀分别为5.95×10⁶ PIB·mL^-1和3.14×10⁶ PIB·mL^-1,EoNPV-ZJ对灰茶尺蠖和茶尺蠖3龄幼虫14 d的LC₅₀分别为1.13×10⁷ PIB·mL^-1和5.04×10⁶ PIB·mL^-1。EoNPV-JX和EoNPV-ZJ的hr1大小均为1 795 bp,含有11个完全回文序列,hr3大小均为665 bp,含有3个完全回文序列,与已报道的安徽毒株（EoNPV-AH）无差异;而hr2差异较大,其中EoNPV-JX hr2为864 bp,含有7个完全回文序列,EoNPV-ZJ hr2为1 168 bp,含有12个完全回文序列,均少于EoNPV-AH的18个完全回文序列。综合分析显示,EoNPV不同毒株对茶尺蠖的毒力水平高于其近缘种灰茶尺蠖;EoNPV-JX毒株对灰茶尺蠖的毒力高于EoNPV-ZJ毒株,造成EoNPV不同毒株毒力差异的主要原因可能与其hr2序列回文序列个数相关。     

Bt转基因玉米的抗虫效果及其对田间动物种群影响的初步研究

通过比较Bt转基因玉米和常规玉米（丹玉13号）的玉米螟卵量、被害株数及田间一些动物的种群数量，结果表明：Bt转基因玉米对玉米螟具有较高的抗性，而且这种作用是持久的、稳定的。另外还发现，Bt转基因玉米对非鳞翅目昆虫及其他动物的影响甚微，可以认为Bt转基因玉米对田间生态环境是安全的。     

异色瓢虫对取食转Bt基因棉花的扶桑绵粉蚧的捕食功能反应

以转Bt基因棉和常规棉为材料,通过室内测定,研究了以转Bt基因棉为食的扶桑绵粉蚧（Phenacoccus solenopsis）对异色瓢虫（Harmonia axyridis）成虫功能反应的影响。结果表明,异色瓢虫对用转Bt基因棉处理的扶桑绵粉蚧的捕食量与常规棉无显著差异,捕食量均随着密度的增加而逐渐增大,捕食功能反应符合Holling-Ⅱ模型。异色瓢虫对用转Bt基因棉处理的扶桑绵粉蚧的日最大捕食量明显大于常规棉,所用处置时间短于常规棉,瞬间攻击率无显著差异。     

速灭杀丁与辛硫磷混用防治荔枝蝽蟓的增效作用

试验证明,速灭杀丁与辛硫磷混用,对半翅目荔枝蝽蟓的防治有较好的增效作用,其中以速灭杀丁:辛硫磷=1:9混配,可增效10倍以上。这对降低防治成本,扩大防治范围,延缓害虫抗药性的产生具有重要意义。     

江苏沿海棉区烟粉虱发生规律与防治技术

江苏沿海地区是我国重要产棉基地,常年种植棉花170khm^2以上,近几年来随着转Bt基因抗虫棉（简称Bt棉下同）面积不断扩大（现已占90％以上）,使得曾经是棉花主要害虫的棉铃虫已得到控制,而使一些次要害虫现已成为棉田主要害虫及防治对象。烟粉虱就是江苏沿海棉区转Bt基因抗虫棉棉田近年来新发生的一种多食性害虫,对棉花的为害逐年加重,甚至达到暴发。     

高温胁迫对盛铃期Bt棉棉铃中杀虫蛋白表达量及氮代谢的影响

 以2个转Bt基因抗虫棉,泗抗1号（常规种）、泗抗3号（杂交种）为材料,研究了高温对转Bt基因抗虫棉盛铃期棉铃中杀虫蛋白表达量和氮代谢的影响。研究结果表明,（1）高温胁迫显著降低转Bt基因抗虫棉品种铃壳中杀虫蛋白表达量,且随着温度水平的提高,下降的幅度也更大,并以常规种泗抗1号下降幅度较大。（2）高温胁迫后,铃壳中杀虫蛋白含量下降幅度大的,可溶性蛋白含量下降幅度也大,谷氨酸丙酮酸转氨酶（GPT）活性下降幅度也大,游离氨基酸含量、蛋白酶和肽酶活性增加幅度也较大,品种间同样表现为常规种的变化幅度较大。     

