灰色关联度法在杏鲍菇优良杂交菌株筛选中的应用

以杏鲍菇(Pleurotus eryngii ) 6号和ACCC50894为亲本,分别采用单孢杂交和原生质体单核体杂交方式获得65和37个杂交子,观测杂交子及亲本菌丝体生长情况,选择长势好及生长快速的杂交子进行栽培出菇试验.采用灰色关联度分析法对15个生长势较强的杂交子从7个性状方面进行综合评价,结果表明,单孢杂交获得的杂交子D12、D18、D20、D30、D19、D31、D17和D48关联度排名先于两亲本,农艺性状和子实体性状表现较好;原生质体单核体杂交菌株Y29和Y30关联度排名介于两亲本之间.     

凤尾菇营养缺陷型的诱变筛选及交配型基因测定

食用菌原生质体融合育种工作中,带有营养缺陷型突变基因的单核体常被用作融合亲本,以便检出融合子和进行融合子的遗传分析。本实验使用了紫外线诱变担孢子的方法,方便而易于操作,筛选出几株遗传特性稳定的营养缺陷型菌株,同时对它们的交配型基因进行了测定,发现了风尾菇交配型基因中的中性不亲和因子。 1材料和方法 1.1供试菌株 凤尾菇PL27(Pleurotus sajor-caju),野生型双核体;P23,P36,P22和P27是从PL27的单核体,它们的交配型基因分别确定为A1B1,A2B2,A2B1和A1B2。以上菌株均引自香港中文大学生物系。     

灰树花杂交菌株鲁灰86的选育

以灰树花(Grifola frondosa)野生菌株梯灰1号和栽培菌株庆灰151为亲本,各取10个孢子单核体单单杂交,采用光学显微镜观察是否存在锁状联合结构及通过与亲本的拮抗实验最终获得65个杂交子。选取23个菌丝生长速度较快的杂交子进行小试初筛栽培实验,并采用ISSR和SRAP分子标记对筛选出的优良杂交子构建系统发育树。结果表明:鲁灰86子实体颜色较深、朵型较大、菌管较短,产量分别比亲本梯灰1号和庆灰151提高了74.47%和20.53%,生物学转化率大于50%,且子实体中多糖含量较高;鲁灰86与两亲本间存在明显的遗传差异,是具有推广潜力的优质高产菌株。     

侧耳属种间原生质体融合杂种选育的研究

用~(60)Co-γ射线辐射诱变佛罗里达侧耳孢子,得到抗NaN_3药物的突变体。突变体的原生质体经0.83%碘乙酰胺灭活处理,与姬菇单核菌丝释放的原生质体进行融合,然后涂布在1×10~(-6)NaN_3药物选择再生培养基上,得到一个融合子菌落。经酯酶同工酶分析表明:融合子的12条区带中,与双亲共有的区带5条,与佛罗里达侧耳亲本同者2条,与姬菇亲本同者3条,新菌株独具的区带2条,证实为双亲融合杂种。     

灵芝杂交子液体发酵三萜、总糖含量比较

以4个生产上常用的灵芝(Ganoderma lucidum)菌株为亲本,用原生质体单核化技术获取单核体材料,按4个组合在不同亲本的单核体间配对杂交,以锁状联合为细胞标记共选出17个杂交子,比较了这些杂交子的菌丝生长速度、摇瓶培养菌丝的三萜和总糖量,为后继的育种工作提供亲本材料选择基础.     

香蕉线条病毒衣壳蛋白功能域基因的原核表达及抗血清制备

 制备香蕉线条病毒广东分离物（BSV-GD）的抗血清,可为BSV-GD 的快速检测和进一步研 究BSV 编码蛋白的功能提供条件。通过常规分子生物学方法,克隆了BSV-GD 衣壳蛋白（Coat protein, CP）功能域基因,构建了该基因的原核表达载体pET28b-CP,并诱导表达了大小约为46.5 kD 的融合蛋 白His-CP。可溶性分析表明该融合蛋白以包涵体形式存在。利用His 标签纯化试剂盒对目的蛋白进行纯 化、回收,获得了高纯度的融合蛋白。以纯化的融合蛋白为抗原免疫健康大耳白兔,成功制备了BSV-GD CP 功能域基因编码蛋白的兔抗血清。Western-blotting 分析表明该抗血清具有很强的特异性,间接ELISA 法检测抗血清效价达204 800 倍以上,对植物材料的合适检测浓度为1︰1 600 ~ 1︰6 400。     

