不同发育阶段银杏胚的组织培养研究

以低温贮藏银杏胚为试材,研究不同取材时期银杏胚的生长长度变化、愈伤组织诱导和分化能力。结果表明:早期取材且低温保存,能减缓胚的生长和发育速度;不同时期胚均能较好的诱导愈伤组织,以10月10日取材在MS培养基上诱导率最高;愈伤组织有一定的分化能力,早期(10月3日至11月16日)取材能诱导出胚性愈伤和不定芽,晚期(11月16日以后)取材能诱导出不定芽和不定根,诱导频率较低。     

外植体及培养条件对葡萄不定芽再生的影响

以优良无核葡萄品种莫利莎、皇家夏天为试材,分别从外植体类型、叶片接种部位、接种方式及培养条件等方面进行不定芽再生技术研究。结果表明,2品种葡萄试管苗离体叶片切割后接种较节间和叶柄容易诱导不定芽再生;将叶片切分为叶尖、叶中、叶基部叶块分别接种,其不定芽再生能力没有差异;取自培养30～50d继代苗上的叶片,其不定芽再生效果相同;叶块以近轴面或远轴面接触培养基的接种方式对不定芽再生影响不大,不过叶片远轴面贴近培养基接种,产生的愈伤组织状态较好;25℃左右小幅变温或恒温的条件能诱发2个葡萄品种产生较多的不定芽;葡萄不定芽再生须经黑暗培养或弱光培养,暗培养时间在2周与4周之间再生效果差异不显著。     

甘蓝胚状体诱导成苗因素研究

以3个优良甘蓝品种为试材,进行了游离小孢子培养和胚状体植株再生技术研究,以期探讨不同甘蓝材料的基因型、胚状体类型、不定芽大小、烯效唑对不定芽诱导和生根的影响。结果表明:甘蓝子叶型胚容易发育单芽,鱼雷型胚和球型胚容易形成丛生芽;且单芽率和丛生芽率在不同基因型之间存在差异。高度大于2cm的不定芽转接到生根培养基上后生长速度先慢后快,生根数少且细长;小于2cm的不定芽生长速度先快后慢,生根数多且粗壮。小孢子不定芽在添加0.50mg/L烯效唑的MS+0.3mg/L NAA生根培养基中生根率最高且根系生长健壮,移栽成活率高达95.6%。     

特早熟杏胚培养试验

果树极早熟、早熟品种胚发育不全 ,其种子采用常规播种育苗的发芽率极低 ,而采用胚培养技术 ,不仅能提高胚的萌发率、成苗率 ,而且可望选育出成熟期更早的新品种。目前 ,桃、樱桃、李、梅等核果类果树多个早熟品种胚培养已经成功 [1～ 4 ] ,杏早熟品种幼胚培养国内外报道较少 [5～ 7] ,本试验以杏极早熟品种红荷包幼胚和胚珠为试材 ,进行了培养试验 ,现将结果报道如下。1　材料与方法　　供试材料为杏特早熟品种红荷包自然杂交果实的胚珠、幼胚 ,试材摘自山西省农业科学院园艺研究所杏品种资源圃 ,于盛花后 45天(半硬核期 )采样。胚珠培养　…     

苹果花药培养不定胚形成的细胞学观察

【目的】通过对苹果花药离体培养过程中小孢子的发生及雄核发育的过程进行了系统的细胞学观察,明确花粉培养不定胚形成的关键时期和类型,为苹果花药培养小孢子不定胚形成的机理研究奠定基础。【方法】以‘嘎拉’苹果不同发育时期的花蕾为试材,采用石蜡切片技术对其小孢子发生和雄配子发育过程进行了解剖学观察,并对接种培养后的花药进行了切片制作,系统观察了小孢子不定胚的发育过程。【结果】单核期花粉经均等分裂后形成两个对称的两核细胞,然后持续多次均等分裂后形成多细胞(核)结构,进一步分化发育成不定胚。【结论】为苹果花药所获植物的单倍体来源提供了直接证明,有关苹果雄核发育的机理研究还需要通过小孢子培养进一步研究。     