苏云金芽孢杆菌的概况及其研究进展

苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)杀虫剂是对人和环境友好的安全型细菌杀虫剂。目前Bt杀虫剂已被广泛应用,但因使用剂量较大,导致防治害虫时费用过高。若在生物防治中使用超高效的细菌杀虫剂,就可降低其使用剂量。Bt 00-50-5菌株是从美国引进的高效杀虫菌株,其晶体蛋白的特征分析尚未完成,其毒素的作用机理研究也未进行。本项目即将开展如下研究：(1)先用具有特异性杀虫功能的Bt 00-50-5菌株进行发酵,继续完成对防治中国害虫防治效果的评价;再分析细菌的编码杀虫毒素基因和毒素     

新型麦田除草剂的筛选及残留对后茬作物药害分析

大田药试验表明，扑草净与燕麦枯混用对麦田阔叶杂草和野燕麦防效显著，阔叶净（巨星），甲磺隆，２，４－Ｄ丁酯与扑草净混用对阔叶杂草防效也较好，室内盆栽玉米，大豆进行残留分析表明，甲磺隆对后茬作物玉米，大豆有明显的抑制作用。     

茶尺蠖类免疫球蛋白基因EoHML的克隆和表达分析

类免疫球蛋白（Hemolin）是一种鳞翅目昆虫特有的免疫相关蛋白,也是唯一的无脊椎动物免疫球蛋白家族成员。本实验应用RACE技术获得了茶尺蠖（Ectropis obliqua Prout）类免疫球蛋白基因的全长cDNA序列,命名为EoHML（GenBank登录号：KM885983）,并分析了相关生物信息学特性,检测了病毒感染后基因的表达水平。结果表明,EoHML基因序列全长1β772βbp,包含1β239βbp的开放阅读框,编码412个氨基酸,预测蛋白分子量大小为45.8βkD,等电点（pI）为8.297,属于典型的分泌型蛋白,且具有昆虫Hemolin基因保守的4个Ig功能区和2个N-glycosylation位点。系统进化分析表明,该蛋白与目前已知的类免疫球蛋白氨基酸序列的亲缘关系都较远,与烟草天蛾（Manduca sexta）类免疫球蛋白氨基酸序列相似度最高,为53%。荧光定量检测结果表明,茶尺蠖核型多角体病毒（EoNPV）感染茶尺蠖幼虫后该基因表达量显著升高,最高表达量是正常对照的36.5倍,表明茶尺蠖EoHML基因可能参与了茶尺蠖对EoNPV的免疫代谢反应。     

基于化学生态学构建茶园害虫无公害防治技术体系

系统介绍了茶树害虫性信息素、虫害诱导茶树挥发物的生态功能、外源诱导茶树抗虫性以及非寄主次生代谢产物对茶尺蠖和假眼小绿叶蝉的行为调控效果四个方面的主要研究进展与应用,并在此基础上对茶园害虫的无公害防治体系进行了构建和展望。     

茶尺蠖发育历期的温度效应

观察研究结果表明,茶尺蠖(Ectropis Obliqua Prout)各虫态发育历期随着温度的上升而缩短,发育速率则随着温度的升高而加快,并探明了各虫态历期与期内均温之间的曲线关系模型。同时,用加权法和回归直线法分别计算了各虫态的发育起点温度和有效积温常数,结果表明两种方法计算的数据间差异不显著,表明两方法均可采用。验证结果表明,利用各虫态的发育起点和有效积温,推算茶尺蠖的发生代数及各虫态的发生期,与实际发生情况基本吻合。     

茶尺蠖核型多角体病毒(EoNPV)实时荧光定量PCR检测方法的优化及应用

选用茶尺蠖核型多角体病毒(EoNPV)基因组中序列特异性很高的p16基因为目标基因,通过设计引物、PCR扩增、目的片段与载体连接转化获得含p16基因的重组质粒进行测序,进而以经测序鉴定的p16基因的PCR纯化产物作为实时荧光定量PCR标准品模板,稀释后建立SYBR Green I荧光定量标准曲线,统计分析显示标准品浓度的对数值与Ct值之间存在良好的线性关系(R2=0.9981)。该方法的检测灵敏度为102,扩增产物形成单一的特异性熔解峰,组内组间变异系数均小于3%。同时分别对含有其他茶树害虫病毒和不同浓度的茶尺蠖病毒产品的样品进行检测,能明确样品中是否含有EoNPV及含量。根据已建立的方法对感染病毒后不同时间段的茶尺蠖幼虫进行检测,每克幼虫样本内p16基因拷贝数的增殖倍数对数值与感染时间呈正相关(R2=0.9935),可以获得茶尺蠖幼虫感染病毒后不同时间的增殖动态。上述结果表明,该方法能定性定量鉴定茶尺蠖核型多角体病毒,可用于茶尺蠖核型多角体病毒类生物农药的检测和感染过程检测。     

