黑茶对胎牛血清诱导脂肪变性的HepG2细胞的影响

利用含有50%的胎牛血清的培养液处理HepG2细胞48 h,建立非酒精性脂肪变性细胞模型,分别从噻唑兰染色吸光度法(MTT值)、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)3个方面评价茯砖提取物(FZ)、六堡茶提取物(LB)、青砖茶提取物(QZ)、千两茶提取物(QL)清除肝细胞脂肪堆积的作用。结果表明,与模型组相比,加药处理组细胞的脂质堆积有缓解趋势,茯砖茶、六堡茶、千两茶、青砖茶提取物都可显著降低细胞内TG累积(P<0.01);而茯砖、青砖茶提取物对TC的清除效果较好(P<0.01),千两茶与六堡茶效果不明显。以上结果表明,黑茶提取物通过降低细胞内的脂类堆积,可能起到缓解脂肪变性的作用。     

茯砖茶对葡聚糖硫酸钠诱导UC小鼠炎症及肠道微生物的影响

为研究茯砖茶对葡聚糖硫酸钠（Dextran sulfate sodium,DSS）诱导的溃疡性结肠炎（Ulcerative colitis,UC）小鼠的抗炎作用及肠道微生物多样性的影响,将60只C57BL/6雌性小鼠随机分成正常对照组、10 mg·kg^-1 EGCG对照组、高剂量茯砖茶（300 mg·kg^-1）对照组、DSS模型组、DSS+10 mg·kg^-1 EGCG处理组、DSS+低剂量茯砖茶（100 mg·kg^-1）处理组、DSS+中剂量茯砖茶（150 mg·kg^-1）处理组、DSS+高剂量茯砖茶（300 mg·kg^-1）处理组,对照组n=5,处理组n=9。DSS造模1周后,灌喂处理4周,试验5周后处死小鼠,观察小鼠结肠组织病理学变化,评估小鼠结肠炎疾病指数（Disease activity index,DAI）,检测小鼠血清中IL-6、IL-8、IL-1β、TNF-α、IFN-γ等炎性因子水平及小鼠结肠组织中JAK2、STAT3基因表达水平,利用PCR-DGGE、克隆测序等技术分析小鼠肠道微生物菌群多样性。结果表明,与DSS模型组相比,灌喂EGCG和不同剂量茯砖茶后,小鼠生存质量、结肠组织形态明显改善,显著降低了小鼠血清中IL-6、IL-8、IL-1β、TNF-α、IFN-γ水平（P<0.05）;显著降低JAK2、STAT3基因表达（P<0.05）,抑制了JAK2/STAT3炎性信号通路;肠道微生物多样性增加、丰富度提高,不同处理组优势菌群发生变化。综上所述,茯砖茶可通过抑制JAK2/STAT3炎性信号通路以及调节小鼠肠道微生物多样性来改善DSS诱导的小鼠溃疡性结肠炎。     

茯砖茶提取物对葡聚糖硫酸钠诱导小鼠炎症性肠病的保护作用研究

茯砖茶是我国特有的一种黑茶。本文以茯砖茶为原料,分别制备了茯砖茶水提物（FWE）、经95%乙醇沉后得到的醇溶物（FES）和醇沉物（FEP）,并探究了3种提取物对葡聚糖硫酸钠诱导小鼠炎症性肠病的保护作用。研究表明,3种茯砖茶提取物都能够减轻炎症性肠病的肠道结构损伤,其中FWE组效果最好;同时茯砖茶提取物可以显著提升小鼠血清和肠道组织上清液中超氧化物岐化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽（GSH）水平以及降低白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平,且作用效果均为FWE组>FES组>FEP组;在蛋白水平上,FWE组小鼠肠道组织的NF-κB p65蛋白水平有所降低;IκBα的蛋白水平在FWE组和FES组中有所增加;核因子E2相关因子2（Nrf2）和血红素氧化酶-1（HO-1）的相关蛋白水平在FWE组和FES组也有所增加。综上所述,茯砖茶提取物可以通过抗氧化和抗炎途径对葡聚糖硫酸钠诱导小鼠炎症性肠病发挥预防保护作用。     