金针菇杂合菌株子实体颜色遗传分析

将可以单核出菇的黄色单核体与不同白色单核体配对杂交获得双核体,通过控制栽培条件和环境,观察不同组合杂交菌株在相同环境中的子实体的颜色,同时测量双核子实体菌柄基部深色部分占整个菌柄的比例,结果发现不同的黄色单核和同样白色单核组成的双核子实体颜色表达中存在着差异,且不同的白色核对颜色表达的贡献不同,证实了白色金针菇单核体中也存在着不同的等位基因,金针菇双核子实体的颜色受到两个亲本核的共同调控。     

平菇杂交菌株选育

采用单单交配的方法,对两个不同温型平菇亲本菌株(白色高温型菌株和灰黑色中低温型菌株)的单核菌丝体进行随机组合交配,共获得209个杂交组合;杂交后代菌株在子实体颜色、菌丝生长速度、出菇期、子实体性状和产量方面表现出不同程度的性状分化;黑色亲本菌株与白色亲本菌株杂交后代子实体颜色介于两亲本之间,表现为灰色,出菇期延长,杂交后代菌株的菌丝生长速度和产量均无相关性。     

香菇汀香一号菌株的选育研究

历史上福建汀江流域所产的香菇称“汀菇”,为我国四大名菇之一。为了使这一优良的种质资源得到开发利用,本所从1992年开始收集野生香菇种质,并与引进的主栽品种进行杂交,选育出具有野生香菇的优良性状和耐高温出菇特性的新菌株。 一、杂交菌株获得 (一)亲本菌株获得 1992年秋,在一片杂木林中的倒木上(海拔200m左右)发现几朵野生香菇,菇盖圆整、厚实,柄短小,采回后与本场栽培的L03菇同时分别用钟罩法收集孢子。无菌操作,用稀释法在PDA平板上获得野生香菇单核菌株26株,L03单核菌株35株,通过插片显微鉴定,这些茵丝无锁状联合,确定是单核菌株。     

西瓜8155F_1品种引种试验

<正> 8155F_1西瓜品种是1981年由日本引进的杂交一代品种。同时引进母本品种“54”,父本品种“52”。1982年,1984年对亲本品种进行了观察;1983～1984年对“8155”进行了品种比较试验。 一、亲本观察 (一)试材及方法 “54”(母本),“52”(父本)与其它资源一起进行了观察,田间顺序排列,不     

分子生物学技术在菇类研究中的应用

本文报道了应用ＲＦＬＰｓ和ＲＡＰＤ技术分析香菇类缘关系，鉴别品系及分析木耳杂交后人攻原体质体融合子的结果，发现供试的３２个香菇菌株的总ＤＮＡ限制性内切酶片段长度存在多态性；木耳杂交后代、融合子及其亲株间ＤＮＡ ＰＣＲ扩增产物谱带型出现差别，这充分说明ＲＦＬＰｓ和ＲＡＰＤ技术在分析遗传变异、鉴别品系、鉴定杂种和融合子研究中的重要作用。     

金针菇与凤尾菇科间原生质体融合研究

金针菇与凤尾菇皆属四极生异宗结合食用菌,其双核异核体菌株都具有锁关联合遗传标记本研究以金针菇和凤尾菇的双核异核菌株为亲本,将热灭活的凤尾菇原生质体,以ＰＥＧ为融合剂,在高下,高ＰＨ值条件下,与金针菇原生质体融合,结果从１３２９个再生菌株中选择出６株双亲细胞质和细胞核都融合的无锁状联合菌株,经融合核分裂技术处理后,融合核分裂成为具有锁状联合的双核菌株。     

RAPD技术在木耳属杂交种及原生质体融合子鉴定分析中的应用

本研究以ＲＡＰＤ（ＲａｎｄｏｍｌｙＡｍｐｌｉｆｉｅｄＰｏｌｙ－ｍｏｒｐｈｉｃＤＮＡ）技术为主，比较分析食用菌木耳属（Ａｕｒｉｃｕｌａｒｉａ）种内杂交种．种间原生质体融合子与其亲本菌株的ＰＣＲ（ＰｏｌｙｍｅｒｓｅＣｈａｉｈＲｅａｃｔｉｏｎ）扩增的ＤＮＡ片段之间差异，并辅以其它手段，如核相及核数目观察，同功酶鉴别，以期建立完整有效的检测技术系列，确证其杂交种融合子的真实性及可靠性。在ＲＡＰＤ分析中，用于测试的１０种随机引物仅有４种引物与供试菌株的ＤＮＡ模板具有较好的结合能力，其中１种引物可用于检测杂交种及其亲本，另外３种引物可用于检测融合子反亲本。检测结果显示：３个供试杂交种中有２个为真杂合子，１个为假杂合子；２个供试融合子均为非稳定杂合子。与常规方法鉴定结果比较基本相符。因此，ＲＡＰＤ技术提供了一种快速、简便、准确的杂交种及融合子的鉴别方法。     

