番石榴叶挥发油的抗菌性及优化提取研究

分别由酸疮痂链霉菌（Streptomyces acidiscabies, SA）、茄科雷尔氏菌（Ralstonia solanacearum, RS）和胡萝卜软腐欧文氏菌（Erwinia carotovora subsp. carotovora Borgey, ECCB）引起的植物疮痂病、青枯病、软腐病是农作物生产中常见多发的细菌病害。番石榴叶挥发油由多种活性物质组成，具有广谱抗微生物活性。本研究旨在提取并配置番石榴叶挥发油抗菌液，针对酸疮痂链霉菌、茄科雷尔氏菌、胡萝卜软腐欧文氏菌等3种病原菌进行挥发油的抗性研究，为农作物病害生物防治储备资源。采用添加锂盐结合微波辅助水蒸馏法提取番石榴叶挥发油，通过滤纸片扩散法和最小抑制浓度（MIC）评价了番石榴叶挥发油对3种供试菌株的抗菌效果，单因素结合响应面试验优化提取工艺，采用气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）测定番石榴叶挥发油的化学成分。结果表明：番石榴叶挥发油对酸疮痂链霉菌、茄科雷尔氏菌、胡萝卜软腐欧文氏菌均表现出良好的抑制效果，抑菌圈直径范围为20.57～23.24 mm，抑菌率均达到60%以上，MIC值分别为3.13、1.56、3.13...     

香草兰生防细菌的筛选、分子鉴定及其抑菌机制的初步研究

通过平板对峙法从香草兰根际微生物中筛选出对香草兰根(茎)腐病菌(Fusarium oxysporum)、香草兰疫病菌(Phytophthora nicotianae)和香草兰细菌性软腐病菌(Erwinia carotovora)均有良好抑制效果的生防菌10株。通过16S rDNA序列比对及系统发育树分析,其中7株为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus. amyloliquefaciens),2株为枯草芽孢杆菌(B. subtils),1株为甲基营养型芽孢杆菌(B. methylotrophicus)。提取脂肽类化合物进行抑菌分析,发现10株生防菌脂肽类提取物对香草兰根(茎)腐病菌和香草兰疫病菌均有良好的抑制效果,有4株的脂肽类粗提物对香草兰细菌性软腐病菌有强烈的抑制活性。对其中2个菌株脂肽类粗提物进行MALDI-TOF/TOF-MS检测,发现菌株 VX2R11 产生表面活性素(Surfactin)和伊枯草素A(IturinA)2种脂肽类化合物,菌株 VX2S02 仅产生伊枯草素A,推测产生伊枯草素A是菌株VX2R11和VX2S02拮抗香草兰根(茎)腐病菌和疫病菌重要机制;产生表面活性素是菌株VX2R11拮抗香草兰细菌性软腐病菌的重要机制。     

128种南药植物提取物对6种病原菌的生长抑制作用

以水稻稻瘟病菌(Pyricularia oryzae Cav.)、香蕉枯萎病菌[(Fusarium oxysporum sp.cubense(E.F.Smith)Syn.et Han)]、香蕉炭疽病菌[Colletotrichum musae(Berk&Curt)Arx]、杧果炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides PenZ)、辣椒炭疽病菌[Colletotrichum capsici(syd.)Butl.]和西瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.niveum)6种病原菌为供试菌种,对47科128种南药植物的丙酮提取物进行室内抑菌活性试验。结果表明:有36种植物提取物对6种病原菌菌丝生长抑制率在60%以上;22种植物提取物对至少4种病原菌菌丝生长抑制率在80%以上;经方差分析,荜茇、艾纳香、白背叶、香茅、阴香、九里香、花椒、高良姜、益智、山柰、姜等11种植物提取物的抑菌效果与化学农药0.5mg/mL施保功的抑菌效果差异不显著。      

12种热带植物粗提物对胡椒瘟病的抑菌活性测定

用生长速率法测试了12种热带植物乙醇粗提物对胡椒瘟病菌的离体抑菌活性。结果表明，当供试质量浓度为干样10 mg/mL时，鹰爪和马缨丹粗提物对胡椒瘟病菌菌丝生长的抑菌率均达到90%以上，分别为91.95%和94.32%。可见这两种植物粗提物对供试病原菌菌丝生长具有明显的抑制作用，值得进一步研究开发。     

