菘蓝花粉生活力测定方法的比较研究

以菘蓝为材料,用碘-碘化钾(I-KI)染色法、氯化三苯四氮唑(TTC)染色法、亚甲基蓝染色法和琼脂培养法对花粉生活力进行测定。结果表明:用I-KI染色法和TTC染色法测定花粉生活力时都不理想,有生活力和没有生活力的花粉在光学显微镜下不易区分,亚甲基蓝染色法效果明显,但结果偏高,添加20 mg/L蔗糖和3 mg/L硼酸的琼脂培养基花粉萌发率达到90.3%以上,高于其他组分培养基。     

四川牡丹花粉生活力测定方法的比较

本研究以四川牡丹花粉为材料,利用离体萌发法、亚历山大染色法、TTC染色法及I₂-KI染色法,测定四川牡丹花粉的活力。结果表明：开花后第1天花粉即具有活力,第4天花粉活力最高,随着开花时间的推移,花粉活力逐渐下降。开花后1~7 d,用4种测定方法测得的花粉活力变化趋势基本一致。亚历山大染色法与离体萌发法的结果差异极其显著（P<0.01）。TTC染色法和I₂-KI染色法,与离体萌发法的结果差异不显著。其中I₂-KI测定结果最接近离体萌发法。综合考虑实验条件、实验周期、实验过程和药品保存方法等因素,I₂-KI染色法适合四川牡丹野外人工传粉之前快速准确地测定花粉活力。这为探讨四川牡丹濒危的原因、保护种质资源、开展引种驯化和杂交育种提供了理论依据。     

转基因水稻B2花粉活力的温度模型

 以含bar基因的抗Basta转基因粳稻B2为材料,分别在5℃、10℃、15℃、20℃、25℃、30℃、35℃、40℃、45℃下进行处理,用2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色法测定了不同温度处理下转基因水稻B2花粉离体0、1、2、3、4、5、6、8、12、14 min后的活力。B2花粉离体后活力呈现“S”型下降,用Logistic模型可精确模拟两者的关系; 其次, B2花粉离体后活力随着温度先升后降,花粉活力的最适温度范围是20℃~30℃,25℃时活力最强,高温对花粉活力的胁迫作用更大。采用指数方程和Logistic方程分段函数,建立B2花粉活力的温度模型,可精确预测花粉存活时间和寿命,为进一步准确估算转基因水稻基因飘移距离提供依据。     

柱花草花粉活力的测定方法

利用6种常用花粉活力测定方法对柱花草花粉活力进行测定，并筛选出各方法的最佳配方。结果表明：以离体萌发法为最佳，最适培养基：10%蔗糖、10% PEG-6000(聚乙二醇)、0.01% H3BO3、0.03% CaCl2·2H2O、0.01% KNO3，pH 6.5，柱花草花粉在该培养基上30℃条件下培养10 min，萌发率可达84.03%。0.5% I2＋1.5% KI的碘-碘化钾染色效果好，色差明显，较离体萌发法测定值偏高，但差异不显著，可选作简单快速测定法；FDA(荧光素二醋酸脂)染色法、醋酸洋红染色     

高温胁迫对玉米自交系父本花粉生活力的影响

以中种集团提供的10份骨干玉米自交系父本花粉为试验材料,通过TTC染色法和离体培养法,研究不同胁迫温度对花粉生活力的影响。结果表明,玉米花粉不易储藏,高温胁迫会导致花粉生活力显著下降,在35℃胁迫处理6 h之后花粉生活力全部丧失;在40℃胁迫处理4 h之后有8个自交系的花粉丧失生活力。TTC染色法和离体培养法均能有效测定玉米花粉生活力,离体培养法测得的花粉生活力低于用TTC法测得的水平。     

圭亚那柱花草花粉活力的测定方法

采用蔗糖萌发、无机酸测定、TTC染色、碘－碘化钾染色、红墨水染色和联苯胺染色等6种方法,测定了圭亚那柱花草[Stylosanthes guianensis(Aublet)Swartz]的花粉活力,并比较了各方法的优缺点、试验效果。结果发现,前4种方法的测定效果较好,且二者配合使用测定结果较为准确。试验结果同时表明,F137号柱花草种质的花粉活力最低,有望成为圭亚那柱花草雄性不育研究工作的育种材料。     

