荔枝霜疫霉游动孢子及卵孢子生物学特性研究

为了更深入理解荔枝霜疫霉在果园内侵染流行规律,利用植物病理学方法,通过离体培养研究了环境因素对荔枝霜疫霉游动孢子释放、萌发及卵孢子萌发的影响。结果表明,在荔枝果肉培养基中,孢子囊萌发的温度等于或小于孢子囊形成的温度时,孢子囊主要以释放游动孢子的方式萌发,28℃是荔枝霜疫霉孢子囊释放游动孢子的临界温度。荔枝霜疫霉在荔枝果肉培养基中,于26℃下培养7 d后,游动孢子释放最适温度范围为12~20℃,最适pH值为5~7;游动孢子萌发的最适温度为20~24℃,最适pH值为7~9;孢子囊在水滴中才释放游动孢子,游动孢子在水滴中方可萌发。荔枝霜疫霉在荔枝果皮和叶片煎汁培养基中均可产生卵孢子。当温度为28℃,pH值为5,12 h光暗交替光照时,卵孢子的萌发率最高,可达到49.68%;温度是影响孢子囊萌发和萌发方式的主要因素,水是游动孢子释放和萌发的必要条件。卵孢子广泛存在于果园中,为翌年初侵染源;荔枝霜疫霉主要以游动孢子再次侵染寄主。     

马铃薯晚疫病及其综合防治

1马铃薯晚疫病发生和传播 1.1病原菌的基本特征特性 马铃薯晚疫病的病原真菌属于鞭毛菌亚门卵菌纲疫霉属(Phytophthora),而马铃薯晚疫病的发生是由于致病疫霉(Phytophthorainfestans(Mont)deBary)的侵染所致.病原菌在形态上分为菌丝、孢囊梗、孢子囊、游动孢子等.马铃薯叶背面的白色霉轮就是从气孔长出来的孢囊梗和孢子囊.孢囊梗白色,无隔膜.孢子囊卵圆形,呈乳头突起,它是病菌的繁殖器官,条件适宜时,每个孢子囊能产生6～12个游动孢子.     

福建荔枝酸腐菌的生物学特性研究

对福建省分离的荔枝酸腐病菌的形态学特征、生长速度、产孢、分生孢子萌发及侵染的影响因子进行研究.结果表明:福建荔枝酸腐病的病原菌为白地霉(Geotrichum candidum);该菌最适生长温度为24～28℃,pH值为8～9,光照时间为12～20h,最适生长与产孢培养基为PDA,分生孢子致死温度为65℃,10min;该菌分生孢子的萌发率与pH值、培养基、光照时间、温度及营养成分等有关,其中该菌在24～32℃,光照时间为16～20h,培养15 d时所产生的分生孢子萌发率最高;该菌不同培养时间所产生的分生孢子及不同温度条件对其侵染荔枝的能力也不同,培养10d所产生的分生孢子侵染力最强.侵染最适温度为28～32℃.该菌除了寄生荔枝外,人工接种还能侵染胡萝卜、番茄、水蜜桃、龙跟、葡萄、茄子和黄瓜.试验结果为进一步了解该病的发生危害提供理论依据.     

茶轮斑病菌与灰斑病菌的特性比较及致病观察

对Pestalotiopsis属的P.theae和P.guepinii菌侵染茶叶后的症状表现、菌落、形态特征和病菌生物学特性作比较观察。结果表明:发病初期二病症状差别不大,后期明显区分,轮斑病斑褐色具轮纹,着生明显凸起的黑点;灰斑病斑灰白,散生小黑点。前者菌落具轮纹,分生孢子附属丝2～4条;后者菌落波状隆起,分生孢子附属丝2～5条。2种菌孢子萌发适温25℃,萌发率分别为87.5%和86.1%。茶汁能促进孢子萌发和产孢。强光照对孢子萌发、菌丝生长及产孢皆有明显抑制作用。P.theae菌丝生长适温为26～28℃,P.guepinii菌则为24～25℃;以PDA培养基最适2者菌丝生长,PSA+200g/L茶叶煎汁培养基利于产孢。P.theae菌适宜pH值为6.0,P.guepinii菌则为7.5。用2种菌孢子茶汁悬液结合磨擦对新梢不同叶龄作涂抹接种。结果显示:伤口利于侵染,P.theae菌孢子可直接从芽、嫩叶侵入,也侵染损伤的成叶;P.guepinii菌孢子只能从损伤的芽、嫩叶和成叶侵染。     

