梨矮化基因pcDw的一个SCAR标记

以'矮化梨'(Pyrus communis L.)与 '茌梨'(Pyrus bretschneideri Rehd.)的杂交后代共111个单株为试材,采用分离群体分组分析法（Bulked Segregate Analysis, BSA）,通过对412个随机引物的筛选,获得了一个与控制梨树矮化性状基因pcDw连锁距离为8.3 cM、长度为940 bp的RAPD标记S_1172-940, 并将其转换成了SCAR (Sequence Characterized Amplified Region) 标记,即SCAR_-940。这一研究结果,为该矮化性状的标记辅助选择提供了有效工具。     

新高系梨10个品种S基因型的鉴定

以亲缘关系极近的新高系梨10个品种及被视为‘新高’亲本的‘天之川’和‘今村秋’梨等为试验材料，对其基因组DNA进行了PCR-RFLP检测、DNA序列测定及生物信息学分析。结果表明：新高系梨10个品种即‘新高’、‘黄金’、‘水晶’、‘早生黄金’、‘早蜜新高’、‘天皇’、‘金秋’、‘晚大新高’、‘农家新高’和‘鲜黄’的S基因型分别为S₃S₉、S₃S₄、S₃S₉、S₃S₄、S₃S₉、S₃S₉、S₃S₉、S₃S₉、S₃S₉和S₃S₅；‘天之川’、‘今村秋’的S基因型分别为S₁S₉和S₁S₆，通过基因型判定‘今村秋’非‘新高’梨的父本。     

梨矮化基因pcDw的SSR标记定位

以矮化梨(Pyrus communis L.)与茌梨(P.bretschneideri Rehd.)的F1杂交分离群体共110个单株(3a生,矮化型和正常型各55株)为试材,对来自西洋梨的矮化型突变基因pcDw进行了SSR分子标记研究。用分离群体分组分析法(Bulked Segregant Analysis,BSA),通过对源自梨、苹果和桃基因组的共40对SSR(Simple Sequence Repeat)引物的筛选,获得了一个与pcDw基因连锁距离为9.3cM的SSR标记KA14210,由此将该基因定位到了梨品种Barlett遗传图谱的第16连锁群上。     

番茄根系分泌物、木质部和韧皮部汁液组分对矿质氮、有机氮营养的响应

 采用营养液培探讨了番茄幼苗根系参数、根系分泌物、木质部和韧皮部汁液组分对矿质氮（NH₄⁺-N、NO₃^--N）和有机氮（Glycine）的不同响应。结果表明,不同氮素处理8 d后,'申粉918'、'沪樱932'番茄根系干质量、根系体积表现为NO₃^--N > Gly-N > 对照 > NH₄⁺-N处理;而根系活力则表现为以供Gly-N 或NO₃^--N为最高,其次为供NH₄⁺-N的处理,以对照处理为最低。不同氮素形态显著影响不同番茄品种根系分泌物、木质部和韧皮部各组分含量。 NO₃^--N处理的番茄根系分泌物、木质部和韧皮部汁液中的NO₃^--N和P含量最高,供Gly-N、NH₄⁺-N其次,对照最低;而供Gly-N、NH₄⁺-N时铵态氮、游离氨基酸、可溶性糖含量一般均高于处理NO₃^--N和对照。番茄根际吸收不同氮素对根际pH亦产生不同的影响,吸收NO₃^--N和Gly-N后,根际pH显著升高,而吸收NH₄⁺-N后则降低。根系分泌物可溶性蛋白含量的变化表现为NO₃^--N > Gly-N > NH₄⁺-N> 对照,而木质部、韧皮部可溶性蛋白含量的变化则表现为Gly-N > NO₃^--N> NH₄⁺-N > 对照。番茄幼苗不同品种间的差异性表现,与氮素形态有关,以根系活力为指标的基因型差异在供应NO₃^--N、NH₄⁺-N和Gly-N及对照时,'沪樱932' 的根系活力均显著（P<0.05）大于 '申粉918'。     