豆薯花粉活力研究

了解豆薯花粉活力是开展杂交育种的重要环节。通过对豆薯不同品种花粉活力测定表明:离体培养、TTC法和I2-KI法测定豆薯花粉活力结果差异较大,以花粉离体培养测定花粉活力在36%以内,I2-KI法测定染色效果最为明显达92%以上。不同品种采用同一方法测定的花粉活力亦有差异。花粉离体培养萌发在蔗糖浓度20%、硼酸浓度10 mg/L,pH值7.22条件下5~6 h观察结果最佳。I2-KI染色时间快、染色深,浓度以0.5%为宜。     

抗虫耐除草剂转基因玉米花粉生活力研究

使用离体培养法检测不同玉米材料花粉萌发率并于显微镜下观察花粉粒直径,研究转Cry1Ab、EPSPS基因玉米对花粉生活力的影响。结果表明,刚离体花粉萌发活力最强,培养180 min后花粉萌发率可达89.4%,高温(36℃)条件下放置2 h花粉基本丧失萌发能力。与非转基因对照相比,转Cry1Ab、EPSPS基因玉米对花粉离体后的生存能力无显著影响,对花粉粒直径大小无影响。     

马铃薯花粉生活力检测方法的比较

使用受精力检测法、染色法和花粉离体萌发法对马铃薯花粉生活力进行检测,旨在筛选出一种或几种快速、准确、有效地检测马铃薯花粉生活力的方法。通过试验,发现受精力检测法结合碘-碘化钾染色法、花粉离体萌发法,能更准确地分析结实率或不结实的原因,同时解决亲本花期不一致和远距离杂交的问题,使育种者能更合理地选择亲本,充分有效地利用育种材料。     

棉籽发芽试验新方法的探讨

在棉花的生产和科研工作中为能及时了解棉花种子的发芽能力。以确定播种量和可否作为试验材料。历来采用TP法(培养皿中萌发)。TS法(沙基萌发)和BP法(毛巾卷叠萌发)进行检测。但常因水、气、温度不易协调,致使发芽不齐,重演性差。且胚根容易弯曲。近年来新起的物理学X射线快速检定和化学的TTC(氯化三苯基四氮唑)染色检验种子生活力的方法,具有花时     

马蹄莲花粉活力鉴定与贮藏影响因子研究

以马蹄莲不同品种的花粉为材料,研究马蹄莲花粉活力检测的适宜方法和贮藏影响因子。比较了TTC、Lugol’s 染色液、亚甲基蓝、醋酸洋红4种染色法和离体培养法鉴定马蹄莲花粉活力的效果,以及花粉干燥时间（含水量）、贮藏温度、预冻方法、解冻方法对花粉贮藏的影响。结果表明：所选用的4种染色法中,TTC法能将马蹄莲花粉染成深红、浅红、粉红,从而区分出花粉有无活力及活力的强弱;Lugol’s 染色液、醋酸洋红不能使花粉染色;亚甲基蓝将所有花粉染成同一颜色;所以除TTC法外均不适合马蹄莲花粉活力的鉴定。离体培养法培养24 h可以较好鉴定马蹄莲花粉活力,其最佳培养基配方为80 g/L蔗糖+0.2 g/L硼酸+0.3 g/L硝酸钙。马蹄莲花粉的适宜干燥条件是室温下干燥27 h,之后不需任何预冻处理直接放入冰箱,最适解冻方式是37 ℃水浴2 min。不同贮藏温度下马蹄莲花粉活力变化存在明显差异,试验温度中以-80 ℃的贮藏效果最好,贮藏61 d后仍能保持40%以上的活力,其次是-20 ℃贮藏,然后是室温,4 ℃贮藏效果最差。综上所述,TTC染色法和离体培养法是马蹄莲花粉活力测定的适宜方法,-80 ℃的低温可明显延长马蹄莲花粉的贮藏时间,研究结果为马蹄莲花粉离体保存提供了科学依据。     

