福建李叶斑病病原菌种类鉴定及致病性研究北大核心CSCD

【目的】鉴定明确近年在福建新发生的李叶斑病的病原菌种类。【方法】采集李叶斑病叶进行组织分离,对获得的菌株采用形态学和分子生物学相结合的方法进行种类鉴定和致病性研究。【结果】通过组织分离和纯化,并根据菌落形态特征共获得66个刺盘孢属(Colletotrichum)菌株。对这些菌株进行形态学观察和多基因(ACT、TUB2、CHS-1、GAPDH及ITS)系统发育分析的结果显示,它们分别归属于刺盘孢属的6个种,包括果生刺盘孢(C.fructicola)59个菌株、喀斯特刺盘孢(C.karstii)2个菌株、普洛柏刺盘孢(C.plurivorum)2个菌株、暹罗刺盘孢(C.siamense)1个菌株、无锡刺盘孢(C.wuxiense)1个菌株和李刺盘孢(C.pruni-salicinae)1个菌株,其中李刺盘孢(C.pruni-salicinae)为笔者鉴定出的1个新种。分离鉴定的6种刺盘孢的代表菌株,有伤接种结果显示它们均可使李叶片和果实致病,但其致病力明显不同,它们对桃、梨、柑橘和猕猴桃的致病也存在显著差异。【结论】引起福建李叶斑病的病原菌有果生刺盘孢、喀斯特刺盘孢、普洛柏刺盘孢、暹罗刺盘孢、无锡刺盘孢和李刺盘孢6种,其中果生刺盘孢(C.fructicola)为优势种,占刺分离获得的盘孢属(Colletotrichum)菌株的89.4%。不同刺盘孢菌的致病性存在明显差异。     

广西平果莲雾炭疽病病原菌鉴定

采用形态学特征观察和多基因系统进化分析进行病原种类鉴定。结果表明:病原菌在PSA培养基上初生菌丝为白色,逐渐转变成墨绿色至灰黑色,孢子堆为橘红色,分生孢子为单细胞,无色透明,长椭圆形,8.5~17.5μm×3.5~4.5μm,有的含有1~2个油球,萌发产生附着胞;病原菌的ITS序列与果生刺盘孢菌(Colletotrichum fructicola)相似性最高,达99.7%;基于ACT、ITS、CHS-1、GPDH和TUB2基因序列构建的多基因联合系统进化结果显示,病原菌与果生刺盘孢菌的不同分离物聚集在同一个分支上,结合其形态学特征将病原菌鉴定为果生刺盘孢菌。     

杧果拟盘多毛孢叶枯病菌鉴定及其生物学特性研究

分离鉴定杧果苗圃叶枯病病原菌并研究其生物学特性。结果表明,该病原菌鉴定为杧果拟盘多毛孢Pestalotiopsis mangiferae(P.Henn.)Steyaert。菌丝在Richard+杧果叶煮沸汁液培养基上生长最佳,在Czapek培养基上不产孢。菌丝生长和分生孢子萌发的适宜温度分别为20～25℃和25～30℃,适宜pH值分别为5.0～6.0和4.5～6.0。供试碳源中蔗糖和D-葡萄糖较利于菌丝生长,乳糖和蔗糖较利于孢子萌发;供试氮源中硝酸钠和硝酸钾较利于菌丝生长,硝酸铵较利于孢子萌发。完全光照和光暗交替各12小时有利于病菌菌丝生长和产孢,完全黑暗不利于菌丝生长且不产孢。分生孢子致死温度为52℃水浴10分钟。     

茼蒿炭疽病菌生物学特性研究

对茼蒿炭疽病病原菌菊刺盘孢(Colletotrichum chrysanthemi Hori.Saw)的生物学特性进行了研究。结果表明:病原菌在供试的6种培养基上均能生长,在茼蒿煎汁培养基上生长的最好。各种碳氮源能被病原菌有效利用,菌丝生长的最佳碳源为葡萄糖,最佳氮源为蛋白胨。病菌菌丝在10～34℃范围内都能生长,适宜温度范围为26～30℃,最适生长温度为28℃。在pH3～9范围内菌丝均能生长,在pH 7的环境中生长的最好。病原菌光照条件下的生长量显著高于黑暗条件下的生长量,该病菌的致死温度为60℃、10min。     