陈年茯砖茶多酚类对老年人肠道菌群的影响研究

为了揭示陈年茯砖茶多酚类对老年人肠道菌群多样性及结构的影响,从陈放1年及7年的茯砖茶中提取、纯化茶多酚,将等量茶多酚的提取物分别加入含有65岁老年人的肠道菌群混合培养基中进行体外静态厌氧培养,在0βh、4βh、8βh、12βh及24βh时对7年陈茶多酚组（O组）、1年陈茶多酚组（N组）及空白组（B组）进行茶多酚和短链脂肪酸（SCFAs）的含量测定,并进行肠道菌群的高通量测序,对测序结果进行生物信息学分析。结果显示,7年陈茯砖茶的茶多酚类在与老年人肠道菌群的体外互作下,SCFAs的含量较对照组显著提高,老年人肠道菌群的丰度及多样性水平也有所提升。在4βh及12βh时,能明显降低埃希氏菌属（Escherichia）及γ-变形菌纲_B38（γ-Proteobacteria_B38）的相对丰度,同时提高拟杆菌属（Bacteroides）、双歧杆菌属（Bifidobacterium）及普拉梭菌属（Faecalibacterium）的相对丰度。研究表明,7年陈茯砖茶的茶多酚类比1年陈茯砖茶的茶多酚类更有益于改善老年人的肠道菌群结构,在老年人的营养保健方面更具潜在的价值。     

不同年份茯砖茶水提取物的抑菌效果研究

选用1996、2002及2009年生产的茯砖茶水提取物分别测定其对大肠杆菌（Escherichiacoli）、沙门氏杆菌（Salmonella）、溶血性链球菌（Streptoeoccthehemolytcus）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcusaureus）、枯草芽孢杆菌（BacillusSllbtilis）、志贺氏杆菌（Shigella）不同供试细菌的抑制效果,结果显示均有一定的抑制作用。2009及2002年生产的茯砖茶水提取物对志贺氏杆菌的抑菌效果最好,抑菌圈直径分别达到20．40mm±0．87mm及18．10mm±0．91mm;1996年生产的茯砖茶水提取物仅对沙门氏菌和大肠杆菌有抑制作用,但效果不太明显。最低抑菌浓度的测定结果显示,2009年生产的茯砖茶的抑菌效果最好,1996年生产的茯砖茶的抑菌效果最差。茯砖茶的保存时间越长,其抑菌效果越差。     

茯砖茶对NAFLD大鼠肠道黏膜屏障及肝损伤的保护作用研究

为探讨茯砖茶对高脂诱导的非酒精性脂肪肝病（Non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD）大鼠肠黏膜屏障及肝损伤的保护作用,将SD雄性大鼠随机分为正常组、NAFLD组、茯砖茶低、高剂量组,每组8只。通过分析大鼠的采食量、体重变化、血脂指标、肝脏指标及病理切片来评估NAFLD大鼠模型的构建情况及茯砖茶的干预作用。通过分析空肠与结肠病理及PAS染色切片、绒毛高度/隐窝深度值（V/C值）、血清二胺氧化酶（DAO）和脂多糖（LPS）活力评估肠道完整性和通透性;通过分析空肠上皮间淋巴细胞（JIL）数量和血清肿瘤坏死因子（TNF-α）活力评估肠道相关炎症。结果表明,茯砖茶能减少NAFLD大鼠的采食量和体重,降低血脂水平,减少血清中谷草转氨酶（AST）和谷丙转氨酶（ALT）活力,并抑制肝脏的脂质聚集和炎细胞浸润。茯砖茶还降低了血清炎症因子TNF-α和血清LPS的水平,并使血清DAO活力上升。同时,茯砖茶抑制了NAFLD大鼠空肠和结肠绒毛中发生的炎细胞浸润现象,减少了空肠绒毛脱落、断裂、稀疏和紊乱现象,增加了空肠绒毛V/C值,降低了空肠上皮间淋巴细胞数量,增加了空肠和结肠的杯状细胞数量。这些结果说明,茯砖茶能够有效的改善高脂饮食诱导的肠道黏膜屏障及肝损伤,起到防治NAFLD的作用。     