硫藤黄链霉菌St-79对水稻白叶枯病的防效和促生作用

【目的】水稻白叶枯病是水稻的主要细菌性病害之一，严重影响水稻生产。本研究获得一株有效防治水稻白叶枯病的放线菌菌株，探索其对白叶枯病的防效和促进水稻生长的作用，为生防菌的开发利用提供科学依据。【方法】利用梯度稀释涂布法、共培养法和牛津杯法筛选拮抗水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv. oryzae, Xoo)的放线菌菌株；通过形态特征、生理生化反应、16S rDNA序列和系统发育树分析对其进行分类鉴定；利用共培养法分析目标菌株的抗菌谱；通过96孔板微量稀释法、扫描电子显微镜、微生物粘附碳氢化合物法等探究目标菌株的抑菌作用；通过发酵滤液浸种与菌液喷洒土壤的方法探究其对水稻生长的促进作用；利用盆栽试验探索目标菌株发酵滤液对水稻白叶枯病的防治效果。【结果】从不同生境土壤中分离出140株放线菌菌株，最终筛选得到一株对Xoo具有强拮抗活性的放线菌菌株St-79，其发酵滤液抑菌圈直径为64 mm，并鉴定其为硫藤黄链霉菌(Streptomyces thioluteus)。菌株St-79对水稻细菌性条斑病菌(Xanthomonas oryzae pv. oryzicola)、大豆细菌性斑疹病菌(Xanthomonas axonopodis pv. glycines)、油菜黑腐病菌(Xanthomonas campestris pv. campestris)和番茄细菌性叶斑病菌(Pseudomonas syringae pv. tomato)均有拮抗作用。其乙酸乙酯粗提物具有良好的抑制Xoo生长的效果，粗提物对Xoo的最低抑菌浓度为8 μg/mL，最低杀灭浓度为32 μg/mL；扫描电镜观察结果显示，粗提物对Xoo细胞有很强的损伤作用；粗提物还能改变Xoo细胞内膜通透性，降低Xoo细胞的疏水性。促生试验结果显示，菌株St-79发酵滤液能够促进水稻幼苗的生长。盆栽试验结果显示，菌株St-79发酵滤液对水稻白叶枯病有良好的防治效果，在日本晴、甬优15、甬优1540上的相对防效为65.95%~87.23%，病斑抑制率为69.85%~95.8%，且预防效果优于治疗效果。【结论】获得一株有效防治水稻白叶枯病的放线菌，其对水稻白叶枯病菌有明显的抑制作用，并且可以促进水稻种子的萌发与幼苗的生长。     

艾纳香中绿原酸类化学成分研究

为全面了解海南传统黎药艾纳香抗菌药效物质基础,本研究采用硅胶柱色谱、凝胶色谱以及高效液相色谱技术对艾纳香提取物进行系统化学成分研究。结果显示:共分离鉴定6个绿原酸类成分:3,5-O-二咖啡酰奎尼酸乙酯(1),3,5-O-二咖啡酰奎尼酸甲酯(2),3,4-O-二咖啡酰奎尼酸甲酯(3),3,4-O-二咖啡酰奎尼酸(4),3,5-O-二咖啡酰奎尼酸(5),1,3,5-O-三咖啡酰奎尼酸(6)。化合物1~6均为首次从该植物中分离得到,其中化合物1为新天然产物。抗细菌活性评价显示化合物3对枯草芽孢杆菌及化合物6对金黄色葡萄球菌均具有较强抑制活性,MIC值均为64μg/mL,推测绿原酸类为艾纳香的重要抗菌活性组成。     

