花椰菜小孢子胚状体增殖及植株再生

为建立稳定的胚状体增殖成苗技术体系,以期稳定获得足够的再生植株,以花椰菜小孢子胚状体为试材,研究了植物生长激素6-BA、NAA对胚状体增殖及再生苗生根培养的影响。结果表明,胚状体在附加1.25 mg·L~(-16)-BA+0.025 mg·L~(-1)NAA的改良MS培养基上培养,增殖系数最高,可达10.3;再生苗在附加浓度为1.0 mg·L~(-1)NAA生根培养基上的生根效果最佳,平均每芽上生根数达到8.1个。因此,6-BA和NAA配合使用,可显著提高胚状体增殖系数;生根培养基中,添加适量的NAA可增加再生苗的生根数。     

不同浓度激素配比对重唇石斛组织培养的影响

以重唇石斛(Dendrobium hercoglossum Rchb.f.)成熟种子为外植体,MS为基本培养基,研究了植物生长调节素种类及浓度对重唇石斛继代增殖和生根的影响。结果表明:重唇石斛最佳的启动培养基为MS+6-BA 1.5mg·L~(-1)+NAA 0.5mg·L~(-1)。利于继代增殖的培养基为MS+6-BA 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.4mg·L~(-1)+KT 0.2mg·L~(-1)+AC 1.0g·L~(-1),最佳的生根壮苗培养基为MS+6-BA 0.5mg·L~(-1)+NAA 2.0mg·L~(-1)+AC 1.0g·L~(-1),平均根长3.12cm,生根率达到90%以上。     

富花青素紫色番茄组织培养再生体系的建立

以樱桃型紫色番茄"砚紫1号"种子为试材,通过无菌处理获得无菌苗,用无菌苗的幼嫩子叶为外植体,研究了诱导愈伤组织分化及生根情况,以期建立高效的离体培养再生体系。结果表明:紫色番茄无菌苗子叶在MS+IAA 0.1mg·L~(-1)+6-BA 0.5mg·L~(-1)培养基条件下的愈伤组织诱导状态最佳;将愈伤组织进行暗培养处理,可诱导愈伤产生不定芽,其中最佳的培养基条件是MS+NAA 0.01mg·L~(-1)+6-BA 2.0mg·L~(-1);诱导再生的不定芽经过2周光培养接种至MS+NAA 0.05mg·L~(-1)培养基中,诱导生根良好,可获得完整的再生植株。     

走马胎离体培养及植株再生

以走马胎幼嫩叶片为外植体,研究不同培养基对走马胎叶片愈伤组织诱导、不定芽分化、增殖及生根培养的影响。结果表明:叶片在MS+6-BA 1.0mg·L~(-1)+NAA 1.0mg·L~(-1)培养基上诱导产生的愈伤组织最适合用于进行分化和增殖;愈伤组织分化不定芽的最适培养基为MS+6-BA 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1),分化率高达88.9%;壮苗培养基为MS+6-BA0.5mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)+10%椰子水(CW);最适的生根培养基为MS+NAA0.1mg·L~(-1)+IBA 1.0mg·L~(-1),生根率达100%,根系发达,植株生长健壮。经生根培养及练苗,走马胎的假植成活率达85%。     

北美红杉组培快繁体系的建立与优化

以北美红杉1年生带芽茎段为外植体,通过基本培养基筛选和不同植物生长调节剂水平对比试验得到北美红杉组织培养的不定芽诱导、增殖、生根等生长阶段的优化配比培养基,以期建立北美红杉高效的快繁体系。结果表明:确定最佳消毒方法为75%乙醇消毒30 s,无菌水冲洗2次,再用0.1%氯化汞消毒处理10 min,无菌水冲洗4次;最佳不定芽诱导培养基配方为MS+6-BA 1.0 mg·L~(-1)+NAA 0.10 mg·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1)+琼脂6 g·L~(-1),不定芽诱导效果最好,诱导芽率高达2 153.3%,且芽生长健壮;最佳不定芽增殖培养基配方为MS+6-BA 1.0 mg·L~(-1)+NAA 0.10 mg·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1)+琼脂6 g·L~(-1),增殖系数高达15.8;最佳生根培养基配方为1/2MS+KT 1.5 mg·L~(-1)+IBA 1.0 mg·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1)+琼脂6 g·L~(-1),其生根率达90.0%,根多且粗长,植株高大健壮;最佳移栽基质为V_(炉渣)∶V_(原土)∶V_(腐殖土)=1∶1∶1,植株成活率达91.7%。     