茶皂素对雷公藤乳油防治茶尺蠖幼虫的增效作用

测定了茶皂素对雷公藤乳油防治茶尺蠖幼虫的增效作用。结果表明,用1、2、4mg/ml茶皂素浸叶处理,对茶尺蠖2龄幼虫的毒杀作用不明显,第7天的毒杀效果只有27.03%~37.84%。用雷公藤乳油0.8、1.6、3.2、6.4mg/ml和12.8mg/ml浸叶处理,对茶尺蠖2龄幼虫的毒杀效果在第7天分别为27.27%、33.78%、40.54%、56.76%和63.51%。在0.8mg/ml浓度的雷公藤乳油中加入4mg/ml的茶皂素,对茶尺蠖幼虫的毒杀作用(84.42%)显著高于加1mg/ml茶皂素的毒杀效果(68.83%);而加入2mg/ml和4mg/ml的防效差异不显著。向不同浓度的雷公藤乳油中加入2mg/ml茶皂素,对茶尺蠖2龄幼虫的共毒系数在第1、3、5、7天分别为667.68、981.61、1706.15和1209.76,即增效5.68~11.10倍,达到相同的使用效果可减少雷公藤用量85%以上。对茶尺蠖4龄幼虫增效1.00~6.91倍,减少雷公藤用量50%以上。     

不同温度下鞍形花蟹蛛亚成蛛对茶尺蠖3日龄幼虫的捕食功能

鞍形花蟹蛛（Xysticus ephippiatus Simon）是茶园害虫的重要捕食性天敌,为了明确它对茶尺蠖（Ectropis obliqua Prout）的控制能力,在20、25、30℃ 3种不同温度条件下,研究了鞍形花蟹蛛亚成蛛对茶尺蠖3日龄（1龄末2龄初）幼虫的捕食反应。结果表明,鞍形花蟹蛛雌蛛和雄蛛对茶尺蠖3日龄幼虫的捕食功能反应均符合HollingⅡ型方程,在相同温度下,捕食量随着猎物密度的增大而增加。在25℃和30℃时,雌虫的捕食上限均为68头;雄虫的捕食上限以30℃时最大,为67头。相同条件下雌、雄蛛之间的捕食量没有明显差别,而温度对鞍形花蟹蛛的捕食量有明显影响。     

辣蓼粗提物对茶尺蠖的生物活性

辣蓼（Polygonum hydropiper L）粗提物对茶尺蠖3龄幼虫的室内生物活性测定结果表明，以95％的酒精为溶剂的辣蓼提取物效果最佳。在触杀试验中，95％酒精提取物处理后3d和7d的校正死亡率分别达到了44.22％和52.40％，乙酸乙酯提取物在3d和7d后校正死亡率也达到了29.25％和31.97％；非选择性拒食作用结果表明，95%的酒精提取物具有良好的拒食效果，12h和24h的拒食率分别达到了90.29％和84.15%。     

杀虫剂对小菜蛾幼虫的毒力研究

采用浸叶法测定10种杀虫剂对海南省海口、三亚、儋州小菜蛾田间种群的毒力。结果表明：10种药剂对海口地区小菜蛾3龄幼虫的毒力LC50大小顺序为：Bt＞氟啶脲＞多杀菌素＞茚虫威＞虫螨腈＞阿维菌素＞丁醚脲＞虫酰肼＞杀螟丹＞高效氯氰菊酯;三亚地区小菜蛾3龄幼虫的毒力LC50大小顺序为：Bt＞多杀菌素＞氟啶脲＞茚虫威＞虫螨腈＞阿维菌素＞虫酰肼＞丁醚脲＞杀螟丹＞高效氯氰菊酯;儋州地区小菜蛾3龄幼虫的毒力LC50大小顺序为：Bt＞多杀菌素＞茚虫威＞氟啶脲＞虫螨腈＞阿维菌素＞丁醚脲＞虫酰肼＞杀螟丹＞高效氯氰菊酯。3个地区     

叶面分离Bt及对茶树主要害虫高毒力菌株的筛选

通过分离培养基和分离方法的筛选,得到了从叶面分离Bt的有效方法。用此法从25种植物叶面分离出54株Bt,利用茶尺蠖、茶小绿叶蝉和茶橙瘿螨作为靶标昆虫,筛选对茶树主要害虫有毒力菌株,得到了对鳞翅目有效的菌株10株,对同翅目有效的菌株4株,但所有测试菌株均对茶橙瘿螨无效。