艾纳香乙酸乙酯部位抗菌活性成分研究

本研究采用硅胶柱层析、ODS反相柱层析、sephadex LH-20分子筛等技术进行分离纯化艾纳香乙酸乙酯部位,共获得7个化合物。采用波谱学技术进行结构鉴定,7个化合物分别为：3,3’,5,7-四羟基-4’-甲氧基-二氢黄酮（1）,7-甲氧基紫衫叶素(padmatin)（2）,木犀草素-7-甲醚（3）,咖啡酸（4）,北美圣草素（5）,槲皮素（6）和木犀草素（7）。采用96孔板倍比稀释法,对单体化合物抗细菌活性进行评价,结果显示化合物2和3具有较好的抑制金黄色葡萄球菌活性,MIC值均为64 μg/mL。化合物2和4均为首次从该植物中分离,化合物2 和3可作为艾纳香抗菌活性先导化合物,为相关新药研发提供依据。     

艾纳香中的黄酮类化合物及其抗菌活性

为明确艾纳香抗菌药效物质基础,采用硅胶柱色谱, 凝胶色谱和反相色谱等技术从艾纳香乙酸乙酯部位中分离获得15个单体化合物,经波谱学鉴定分别为：3,3°,5-三羟基-4°,7-二甲氧基二氢黄酮 (1)、4°,5-二羟基-3,3°,7-三甲氧基黄酮 (2)、艾纳香素 (3)、3,5,3°,4°-四羟基-7-甲氧基黄酮 (4)、香叶木素 (5)、3°,4°,5-三羟基-3,7-二甲氧基黄酮 (6)、异鼠李素 (7)、chrysosplenol C (8)、金丝桃苷 (9)、异槲皮苷 (10)、3°,5,7-三羟基-4°-甲氧基二氢黄酮 (11)、sakuranetin (12)、pilloin (13)、5,7,3°,4°-四羟基-3-甲氧基黄酮 (14)、5-羟基-3,7,3°,4°-四甲氧基黄酮 (15),其中化合物7、11、12和13为首次从该植物中分得。抗菌活性评价结果显示：化合物1、3、6、8和12对3株细菌具有不同程度的抑制活性,其中化合物3对金黄色葡萄球菌抑制活性最强, 最低抑菌浓度MIC值为32 μg/mL。     

两种十八碳二烯酸诱发水稻对稻瘟病的抗性及其防病作用

 研究了（１１Ｓ，１２Ｓ，１３Ｓ）－１１，１２，１３－三羟基０（９Ｚ，１５Ｚ）－十八碳二烯酸（Ａ）和（１１Ｒ）－羟基－１２（Ｓ），１３（Ｓ）－环氧－（９Ｚ，１５Ｚ）－十八碳二烯酸（Ｂ）的生物学活性。体外测试结果表明，这两种十八碳二烯酸对稻瘟菌菌丝生长只有轻微的抑制作用，而对分生孢子萌发则表现了较强的抑制作用，３－４叶期的水稻幼苗经这两种十八碳二烯酸诱发处理后均获得了对稻瘟病的抗性，减轻了稻瘟病的病情。用A处理后隔5 d接种稻瘟病菌，病情指数比对照降低64.8%；用B处理后隔2 d接种病菌，病情指数比对照降低69.8%。两种十八碳二烯酸均以5 μg/mL浓度诱发处理时，使水稻植株获得最大的诱导抗性。由A和B激发产生的诱导抗性对稻瘟病的防治效果均大于50%。先接种稻瘟病菌以诱发发病，而后隔5 d或10 d后喷施10 μg/mL的A或B水溶液，均可减轻稻瘟病的病情，其防治效果在44％－55％。     

冬枣早期落叶病致病菌分离鉴定及防治药剂筛选试验

【目的】为了明确引起冬枣早期落叶病的致病菌并选择有效的药剂进行防治。【方法】采集具有典型症状的病害标样,室内分离纯化后选取5个代表菌株,对病原细菌形态、培养性状、染色反应、生理生化反应和致病性等性状进行测定,并与棉花角斑病菌和烟草野火病菌进行比较、同时室内测定了31种杀菌剂对冬枣早期落叶病病菌的皿内抑菌效果;【结果】结果表明,甘蓝黑腐黄单胞菌和洋葱假单胞菌均能引起冬枣早期落叶病,田间以甘蓝黑腐黄单胞菌侵染为主。硫酸链霉素、72％农用链霉素、新植霉素、50％代森锰锌等4种药剂防治效果最好,抑菌圈直径为j．8～4．8cm,押菌斑透明程度好。[结论]初步筛选出了4～6种抑菌效果较好的单剂,用于田间防治试验和防治示范推广。     