以叶片为外植体的多花黄精组织培养

以叶片为外植体建立多花黄精组织培养快速繁殖技术体系,通过添加不同浓度6-BA、NAA、2,4-D和蔗糖的MS培养基中培养,筛选愈伤组织诱导、愈伤组织增殖、丛生芽诱导、丛生芽生根诱导的最佳培养基。结果表明:愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA3.0mg·L~(-1)+NAA 4.0 mg·L~(-1)+蔗糖20g·L~(-1),愈伤组织诱导率最高为53.89%,生长情况最好;愈伤组织增殖培养的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+NAA3.0mg·L~(-1)+蔗糖20g·L~(-1),增殖倍数7.87,生长情况相对最好;丛生芽诱导培养的最佳培养基为MS+6-BA 2.0mg·L~(-1)+NAA 4.0mg·L~(-1),出芽率最高为86.11%,生长情况最好,芽高最大为1.70cm;丛生芽生根诱导的最佳培养基为MS+NAA 1.0mg·L~(-1),生根率最高为66.67%,根数、根长和根粗最好,分别为31.0条、0.46cm和1.100mm。以叶片为外殖体可短时间获得大量多花黄精组培苗,解决种植生产上的种苗短缺问题。     

红掌实生苗根段病原菌的抑制及再生体系的建立

以红掌实生苗根段为外植体,通过在培养基中添加抗生素来抑制病原菌的快速繁殖,并建立了完整的再生体系。结果表明:硫酸链霉素抑制病原菌的效果最好,其次是卡那霉素,庆大霉素抑菌效果最差;30mg·L~(-1)的硫酸链霉素因抑菌效果好,保持更高的根段活率而更适合在组织培养中应用;愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA1.0mg·L~(-1)+2,4-D0.5mg·L~(-1)+硫酸链霉素30mg·L~(-1),愈伤组织增殖的最佳培养基为MS+6-BA1.0mg·L~(-1)+2,4-D0.8mg·L~(-1),丛生芽诱导最佳培养基为1/2MS+6-BA0.5mg·L~(-1),丛生芽生根最佳培养基为1/2MS+NAA0.2mg·L~(-1),生根后的幼苗,移栽成活率高达100%。     

太行菊组织培养技术研究

以太行菊叶片、叶柄、茎尖和茎段为试材,采用MS培养基,在其中添加不同的激素对太行菊的不同外植体进行培养,研究了濒临灭绝的太行菊再生植株的方法。结果表明:太行菊的叶片、叶柄作为外植体诱导出愈伤组织的诱导率分别为44.44%和44.11%,所需时间较长,而茎尖、茎段作为外植体诱导愈伤组织诱导率分别为48.44%和68.75%,培养时间较短。茎段最适合作为诱导愈伤组织的繁殖材料。为了使茎段能更好的诱导出愈伤组织,课题组又对诱导茎段愈伤组织的激素浓度组合进行了研究,A组:MS+6-BA 1.0 mg·L~(-1)+NAA 0.5 mg·L~(-1)+2,4-D 0.1 mg·L~(-1),B组:MS+6-BA 1.0 mg·L~(-1)+NAA 1.0 mg·L~(-1)+2,4-D 0.1 mg·L~(-1),C组:MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+NAA 0.5 mg·L~(-1)+2,4-D 0.1 mg·L~(-1),D组:MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+NAA 1.0 mg·L~(-1)+2,4-D 0.1 mg·L~(-1)。试验表明,C组激素浓度组合最适合太行菊茎段的愈伤组织诱导。35 d后愈伤组织不再增加后进行继代培养,45 d后将植株转移至生根培养基1/2MS+NAA 0.12 mg·L~(-1)中进行生根培养。     

四种露地菊再生体系的建立

以‘东林瑞雪’‘夺目玛瑙’‘黄金盏’‘金不换’4种露地菊叶片外植体为试验材料,在MS基本培养基上添加不同浓度的6-BA、NAA进行高效稳定的再生体系的建立。结果表明:‘东林瑞雪’叶片最适分化培养基为MS+0.5mg·L~(-1) 6-BA+1.5mg·L~(-1) NAA;‘夺目玛瑙’叶片最适分化培养基为MS+1.0mg·L~(-1) 6-BA+2.0mg·L~(-1) NAA;‘黄金盏’叶片最适分化培养基为MS+0.5mg·L~(-1) 6-BA+1.0mg·L~(-1) NAA;‘金不换’叶片最适分化培养基为MS+1.0mg·L~(-1)6-BA+1.5mg·L~(-1) NAA;4种露地菊的最适生根培养基均为1/2MS培养基。     