菜豆抗炭疽病基因SCAR标记在品种抗性鉴定中的应用

 利用5个来自于普通菜豆抗炭疽病基因SCAR 标记（SCA₁₀₀₀、SH18₁₁₀₀、SAB3₄₀₀、SB12₃₅₀和SCF10₁₀₇₂）引物组,对143份荚用菜豆资源进行DNA水平的鉴定。同时使用苗期接种方法,验证了143份资源的抗病性。结果表明：共有61份资源检测到SCAR标记。在这些资源中,有40份具有SCA₁₀₀₀标记,40份具有SCF10₁₀₇₂标记,19份兼有SCA₁₀₀₀和SCF10₁₀₇₂标记,其余的82份未检测到SCAR标记。这143份资源中均未检测到SAB3₄₀₀、SB12₃₅₀和SH18₁₁₀₀扩增带。群体抗性鉴定结果显示：143份资源中,抗病的有16份。其中含有2个SCAR标记,群体抗性结果表现抗病的有5份,含有1个SCAR标记,并且群体抗性结果表现抗病的有3份。通过本研究明确了：荚用菜豆中Co-2和Co-10基因含量比较丰富,除扁圆荚类型紫荚菜豆中Co-2基因含量多于Co-10基因外,这两个抗病基因在其它类型的菜豆中分布比较均匀。在油豆类型和扁圆荚类型绿荚菜豆资源中,同时含有此两个抗病基因标记的较多。在油豆类型资源中,含有两个抗病标记,并且群体抗性表现抗病的最多。     

梨果实褐皮性状的SSR标记

以梨品种‘黄金’（Pyrus pyrifolia Nakai‘Whangkeumbae’）与‘砀山酥’（Pyrus bretschneideri Rehd.‘Dangshansu’）的F1代杂交分离群体为试材,用分离群体分组分析法（Bulked Segregant Analysis,BSA）对果实褐皮性状进行了SSR分子标记研究。通过对源自梨和苹果基因组的281对SSR引物的筛选,获得了与梨果实褐皮性状相连锁的SSR标记CH01c06和Hi20b03,遗传连锁距离分别为4.8 cM和12.0 cM,据此,将控制该性状的基因定位在梨公共遗传图谱的LG8上。     

氮磷钾肥处理对桂花生长、花量及光合作用的影响

研究了施用N、P、NP、NPK不同肥料处理对12年生丹桂(Osmanthus fragrans) 生长、花量、叶片解剖结构及光合作用的影响。结果表明: 不同施肥处理对桂花株高、冠径、新梢平均生长量、比叶重和单叶面积的表现为NPK>NP>N>P>对照, 单株全年花量以施NPK最高, 其次为NP和P, 以纯N肥最低。对叶片厚度的影响表现为NPK>NP>N>对照>P, 各施肥处理的栅栏组织厚度均比海绵组织高, 海绵组织除施N肥比对照高外, 其他处理均比对照低, 叶片紧密度均比对照高。4—8月各处理叶绿素含量和光合作用均表现出NPK>NP>N>P>对照, 14时F_v /F_m 值表现为施NPK>NP>P>对照>N。建议在农业生产中增施N肥促进树体生长的同时, 配施P、K肥, 达到提高早期产量的目的。     

硒对酥梨叶片衰老及抗氧化酶系统的影响

 研究喷施Na₂SeO₃对砀山酥梨（Pyrus bretschneider Rehd.‘Dangshan Suli’）叶片衰老及抗氧化酶系统的影响。结果表明：与对照相比,喷施低浓度的硒（5 mg · L^-1）,可明显延迟衰老叶片含水量、干样质量、叶绿素和可溶性蛋白含量的下降,显著提高SOD和GSH-Px活性,降低H₂O₂、和MDA含量,平均延迟落叶7.25 d;喷施中等（10 mg · L^-1）和高浓度（20 mg · L^-1）的硒对延缓叶片衰老的效果变差,且浓度越高,效果越差;叶面喷硒对POD活性具有抑制作用。硒延缓梨树叶片衰老存在浓度差异,低浓度的硒可能通过提高SOD、GSH-Px等酶的活性参与叶片衰老进程的调控,从而降低膜脂过氧化水平,延长叶片功能期。     

