鸡屎藤愈伤组织诱导及细胞悬浮培养研究

建立鸡屎藤愈伤组织的诱导、增殖继代培养及其细胞悬浮培养的技术体系。研究不同植物激素组合对叶片、茎段和带腋芽茎段愈伤组织诱导的影响;采用正交试验研究不同处理对叶片愈伤组织增殖的影响;采用液体振荡培养法测定叶片愈伤组织细胞悬浮生长曲线。结果表明：叶片最易诱导产生愈伤组织,最佳激素配比为MS＋6-BA1.0mg/L＋NAA0.5mg/L,诱导率可达100%。叶片愈伤组织最佳增殖培养基为MS＋2,4-D0.5mg/L＋NAA0.3mg/L＋6-BA0.5mg/L,pH5.8。由叶片愈伤组织建立的细胞系生长呈＂S＂型曲线,培养24d达到最大生长量,最适继代周期为18～20d。以叶片为外植体经愈伤诱导、增殖培养可建立良好的细胞悬浮系。     

红莲子草耐寒无性系选育研究

为满足人们观赏栽培的需求,以能越冬的红莲子草嫩茎为材料,进行愈伤组织诱导、低温处理、冷冻处理、复冻处理,愈伤组织分化、试管苗生根与继代增殖培养,以及试管苗移栽和定植的研究,建立起红莲子草耐寒无性系。结果证明：MS＋BA0.4mg/L＋2,4-D1.0mg/L＋NAA0.5mg/L＋蔗糖30g/L为嫩茎愈伤组织诱导和耐冻愈伤组织继代增殖培养的理想培养基;1/2MS＋蔗糖30g/L是复冻后增殖培养的愈伤组织分化的理想培养基;N6＋NAA0.1mg/L＋IAA0.4mg/L＋蔗糖15g/L是生根培养和生根继代增殖培养的理想培养基;移植到水库岸边的试管苗保持了红莲子草的所有生物学性状,且连续3年正常越冬。     

甘蔗幼叶组织培养中培养基的优化

对不同激素浓度质量组合对甘蔗愈伤组织的诱导、不定芽的分化和生根的效果进行研究。结果表明:MS+2,4-D 2.0 mg/L培养基对诱导愈伤组织和继代增殖较适宜;MS+NAA0 mg/L+BA 1.0 mg/L培养基对愈伤组织分化不定芽的效果为佳;1/2MS+NAA 0.5 mg/L+IBA 1.0 mg/L培养基对生根较好。通过这3个培养基培养出的甘蔗组培苗长势良好,表现为叶面积适宜、干物质积累多等方面。     

天女木兰嫩茎愈伤组织诱导及再生体系建立研究

为了保护濒危植物天女木兰,采用植物组织培养方法,以嫩茎为材料,进行愈伤组织诱导与分化、不定芽生根与试管苗生根继代增殖的培养,以及试管苗移栽与定植的研究,建立起天女木兰再生体系技术.结果表明:MS+ZT 0.4 mg/L+2,4-D 2.5 mg/L是嫩茎愈伤组织诱导培养和继代增殖培养的理想培养基;MS+GA30.5 mg/L+BA 0.6 mg/L是愈伤组织分化培养的理想培养基;把不定芽用10 mg/L的IAA溶液处理24 h后,接种到1/3 MS+IBA 0.6 mg/L+0.8 DA-60.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基上的生根培养方法是不定芽生根培养和试管苗生根继代增殖培养的理想方法;在温室中试管苗易移栽成活,定植的试管苗保持了野生天女木兰的所有植物学性状.     

“紫金四季”草莓组培快繁技术研究

以"紫金四季"草莓叶片为外植体,对愈伤组织诱导、不定芽诱导、增殖培养、生根培养等组培快繁关键环节进行了研究,建立了紫金四季草莓组织培养快繁技术。结果表明,紫金四季草莓幼叶较叶柄更适宜作为组培外植体,培养时叶片正面朝上放置更有利于愈伤组织的产生;诱导不定芽培养基以MS+TDZ 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L为佳,诱导率为50%;继代增殖培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.2mg/L,其增殖系数为6.17;生根培养基为1/4 MS,生根率达100%,平均生根数达6.6条。     

夏堇悬浮细胞培养与植株再生研究

以夏堇品种“小丑”的组培苗幼嫩叶片为试材,进行愈伤组织诱导、细胞悬浮培养及植株再生诱导的研究.结果表明:MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L2,4-D的培养基能够使叶片诱导为生长迅速、质地疏松的愈伤组织.愈伤组织最适宜的悬浮培养条件为:MS+ 1.0 mg/L6-BA+0.1 mg/L 2,4-D液体培养基,20 g/L的起始接种量以及100 r/min的震荡培养.将继代3～4次的细胞悬浮颗粒转到1/2MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA的固体再生培养基上培养,3周后可以诱导分化出芽,进而获得完整植株.悬浮培养有利于夏堇愈伤组织的再生,悬浮培养对提高以夏堇作为模式植物进行的相关研究具有重要的应用价值.     