绿茶、红茶和茯砖茶水提物对肠道微生物体外发酵特性的影响

为探究不同茶样的水提物与肠道微生物的互作效应,以健康大学生粪便为菌源,采用体外厌氧发酵模式,结合传统培养技术和气相色谱法,研究绿茶、红茶和茯砖茶的水提物24 h体外发酵过程中pH值、短链脂肪酸、肠道微生物的变化,并计算益生元指数PI(Prebiotic Index)和B/E值(Bifidobacterium/Enterobacterium)。结果表明绿茶、红茶和茯砖茶水提物均会引起发酵液的pH大幅下降,其中茯砖茶组的pH下降幅度最大。同时,3种茶叶水提物都能显著增加短链脂肪酸的产量,其中绿茶对乙酸、丙酸、异丁酸、异戊酸、戊酸和总短链脂肪酸的提高效果最佳,而茯砖茶对丁酸的提高幅度最大。3种茶叶水提物都能调节肠道微生物的结构组成,促进双歧杆菌的增长,抑制拟杆菌、肠杆菌和梭状芽孢杆菌的生长;其中茯砖茶组对双歧杆菌的促进作用最大,对肠杆菌和梭状芽孢杆菌的抑制效果最明显,绿茶组对拟杆菌的抑制效果最大;但绿茶组和红茶组都能促进乳杆菌的增殖,茯砖茶组却表现出抑制作用。另外通过分析PI值和B/E值,发现绿茶、红茶和茯砖茶组都具有良好的益生作用,4 h阶段茯砖茶组的益生元指数PI值最大,发酵8、12、24 h阶段绿茶组益生元指数PI值最大;而整个发酵过程茯砖茶组的B/E均保持最大。本研究为不同茶叶在青年消费市场中的进一步扩大推广提供了基础数据和科学依据。     

一种黑茶不同提取物中氟生物有效性研究

以Caco-2细胞为模型,对比分析了一种黑茶不同提取物中氟的吸收转运及生物有效性。结果表明,黑茶不同提取物组分中氟含量差异明显,粗茶多糖组分（RTP）氟含量最高,是水提取物（TE）氟含量的2.17倍,RTP经水透析后得到的透析多糖（DTP）氟含量则显著降低,仅为RTP氟含量的1/22,TE氟含量的1/10。来自3种茶提取物中的氟以及氟化钠（NaF）中的氟在Caco-2细胞模型中的正向和逆向转运都有时间和浓度剂量效应,随着时间的延长、浓度升高而显著增加;处理1 h后,NaF处理组细胞对氟正向和逆向转运量最高,DTP中氟的正向和逆向转运量最低,与其他各处理达到显著水平,TE和RTP处理间差异不明显。表观渗透系数（P_app）随处理时间延长呈下降趋势,其中,NaF中的氟的P_app在4 h各阶段都大于1×10^-5 cm·s^-1,说明其生物有效性良好,易于吸收;TE和RTP氟处理2 h后,P_app下降至小于1×10^-5 cm·s^-1,说明其生物有效性中等;DTP氟处理各阶段P_app都最小,在处理1 h后下降至小于1×10^-5 cm·s^-1,提示其吸收性最弱,生物有效性最差。NaF、TE以及DTP中的氟在所试浓度范围内,是以被动扩散为主,而RTP氟在较高浓度存在主动转运形式。由此可见,在小肠吸收模型中,黑茶提取物中的氟较NaF中的氟生物利用度低,而茶叶中氟的结合形式影响其生物有效性。     