生物源杀菌剂及其与戊唑醇复配对苹果主要炭疽菌的室内活性评价分析

苹果免套袋生产已经成为苹果产业转型升级的必然趋势，然而去袋后，主要由胶孢刺盘孢和尖孢刺盘孢侵染引起的苹果炭疽病会引发烂果、落果，严重影响苹果产量和品质，且面临果面农药残留的问题。为此，筛选可用于防控上述病害的生物源杀菌剂至关重要。采用菌丝生长速率法首先测定了8种生物源杀菌剂对2种病菌菌丝生长的抑制效果，结果表明，50亿cfu/g多粘类芽孢杆菌、100亿cfu/g枯草芽孢杆菌、300亿cfu/g解淀粉芽孢杆菌对2种病菌菌丝生长的抑制效果较好，对胶孢刺盘孢的EC₅₀值分别为1.489×10^-5、5.911×10^-1、1.717×10^-5μg/mL，对尖孢刺盘孢的EC₅₀值分别为2.810×10^-4、1.302×10^-1、1.110×10^-2μg/mL。进而分析了上述药剂与常用化学药剂43%戊唑醇的最佳复配比，结果表明，100亿cfu/g枯草芽孢杆菌与43%戊唑醇按1∶1比例复配时，对胶孢刺盘孢的抑制效果最好，增效比为...     

甜瓜炭疽病病原菌鉴定

以南昌郊蛟桥镇甜瓜基地的甜瓜炭疽病病果为试材,采用致病性测定、形态学观察和分子生物学的方法,研究了甜瓜炭疽病病原归属。结果表明:黄瓜炭疽病病原菌形态具典型炭疽菌属类真菌Colletorichum orbiculare的特征,GPDH基因序列与NCBI-GenBank中已有的C.orbiculare序列同源性为100%,接种发病症状与自然发病症状类似,因此将该病原菌鉴定为瓜类刺盘孢(Colletorichum orbiculare)。     

热处理对四种果实上炭疽菌的抑制作用及防治效果

从荔枝、龙眼、卡亡果、木瓜果皮中分离出的炭疽病菌均为胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides Penz．)，不同来源的菌株对4种果实及叶片的致病力和对热处理的反应没有显著性差异。胶孢炭疽菌分生孢子在48℃温水中处理10min后萌发率显著降低。分生孢子的致死温度为50℃ 10min或55℃ 5min。菌丝比分生孢子对热处理的敏感性低。48℃温水处理2．30min对菌丝生长没有抑制作用。在52℃、55℃温水中处理5min或60℃温水中处理2min后菌丝生长速度显著降低。菌丝的致死温度为60℃ 30min。热水浴处理是防治卡亡果、木瓜采后炭疽病的一种较为有效的方法．处理温度和时间可选用52-55℃5-10min。     

百合炭疽病病原菌Colletotrichum spaethianum生物学特性及室内药剂筛选

白蜡树炭疽菌(Colletotrichum spaethianum)是新发现的引起龙牙百合炭疽病的病原菌,为进一步明确其生物学特性及对药剂的敏感性,本试验采用菌丝生长速率法和孢子计数法,研究不同碳源、氮源、培养基、pH、光照、温度等对白蜡树炭疽菌菌丝生长和产孢的影响;并采用菌丝生长速率法,测定该病原菌对6种杀菌剂的敏感性。结果表明,最适合白蜡树炭疽菌菌丝生长的条件:碳源为葡萄糖和乳糖,氮源为牛肉浸膏,pH值5,温度25 ℃,培养基为OA,12 h光照/12 h黑暗;最适产孢条件:碳源为乳糖,氮源为甘氨酸,pH值9,温度25 ℃,培养基为PSA,24 h 黑暗;菌丝致死温度为53℃,分生孢子致死温度为58 ℃。参试6种杀菌剂中,吡唑醚菌酯抑制作用最强,EC_(50)为0.056 mg · L~(-1);唑醚·代森联的防治效果最差,EC_(50)为64.609 mg · L~(-1)。     