茄子果形遗传研究

 以果形差异显著的3个茄子高代自交系106（扁圆）、114（短筒）和111（长筒）为试验材料,用人工和计算机图像测定相结合获得果形指数和三角果形指数,通过P₁、P₂、F₁、B₁、B₂和F₂世代联合分析,研究茄子果形性状遗传规律。结果表明：组合Ⅰ（106 × 114）和组合Ⅱ（114 × 111）果形分离群体的果形指数以及组合Ⅰ分离群体的三角果形指数均呈单峰偏态分布,说明茄子果形属于数量性状,存在主基因效应;茄子果形性状符合D-2遗传模型,即符合一对加性主基因 + 加性—显性多基因模型;主基因遗传力以F₂代最高,多基因遗传力以B₂代最高。茄子果形性状遗传总体表现出多基因遗传特征,果形选择效率在F₂代中最高。     

毛竹EST资源SSR标记分析与筛选

 对来源于NCBI公共数据库的非冗余3 087条毛竹（Phyllostachys edulis）EST序进行简单重复序列SSR搜索发现：在401条毛竹EST序列中共查找到408个SSR位点,平均6.8 kb EST序列中含有1个SSR。其中二核苷酸和三核苷酸重复是毛竹EST-SSR的主要重复类型,分别占SSR总数的43.14%和49.75%。SSR的不同重复基序中,最常见的重复基序是：(AG)_n,占37.01%,其余出现频率较高的依次为(TC)_n、(AGC)_n、(GAG)_n和(CGC)_n。根据搜索结果设计了182条毛竹EST-SSR引物,以12个不同种属的竹子DNA为模板,对引物进行了稳定性、通用性的验证与评价。结果表明有42对引物有较清晰且稳定的目标扩增产物,其中39对引物的产物存在多态性,说明设计开发的毛竹的EST-SSR标记是可行且有效的。     

两个新发现的黄瓜性别决定基因遗传规律的研究

 选取黄瓜两个雌雄同株型的强雌性高代自交系材料与普通雌雄同株、两性花株、纯雌株高代自交系材料杂交, 通过对F₁、F₂、BC₁ -1 和BC₁ -2 代性型观察, 统计分析表明: 雌雄同株型的强雌性由1对不完全显性和1对隐性基因控制, 暂定名为Mod-F₁和mod-F₂, 它们是新发现的黄瓜性别表达的两个基因, 能增强黄瓜植株雌性的表达, 与F和M 基因独立遗传。     

3个樱桃品种光合特性比较研究

 以3个原产地不同的甜樱桃栽培品种佐藤锦、斯坦勒和那翁为试材, 利用CIRAS-2便携式光合测定仪, 对其光合特性进行了比较研究。结果表明: 樱桃净光合速率( Pn) 日变化为典型的双峰曲线,气孔限制是光合“午休”的主要调节因素。樱桃光合作用对光照强度( PAR) 、CO₂ 浓度和温度等单一生态因子水平变化的响应均可以用二次方程来描述。樱桃光补偿点(LCP) 为10～82μmol·m^{- 2} ·s^{- 1} , 光饱和点(LSP) 为970～1 040μmol·m^{- 2} ·s^{- 1} , 斯坦勒较低, 佐藤锦较高。樱桃CO₂ 补偿点(CCP) 为90～116μmol·mol^{- 1} , CO₂ 饱和点(CSP) 为1 030～1 233μmol·mol^{- 1} , 佐藤锦CCP较低而CSP较高, 且羧化效率和CO₂ 饱和点时光合能力( Pm) 均显著高于其它两个品种。樱桃光合作用对温度的适应范围较窄,在11～36℃之间, 最适温度在23～25℃之间, 适温下佐藤锦Pn显著高于斯坦勒和那翁。     

梨矮化砧木'青砧D3'叶片高效再生体系的构建

以梨矮化砧木'青砧D3'为试材,进行了离体叶片组织培养高效再生体系的构建。结果表明:TDZ和IBA均可以促进'青砧D3'离体叶片不定芽的诱导,但TDZ效果更显著,其诱导效果和TDZ的浓度成正比,研究发现'青砧D3'离体叶片不定芽再生最佳培养基为NN69+TDZ 3.0 mg·L~(-1)+IBA 0.3 mg·L~(-1)+琼脂7 g·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1),再生率与再生芽数分别为100.00%和7.69;IBA对'青砧D3'不定根的诱导优于NAA,不定根再生最佳培养基为1/2MS+IBA 0.2 mg·L~(-1)+琼脂7 g·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1),根诱导率达到100%。该研究的开展为梨矮化砧木'青砧D3'的工厂化育苗奠定了基础。     

