一株小果蚁巢伞菌株鉴定及其液体培养基的筛选

以云南省临沧市蚁巢伞中分离获得的菌株0820-003为供试材料,根据形态学特征和ITS序列分子鉴定分析,确定其分类学地位,并设计3种不同液体培养基,筛选其最佳液体培养条件。结果表明,该菌株0820-003为小果蚁巢伞Termitomyces microcarpus (Berk.&Broome) R. Heim,在3种配方中,适合菌株0820-003生长的液体条件为配方C,即土豆200 g、葡萄糖20 g、酵母菌2 g、蛋白胨1 g、KH2PO41.0 g、MgSO41.0 g、维生素B110 mg,加水至1 000 mL,pH自然。     

RFLP在鳞翅目蛹虫草菌鉴别中的应用

本文应用RFLP技术鉴别两未知菌株S1001和S1002是否系鳞翅目蛹虫草菌(Cordyceps milicaris)。试验以ITSl,TTS4为引物,PCR扩增rDNA的5.8S+ITS区段,扩增产物纯化后用DNA限制性内切酶酶切,获得DNA的RFLP图谱,并同ATCC模式菌株的RFLP图谱相比较。结果表明:三个作为对照的ATC菌株具相同的RFLP图谱,而两待鉴定菌株之间存在差异,且明显不同于ATCC模式菌株,从而证明,两待鉴菌株与ATCC菌株之间在rDNA区域具有明显的结构差异,故推断两待鉴定菌株不隶属于鳞翅目蛹虫草菌。     

金针菇不亲和性因子研究

从29株金针菇(Flammulina velutipes)中经单孢分离获得的单核菌株,两两配对后,在显微镜下观察锁状联合,配对结果将金针菇的A因子确定到10个,B因子确定到8个.13个黄色菌株的不亲和性因子包含了从A1到A9,B1到B8;而16个白色菌株的不亲和性因子大多为A2A3B2B3类型.有24个金针菇菌株获得的单核菌丝有4种交配型且符合1∶1∶1∶1比例,其它菌株获得的单核菌丝交配型与理论数据有偏离.     

高产黑木耳菌株的筛选及培养条件的优化研究

以黑龙江地区畅销的主要栽培菌种黑29为对照,研究了产自黑龙江山区柞栎木上经筛选获得的黑木耳野生LY58菌株的生物学性状.结果表明:该菌株的适宜培养条件为温度28℃、pH 7.0;产量为(45±5)g/袋,生物学效率为95.4,其各方面性状皆优于对照菌株黑29,可用于黑龙江省气候条件的袋料栽培菌株.     

杧果树生黄单胞叶斑病病原的鉴定

对海南和广西杧果（台农）上发生的一种细菌性病害进行病原鉴定。采用形态观察、革兰氏染色、致病性测定、生理生化性状等常规细菌鉴定技术,结合细菌DNA促旋酶B亚单位基因（gyrB）序列特点对获得的10株细菌菌株进行分析。结果表明,供试的10株细菌菌株均为树生黄单胞杆菌（Xanthomonas arboricola）。该研究是...     

野生硫磺菌分离株ITS序列分析

采用组织分离的方法从野生硫磺菌(Laetiporus sulphureus)子实体上分离得到菌株ts,以其基因组为模板扩增获得该菌株的ITS序列,序列分析结果表明:该菌株与GenBank中Laetiporus sulphureus var.sulphureus的3个日本分离株聚为一簇,ITS核苷酸一致率为98.31%～99.25%,而与其它22个来自不同国家的硫磺菌属菌株的ITS核苷酸一致率为91.93%～98.12%,依此结果,ts菌株应为L.sulphureus var.sulphureus。     

平菇深色菌株与G30杂交的子实体性状比较及关联度分析

为缩短平菇菌株的育种年限,加快优良菌株的获得,以平菇的5个栽培菌株P129、黑380、茶39、华平49和B5-19分析与G30(高温30)菌株杂交后获得的71个子实体为材料,通过对71个子实体的菌丝生长速度及产量等农艺性状进行分析,并进行方差分析和灰色关联分析。结果表明:菌株HP28产量最高,每袋单产为1 007.5g,P16与HP41关联度最大,其综合性状最好,因此,筛选出综合性状较优良的平菇菌株P16、HP41。     