杧果红点病病原菌的鉴定

在海南杧果果实上发现了一种由炭疽病菌引起的杧果红点病,通过菌种分离与纯化、致病性测定、形态学观察和rDNA-ITS序列分析,对引起杧果红点病的病原菌进行了鉴定。病原菌回接后,杧果果皮上出现凸起的褐色或黑色坏死斑点,周围有红色或暗红色晕圈,这与田间自然发病果实症状一致;在PDA培养基上培养后,杧果红点病原菌菌落呈圆形,灰色,气生菌丝绒毛状,后期产生桔红色孢子堆;病原菌的rDNA-ITS基因序列与已有的杧果炭疽菌rDNA-ITS核苷酸序列同源性高达100%。结果表明,杧果红点病病原菌为胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides Penz.。     

芙蓉李炭疽病的病原鉴定及生物学特性

为明确引起福建省芙蓉李炭疽病的病原菌种类及其生物学特性,对采自永泰、连城等地的芙蓉李炭疽病果实和叶片样品,进行病原菌分离、纯化、致病性测定、形态学及分子生物学鉴定,并分析不同培养基、光照、温度、pH值、碳氮源对病原菌菌丝生长的影响。研究结果表明,引起福建芙蓉李炭疽病的病原菌为胶胞炭疽菌Colletotrichum gloeosporioidesPenz.。该菌在温度10~35℃均可生长,最适生长温度为20~25℃;在CA、PCA、OA和PDA等4种培养基中生长较好;在pH值为4~13均能生长,pH值为5~9时生长较好;当温度低于25℃时,光照对菌丝生长具有一定促进作用;菌丝体生长的最佳碳源为乳糖,最佳氮源为蛋白胨。     

石棉县黄果柑果实病斑致病菌的分离鉴定

为明确近年四川省石棉县黄果柑果实田间普遍发生的果面病斑的致病菌,2016年12月在当地采病果为试验材料进行病菌分离,并对分离菌株进行形态学鉴定、分子鉴定及致病性测定。结果表明,分离共获得12株真菌,5株为胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides,5株为互隔交链格孢菌Alternaria alternata,2株为果生刺盘孢菌C. fructicola。分离获得的胶孢炭疽菌株和互隔交链格孢菌株均能侵染果实和叶片形成病斑且与田间病斑基本一致,两者是生产中石棉县黄果柑果面病斑的致病菌。     

枣炭疽病菌鉴定及9种杀菌剂对其菌丝生长的影响

为明确枣炭疽病的病原菌,从病样中分离病原菌并选择获得代表性的2个菌株,研究病原菌的形态学特征、rDNA-ITS序列、致病性及9种杀菌剂对其菌丝生长的影响。结果表明:引起枣炭疽病的病原菌为胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides),该病原菌主要侵染枣果实,发病初期果皮病斑为淡黄色,逐渐变成黑褐色圆形或近圆形斑,病斑中央凹陷,边缘呈黄色晕圈。吡唑醚菌酯和咪鲜胺对炭疽菌菌株YY-02和YY-05的菌丝生长抑制作用最强,其平均EC_(50)值分别为0.27,0.23μg/ml,2种药剂的毒力显著高于其他药剂;戊唑醇、苯醚甲环唑、醚菌酯、三唑酮4种药剂对胶孢炭疽菌YY-02和YY-05菌丝也具有一定的抑制作用,其平均EC_(50)值分别为2.85、2.97、3.17、5.69μg/mL。建议在枣炭疽病发病的不同时期,轮换使用吡唑醚菌酯、咪鲜胺、戊唑醇、苯醚甲环唑、醚菌酯和三唑酮等杀菌剂,以有效控制该病害。     