油酸在黄曲霉毒素诱导肝细胞损伤中的保护作用

为了解油酸在黄曲霉毒素B1（aflatoxin B1,AFB1）诱发的肝损伤中所起的保护作用,以体外培养的肝细胞（L-02）作为靶细胞,研究油酸的保护机制。设置3组实验：对照组（无处理）、AFB1组（只有AFB1）、油酸组（AFB1和油酸共同处理）,药物处理24h后显微镜观察细胞形态,细胞增殖-毒性检测试剂盒（Cell Counting Kit-8, CCK-8）检测细胞活力,荧光法检测活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平,Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡率,蛋白质免疫印迹检测血红素加氧酶-1（heme oxygenase 1,HO-1）、Caspase-3以及Survivin蛋白的表达。采用t检验或单因素方差分析进行统计分析。结果发现：与对照组相比,AFB1暴露能够明显抑制细胞活力（P<0.05）,促进细胞凋亡（P<0.001）,升高ROS水平（P<0.001）;与AFB1组相比,油酸作用后细胞活力显著增加（P<0.01）,细胞凋亡减少（P<0.01）,ROS水平降低（P<0.001）。与AFB1组相比,油酸作用后可显著提高 HO-1（P<0.05）和抑凋亡蛋白Survivin的表达（P<0.05）,降低凋亡蛋白Caspase-3（P<0.01）表达。因此认为油酸对AFB1引发的肝细胞损伤具有保护作用,其机制可能与其通过促进抗氧化酶蛋白HO-1的表达,从而降低氧化应激水平,降低细胞凋亡有关。     

茯砖茶改善2型糖尿病小鼠代谢紊乱的效果研究

为探究茯砖茶能否通过调节肠道微生物群改善2型糖尿病(T2DM)的代谢紊乱,建立T2DM小鼠模型,给予400 mg·kg-1茯砖茶水提取物灌胃干预,观测T2DM小鼠的饮食量、饮水量、空腹体重、空腹血糖、糖耐量等日常指标,血清中胰岛素(INS)、总胆汁酸(TBA)、总胆固醇(TC)、总甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL...     

Antitumor Effect of a Polypeptide Fraction from Arca subcrenata in Vitro and in Vivo

Arca subcrenata Lischke is a marine traditional Chinese medicine. The study investigated the antitumor effects of P2, a polypeptide fraction from A. subcrenata, and its toxicity in vitro and in vivo. The results showed that P2 could inhibit the proliferation of seven tumor cell lines, especially in HeLa and HT-29 cell lines. The IC₅₀ values were 11.43 μg/mL for HeLa and 13.00 μg/mL for HT-29 treated by P2 for 48 h. P2 had little cytotoxicity on normal liver cells (L-02). The maximum tolerated dose (MTD) of P2 on KM mice was 1000 mg/kg by i.p. or i.v. The tumor growth inhibitory ratios of P2 were 26.4%, 41.4% and 46.4% for H-22, and 34.0%, 45.8% and 60.1% for S-180 tumor-bearing mice. The results demonstrated that P2 might be a potential antitumor agent with high efficiency in dose-dependent and time-dependent manners and low toxicity.     

EGCG抑制Nicotine诱导肺腺癌H1299细胞JAK2/STAT3 mRNA的表达研究

为探索EGCG对Nicotine诱导肺癌细胞增殖的抑制作用,本研究通过MTT实验筛选出EGCG、Nicotine对肺腺癌细胞H1299的最佳作用浓度,利用实时荧光定量PCR技术检测EGCG、Nicotine对H1299细胞中Bax、Bcl-2、Jak2和Stat3基因mRNA相对表达量的变化。实验结果表明,EGCG对H1299细胞的半抑制浓度IC₅₀值约为32βμmol·L^-1（24βh）、15βμmol·L^-1（48βh）;1βμmol·L^-1的Nicotine对H1299细胞促增殖作用明显;以15βμmol·L^-1的EGCG预处理H1299细胞24βh可显著下调1βμmol·L^-1 Nicotine的促增殖作用（P<0.05）。1βμmol·L^-1的Nicotine处理H1299细胞可明显降低JAK2/STAT3信号通路中Bax基因mRNA的表达,增加Bcl-2、Jak2、Stat3基因的mRNA表达;15βμmol·L^-1 EGCG预处理H1299细胞可反向调控Nicotine诱导所致JAK2/STAT3信号通路中Jak2、Stat3和Bax、Bcl-2基因表达量的变化,结果具有显著性差异（P<0.05）。由此可知,EGCG对Nicotine诱导的肺腺癌H1299细胞增殖及JAK2/STAT3信号通路中促增殖基因mRNA的表达起抑制作用。     

The effects of varying sprouting periods on the nutritional quality of normal yellow corn (Zea mays)