银杏锰型超氧化物歧化酶GbMnSOD基因的克隆与表达

利用RACE技术首次从银杏中克隆到锰型超氧化物歧化酶基因(GbMnSOD ) 的cDNA全长。GbMnSOD的cDNA全长965 bp (GenBank accession number: EF633506) 。生物信息学分析GbMnSOD cDNA序列含有一个681 bp最大读码框, 编码一个226氨基酸多肽链, 通过软件预测分子量为2515 kD, 等电点为8197。三维结构预测结果显示, GbMnSOD 含有12个α螺旋和3 个β折叠构成一个篮子状的活性中心。GbMnSOD氨基酸序列与其它植物MnSOD具有很高的相似性。进化树分析结果表明GbMnSOD和其他物种的MnSOD源自于相同的祖先。Southern杂交显示, GbMnSOD属于一个小的多基因家族。Northern 杂交表明GbMnSOD在银杏的根、茎、叶和果中都有表达, 在叶中的表达量最高, GbMnSOD 的转录受到ABA、IAA、蔗糖、甘露醇、NaCl 和低温的诱导。     

外源硫化氢对镉胁迫下黄瓜胚轴和胚根生理生化特性的影响

 以黄瓜（Cucumis sativus L.）种子为试材,研究了外源H₂S预处理对镉胁迫下黄瓜胚轴和胚根生理生化特性的影响。结果表明：用浓度为300、600、900和1 200 μmol · L^-1的H₂S供体NaHS预处理黄瓜种子均能显著缓解镉胁迫对其胚轴和胚根的抑制作用,其中以900 μmol · L^-1 NaHS处理效果最好。NaHS处理显著提高了镉胁迫下黄瓜子叶中淀粉酶的活性及胚轴与胚根中SOD、POD、CAT和APX活性,提高了二苯代苦味酰基自由基（DPPH· ）清除能力和羟基自由基（OH· ）清除能力,从而降低了MDA和H₂O₂含量,而其他钠盐（Na₂S、Na₂SO₄、NaHSO₄、Na₂SO₃、NaHSO₃和NaAc）处理效果甚微,表明NaHS缓解镉胁迫对黄瓜胚轴和胚根生长的抑制作用归因于其释放出的H₂S。     

野生西瓜种质PI296341-FR抗枯萎病菌生理小种2的遗传规律

 以抗枯萎病的野生西瓜种质PI296341-FR和高度感病的高品质西瓜自交系97103为亲本杂交,获得P₁,P₂,F₁,B₁,B₂,F₂等6世代及RILs（F₂S₈）永久分离群体。采用植物数量性状主基因 + 多基因混合遗传模型,进行6世代联合分析和RILs（F₂S₈）联合分析,探讨PI296341-FR对西瓜枯萎病菌生理小种 2 的抗性遗传规律。6世代分析结果表明,对生理小种2的抗性遗传符合1对加性主基因 + 加性—显性多基因遗传模型,主基因遗传率在B₁,B₂和F₂群体中分别为31.8%,23.4%和48.6%,加性效应为0;多基因遗传率为16.5% ~ 43.9%,加性效应为2.24,显性效应为–0.75。RILs（F₂S₈）联合分析显示,对生理小种2的抗性遗传符合3对连锁的等加性主基因遗传模型,主基因遗传率为66.2%,加性效应–0.51,主基因间重组率0.16。两种遗传模型分析结果显示：PI296341-FR对西瓜枯萎病菌生理小种2的抗性遗传由主基因和微效基因共同控制,微效基因加性效应与显性效应的绝对值均高于主基因。     