越橘镰孢果腐病菌的生物学特性测定及防治药剂初步筛选

对新发现的越橘镰孢果腐病菌(Fusarium acuminatum)的生物学特性及药剂防治进行了研究。结果表明:病菌菌丝生长最适培养基为PSA培养基,产孢最适培养基为OA培养基,菌丝生长最适温度为20℃,产孢最适温度为21℃;菌丝生长和产孢的最佳碳源分别为麦芽糖和羧甲基纤维素钠,最佳氮源分别为酵母粉和尿素;pH 5~6适宜菌丝生长,pH 6产孢最佳;全黑暗条件有利于菌丝生长,但全光照有利于产孢;菌丝致死温度为51℃(10 min),分生孢子致死温度为67℃(10 min)。病菌生长因素正交试验结果表明温度对病菌生长的影响最大。采用生长速率法测定了病菌对21种杀菌剂的敏感性,结果表明:病菌对多粘类芽孢杆菌、蜡质芽孢杆菌、咯菌腈、丙环·嘧菌酯和枯草芽孢杆菌的敏感性较高,其EC500.5000 mg·L~(-1)。防效试验结果表明,咯菌腈和多粘类芽孢杆菌处理越橘镰孢菌果腐病的发病率和病斑直径均明显小于对照,防效较好,能有效控制该病害的发生。     

江西峡江椪柑果梗炭疽病病原鉴定

从江西省峡江县椪柑园采集呈典型症状的椪柑果梗炭疽病病样,经病菌分离纯化获得3个炭疽病菌株XJ-1、XJ-2和XJ-3,对这3个菌株进行了形态特征观察、rDNA-ITS序列测定和特异性引物PCR扩增。结果表明,这3个菌株均为胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides),依照柯赫氏法则验证了胶孢炭疽菌为椪柑果梗炭疽病的病原菌。     

琯溪蜜柚炭疽病病原鉴定

【目的】确定引起琯溪蜜柚炭疽病的病原种类,为针对性地防治炭疽病提供理论依据。【方法】2014—2015年从平和县4个乡镇采集发病材料,对病原菌进行分离、纯化、致病性测定以及形态特征观测、r DNA-ITS序列分析,对病原菌的种类进行鉴定。【结果】经单孢分离后,所获得的菌株对琯溪蜜柚果实可致病,并产生典型症状,对病原菌进行显微形态观测,病原菌分生孢子及附着孢的形态为炭疽菌属真菌,以菌株GX(3)的DNA为模板,扩增得到全长为600 bp的DNA片段,并获得该菌的rDNA-ITS序列,发现其与胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides Penz的相似性高达100%。【结论】根据病害症状、病菌的形态特征及ITS序列同源性比较的结果,将琯溪蜜柚炭疽病的病原菌鉴定为胶孢炭疽菌C.gloeosporioides。     

枇杷花腐病病原生物学特性研究

对枇杷花腐病干腐型(拟盘多毛孢Pestalotiopsis eriobotrifolia)和湿腐型(灰葡萄孢Botrytis cinerea)病原菌的生物学特性进行了研究.结果表明,两种病原菌在供试培养基上均能生长.在碳源利用上,除了木糖,不同碳源对拟盘多毛孢生长影响不大,灰葡萄孢则能很好地利用各种供试碳源.它们也都能利用各类供试氮源,适生温度5～35 ℃,25、20 ℃分别为拟盘多毛孢和灰葡萄孢最适生长温度.pH值过高或过低对二者生长都不利,拟盘多毛孢最佳生长pH值4或5,灰葡萄孢为pH值5.拟盘多毛孢分生孢子在全光照下萌发率最高,灰葡萄孢在全黑暗条件下萌发率最高;萌发最佳温度分别为30 ℃和15 ℃,最适相对湿度为75%和78%,最适营养为蔗糖和葡萄糖,致死温度为50 ℃和44 ℃.     