怀地黄愈伤组织诱导及细胞悬浮培养体系的建立

研究了植物生长调节剂和接种方式对怀地黄叶片愈伤组织诱导的影响和细胞悬浮培养体系的建立。结果表明:将叶片正接在MS+2,4-D 1mg/L+6-BA 0.4mg/L培养基上,愈伤组织生长良好,诱导率达100%;在该培养基上多次继代,可形成3种类型的愈伤组织,其中Ⅰ型愈伤组织淡黄色、颗粒透亮、分散性好且疏松易脆,适合进行细胞悬浮培养;在MS+2,4-D 3mg/L+6-BA 0.5mg/L培养基中,悬浮培养细胞生长曲线呈"S"型,培养15d时细胞干重达最大值,为4.94g/L。     

草莓叶片再生体系的建立

以草莓‘红颜’和‘章姬’的叶片为外植体,研究暗培养时间、不同植物激素及浓度对不定芽诱导的影响,不同植物激素种类浓度及继代次数对不定芽增殖的影响,以及组培苗生根的最佳培养基。结果表明:草莓叶片不定芽诱导的最适宜培养基为MS+3 mg/L 6-BA+0.2 mg/L 2,4-D,暗培养天数15~20 d;不定芽增殖的最适宜培养基为2 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA,‘红颜’组培苗适宜继代4代,‘章姬’组培苗适宜继代5次;MS+0.5 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA生根效果最好。     

高品质甜叶菊品系“1096”的组培快繁

采用改良DNS等方法筛选出的生长快、糖苷含量高的甜叶菊品系＂1096＂为材料,研究了不同外植体、不同激素种类和配比对愈伤组织诱导、不定芽分化和生根的影响。结果表明：以茎尖为外植体愈伤组织和不定芽诱导率均最高;其次是带腋芽茎段;再次为叶片。无腋芽茎段和无菌根均能诱导出愈伤组织,但不能诱导成芽。茎尖不定芽诱导的最佳培养基为MS＋6-BA 1.0mg/L;叶片不定芽诱导的最佳培养基为MS＋6-BA 1.0mg/L＋IAA 1.0mg/L;带腋芽茎段不定芽诱导的最佳培养基为MS＋6-BA 1.5mg/L。不定芽继代增殖培养采用MS＋6-BA 0.5mg/L＋NAA0.05mg/L;在1/4MS＋IBA 0.1mg/L＋NAA 0.1mg/L＋1g/L活性炭的培养基上诱导生根,生根率可达100%,生根苗移栽后成活率达95%。     

湘蕾金银花叶柄、茎段的离体培养与植株再生

为建立湘蕾金银花的高效离体培养及植株再生技术体系,并进行快速繁殖,以其叶柄、茎段为外植体,对其愈伤组织诱导、分化、继代培养与生根炼苗等关键技术环节进行研究。结果表明:诱导愈伤组织的适宜培养方案是MS+NAA1.0mg/L,继代培养的适宜培养方案是MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.1mg/L,壮苗培养的适宜方案是MS+6-BA1.0mg/L,生根培养的适宜培养方案是1/2MS+IBA0.2mg/L+NAA0.2mg/L。在珍珠岩中炼苗成功的组培苗,移栽成活率达100%。     

枣胚培养影响因素研究

以枣优良品种冬枣、金丝丰等为试材,对坐果后10～70d幼胚进行了培养,结果表明,胚龄是影响胚培养成功的关键性因素,暗处理对生根有利,低温处理(2～4℃,44d)能缩短成苗时间并提高成苗率,但成苗质量受到影响。20～40d幼胚成苗最适培养基为BA0.1mg/L+IBA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖50mg/L+LH500mg/L的MS培养基,成苗时间超过80d。55～70d幼胚在无激素培养基中亦能获得良好效果。无根苗转到添加BA0.1mg/L+IBA0.5mg/L+IAA0.1mg/L+蔗糖30g/L的MS培养基中可促进生根。生根苗转至无激素+蔗糖30g/L的MS培养基可获得健壮苗。     

枣的胚败育及幼胚培养研究

 对30 个枣优良品种坐果后30 d 的胚败育情况进行了调查, 结果表明, 败育率高于75 %的高度败育品种占53.4 % , 败育率介于25 %至75 %的中度败育品种占3.3 % , 败育率低于25 %的轻度败育品种占43.3 %。以优良品种‘冬枣’、‘金丝丰’等为试材, 对坐果后10～70 d 幼胚进行培养的结果表明, 枣离体胚接种后主要有3 种生长方式, 即形成愈伤组织、子叶间小叶增生和胚直接萌发成苗。本文还提出了提高枣胚培养及胚培养苗移栽成功的技术要点。     