大豆疫霉根腐病菌游动孢子侵染野生大豆下胚轴的细胞学观察

用大豆疫霉根腐病菌的游动孢子悬浮液处理抗感不同野生大豆下胚轴,在接种后1.5~24 h,使用扫描电镜观察了野生大豆与大豆疫霉菌的亲和性和非亲和性互作。结果显示:接种1.5 h后游动孢子在感病野生大豆下胚轴表面产生休止孢,并产生芽管;接种3 h后休止孢萌发产生附着孢,开始侵入下胚轴表皮;接种6 h后侵入加深;接种12 h后附着孢完全进入下胚轴表皮;接种24 h后附着孢孢膜已经开始进入到表皮里。游动孢子悬浮液处理抗病野生大豆后,其侵染过程与亲和反应相似,只是游动孢子在下胚轴表皮产生芽管时间和附着孢侵入下胚轴表皮层的时间比亲和反应迟。     

辣椒疫霉菌产孢培养基及诱导方法筛选

为筛选适合辣椒疫霉菌产孢的培养基和诱导方法。通过计算游动孢子数量，研究比较不同培养基和诱导方法对辣椒疫霉菌产生孢子囊数量的影响。研究结果显示：CA培养基最适合孢子囊的产生，孢子囊密度为5.68×102/cm2，其次为RA培养基，PDA、BA和LA最不适合孢子囊的产生。采用创伤接种法，将辣椒疫霉菌菌丝体接种于20 d大小的黄瓜果实上，于28 ℃，24 h光照培养4 d后，黄瓜接种部位可产生病斑，病斑及周围产生密集菌丝，病斑上产生大量孢子囊，其产孢量为1.35×104/cm2，而同样接种方法的甜椒果实上所产生     

玉米圆斑病拮抗菌芽孢杆菌21的鉴定及抑菌研究

利用形态特征、培养性状、生理生化特征及16Sr DNA序列分析,对获得的具有生防潜力的芽孢杆菌21进行鉴定,确定该菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis spp.)。利用显微观察法,研究枯草芽孢杆菌21对玉米圆斑病菌的抑制作用,结果显示,该菌株不同浓度发酵液处理后玉米圆斑病菌孢子萌发率出现下降趋势,萌发率最低为0;经发酵液处理后的玉米圆斑病菌芽管产生畸形,在发酵液浓度为90%时,芽管畸形最严重;处理后的玉米圆斑病菌菌丝出现畸形,菌丝中的内容物有外渗趋势。     

胡椒瘟病菌（Phytophthora capsici）孢子囊诱导及发育过程观察

孢子囊的产生和发育过程是研究胡椒瘟病菌（Phytophthora capsici）及其病害防控的重要基础。本研究分析不同诱导条件下胡椒瘟病菌孢子囊的产生情况,并通过光学显微镜和共聚焦显微镜观察孢子囊及其内部游动孢子的发育过程。结果发现：（1）3种诱导方法均能诱导出大量孢子囊,其中在V8-A平板上光照和抹伤双重诱导法获得的孢子囊数量最多,其次是在V8-A平板上光照诱导法,获得孢子囊数量最少的是V8液体光照诱导法,但仅差异最大的2个处理间达到显著水平;（2）显微镜观察发现,孢子囊由气生菌丝顶端逐步膨大形成,初始为近球形逐渐发育成倒洋梨形,孢子囊成熟后从顶端排出大量游动孢子,偶尔可见孢子囊顶端直接发育出芽管;（3）共聚焦显微镜观察发现,首先孢子囊内部原生质体被膜结构隔裂成大约数十个独立小格,然后在每个格子中积累数倍于细胞核的DNA,最后每份细胞核DNA发育成一个游动孢子。本研究从微观角度揭示P. capsici孢子囊发育外观及内部的形态特征,为胡椒瘟病菌后续致病机制研究和胡椒瘟病田间防控提供技术基础。     