黄瓜无毛基因gl-2的遗传分析和定位

 以黄瓜（Cucumis sativus L.）有毛类型‘9110Gt’（P₁）和无毛突变体‘NCG-042’（P₂）为试材,对无毛基因gl-2进行遗传分析和基因定位研究。结果表明,黄瓜的有毛、无毛性状由一对核基因控制,有毛对无毛为显性。结合分离群体分组混合分析法（bulked segregant analysis,BSA）,以F₂为作图群体,筛选得到18对与黄瓜无毛基因gl-2相关的SSR引物,构建了gl-2基因的SSR连锁群,并将该基因定位在黄瓜第2染色体上,两侧最近的连锁标记为SSR10522和SSR13275,遗传距离分别为0.6 cM和3.8 cM。经过回交群体验证,SSR10522和SSR13275的正确率分别为94.4%和91.6%。     

无机氮和氨基酸态氮处理对番茄幼苗木质部和韧皮部汁液中矿质养分的影响

溶液培养条件下研究了番茄幼苗木质部和韧皮部汁液中氮及其它矿质养分运输对无机氮(NH₄^{+ _-}N、NO₃^- -N) 和氨基酸态氮(Gly-N) 处理的不同响应。结果表明, 不同氮素处理8 d后, ‘申粉918’和‘沪樱932’番茄木质部和韧皮部汁液中全氮含量表现为NH₄⁺ -N > Gly-N >NO₃^- -N处理, 而氮溢出量则以Gly2N处理的最多, 其次为NH₄^{+ _-}N或NO₃^- -N处理。两个品种木质部汁液中K、Ca、Mg以及‘沪樱932’木质部汁液中Cu含量表现为NO₃^- -N > Gly-N >NH₄⁺ -N 处理, 而‘申粉918’中的Cu含量则表现为NO₃^- -N>NH₄⁺ -N > Gly-N处理。两个品种木质部汁液中K、Ca、Mg、Cu、Zn、Mn溢出量均表现为NO₃^- -N> Gly-N>NH₄⁺ -N处理; 韧皮部汁液中K、Ca、Cu、Mn溢出量表现为Gly-N >NO₃^- -N>NH4+ 2N处理; 而其Mg、Zn溢出量则表现为NO₃^- -N> Gly-N >NH₄⁺ -N处理, 且‘沪樱932’的变化幅度较‘申粉918’的小。NH₄⁺ -N处理抑制番茄木质部养分向上运输的能力远大于Gly-N, ‘申粉918’受抑制的程度更为明显。     

NO和H2O2在IBA诱导万寿菊不定根形成中的作用

 研究了一氧化氮（NO）和过氧化氢（H₂O₂）在吲哚丁酸（IBA）诱导万寿菊（Tagetes erecta L.）外植体不定根形成过程中的作用及其相互关系。结果表明：外源IBA与NO、H₂O₂一样对万寿菊外植体不定根形成有促进作用,且IBA与NO,IBA与H₂O₂协同增效。NO清除剂cPTIO和H₂O₂清除剂CAT均能抑制IBA对不定根形成的促进作用。同样,cPTIO和CAT亦能抵消IBA对NPA抑制不定根形成的逆转作用。可见,NO和H₂O₂是IBA诱导万寿菊不定根形成的必要条件。IBA处理提高了外植体内源NO和H₂O₂的含量,说明IBA是通过增加内源NO和H₂O₂水平实现对不定根形成的促进作用。cPTIO和L-NAME抑制了IBA对H₂O₂含量的促进作用,而CAT和DPI却不能抑制IBA对NO含量的促进作用。可见,NO和H₂O₂是IBA诱导万寿菊不定根形成的两个下游信号分子,且NO可能位于H₂O₂的上游。     

茄子果实性状相关基因的QTL定位

以果实性状差异显著的茄子(Solanum melongena L.)种质材料绿茄‘131'和上海本地长茄‘141'为作图亲本,构建了237个株系的F_2群体,采用450对SSR标记构建遗传图谱,定位茄子果实单果质量、果长、果径、果形指数和果实花萼大小的QTL。研究结果表明:在亲本间表现多态性的SSR标记为63对,平均多态性比例为14%;共有53个标记被分配到13个连锁群上(12条染色体),13个连锁群覆盖总长度为532.2cM,标记间距范围为0.2~45.9 cM,平均距离为10.04 cM;共定位了9个与果实性状相关的QTL位点(单果质量1个,果长1个,果径2个,果形指数3个,果实花萼大小2个)。