秋水仙素离体诱导冬枣和酸枣四倍体

 以冬枣和酸枣组培苗丛芽为材料, 研究了秋水仙素诱导染色体倍性变异的最佳浓度与时间组合、多倍体的特征及其纯化技术。结果表明: 秋水仙素处理的最佳组合为50 mg·L ^{- 1}秋水仙素处理40 d,诱导酸枣和冬枣染色体加倍的频率分别达36.37%和26.67%。嵌合体经3～4次继代分离得到了纯化, 并对纯化后的变异株进行了增殖和生根。变异株根尖染色体数加倍(2n = 4x = 48) , 叶片增厚, 栅栏组织、海绵组织明显发达, 茎尖LⅠ、LⅡ和LⅢ层细胞均显著变大, 充分表明获得的变异株为同质四倍体。同质四倍体的主要特征为: 叶片增大, 叶色浓绿, 叶缘锯齿增大, 保卫细胞增大, 气孔密度降低。变异株在诱导期间表现出生长缓慢、叶片变圆、节间变短的暂时现象。     

枣离体叶片高效再生植株的研究

 以‘黄骅冬枣’组培苗叶片为试材, 研究了叶片幼嫩程度、叶片来源、组培苗状态以及植物生长调节剂等对离体叶片诱导不定芽再生的影响, 并获得了完整的再生植株。结果表明, 以未生根组培苗中上部叶片再生效果较好; TDZ诱导叶片再生不定芽的效果显著优于BA; 离体叶片在MS + TDZ 1.0 mg·L ^{- 1} + IBA 0.1 mg·L ^{- 1}培养基中诱导培养28 d后, 转入MS + IBA 0.1 mg·L ^{- 1} + GA₃ 0.05 mg·L ^{- 1}培养基中二次培养, 叶片再生效果最好, 再生率可达92.45%。将叶片再生植株转入MS +BA 1.0 mg·L ^{- 1} + KT0.5 mg·L ^{- 1} + IBA 0.1 mg·L ^{- 1}培养基中继代增殖培养, 增殖系数达3.64。以1 /2MS + IAA 1.0 mg·L ^{- 1}培养基诱导生根, 生根率87.1%。生根苗大田移栽成活率达到57%。     

枣树组织培养研究进展

概述了枣树的茎尖、芽和茎段培养、花药培养、原生质体培养、胚乳培养、离体叶培养等方面的主要进展,并针对枣树组织培养中存在的主要问题提出了今后的研究方向。快繁是枣树组培最成功的方面,以茎尖、芽或茎段为外植体已经建立了十几个品种的快繁体系,而且,应用茎尖培养和热处理相结合的方法得到了脱除枣疯病病原-植原体的无毒苗。应深入研究花药培养、原生质体培养、叶片培养、胚乳培养及胚培养,并尽快应用于枣树的转基因育种和倍性育种。特别是幼胚培养的研究应该进一步加强,从而解决因优良品种胚败育难以获得杂种后代的问题,实现枣树的杂交育种和遗传图谱的构建。     

枣的组织培养与快繁

通过两年多的试验，探明了鲜食品种西吕枣的最佳增殖与生根条件，获得了试管丛生苗，增殖系数达5倍以上，生根率高达98．2％，移栽和田间定植成活率分别达95％和93％以上。     

影响红枣幼茎组培增殖因子的研究

以灰枣、骏枣的幼嫩茎段为外植体,研究了不同有机添加物对红枣组培继代增殖的影响。结果表明:外植体灭菌采用酒精处理20s、升汞处理10min,茎段污染率低,平均出芽数比较高;灰枣初代培养基:MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.2mg/L,骏枣初代培养基:MS+6-BA4.0mg/L+NAA 0.5mg/L;灰枣继代培养基:MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.4mg/L,骏枣继代培养基:MS+6-BA 4.0mg/L+NAA 0.5mg/L;最适有机添加物为水解酪蛋白,在灰枣和骏枣的继代培养中的添加浓度分别为400mg/L和500mg/L。     

酸枣的组织培养与快繁

用酸枣种仁在MS0培养基上培养无菌苗，然后接种在增殖培养基上增殖，再转接在生根培养基上生根。结果表明，适宜酸枣无菌苗高效增殖的培养基为MS BA1mg/L IBA0.2mg/L 蔗糖3%，在1/2MS IBA1.0mg/L 蔗糖2%生根培养基上暗培养10天，再转光下培养，无菌苗生根率为74.4%。     

乙烯抑制剂对灰枣叶片再生的影响

以灰枣组培苗叶片为材料,研究不同乙烯抑制剂对灰枣叶片再生的影响。结果表明,0.5 mg/L AgNO3和0.1 mg/L的STS均促进灰枣叶片再生,再生率分别为82.25%、91.26%;由此可见,培养基中附加0.1 mg/L STS,灰枣叶片再生率较高。