应用RAPD技术对香菇融合菌株进行遗传鉴定

本文应用RAPD技术与聚类分析方法,对香菇细胞融合菌株F1及亲本S1、465进行遗传分析.根据DNA扩增的指纹图谱,估算融合子与亲本的DNA相似系数并构建遗传相关性聚类图.结果表明,RAPD技术与聚类分析方法可应用于香菇细胞融合菌株的遗传鉴定.     

荧光标记紫孢侧耳和糙皮侧耳原生质体融合研究

异硫氰酸荧光素(FITC)标记的紫孢侧耳单核原生质体与未标记的糙皮侧耳单核原生质体经PEG融合后,在倒置显微镜下,用显微操纵仪直接吸取一方带有荧光另一方不带荧光的原生质体对,经培养后,根据“锁状联合”这一形态特征挑选出融合子,融合率为5.2×10~(-3).进一步鉴定结果表明,融合菌株的酯酶同工酶谱发生了明显的变化,其生物量和生长速度有不同程度的提高,子实体形态也与双亲有所不同.     

平菇与香菇融合子后代子实体的细胞学研究

平菇(Pleurotus sapidus)、香菇(Lentinus edodes)及其融合子后代子实体的细胞学观察表明:平菇、香菇的担子细胞及核分裂行为均属正常,而融合子后代的担子细胞发生异常,其担子细胞顶端出现粗大伸长的担子梗,其中有的形成一个孢子。处于终变期的染色体收缩成小球状,其数目多于双亲染色体,分裂后期出现落后染色体,融合子后代子实体不形成孢子印,镜检发现有少数孢子。融合子所产生的孢子与双亲的孢子相比较,在形态特征及大小上均有较显著的差异。     

草菇组织分离物的遗传变异研究（Ⅱ）

利用现代分子生物学技术扩增获得草菇组织分离物与草菇出发菌株的ＲＡＰＤ和ＩＴＳ的ＤＮＡ指纹图谱，以此估算两者的ＤＮＡ相似系数，并构建了遗传相关聚类图。结果表明，两者存在着一定的遗传差异。     

草菇染色体核型的鉴定

利用等高锁状同源电场凝胶电泳（CHEF）,获得草菇的电泳核型.综合两组脉冲电泳的电泳条件、溴化乙锭染色以及DNA杂交分析结果,草菇染色体DNA至少可分为9个谱带.这一结果和以前用光学显微镜观察草菇的染色体数目的结果相一致.以混浊酿酒酵母和粟酒裂殖酵母等的相对迁移率为基准,草菇染色体长度估计在1.32～5.4Mb之间,染色体组总长约25Mb.     

白金针菇菌体可溶性蛋白质图谱研究简报

应用梯度浓度聚丙烯酰胺凝胶电泳法（ＧＣ－ＰＡＧＥ）对金针菇白色菌株和普通菌株的菌体可溶性蛋白质进行分析比较。结果表明，可溶性蛋白质谱带分布在凝胶浓度６．４％￣２３．６％范围内，具有１９￣２３条，其中１５条为金针菇共同谱带，普通菌株的蛋白质谱带与白色菌株差异明显；白色菌株间谱带相似程度较大，相似系数（ＳＣ）为０．７８６￣０．８１８；推广栽培品种８９０９（Ｂ）存在其特征性谱带。     

香菇原生质体单核体杂交后代性状变异初探

以香菇菌种939和本所实验菌株中19为亲本,进行原生质体单核体分离和配对杂交。对杂交组合和亲本菌株的菌盖直径、厚度,菌柄长度、直径等性状进行考察。结果表明,10个杂交组合在子实体外观形态上与亲本存在明显的差异,且原生质体单核体杂交后代的农艺性状表现规律与亲本交配型的类型存在一定的关联。