荔枝霜疫霉对烯酰吗啉的抗性风险评估

【目的】检测荔枝霜疫霉对烯酰吗啉的敏感性，建立敏感性基线；测定抗烯酰吗啉突变株的生物学适合度，为荔枝霜疫病的化学防治提供依据。【方法】采用菌丝生长速率法，对2019—2020年来自中国广东、广西、福建、四川和云南5个省份荔枝主产区的320株荔枝霜疫霉单孢子囊菌株进行烯酰吗啉敏感性测定，通过药剂驯化获得抗烯酰吗啉突变株，测定其生物学适合度。【结果】经过异常值分析并剔除，317株荔枝霜疫霉菌株对烯酰吗啉的敏感性频率分布呈正态分布，EC₅₀值介于0.086 3～0.173 3μg·mL^-1之间，平均(0.122 2±0.000 9)μg·mL^-1，以此建立荔枝霜疫霉对烯酰吗啉的敏感性基线。来自2020年的荔枝霜疫霉菌株对烯酰吗啉的EC₅₀均值较2019年显著增高。3株荔枝霜疫霉抗烯酰吗啉突变株的抗性指数介于77.17～360.11之间，为中到高抗水平，抗药性可稳定遗传，与亲本相比，抗性突变株的孢子囊萌发率及卵孢子产量均下降，但致病力相当。【结论】荔枝霜疫霉对烯酰吗啉敏感，烯酰吗啉可继续作为防治荔枝霜疫病的...     

荔枝霜疫霉病病原菌生物学特性研究

对荔枝霜疫霉病病果进行组织分离、病原菌鉴定及其生物学特性测定。结果表明,分离所得病原菌为荔枝霜疫霉菌Peronophythora litchii Chen ex Ko et al.,菌丝生长适宜温度20~30℃,适宜pH值4~6,光暗交替有利于菌丝生长。供试碳源中,可溶性淀粉、山梨酸和甘露醇较有利于该菌菌丝生长;氮源中,酵母浸膏较有利于其菌丝生长。     

荔枝霜疫霉病的发生及防治

荔枝霜疫霉病 ,俗称荔枝霜霉病 ,病原为荔枝霜疫霉菌 (Ｐｅｒｏｎｐｈｔｈｏｒａｌｉｔｃｈｉｃｈｅｎｅｘｋｏｅｔａｌ.) ,是荔枝主要病害之一。该病的发生和流行与空气湿度有密切关系。在荔枝开花至果实成熟期 ,遇上 4～ 5ｄ以上的连续阴雨天气 ,常严重发病。厦门地区荔枝在开花至采收前 ( 4月 /中旬～ 7月中旬 )常常遇上连续阴雨天气 ,据多年调查 ,霜疫霉病平均发病率在 2 0 %以上 ,严重的高达 6 0 %。造成大量的烂果、落果 ,春雨、梅雨季较长的年份 ,烂果率达 30 %～ 50 % ,严重影响产量和品质以及鲜果的储运和外销。荔枝霜霉病病菌以卵…     

不同抗性辣椒品种根系分泌物对疫霉菌的影响

为分析辣椒根系分泌物与抗疫病的相关性,测定了4 个不同抗性辣椒品种的根系分泌物对辣椒疫霉菌的影响。结果表明：对辣椒疫病表现抗病的PRMND 和DNP56 的根系分泌物对疫霉菌的菌丝生长、游动孢子囊形成、游动孢子释放和休止孢子萌发均有显著的抑制作用,而对辣椒疫病表现高度感病的科星6 号和新机遇的根系分泌物对疫霉菌的菌丝生长没有明显影响,科星6 号根系分泌物对游动孢子囊的形成没有明显的影响,而新机遇根系分泌物对游动孢子囊形成有明显抑制作用,科星6 号和新机遇的根系分泌物对游动孢子释放和处理8 h 后对休止孢子萌发具有明显的抑制作用,但其抑制效果显著低于抗病品种。     

辣椒疫霉菌单个孢子囊快速分离及复壮技术研究

通过研究马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)和PDA含药选择性培养基(PDAPR)对辣椒疫霉菌单个孢子囊分离的影响,筛选出最佳进行单个孢子囊分离的培养基;利用一对抗、感品种作为寄主,通过常规抗病性鉴定技术,对陕西辣椒疫霉菌复壮前后的致病力进行了测定。结果表明:最佳进行辣椒疫霉菌单个孢子囊分离的培养基是PDA含药选择性培养基,其分离率高达95%,其中污染率只有15.8%;复壮前后菌株对感病品种的致病力有明显的差异,复壮后菌株的致病力比于复壮前提高27.2%,且与刚分离后菌株的致病力相当,说明通过复壮能够恢复辣椒疫霉菌菌株的致病力。     