刺五加形态发生方式的研究

以刺五加愈伤组织为试材,研究了器官发生途径和体细胞胚胎发生途径获得再生植株的发生机制。结果表明:移栽成活率分别达到47%和86%;刺五加不定芽诱导最适培养基组成为:MS+NAA 0.2 mg/L+BA 3.0 mg/L;体胚诱导的最适培养基组成为:MS+蔗糖20g/L+葡萄糖20g/L;细胞学观察发现刺五加不定芽大多发生在愈伤组织表面;刺五加体胚发生与合子胚发育过程相似,发生途径为单细胞起源、内部发生。     

红富士苹果叶片不定芽再生中激素、多胺和NO含量的变化

以红富士苹果继代试管苗叶片为试材,对光、暗培养条件下叶片不定芽再生过程中内源激素、内源多胺及NO含量变化进行了测定。研究结果表明:暗培养下内源ZR和ABA及内源多胺的水平显著高于光培养。叶片接种初期诱导细胞启动分化时ZR、IAA和ABA含量较高,细胞旺盛分裂期及芽原基形成期ZR和ABA含量较高而IAA含量较低。与光培养相比,暗培养下ZR/IAA和ABA/IAA均较高。在叶片接种初期(0～7d)内源腐胺(Put)、精胺(Spm)、亚精胺(Spd)以及内源多胺总量均达到峰值,并且在不定芽分化时期内源多胺含量始终维持在较高水平。与光培养相比,暗培养叶片的NO含量较高。红富士苹果叶片不定芽再生与其内源激素、多胺和NO含量密切相关。     

Study on the Morphogenesis Way of Acanthopanax senticosus

以刺五加愈伤组织为试材,研究了器官发生途径和体细胞胚胎发生途径获得再生植株的发生机制.结果表明:移栽成活率分别达到47％和86％;刺五加不定芽诱导最适培养基组成为:MS+NAA 0.2 mg/L +BA 3.0 mg/L;体胚诱导的最适培养基组成为:MS+蔗糖20 g/L+葡萄糖20 g/L;细胞学观察发现刺五加不定芽大多发生在愈伤组织表面;刺五加体胚发生与合子胚发育过程相似,发生途径为单细胞起源、内部发生.     

桃幼胚离体培养再生植株的研究

 以中晚熟桃品种‘京艳’、‘绿化9 号’、‘ 晚蜜’和‘大久保’为试材, 初步建立了桃体细胞胚发生和增殖的三阶段程序, 即胚性愈伤组织诱导、体细胞胚发生和发育、体胚萌发成株以及次级体细胞胚的增殖。各品种体细胞胚的萌发成株率分别为73. 5 %、38. 6 %、5. 4 %和58. 2 %。用苯脲类细胞分裂素TDZ有效诱导‘京艳’的幼胚子叶直接再生植株, 再生率70 % , 平均每外植体不定芽数13. 8 个, 再生不定芽生根后获得完整植株。     

甜樱桃砧木离体叶片愈伤组织诱导及不定芽再生

叶片再生效率的高低直接影响目的基因转化的成功率,为建立稳定、高效的樱桃不定芽离体再生体系,以30～40d苗龄的甜樱桃砧木ZY-1的组培继代苗为试材,取上部幼嫩叶片或不含腋芽的茎段,分别从培养基生长调节剂配比、接种材料类型、叶片接种部位、接种方式以及培养条件等方面进行了不定芽再生技术研究。结果表明,培养基中添加7.0mg/L的6-BA与0.5～1.0mg/L的IBA配比时不定芽再生率和出芽数均较高,TDZ和NAA不适于诱导ZY-1叶片再生不定芽;接种继代苗茎段比叶片再生率高;接种叶片以选择嫩叶横切2刀、远轴面向下接触培养基的方式为好;叶片不同部位处理以带叶柄的基部叶块最易再生;叶片接种后在25℃室温条件下,先暗培养3周再照光,利于不定芽的再生。     