甜瓜镰刀菌果腐病新病原菌Fusarium incarnatum的鉴定及生物学特性

采用常规组织分离法对采自山西省太谷县疑似镰孢刀菌引起的甜瓜果实新病害进行病原菌分离,根据柯赫氏法则明确其致病性。基于形态特征以及核糖体内转录间隔区(rDNA-ITS)、转录延伸因子(EF-1α)、组蛋白(Histone 3)和线粒体中核糖体小亚基(mtSSU)序列分析,鉴定该病原菌为变红镰刀菌(Fusarium incarnatum)。病原菌的生物学特性测定结果表明,菌丝生长和产孢最适培养基均为马铃薯蔗糖琼脂培养基(PSA);温度为20～35℃菌丝生长较快,20～25℃产孢量最大;羧甲基纤维素钠、淀粉和木糖等碳源适合菌丝生长,产孢的最佳碳源为乳糖;病原菌在多种氮源上均能较好生长,产孢的最佳氮源为酵母粉;pH为8时菌丝生长最快,不同pH处理的产孢量间差异不显著;病原菌在全光照和全黑暗条件下能较好生长,不同光照条件下产孢量差异不显著;菌丝致死温度为61℃(10min),分生孢子致死温度为56℃(10 min)。     

柿树炭疽病菌的生物学特性及其抑菌药剂筛选

通过十字交叉法和血球计数板法测定柿树炭疽病菌Colleltrichum horri的生物学特性,采用菌丝生长速率法和孢子萌发法分别测定16种常用杀菌剂对该菌菌丝生长的抑制作用和对孢子萌发的影响。柿树炭疽病菌菌丝生长的最适温度为25℃,最适产孢温度为28℃,适合菌丝生长的pH值为4.0~6.0,最适产孢pH值为4.0;最佳碳源为葡萄糖和麦芽糖,最佳氮源为牛肉膏。16种常用杀菌剂中,33.5%喹啉铜悬浮剂、25%溴菌腈乳油和70%代森锰锌可湿性粉剂对柿树炭疽病菌菌丝生长和产孢的抑制效果最好,可作为防治柿树炭疽病的优选药剂,其次为70%代森联水分散粒剂、400g·L~(-1)氟硅唑乳油和50%福美双可湿性粉剂,可作为备选药剂。该研究结果可为柿树炭疽病的有效防治提供依据。     

杧果红点病病菌生物学特性研究

杧果红点病是近年在海南杧果上发现的新病害,由炭疽菌Colletotrichumsp.引起。研究结果表明,该菌菌丝生长、孢子萌发的温度范围均为13~37℃,适宜温度25~31℃;孢子产生温度16~37℃,最适温度34℃。菌丝生长、孢子形成、孢子萌发的pH值范围广,均为3.0~11.0,适宜pH值分别为4.0~8.0、4.0~7.0和5.0~9.0。供试碳源中,以葡萄糖、蔗糖、菊糖为碳源菌丝生长良好;以菊糖为碳源最适产孢。供试氮源中,以硝酸钙、硝酸钾为氮源菌丝生长良好;以甘氨酸为氮源产孢量最大。营养及光照条件对菌丝生长、产孢有明显影响,在PSA、PSA+酵母膏培养基上菌丝生长良好,在PSA+酵母膏培养基上产孢量大;光照可促进产孢。     

杧果露水斑病病原菌生物学特性测定

【目的】明确杧果新病害露水斑病病原菌(Cladosporium cladosporioides)的生物学特性,以便为该病害的发生规律研究提供理论依据。【方法】测定了不同条件对病原菌菌丝生长、产孢量和孢子萌发的影响。【结果】菌丝在杧果葡萄糖琼胶培养基和PDA培养基上生长最佳,最适生长温度20℃,最适p H值7~8,光照对菌丝生长影响不明显,菌丝对有机碳源乳糖和有机氮源氨基乙酸利用最好,菌丝致死温度为50℃、10 min;产孢量以25℃、p H 6、光暗交替、麦芽糖为碳源、L-胱氨酸为氮源时最大;分生孢子萌发率以25℃、p H7、液态水、有机碳源阿拉伯糖、有机氮源L-天冬氨酸为最适条件,分生孢子致死温度50℃、10 min。【结论】杧果露水斑病菌喜好20~25℃、弱酸至弱碱、高湿、富含有机营养的环境。