不同来源葡萄霜霉菌致病力差异研究

对不同来源的20株葡萄霜霉菌孢子囊测定结果表明,其大小存在明显的差异。采自宁夏与甘肃武威的菌株孢子囊大小更接近,与其他各地菌株间差异明显,孢子囊大小与地域及原始寄主未表现明显相关,可能与菌源采集地的气候条件有关。通过离体叶盘法对来自宁夏、四川及甘肃武威、天水、兰州的不同品种上的5株葡萄霜霉菌的致病力迚行测定结果表明,不同来源的葡萄霜霉菌在同一葡萄品种上的潜育期、病情指数及品种抗感反应均存在明显差异,即不同菌株对相同寄主的致病力不同,表明不同菌株间存在致病力分化现象,菌株致病力与其孢子囊大小及地域未见明显相关,而与原始寄主的抗性有关。     

辣椒抗疫病性鉴定及辣椒疫霉药剂敏感性分析

以27份辣椒种质资源为试材,采用游动孢子灌根法进行了抗疫病水平的鉴定,以期筛选抗疫病的辣椒种质资源。结果表明:鉴定为高抗水平的材料共有3份,占供试材料的11%;其中L151的病情指数最低,为2.86,其次为L19,病情指数为5.71。鉴定为抗病水平的材料共有6份,占供试材料的22%,病情指数介于10.00~30.00。中抗材料有3份,占供试材料的11%,其余15份材料均为感病材料,占供试材料的56%。同时,为了评估辣椒疫霉菌对杀菌剂的敏感性,室内条件下测定了杀菌剂氟啶胺和氰霜唑对疫霉菌菌丝生长的抑制率。表明氟啶胺和氰霜唑对7株疫霉菌菌丝生长抑制率的区间范围分别为42.68%~71.85%和1.87%~55.01%;其中氰霜唑对菌株P5的抑制率最低,仅为1.87%,对菌株P1和P2的抑制率也较低,分别为22.38%和37.50%,预示着供试的部分辣椒疫霉菌菌株对氰霜唑存在不同程度的抗药性风险。     

荔枝霜疫病的研究进展

荔枝霜疫霉(Peronophythora litchii Chen ex Ko et al)引起的荔枝霜疫病是我国荔枝生产和贮藏运输过程中为害最严重的病害,极大地威胁着我国荔枝产业的健康发展。该病可为害荔枝嫩叶、嫩枝、花穗及果实,流行年份对荔枝产量影响极大。笔者主要从荔枝霜疫病的症状、病原菌的分类和生物学特性、发生与流行、致病机制及防治策略等方面进行综述,并提出今后研究的趋势和待解决的问题,为该病原菌的深入研究和病害防控提供参考。     

辣椒疫霉菌拮抗细菌L14-3的生防潜力及其鉴定

为探讨L14-3菌株对辣椒疫病的生防潜力,采用皿内对峙试验和孢子萌发试验,测定其对辣椒疫霉菌的抑制活性,通过盆栽试验验证其对辣椒疫病的防治效果,并根据形态特征、生理生化特性和16S rDNA序列同源性分析对其进行鉴定。结果表明,L14-3菌株对辣椒疫霉菌的菌丝生长、游动孢子囊的形成、游动孢子的释放和休止孢子的萌发均具有显著的抑制作用;在盆栽试验中,L14-3处理对辣椒疫病的防治效果达到75.00%。经过鉴定,L14-3菌株为多黏类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)。     

辣椒疫霉菌复壮与保存及生长特性研究

研究了辣椒疫霉菌3个生理小种的孢子囊诱导、回接复壮、短期固体培养基保存方法和复壮、培养基厚度、菌龄、生理小种对菌落生长及其形态的影响。结果表明:打菌饼诱孢较整皿光照诱孢速度快、产孢量大;发病辣椒茎段较发病叶片回接效率高,达到50%;疫霉菌在16℃下固体培养基上保存效果最好,保存时间为3～4个月;辣椒疫霉菌复壮前后Ph1、Ph3生理小种菌丝生长速率无显著差异,Ph2有显著差异,复壮后3个生理小种菌丝都变致密,致病性增强;培养基厚度可影响菌丝生长速率,10～15 mL体积的培养基较适合疫霉菌的培养;疫霉菌菌丝的菌龄对菌丝生长速率无影响;Ph1、Ph2、Ph3随着致病性的增强菌丝生长速率下降。     

荔枝果实感染霜疫病后的生理变化

人工接种霜疫病菌的荔枝果实感病后,病斑部位的果皮和距离病斑部位较近的果皮中■产生速率和MDA含量较高,而SOD活性较低;距离病斑部位较远的果皮中■产生速率和MDA含量较低,而SOD活性较高;邻近病斑部位的果皮中PPO、POD和PAL活性较高,而距病斑部位较远的果皮中PPO、POD和PAL活性较低。表明霜疫病菌的侵染对荔枝果皮中以SOD为核心的活性氧清除酶系统产生了破坏作用,导致SOD活性下降,使得自由基等活性氧与其清除系统之间的相对平衡被破坏,启动膜脂过氧化,膜脂过氧化产物MDA含量显著增加,造成对细胞的伤害,加速荔枝果实衰老和劣变。同时霜疫病菌侵染诱导荔枝果皮中POD、PPO和PAL活性增高,是加速荔枝果皮酶促氧化褐变的一个重要原因。     