金叶锦带组培技术

以金叶锦带的腋芽为外植体,采用组织培养法,通过在培养基中添加不同浓度激素,筛选最佳培养基,为金叶锦带的大面积推广提供技术支撑。结果表明:最佳诱导培养基为MS+0.6mg·L~(-1) 6-BA+0.1mg·L~(-1) NAA+蔗糖30g·L~(-1)+琼脂7g·L~(-1),诱导率达86.3%;最佳增殖培养基为MS+1.0 mg·L~(-1) 6-BA+1.0 mg·L~(-1) GA3+蔗糖30g·L~(-1)+琼脂7g·L~(-1),增殖系数7.250 6;最佳生根培养基为1/2MS+1.0mg·L~(-1) IBA+蔗糖30g·L~(-1)+琼脂7g·L~(-1),生根率100.0%。     

报春石斛组培快繁技术体系的建立

以报春石斛蒴果为外植体,通过对种子无菌萌发和原球茎诱导、原球茎增殖及丛生芽诱导、生根壮苗以及移栽驯化的研究,以期建立报春石斛的组培快繁技术体系。结果表明:培养基MS+6-BA 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)+蔗糖20g·L~(-1)最适报春石斛种子无菌萌发和原球茎的诱导;原球茎增殖及丛生芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA1.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)+香蕉泥100g·L~(-1)+蔗糖20g·L~(-1),继代培养45d,增殖系数达8.2;最佳生根壮苗培养基为MS+6-BA 1.0mg·L~(-1)+KT 0.5mg·L~(-1)+NAA 0.2mg·L~(-1)+香蕉泥100g·L~(-1)+蔗糖30g·L~(-1)+活性碳1.0g·L~(-1),培养3个月,生根率达100%,根系较长,苗壮;3—4月是桂林地区移栽报春石斛组培苗的最佳季节,生根苗在栽培基质Ⅰ(树皮∶水苔∶珍珠岩∶蛭石=10∶2∶1∶1,体积比)的长势好于栽培基质Ⅱ(树皮∶珍珠岩∶蛭石=10∶1∶1,体积比),成活率为92.3%。     

蛋白桑叶片再生体系的建立及对草丁膦敏感性测定

以蛋白桑的幼嫩叶片为外植体,以MS为基本培养基,采用正交实验设计,研究不同浓度的植物生长调节剂对蛋白桑植株再生的影响。结果表明:叶片诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+TDZ 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1);最佳分化培养基为MS+TDZ 0.2mg·L~(-1)+NAA 0.09mg·L~(-1),分化率为21.65%;培养基1/2MS+PVP 0.2g·L~(-1)+NAA 0.5mg·L~(-1)生根率最高,达到66.70%;对草丁膦的敏感性试验中,草丁膦浓度0.04mg·L~(-1)为蛋白桑叶片半致死浓度,草丁膦浓度0.05mg·L~(-1)对蛋白桑叶片的致死率为75.00%,草丁膦浓度0.07mg·L~(-1)的致死率为100.00%。     

不同消毒方式及激素配比对毛桃愈伤组织形成的影响

以毛桃品种"春美"当年生枝的茎段以及嫩叶为外植体,采用单因子试验方法,研究了在不同消毒方法下接种的2种外植体的污染率和愈伤组织形成率,以及不同激素种类和浓度配比下2种外植体的愈伤组织形成率,以期为建立毛桃再生体系以及毛桃的遗传转化提供参考依据。结果表明:毛桃茎段的表面消毒以75%酒精30s+2.5%NaClO 10min为佳;适合茎段的最佳初代培养基为MS+6-BA 1.0mg·L~(-1)+IBA 0.5mg·L~(-1)+GA30.5mg·L~(-1),毛桃叶片的表面消毒以75%酒精30s+2.5%NaClO 6min+0.5%NaClO10min最佳,适合叶片的最佳初代培养基为1/2MS+TDZ 1.5mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)。     

慈姑茎尖组织培养与快速繁殖

以慈姑茎尖为外植体,用不同培养基进行组织培养,以所获得的试管苗为材料进行快速繁殖技术研究。结果表明,慈姑茎尖培养的最适启动培养基为MS+6-BA1.0mg·L~(-1)+NAA0.3mg·L~(-1);继代增殖的最适培养基为-S+6-BA3.0mg·L~(-1)+NAA0.1mg·L~(-1),增殖系数为4.35。     

红金银花茎段愈伤组织的诱导

以红金银花当年生幼嫩茎段为试材,采用正交实验设计,研究了红金银花愈伤组织诱导和增殖培养的影响因素。结果表明:6-BA、KT促进了愈伤组织的诱导,提高了出愈率;当NAA、KT分别为0.4、1.0mg·L~(-1)时最有利于愈伤组织的增殖培养。不同季节外植体愈伤组织诱导效果不同,春季采集的当年生的幼嫩茎段更有利于愈伤组织的诱导;MS培养基中添加6.5mg·L~(-1)琼脂比较适宜;红金银花愈伤组织诱导最适宜的培养基为MS+KT 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.2mg·L~(-1)+6-BA 1.5mg·L~(-1);愈伤组织增殖培养最适宜的培养基为MS+6-BA 1.5mg·L~(-1)+NAA 0.4mg·L~(-1)+KT 0.1mg·L~(-1)。     