丛枝菌根真菌与胡萝卜毛状根双重培养体系研究

以发根农杆菌（Agrobacterium rhizogenes）K599诱导胡萝卜产生毛状根,接种丛枝菌根（AM）真菌摩西斗管囊霉（Funneliformis mosseae）建立双重培养体系,研究不同消毒方法、超声波、低温预处理和培养基pH对摩西斗管囊霉孢子萌发的影响及其与胡萝卜毛状根建立双重培养体系的最佳条件。研究结果表明：消毒方法3孢子萌发率最高,孢子污染率最低,15 d孢子萌发率达48.88%,而污染率仅为9.98%;超声波处理能降低孢子污染率11.17%~14.53%;低温预处理可有效提高孢子的萌发率,4℃低温处理10 d和15 d效果较好,其萌发率分别为70%和65%;AM真菌孢子在水琼脂培养基萌发最佳pH为6.5,萌发率达到48.50%,pH< 5.5或pH>8.0均抑制孢子萌发,pH 5.5和pH 8.0的萌发率分别为15.43%和16.06%。消毒孢子先于水琼脂萌发后,再挑取萌发管多,菌丝较长的孢子并将菌丝生长方向正对毛状根方向进行转接,可以提高双重培养的成功率。MSR培养基为双重培养的最优培养基。胡萝卜毛状根与AM真菌双重培养可为菌根真菌繁殖及相关分子机理研究提供可行有效的途径。     

木薯疫霉根腐病病原初步鉴定及其生物学特性测定

2010年11月，在对海南省儋州市的木薯病害调查中发现一种根腐病。经致病性评价，分离获得病原菌。显微观察发现，菌丝无分隔，孢囊梗呈简单合轴分枝，孢子囊多顶生，倒梨形，厚垣孢子大量产生，球形、顶生。形态观察结果初步表明，其为棕榈疫霉(Phytophthora palmivora)。ITS序列分析表明，其和几株棕榈疫霉(HQ237481，HQ237478和HQ237477)的序列同源性为99%。生物学特性研究表明，OA或CMA培养基、26～30℃、pH 5、D-木糖醇、乙酸铵、光暗交替是病菌生长最适条件，菌丝致死温度为50℃，10 min。     

红毛丹炭疽病菌生物学特性研究

对红毛丹炭疽病病菌进行分离,鉴定病原菌为胶孢炭疽菌[Colletotrichum gloeosporioides(Penz.)Sacc.]。研究培养基、温度、湿度、pH值、光照、营养对红毛丹炭疽病菌生长和孢子萌发的影响。结果表明,该菌菌丝在PDA、CA和CZ培养基上生长较好,10~35℃下均能生长,适宜生长温度为25~28℃,分生孢子萌发的最适温度为28℃;病原菌在pH3~11都能生长,pH5~8生长较好,菌丝生长及孢子萌发最佳pH值为7;分生孢子在饱和湿度中萌发快,相对湿度低于99%时不能萌发;光照对病原菌的生长有明显的促进作用,病原菌的致死温度为:55℃,10min;PDA培养基中加入不同的糖对病原菌生长有明显的促进作用,以鼠李糖、果糖、半乳糖、麦芽糖、甘露糖和木糖最好;PDA培养基中添加2%的不同的无机氮源对病原菌的生长有明显的促进作用。     

培养基营养成分对香蕉枯萎病尖孢镰刀菌生长的影响

通过对香蕉枯萎病发病株病组织的分离、纯化,得到香蕉枯萎病病原菌--尖镰孢菌古巴专化型[Fusarium oxysporum f.sp.cubense(E.F.Smith)Snyder et Hansen].该病原菌在不同pH值培养基上培养4 d后,发现尖孢镰刀菌菌落在pH值4.0～9.0范围内均可生长,pH值为6.0～7.0时最适,菌落直径平均在3.7～3.9 cm之间.尖孢镰刀菌在不例营养成分的培养基上培养,结果表明,N源对尖孢镰刀菌菌丝的生长影响大于C源.生长到第6天时,全糖型培养基产孢量最大,且小型分生孢子的产孢量也最大,可使香蕉苗发病率达到100%.而大型分生孢子的产生最佳培养基为低氮型培养基.     

萌发马铃薯实生种子超弱发光与种子活力关系的研究

由于种子的成熟度及藏年限的不同，使不同年度采收种子的活力之间有很大差异，其发芽后的整种子及其粉碎后的提取液的发光也有很大差异，发芽４～１６天的整种子发光强度与种子的发芽率及发芽指数之间的相关达到了显著或极显著的水平。其提取液发光强度的变化曲线因萌发天数的不同而有规律的变化，低发芽率或发芽天数少于４天的种子提取液的发光强度的变化趋势是平滑下降，随着发芽天数的增加，高发芽率种子提取液的发光强度出现了峰谷变化，而低活力种子的发光强度的变化趋势则仍然是平滑下降。说明发芽后的整种子或其提取液的发光与原样的代谢活性密切相关，提取液中的发光物质的浓度和发芽的天数有关。     