荔枝、龙眼叶片表皮结构的研究

 用扫描电镜观察了荔枝、龙眼各3个品种的叶表皮。结果表明, 龙眼叶片上表皮角质层平均厚度2.36μm , 显著大于荔枝(1.93μm) 。荔枝、龙眼叶片下表皮具有大量的乳状突; 乳状突的密度, 荔枝为7 855.1个/mm² , 龙眼为7 708.8个/mm² ; 荔枝的乳状突呈近半圆形, 宽9.55μm, 高5.71μm; 龙眼的乳状突为长形, 宽5.94μm, 高10.38μm; 荔枝、龙眼气孔长×宽分别为6.98μm ×3.09μm、7.14μm×2.30μm。荔枝、龙眼表皮结构特征差异明显。     

4个优质荔枝品种生长规律及果实性状比较分析

对‘荷花大红荔’、‘脆肉荔’、‘粤引无核荔’及‘竹山六号’等4个荔枝品种定植后5年的树体生长规律进行研究,并对其果实性状进行比较分析。结果表明,4个荔枝品种的树高、冠幅和地径增长均呈较好的一致性,且‘荷花大红荔’的生长速度显著快于其他3个品种。‘荷花大红荔’属于大果型荔枝品种;‘粤引无核荔’为典型无核型荔枝品种;‘脆肉荔’果实含有较高的可溶性固形物和具有较高的焦核率。     

荔枝新品种‘紫荔’

 ‘紫荔’是从荔枝实生变异单株后代中选育的新品种,平均单果质量19.9 g,可食率为67.1%,可溶性固形物含量18.6% ~ 20.1%,果肉质地干苞、爽脆,不流汁,风味浓甜,香气浓。果皮呈紫黑色,颜色特异,具观赏性,可用于荔枝种质资源研究和育种,以及观赏果品生产。     

霜疫病菌侵染对荔枝果实生理变化的影响

测定了荔枝果实人工接种霜疫病菌后呼吸速率、乙烯释放量的变化和果皮中氧化、过氧化作用以及与酚类氧化有关的几种酶活性的变化。结果表明,接种霜疫病菌的荔枝果实呼吸速率和乙烯释放量显著增高,果皮中活性氧(O2-)产生速率和膜脂过氧化产物丙二醛(MDA)含量增加,超氧化物歧化酶(SOD)活性降低,过氧化物酶(POD)和多酚氧化物酶(PPO)活性增高。这是霜疫病加速采收后荔枝果实衰老、褐变、腐烂的重要原因之一。     

流式细胞术细胞核分离缓冲液的改良及大、小果型荔枝幼果和果皮细胞分裂活性比较

 以荔枝幼果为材料，比较5种常用细胞核分离缓冲液对制备样品DNA分辨率效果的影响，发现在Otto缓冲液基础上进行适当改进（增加还原剂种类和含量，把RNaseA直接加入缓冲液，降低离心力），可获得最佳的提取效果，分辨率高，细胞G₁/G₀峰产生的变异系数低。通过比较具有相似遗传背景的‘妃子笑’早花大果和晚花小果以及具有不同遗传背景的大果（‘四两果’）和小果（‘陈紫’）型荔枝品种之间果实发育前期的幼果和果皮的细胞分裂活性发现，大果的细胞分裂活性高于小果，且持续时间长，说明果实大小差异与果实发育前期细胞分裂活性有关。     

蝴蝶兰叶外植体发生褐变超微细胞结构和酚类物质分布观察

观察蝴蝶兰叶外植体发生褐变后的细胞亚显微结构发现,细胞膜以及细胞壁扭曲变形甚至断裂,细胞壁降解严重,集聚大量黑色颗粒物质,细胞内出现黑色絮状物质,叶绿体结构破坏。Pauly试剂和亚硝酸钠溶液染色结果表明:褐变外植体存在有较多酚类物质,染色较深。以上结果说明,外植体在褐变过程中,细胞膜完整性被破坏,酚类含量增加促进褐变。     

无核荔枝新品种‘南岛无核’

‘南岛无核'是从海南琼北雷虎岭地区荔枝实生群体中选育出的新品种。果实近圆形,平均单果质量35 g,无核率95%,可食率86%;果皮浅红色,裂片峰锐尖,缝合线明显;果肩-斜-隆起。果肉厚且凝脂晶莹多汁,脆爽醇香;可溶性固形物16.40%,总糖14.70%,总酸0.22%,维生素C 310 mg·kg~(-1),品质优。高产稳产,适应性强,6~10年生单株产量23.3~35.6 kg。     

大果荔枝新品种‘桂糯’

 ‘桂糯’是从广西实生荔枝优良变异单株后代中选育的荔枝新品种,具有果大、质优、丰产等特性,果肉质地干胞、爽脆,平均单果质量37.02 g,可食率73.36%,可溶性固形物含量18.55%。