丽格海棠离体培养植株再生影响因素的研究

以丽格海棠叶片、叶柄和花茎为试材进行培养.研究了不同浓度的NAA和6-BA对叶片不定芽的诱导作用,同时研究了不同类型的外植体,叶片的不同部位对不定芽的诱导影响,结果表明:MS 6-BA1.5mg/L NAA0.2-0.5 mg/L有利于不定芽的诱导.叶片再生不定芽的能力最强,而叶片中以叶中和叶侧的再生效果最好.1/2Ms NAA1.0 mg/L有利于不定根的诱导.     

霞多丽葡萄茎段丛生不定芽的诱导

以葡萄品种(Vitis vinifera)霞多丽(Chardonny)为材料,研究了外植体类型、不同培养基、不同激素及其质量浓度组合、暗处理时间对霞多丽丛生不定芽诱导的影响。结果表明,在所试的3类外植体中,仅从茎段诱导出不定芽。在所试的MS、NN1969及B53种培养基上,平均不定芽数差异不明显。当BA和IBA不同质量浓度组合时,霞多丽茎段均能诱导出不定芽,而且不同处理间不定芽诱导率差异显著,但每个外植体上诱导的平均不定芽数差异不明显,为0～2.5个。BA和IBA组合诱导的不定芽以单个芽为主。BA和NAA不同质量浓度组合对茎段不定芽诱导率和丛生不定芽数均有显著影响,当BA质量浓度为3.0mg·L-1、NAA为0.1mg·L-1时,不定芽诱导率和平均不定芽数达到最高,分别为9.7%和10.1个。由BA和NAA组合诱导的不定芽均为丛生不定芽,单个茎段诱导丛生不定芽数最高可达27个。将不定芽置于1/2MS+IAA0.2mg·L-1培养基上诱导生根,获得了完整的再生植株。     

新疆甜瓜“伽师”再生体系的建立

以厚皮甜瓜"伽师"为试材,研究了6-苄氨基嘌呤(6-BA)、硝酸银(AgNO3)对诱导不定芽的影响,建立以子叶为外植体的快速高效再生体系。选取5d的"伽师"无菌苗子叶,在添加了不同浓度6-BA的MSB培养基中诱导不定芽;并且探讨了在最适6-BA浓度的培养基中添加不同浓度AgNO3对诱导不定芽的影响。结果表明:甜瓜子叶外植体接种在MSB+1.5mg·L~(-1) 6-BA诱导分化培养基上,诱导率可达75%;添加不同浓度AgNO3诱导不定芽,以MSB+1.5mg·L~(-1)6-BA+2.0mg·L~(-1) AgNO3最适,诱导率可达65%,产生单芽较多,缩短了再生周期。丛生芽或单生不定芽转至MSB+0.1mg·L~(-1) 6-BA+0.1mg·L~(-1) GA3的培养基中伸长,不定芽均可伸长且生长状况良好;再将单芽转至MSB+0.01mg·L~(-1) NAA培养基进行生根。     

甜瓜“黄旦子”再生体系的建立

以甜瓜品种"黄旦子"的子叶为试材,采用组织培养的方法,研究了子叶日龄、不同浓度6-BA、IAA和头孢霉素对不定芽的影响。结果表明:子叶日龄对其不定芽的诱导具有较大影响,最佳诱导时间为子叶光照下培养2d,不定芽诱导率达80%;MS+6-BA 1.2mg·L~(-1)为最佳诱导培养基,诱导率达67%。此外,500mg·L~(-1)头孢霉素可作为脱菌和抑菌过程的最佳浓度,最佳卡那霉素浓度为25mg·L~(-1)。     