禾长蠕孢菌及其代谢产物Ophiobolin A防治水稻纹枯病

 为充分利用已有杂草生防菌菌种资源，进行了稗草生防菌禾长蠕孢菌(Helminthosporium gramineum Rabenh f. sp.echinochloae，HGE）防治水稻纹枯病的初步研究。菌落对峙实验结果表明HGE对纹枯病菌菌丝生长有较强的抑制作用。HGE菌株的发酵液对纹枯病菌的生长有较强的抑制活性，稀释5倍的发酵液24 h的抑菌率为84.1％。发酵液及菌丝的乙酸乙酯提取粗毒素在200 μg/mL浓度下100％抑制纹枯病菌的生长。从粗毒素中分离纯化的有很强抑菌活性的化合物经过NMR及MS波谱分析鉴定为Ophiobolin A。Ophiobolin A在25 μg/mL浓度下即100％抑制纹枯病菌的生长，浓度1 μg/mL时的抑菌率为70.2%。实验结果显示HGE菌及其代谢物Ophiobolin A具有开发成水稻纹枯病生物杀菌剂的潜力。     

3种姜科植物提取物的体外抗菌活性

采用试管倍比稀释法研究3种姜科植物(砂仁、草豆蔻和高良姜)乙醇提取物对5种鸡、猪致病菌的体外抗菌活性。结果表明,3种姜科植物提取物对5种致病菌均有较好的抑制作用,对鸡和猪大肠杆菌、鸡和猪金黄色葡萄球菌、鸡沙门氏菌最低杀菌浓度(MBC)分别为125、15.6、62.5 mg/mL。说明3种姜科植物乙醇提取物对鸡、猪5种常见致病菌均具有较好的体外抗菌效果,其中对金黄色葡萄球菌的体外抑杀效果优于大肠杆菌和沙门氏菌。     

Antibacterial activity and phytochemical study of six medicinal plants used in Benin

The ethanol extracts obtained from Psidium guajava, Flacourtia flavescens Boswellia dalzielii, Ficus exasperata, Pavetta corymbosa and Hybanthus enneaspermus, six species traditionally used in Benin to treat several infectious diseases, were evaluated for their in vitro antimicrobial activity against Staphylococcus aureus, Enteroccocus feacalis, Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa. The minimum inhibitory concentration of extracts was determinate using the microplate dilution method. The presence of major phytoconstituents was detected qualitatively. The diphenylpicrylhydrazine radical scavenging activity was also performed. The extracts exhibited antibacterial activities against the tested bacteria. Boswellia dalzielii, Psidium guayava, Pavetta corymbosa and Flacourtia flavescens exibited the lowest minimum inhibitory concentration values (0.313-2.5 mg mL(-1)). Pseudomonas aeruginosa was the lest sensitive microorganism with MIC values higher than 10 mg mL(-1). In antioxidant assay the crude extracts of B. dalzielii and P. corymbosa appeared to be as potent as quercetol with an inhibition percentage of 83 and 75.3% at 10 microg mL(-1) which is comparable to 75.9% for quercetol at the same concentration.     

γ-氨基丁酸对香蕉果实采后成熟的调控作用及其生理机制

香蕉是世界上最重要的水果之一,研究香蕉采后成熟与调控对香蕉品质形成及创新采后催熟技术具有重要意义。本实验室前期的研究结果发现Ma GAD1基因的表达与香蕉采后乙烯生物合成及果实成熟密切相关。本研究在此基础上,根据香蕉果实达到全黄并有黑色斑点期(YB)成熟度的天数为标准,筛选出Ma GAD1基因表达的诱导剂γ-氨基丁酸(GABA)能够促进香蕉果实采后成熟。生理学分析结果表明,外源GABA能够促使香蕉果实提前发生生理跃变。实时荧光定量PCR分析结果表明,外源GABA能够诱导Ma GAD1和Ma ACS1上调表达。因此,GABA通过诱导Ma GAD1和Ma ACS1上调表达及促进香蕉果实生理跃变,从而促进香蕉果实采后成熟。本研究不仅从理论上证明了GABA能够促进果实成熟,揭示了GABA促进果实成熟生理机制,并且从实际生产上为蕉催熟的应用提供了一种新方法。     