金针菇B_1菌株的生物学性状研究

为了解金针菇B1菌株的生物学性状,并探索该菌株的栽培方法,运用显微观察以及组织分离,孢子分离,原种分离和母种培养等技术对金针菇B1的形态、生理等生物学性状进行了观察研究。结果表明,该金针菇属于粗稀型（少柄型）,白色品系,菇体质地鲜嫩柔软,外观色泽极佳,原种菌丝在含有生长因子钾和镁的木屑加麸皮的培养料上生长最快,是一株优良菌株。     

肺形侧耳交配型研究

以肺形侧耳(Pleurotus pulmonarius)鲁大秀珍1号(LD1)的新鲜子实体为材料,收集担孢子并分离获得58株单核菌株,经过三轮交配实验,将58株单核菌株分成4组(T1、T2、T.和T4),分别有16、14、12和16株,可知肺形侧耳属于四极性异宗配合;指定T1为A1B1,T2为A2B2,核迁移实验明确了T3的交配型为A1B2,T4为A2B1;卡方检验结果表明,4种交配型单核体的比例符合1∶1∶1∶1的分离规律.     

一株野生鳞皮新香菇的分离鉴定与培养

采用形态学观察和ITS序列分析相结合的方法,将采自云南丽江的野生子实体鉴定为鳞皮新香菇(Neolentinus lepideus)。通过组织分离和菌种纯化,获得菌株JZ505,对该菌株的菌丝培养条件进行了探究并进行了人工栽培实验。研究结果表明该菌株的最适碳源为果糖或蔗糖,最适氮源为酵母粉,适宜生长温度为25℃,最适pH 5.0～6.0,经栽培成功得获得了该菌株的子实体。     

扩增核糖体DNA限制性分析(ARDRA)研究刺芹侧耳细菌病原菌

为分析刺芹侧耳(Pleurotus eryngii)工厂化栽培中发黄腐烂子实体的细菌组成,构建16SrDNA文库,利用限制性内切酶MspI和RsaI分别对随机克隆进行酶切筛选,并测定代表性克隆16SrDNA序列,BLAST分析结果表明刺芹侧耳子实体病状组织中存有两类菌群,分别为假单胞菌和芽孢杆菌属。同时,对刺芹侧耳子实体病状组织中的细菌进行分离培养、致病性测定、16SrDNA鉴定及BLAST分析,病原细菌与恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)的同源性较高,其作为引起刺芹侧耳工厂化栽培细菌性病害的病原菌在国内外尚属首次报道。     

越橘叶斑病原菌的拮抗菌筛选及其发酵条件优化

从黑松林地土壤中分离得到一株对越橘叶斑病原菌Cylindrocladium colhounii有较强抑制作用的细菌B7。建立该细菌的生长曲线。采用菌丝生长抑制法,研究了该细菌对C.colhounii的拮抗作用,并通过正交试验优化了其发酵条件。结果表明,该菌体在培养了5h后即进入对数生长期;B7细菌的发酵液原液和无菌滤液均能抑制病原菌的生长,其中发酵液原液的103稀释液的抑菌效果仍与对照之间存在显著的差异;发酵条件优化试验中发现该细菌的无菌滤液最大抑菌率达100%,最佳发酵条件为葡萄糖0.5%、氯化铵0.1%、不加无机盐、pH5.4,温度28℃;结合形态学特征和16SrRNA的序列分析,将该菌株鉴定为枯草芽孢杆菌。     

解淀粉芽胞杆菌防治番茄果实灰霉病及其抑菌物质分析

通过对峙培养法筛选对灰葡萄孢菌有显著拮抗性的产芽胞细菌,利用番茄果实检测拮抗菌及其发酵上清液对灰霉病的防治效果,采用ESI-MS检测拮抗菌发酵上清液粗提取物中主要抑菌物质并利用PCR检测合成抑菌物质的相关基因,通过菌体菌落形态观察、生理生化试验、16S rDNA及gyrB分析对拮抗细菌进行种属鉴定。结果表明,分离筛选的拮抗菌fqhm-13及其发酵上清液对番茄果实灰霉病防治效果分别达到69.0%和78.1%。fqhm-13发酵上清液粗提取物中主要抑菌物质为脂肽抗生素C14 ~ C16的surfactin A和C15 ~ C17的iturin A。fqhm-13基因组中含有脂肽抗生素合成基因ituC、ituD、fenD和srfAB。fqhm-13菌株为解淀粉芽胞杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）。该研究为利用芽胞杆菌及其代谢产物防治番茄果实灰霉病奠定了材料基础。     