杏特早熟品种胚培的研究

选用特早熟杏红荷包为试材，首次将果实发育期45天的胚培养成株，从发育55～59天的胚得到300余株壮苗，栽植于选种圃．提高特早熟杏胚培成首的技术关键主要是：①选择适宜的接种时期，在花后59天硬核期PF1值达0.9时采样接种；②选用改良Tuber培养基，附加BAO．2毫克／升；③经80天以上0～3℃低温处理，④在15℃条件下，增强光照炼苗，9月下旬气温较低时移栽．     

优质观赏百合品种“木门”组织培养研究

以观赏百合优质品种"木门"鳞茎为试材,进行组织培养研究。结果表明:最佳灭菌方法为75%乙醇30s+0.1%升汞15min,污染率仅为30.00%;诱导不定芽最适宜培养基和激素组合为MS+0.5mg/L NAA+0.5mg/L 6-BA,诱导芽点平均为5.87个,不定芽2.87个;最佳放置方向为内侧向下。     

羽衣甘蓝游离小孢子胚胎发生、植株再生与增殖的研究

以20份羽衣甘蓝材料为试材,采用游离小孢子培养的方法,研究了胚胎发生、胚状体成苗和丛生芽继代培养的影响因素。结果表明:在诱导胚胎发生过程中,基因型是关键因素,供试材料中有15份诱导出胚,诱导率为75%;最适蔗糖浓度也与基因型有关;在不同基因型中,6-BA与NAA最佳浓度配比为1∶1或2∶1。与B5相比,MS培养基更有利于胚状体成苗。丛生芽转接周期为15d时增殖效果最好,平均增殖系数为10.3。     

桃幼胚下胚轴高频植株离体再生

以桃品种京艳和晚蜜不同发育阶段合子胚下胚轴为外植体进行离体培养,用6-BA、CPPU和TDZ等细胞分裂素诱导下胚轴直接再生不定芽试验。结果表明,花后70d下胚轴为诱导的最佳材料,供试细胞分裂素中,诱导活性为TDZ>CPPU>6-BA,苯脲类细胞分裂素TDZ5mg/L与NAA0.01mg/L配合对下胚轴再生具有极强的诱导作用,京艳诱导再生率高达95.2%,平均不定芽数达每外植体25.3个。京艳的诱导率显著高于晚蜜。IBA 0.5mg/L适于诱导再生幼茎的生根,生根率和移栽成活率分别达到92.6%和65.5%。组织学观察表明不定芽起源于皮层薄壁细胞,属直接再生方式。     

特早熟杏的育种

通过有性杂交与胚培技术相结合的办法,首次获得200余株基因重组后代,并从中选育出1株果实发育期仅52天的特早熟优系。研究结果表明,特早熟杏育种的关键技术措施是:①选用优良的早熟杏品种为亲本进行杂交;②于硬核期(PF,值0.9～1.0)采集杂种胚接种于Tukey BA0.2mg/L的培养基上;③1～3℃低温处理80天以上;④9月下旬气温较低时移植于盛有消毒沙的纸袋中;⑤加强肥水管理、接种VA菌根等促进胚培苗的营养生长;⑥当胚培苗高达2.5m左右时,于5月份叶面喷施1000mg/L的PP333,可控长促花,提早结果,比常规层积播种法缩短童期2年以上。     

花菖蒲类鸢尾组培愈伤组织诱导及芽的分化研究

以日本花菖蒲类鸢尾的2个品种为试材,进行了愈伤组织的诱导和不定芽分化的组织培养试验。结果表明:日本花菖蒲类鸢尾组织培养最佳的外植体是花茎,而且是在花苞长度为2～5cm左右处取样最佳,灭菌以采用0.1%HgCl2消毒10min效果最好,污染率仅为15%,成活率能达75%。诱导愈伤组织和不定芽分化的最佳培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 1.0mg/L,愈伤组织诱导率为59.09%,不定芽的分化率为50%。