罗布麻茎叶粗提物及脱胶纤维的抑菌活性分析

文章研究了罗布麻茎叶粗提物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和黄曲霉的抑菌活性和最小抑菌浓度,并定性分析了脱胶后的罗布麻纤维对上述类型微生物的抑制效果。结果表明,罗布麻茎叶粗提物对黄曲霉和金黄色葡萄球菌的抑制效果较为明显,对大肠杆菌抑制效果稍差,其中,罗布白麻和罗布红麻对黄曲霉菌的最小抑菌浓度分别为5、7.5 mg/mL,对金黄色葡萄球菌最小抑菌浓度均为7.5 mg/mL,而对大肠杆菌的最小抑菌浓度分别为10、15 mg/mL;定性分析发现,经脱胶后的罗布麻纤维仍对细菌类的金黄色葡萄球菌和大肠杆菌具有一定的抑制作用,但对霉菌类的黄曲霉无明显抑制作用。     

Bioactive properties and chemical constituents of methanolic extract and its fractions from Jatropha curcas oil

The present work is designed to evaluate the bioactive properties of the crude methanolic extract of Jatropha curcas oil and its solvent fractions. The crude methanolic extract obtained was fractionated using a hydrophilic lipophilic balanced (HLB) cartridge and then eluted with different solvents in the order of hexane (F1), dichloromethane (F2), chloroform (F3), ethyl acetate (F4) and methanol (F5), respectively. Total phenolic content of the crude methanolic extract and its fractions was in the range of 0.19-4.5 mg/g as gallic acid equivalent. Antioxidant activity of the crude methanolic extract and its fractions were determined by two complementary test methods, namely, phenanthroline method and 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) free radical scavenging method. All samples demonstrated weak antioxidant activity (150-851 μmol Fe/100 g of the extract and IC₅₀ of 1.05-13.5 mg/mL). When compared to butylated hydroxytoluene (BHT), a reference synthetic antioxidant, both showed weaker antioxidative potential. The evaluation of antimicrobial activity of the extracts was performed using a disc diffusion method and a micro-well dilution method against six economic plant disease bacteria. The results showed that all extracts possessed strong to moderate antibacterial activity with varying degrees of growth inhibition against the test bacteria. The minimum inhibitory concentrations (MIC) were in the range of 14.92-428.6 μg/mL. In addition, the chemical constituents in each fraction of the extract were subjected to analyze by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). The eleven constituents were identified. Among them, 2,4-di-tert-butylphenol, methyl 3-(3,5-di-tert-butyl-4-hydroxyphenyl)propionate and linoleic acid may be the main cause of its strong antibacterial activity. Therefore, this oil present in the methanolic extract had great potential as effective antibacterial sources.     

中草药提取物对香蕉镰刀菌枯萎病病原菌的抑制作用

本研究测试了 123 种常见中草药提取物对香蕉镰刀菌枯萎病病原菌的抑菌作用。结果表明,供试提取物 100 倍稀释液对菌株 B1 的菌丝生长和孢子萌发的抑制作用在 50 %以上的分别有 15 种和 14 种;对菌株B2 的菌丝生长和孢子萌发抑制作用在 50 %以上的提取物分别有 7 种和 9 种。进一步测试发现,经过 200 倍 稀释,只有丁香提取物和厚朴提取物对菌株 B1 的菌丝生长和孢子萌发抑制作用均达到 50 %以上。丁香提取物对菌株 B1 和菌株 B2 菌丝生长的抑制中浓度分别为 3 396.31 μg/mL 和 3 375.87 μg/mL。