银杏RNA的提取

采用CTAB法提取银杏叶的RNA,结果表明:抽提的RNA经电泳检测,可见28SrRNA和18SrRNA两条主带;紫外吸收值测量,A260/A280接近2.0;反转录合成的cDNA经RAPD扩增,出现清晰的条带,这些说明提取的RNA纯度高,质量好。此方法简便易行,成本也较低,适合于富含多糖、多酚植物材料的RNA提取。     

Biological control of the shoot disease of Amaranthus hybridus caused by Choanephora cucurbitarum with Bacillus subtilis

Summary

Isolates of Bacillus subtilis from soil and ogili (a local food condiment) controlled choanephora shoot disease of the vegetable crop plant, Amaranthus hybridus, in the greenhouse. Disease developed on plants inoculated simultaneously with the pathogen Choanephora cucurbitarum and the ‘ogili’ isolate, but not the soil isolate, of B. subtilis. Application of either bacterial strain to plants one day before a challenge with the pathogen prevented disease development. A single application of either strain prevented disease development from a subsequent challenge with the pathogen at any time over a thirty day period. Viable counts of the microflora on the shoot tips of the treated plants indicated strongly that the inoculated bacteria multiplied and colonized the extending shoot tip whether or not the shoots were covered with polythene bags. Both strains of Bacillus subtilis inhibited mycelial extension growth as well as conidial germination in vitro.     

果树内生拮抗细菌的筛选鉴定及其生防作用研究

通过组织分离法,在不同健康果树的木质部中分离到235株内生细菌。通过平板对峙法对所得菌株进行了初筛和复筛,得到6株拮抗作用较强的菌株。用过滤和高温灭菌得到的菌株发酵液进行抑菌谱试验,最终获得拮抗作用较强的内生细菌X8。对X8菌株在植物体内定殖、分类鉴定和防治作用的深入研究。结果表明：X8菌株可以在杏、辣椒等植物中定殖。X8菌株发酵液对辣椒疫霉病菌（Phytophthora capsici）抑制作用最强,达80.3%,对3种链格孢菌（Alternaria）病原菌的抑制作用达到75%以上,对番茄灰霉病和辣椒疫病的防效达到75.4%和79.3%,显著高于50%腐霉利和25%甲霜灵的防效。经16S rDNA序列分析,X8菌株与枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis的16S rDNA序列的同源性达99%。综合形态特征、生理生化特性,最终将X8鉴定为B. subtilis,在GenBank中序列登录号为HQ647257。     

白菜黑斑病菌拮抗细菌LBC-1菌株的分离与鉴定

从湖南、湖北、河北等地区菜地采集土样，采用抑菌圈法筛选对白菜黑斑病病原菌芸薹链格孢菌（Alternaria brassicae）具有拮抗作用的芽孢杆菌菌株。通过初筛得到具有拮抗作用的菌株20株，复筛出1株拮抗活性较高的菌株LBC-1。通过生理生化试验、形态特征观察及16S rDNA序列分析对其进行了种属鉴定。鉴定结果为菌株LBC-1属于解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens），是1株广谱拮抗芽孢细菌菌株。     

大花惠兰根腐病拮抗细菌ZL7-5菌株的筛选与鉴定

 从各地大花惠兰种植地采集的土样中共分离到细菌519株,初筛出对大花惠兰根腐病病原菌尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporium）具有拮抗活性的细菌菌株26株,经过复筛,选出1株具有较高拮抗活性的菌株ZL7-5。通过16S rDNA序列相似性分析,菌株ZL7-5与解淀粉芽孢杆菌标准菌株(NBRC 15535)的16S rDNA序列相似度达100%,通过比较菌株ZL7-5和模式菌株的形态特征和生理生化特性,最终将菌株ZL7-5鉴定为解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）。     

Phytoplasma infection may affect morphology,regeneration and pyrethrin content in pyrethrum shoot culture

The aim of the work was to infect pyrethrum (Tanacetum cinerariifolium (Trevir.) Schultz-Bip.), an important secondary metabolite pyrethrin producing plant, with MA phytoplasma (16S rRNA group III, subgroup B) to initiate tissue culture of phytoplasma-infected plants, and to examine possible effects of infection on pyrethrin content, morphology, and regenerative capacity in shoot culture.