马铃薯立枯丝核菌病的研究

马铃薯立枯丝核菌病,是甘肃省高海拔冷凉山区发生普遍而危害严重的一种病害。据调查,田间植株平均发病率为10～15％左右。重病区薯块平均带菌率28.4～43.65％。经鉴定,病原菌属于立枯丝核菌(Rhizoctonia solanikihn)。该菌的菌丝生长温度范围是:最低为4℃,最适为23℃,最高为32～33℃,34℃时停止生长。菌核形成的最适温度为23～28℃。病菌能侵染马铃薯、豌豆、小麦等主要作物。并以贮藏期病薯上的菌核或残留在土壤中的菌核越冬。带菌种薯是第二年初侵染来源,也是远距离传播的主要途径。药剂防治试验表明,播前采用0.5%的福尔马林液或采用0.1％福美双或0.1％多菌灵浸种,都有明显的防病效果。采用抗病品种也能减轻病害的发生和危害。     

马铃薯实生种子萌芽特性的研究

马铃薯实生种子小,能量低,发芽期间能量转化慢;种子需经8～12小时达吸胀饱和,其饱和吸水量占绝对干物重的86％～105％;种子发芽在13～17℃变温和25℃恒温发芽最好,对光暗反应不敏感;贮藏2～3年的种子发芽力最高,室温下贮藏7年丧失种用价值;种子经卅烷醇浸种(50ppm浸4小时)、CO_2激光辐射10秒钟、50～60℃温汤浸种均能显著提高发芽力。α-萘乙酸浸种(10ppm15分钟)对发芽没有显著影响,但可促进幼苗根系发育。     

澳洲坚果授粉试验及花粉管生长的荧光显微观察

澳洲坚果品种HAES900的授粉试验及花粉管生长的荧光显微观察表明:HAES900×D4、HAES900×HAES695、HAES900×HAES900平均每个花序的最终座果率分别为0.56%、0.25%、0.12%,异花授粉的最终座果率比自花授粉的高出108%～367%,说明品种HAES900的异交亲和性好于自交亲和性;HAES900自花授粉的20个花序中,最终仅有20%的花序结实,说明品种HAES900可能具有部分自交不亲和性;澳洲坚果授粉后6h柱头上花粉大量萌发;异花授粉花柱基部的花粉管数量是自花授粉的2.5倍。     

复硝酚钠及其组分对大豆种子萌发的影响

采用复硝酚钠及其有效组分邻硝基苯酚钠、对硝基苯酚钠和5-硝基愈创木酚钠对大豆浸种,通过研究发芽第1、3、5、7 天的大豆种子蛋白质含量、脂肪含量、可溶性糖含量和种子发芽情况,探讨复硝酚钠及其组分对大豆种子萌发的影响.结果表明:5 mg·L-1的5-硝基愈创木酚钠和10 mg·L-1复硝酚钠浸种均使大豆的芽重、发芽势、发芽率、发芽指数和种子活力增加,达到了5%的显著水平.同时使种子中的储藏蛋白质从第3天分解加速,脂肪的转化速率从第5天明显加快,可溶性糖含量始终低于其它处理.以上结果表明,5-硝基愈创木酚钠在大豆种子萌发中起主要作用.     

Effect of germination time on physicochemical properties of brown rice flour and starch from different rice cultivars

The present work was designed to obtain information on the effect of germination time on the selected physicochemical properties of brown rice flour and starch prepared from three different rice cultivars. Changes in total starch, amylose and amylopectin contents of flour, amylopectin/amylose ratio and molecular weight of starch, gelatinization, pasting, rheological, and morphological properties of flour and starch during 5 days of germination were investigated. Significant changes of pasting and rheological properties of brown rice flour were found during germination, but only small changes of these properties could be found in isolated starch. Scanning electron micrographs of flour showed that the continuous matrix structure of flour was highly destroyed after germination and scanning electron micrographs of isolated starch showed that after three days of germination, pits and holes were discovered on the surface of some starch granules. Germination had little effect on the average molecular weight of starch, but the polydispersity value in germinated brown rice (2–5 days germination) was higher than that in non-germinated brown rice. The changes observed in physicochemical properties of brown rice flour and starch after germination provided a crucial basis for understanding flour and starch modification mechanisms with potential applications for an industrial scale.