金叶杨组织培养再生体系的建立

以金叶杨(Populus nigra cv.'Jinye')带腋芽的茎段为试材,采用了组织培养的方法,研究了金叶杨的腋芽诱导、继代增殖、生根培养,以期为保持其优良性状、实现工厂化育苗提供参考。结果表明:1年生茎段最佳消毒方式是使用0.1%HgCl_2溶液处理10 min;最佳诱导培养基为MS培养基;腋芽诱导最佳激素配比为6-BA 0.5 mg·L~(-1)+NAA 0.3 mg·L~(-1),腋芽诱导率为92.6%;增殖效果最佳的激素配比为6-BA 1.0 mg·L~(-1)+NAA 0.4 mg·L~(-1)+GA_3 0.2 mg·L~(-1),增殖系数为4.4;组培苗生根培养效果最好的培养基为1/2MS+IBA 0.5 mg·L~(-1),生根率为91.2%。     

美国红枫的组织培养与快繁技术

以美国红枫腋芽茎段为外植体,采用组织培养方法,研究了不同激素配比对美国红枫无菌体系的建立、启动、增殖、壮苗培养、试管苗生根移栽的影响。结果表明:带腋芽茎段最佳消毒方式为以70%酒精浸泡30s,1%升汞消毒6min,成活率和抽芽率最高,分别达到75.22%和95.13%;NAA对启动培养的影响大于6-BA,接种于培养基MS+NAA 0.05mg·L~(-1)+6-BA0.5mg·L~(-1)中的外植体诱导率最高,为62.80%,培养基及激素的最佳配比为NN69+2,4-D0.1mg·L~(-1)+TDZ 0.3mg·L~(-1),诱导率达到80.21%;增殖培养阶段的最佳培养基为NN69+NAA 0.1mg·L~(-1)+TDZ 0.3mg·L~(-1),增殖系数为4.2;MS+2,4-D 0.1mg·L~(-1)+6-BA0.5mg·L~(-1)能有效促进小苗的生长;生根培养最适培养基MS+NAA 0.1mg·L~(-1)+2,4-D0.5mg·L~(-1),生根率达99.8%,生根条数达7.9,根长达6.5cm;练苗后移栽到蛭石+珍珠岩(1∶1)基质中,移栽成活率为75.2%。     

大花蕙兰原球茎诱导、增殖与分化影响因素研究

以大花蕙兰试管组织为试材,MS为基本培养基,研究了不同添加物6-BA、NAA、IBA、活性炭,对大花蕙兰原球茎诱导、增殖和分化的影响。结果表明:适宜原球茎诱导、增殖的最佳培养基为MS+1.00mg·L~(-1) 6-BA+0.1mg·L~(-1) NAA,适宜原球茎分化的最佳培养基为MS+1.0mg·L~(-1) 6-BA+0.2mg·L~(-1) NAA,在培养基中添加0.3%活性炭有利于原球茎的增殖和分化。     

不同激素对“五彩珍珠”番茄再生体系的影响

以"五彩珍珠"番茄为试材,选取6d苗龄无菌苗的子叶和下胚轴为外植体,研究了不同激素浓度及配比对番茄愈伤组织的诱导、不定芽分化及生根的影响,以建立番茄再生体系。结果表明:诱导"五彩珍珠"番茄愈伤组织的最佳培养基为MS+0.4mg·L~(-1)IAA+2.0mg·L~(-1)6-BA,其子叶的诱导率为100%,下胚轴的诱导率为95%;不定芽分化的最佳培养基为MS+0.2mg·L~(-1) IAA+(1.0~3.0)mg·L~(-1) 6-BA;诱导生根的最佳培养基为1/2MS+0.10mg·L~(-1)NAA。子叶为最佳外植体,其不定芽的分化率及生长情况均优于下胚轴。     

不同植物生长调节剂对橡胶草组培苗不定芽分化和生根的影响

以橡胶草为试材,研究不同植物生长调节剂(6-苄氨基腺嘌呤,简称6-BA;萘乙酸,简称NAA)对橡胶草组培苗不定芽分化和生根的影响。结果表明:不同6-BA和NAA激素配比对橡胶草组培苗不定芽分化影响差异显著,诱导不定芽分化的最佳培养基为MS+6-BA 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1);NAA对橡胶草组培苗生根有明显促进作用,最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.2mg·L~(-1)。