不同类型玉米种子活力检测适宜方法的研究

以3种不同类型(普通玉米、糯玉米、甜玉米)共6个品种的玉米种子为试验材料,采用了标准发芽、电导率测定、TTC定量测定、丙二醛含量测定活力检测方法,对人工老化获得的不同类型玉米不同活力水平的种子进行了各项活力指标的测定,以确定不同类型玉米种子活力检测的适宜指标和方法。结果表明:普通玉米种子活力检测的适宜方法为标准发芽试验、电导率测定试验;糯玉米种子活力检测的适宜方法为标准发芽试验、丙二醛含量测定试验;甜玉米种子活力检测的适宜方法为标准发芽试验、电导率测定试验。     

濒危华石斛种子活力测定方法研究

华石斛(Dendrobium sinense)为濒危附生兰,具有重要的观赏和药用价值。因其种子细小,仅具未分化的原胚,造成种子难以保存,活力丧失较快。因此,筛选出快速、准确的种子活力检测方法,是兰科种子有效保存方法探讨的重要前提。本试验通过文献查询筛选后,采用四氮石坐法(TTC)和紫外分光光度计法(UVS)进行研究,通过测定染色率以及吸光值来反映种子活力,比较其检测方法的可靠性、准确性及操作难易度。结果表明:TTC法测定保存1~30 d的种子活力比实际萌发率高0.60%,变化幅度小,最高仅为0.4%,可信度大,但实验操作较繁琐;UVS法测定的种子活力比实际萌发率高0.04%,但变动幅度相对较大,高达3.09%,精确度相对TTC法较低,但实验操作简单。     

防风花粉活力测定方法的比较及柱头可授性的研究

研究并确定防风花粉生活力及柱头可授性的快速有效测定方法。使用I2-KI、TCC、亚甲基蓝及无机盐培养法测定花粉活力。用联苯胺-过氧化氢法测定柱头可授性。亚甲基蓝染色法最适于检测花粉活力,结果与无机盐观测法符合度高。防风刚开花时花粉活力不高,开花后第三天花粉活力最高,可达96%,第五天花粉活力开始下降,且下降幅度较大。防风开花2d后柱头分泌黏液,第3d分泌量最大,但此时柱头不具有可授性。待花药脱落后,柱头可授性逐渐增强,第6-8d达到最大值。亚甲基蓝染色法简便、快捷,适于防风花粉活力的观测。花药脱落后第6-8d柱头可授性最强。     

Staining and fluorescent microscopy methods for pollen viability determination in sunflower and other plant species

Results shown in this paper imply a successful application of staining method by Alexander (1969) which is simplified in comparison to the original method and adapted for pollen viability estimation in sunflower, rapeseed, sugar beet, maize, wheat, alfalfa, etc. Aspects of research in which this method is frequently used are described.This paper also shows the results of fluorescent microscopy method (Kho and Baër, 1968) adaptation for pollen germination and pollen tube growth monitoring in sunflower, as well the possibility for its application in fertilization potential estimation.     

澳系睡莲花粉离体萌发及低温保存研究

为研究适宜睡莲花粉离体萌发的培养基和低温保存的方法,以睡莲品种‘默笙’和3份原种睡莲的花粉为试验材料,采用单因素、正交试验设计,筛选出最适宜的培养基,观测睡莲花粉在不同温度下保存的萌发率。结果表明,4种澳系睡莲花粉的最适培养基的各组分浓度不同,花粉的生活力存在差异,澳洲原生浅色睡莲与澳洲原生深色睡莲的花粉生活力较高,分别为43.90%和45.63%;‘默笙’睡莲的花粉生活力次之,为31.84%;‘白巨睡莲’的花粉生活力较低,为9.73%;4种澳系睡莲花粉均不耐贮藏,不同温度下保存72 h后萌发率均为0。本研究结果可为睡莲杂交育种的亲本选择、花粉的低温保存研究提供参考。     

响应面法优化金银忍冬花粉离体萌发培养基组分

目的以优化金银忍冬花粉离体萌发的培养基组分。方法以盛花期新鲜花粉为材料,采用花粉离体萌发方法,在单因素试验的基础上,通过响应面法优化培养基组分。结果金银忍冬花粉离体萌发的最佳培养基组分为蔗糖质量浓度为400g/L、硼酸质量浓度为127.23mg/L、2,4-D质量浓度为75.00mg/L,在此培养基组分条件下,金银忍冬花粉萌发率的预测值为90.24%,验证萌发率为89.65%。结论利用响应面分析法可得到理论最佳培养基组分,验证结果表明该方法科学、高效。