Weanling male albino rats (45-60 g) were used to study the effects of varying sprouting periods on the nutritional quality of normal yellow corn. The yellow corn (YC) was sprouted for 24, 36 and 48 h (SYC24, SYC36, SYC48). The unsprouted corn (UYC) and casein (CA 100) served as negative and positive controls. African yam bean (AYB) was sprouted for 48 h and blended with the corn in a 70:30 (protein basis). Sprouting for 48 h caused decreases in most of the parameters tested except for the liver weight and N and calcium (CA) balance. The 24 h sprouting produced increases except for weight gain and PER, liver weight and N, phosphorus (P) and Ca intake and retention. The UYC produced increases higher than those of the test groups except for digested N, NPU, liver moisture, Fe intake and absorption. Casein significantly increased all parameters than for the test groups except for digested and retained N, P and Fe intakes. The advantages of sprouting for 24 or 36 h out-weighed those of 48 h.     

茯茶中"金花"孢子粉提取物对体外诱导的非酒精性脂肪肝细胞内甘油三酯代谢的影响

建立非酒精性脂肪肝细胞模型,研究茯茶中"金花"孢子粉提取物对非酒精性脂肪肝细胞甘油三酯代谢的影响,筛选出具有降脂功效的活性组分,为茯茶的深度开发及"金花"孢子粉降脂成分的分离纯化提供一定的指导.以正常人肝细胞LO2为实验对象,采用脂肪乳剂加入细胞培养液培养肝细胞,建立非酒精性脂肪肝细胞模型;以MTT法筛选出提取物最佳作...     

茶树△12-脂肪酸去饱和酶基因FAD2和FAD6的克隆与表达分析

本研究在茶树转录组测序的基础上,以铁观音茶树的芽叶为材料,采用RT-PCR技术,克隆了茶树不饱和脂肪酸合成途径中的关键限速酶—△12-FAD(12-脂肪酸去饱和酶)基因的包含完整ORF的cDNA序列(CsFAD2和CsFAD6)。生物信息学分析结果表明,CsFAD2的全长为1 184 bp,其开放阅读框(ORF)长度1 149 bp,编码382个氨基酸,定位于内质网上,其氨基酸序列与油茶FAD2的同源性最高达97%;CsFAD6的全长为1 425 bp,其ORF长度为1 311 bp,编码436个氨基酸,定位于叶绿体上,其氨基酸序列与葡萄FAD6同源性达81%。荧光定量PCR结果表明,铁观音茶树幼苗在4℃低温胁迫处理72 h过程中,这两个基因的表达均受低温的诱导,其表达量随着处理时间的延长而升高,在处理48 h时,表达量水平最高;在100 g·L-1的PEG胁迫处理12 h过程中,这两个基因的表达均受PEG胁迫处理的诱导;在ABA(100μmol·L-1)胁迫处理72 h过程中,在处理6~24 h期间,CsFAD2的表达量显著升高,而CsFAD6的表达不受ABA处理的影响,CsFAD6的表达量在处理72 h时显著降低;在Na Cl(250 mmol·L-1)胁迫72 h过程中,CsFAD2的表达量全程降低,而CsFAD6在处理24~72 h期间表达量显著升高。     

菜用大豆高效胚尖离体再生基因型筛选

以华东地区4个主栽菜用大豆品种(交大05-133、交大02-89、沪宁96-10、青酥二号)的胚尖为起始外植体,研究消毒方法、预培养天数、6-BA浓度和培养基组合等对不定芽的诱导和伸长的影响。结果表明:用0.1%HgCl2消毒10 min后配合5%的NaClO消毒5 min,消毒效果最佳,胚尖活力好,且适用于各个品种;预培养时间为2 d,6-BA浓度为3.0 mg.L-1,有利于菜用大豆不定芽的诱导;1.0 mg.L-16-BA+0.1 mg.L-1NAA培养基组合有利于增加有效不定芽数;0.05 mg.L-16-BA+0.1 mg.L-1IBA培养基组合有利于不定芽的伸长;交大05-133为最佳胚尖离体再生基因型,其分化频率为90.86%,诱导15 d后外植体平均不定芽数为4.65个,不定芽平均长度为1.38 cm。