百合品种染色体倍性观察

 利用染色体常规制片技术分析了45个从荷兰引进的百合品种的染色体倍性,包括21个亚洲百合、3个麝香百合、7个东方百合、8个LA杂交品种、2个LO杂交品种、4个OT杂交品种。在21个亚洲百合中,12个品种（‘Eleganza’、‘Monte Negro’、‘Renoir’、‘Black Bird’、‘Butter Pixie’、‘Orange Matrix’、‘Petit Brigitte’、‘Pink Pixie’、‘Lollypop’、‘Red Latin’、‘Marrakech’和‘Pollyanna’）为二倍体（2n = 2x = 24）,5个品种（‘Navona’、‘Orange Pixie’、‘Elodie’、‘Vermeer’和‘Lyon’）为三倍体（2n = 3x = 36）,4个品种（‘Brunello’、‘Tresor’、‘Val di Sole’和‘Detroit’）为四倍体（2n = 4x = 48）;3个麝香百合品种（‘White Heaven’、‘Gelria’和‘White Fox’）为二倍体（2n = 2x = 24）;7个东方百合品种（‘Siberia’、‘Sorbonne’、‘Maru’、‘Dynamite’、‘Dordogne’、‘Montezuma’和‘Miss Lucy’）为二倍体（2n = 2x = 24）;8个LA杂交品种（‘Brindis’、‘Courier’、‘Pavia’、‘Advantage’、‘Mestre’、‘Mombasa’、‘Pirandello’和‘Serrada’）为三倍体（2n = 3x = 36）;两个LO杂交品种（‘Triumphator’和‘White Triumph’）为三倍体（2n = 3x = 36）;4个OT杂交品种中‘Yelloween’和‘Red Dutch’为二倍体（2n = 2x = 24）,‘Conca D’Or’和‘Golden City’为三倍体（2n = 3x = 36）。该结果表明,组内杂交品种（亚洲百合、东方百合和麝香百合）中,除亚洲百合中有5个三倍体和4个四倍体品种外,其余22个为二倍体品种,因而多数组内杂交品种为二倍体品种;而组间杂交品种（LA、OT和LO）,只有OT中2个品种为二倍体,其余12个皆为三倍体。     

贮藏温度对百合花粉生活力的影响

以花粉萌发率为指标,利用离体萌发法研究了4种贮藏温度对6个百合品种花粉生活力的影响。结果表明:‘Justina Zantrijus’、‘Sheila’、‘Elite’和‘岷江百合’花粉最适合于4℃干燥冷藏,在最适贮藏条件下萌发能力最长可分别保持84、352、88、4 d;‘Brunello’花粉最适合4℃冷藏,萌发能力可保持70 d;而‘兰州百合’花粉最适合-18℃冷冻贮藏,萌发能力可保持49 d。花粉萌发率随贮藏时间的延长呈下降趋势,但在贮藏的某些阶段有明显上升的现象。     

亚洲百合与东方百合远缘杂交花粉管生长荧光观察及胚培养

以亚洲百合杂种系的3个不同倍性品种"布鲁拉诺"(‘Brunello’,4x)、"耀眼"(‘Dazzling’,3x)和"多安娜"(‘Pollyanna’,2x)与东方百合杂种系的2个二倍体品种"西伯利亚"(‘Siberia’,2x)和"索邦"(‘Sorbonne’,2x)为试材,采用荧光显微镜观察法和胚培养法,研究了亚洲百合与东方百合几个品种正反交授粉后花粉萌发及花粉管生长过程和不同方法处理幼胚对胚萌发及幼苗生长的影响,以期获得亚洲百合与东方百合远缘杂交新品种。结果表明:除"耀眼"外,杂交中其它百合品种柱头上的花粉均能萌发并形成花粉管,但多数花粉管在授粉72h后表现出顶端膨大、缠绕折叠或出现胼胝质等异常现象,只有少量花粉管到达子房。其中,"布鲁拉诺"×"西伯利亚"、"布鲁拉诺"×"索邦"、"索邦"×"布鲁拉诺"和"索邦"×"多安娜"组合花粉管在授粉120h后到达子房;而"西伯利亚"×"布鲁拉诺"、"西伯利亚"×"多安娜"、"多安娜"×"索邦"和"多安娜"×"西伯利亚"组合中,花粉管生长缓慢甚至在花柱中停止生长,授粉120h后仍未伸向子房。同时,通过胚培养获得了种间杂种,胚培养时以授粉后40d左右胚龄为宜;最佳幼胚处理方法为剥离种皮和胚乳,只取幼胚的方法;MS+NAA 0.01mg·L~(-1)+BA 0.1mg·L~(-1)是胚培养的最适培养基。     

亚洲百合杂交新品种‘雨荷’

 ‘雨荷’是以二倍体亚洲百合‘金角’（Golden Horn）为母本,四倍体亚洲百合‘布鲁内罗’（Brunello）为父本,杂交选育而成的三倍体新品种。花橙红色,有少量紫褐色斑点,花瓣肥厚。花丝和花柱橙色,花粉黑褐色。株高75 ~ 80 cm,花径14 ~ 15 cm。生长强健,抗逆性强,适宜中国华东地区栽培。     

中国古老月季品种的核型研究

采用常规压片法对‘月月红’等11个中国古老月季品种进行了以染色体形态和倍性为主的核型分析研究。结果表明: (1) 不同品种的染色体数差异较大, ‘绿萼’、‘玉玲珑’、‘月月红’和‘月月粉’是二倍体(2n = 2x = 14) ; ‘春水绿波’和‘湖中月’是三倍体( 2n = 3x = 21) , ‘大富贵’、‘金粉莲’、‘菊红潮’、‘映日荷花’和‘思春’是四倍体(2n = 4x = 28) 。(2) 11个品种染色体的绝对长度均在1～3μm之间; 品种间核不对称系数变化范围为56.560% ～60.376%; 除‘思春’和‘映日荷花’外,其它9个品种中均未观察到随体存在。(3) ‘春水绿波’和‘湖中月’的核型公式为2n = 3x = 21 = 3 sm +18m, 核型类型均是1A; ‘金粉莲’和‘菊红潮’的核型公式为2n = 4x = 28 = 4 sm + 24m, ‘大富贵’的核型公式为2n = 4x = 28 = 2 sm + 26m, 核型类型都是1A; ‘绿萼’的核型公式是2n = 2x = 14 = 2 sm + 12m, 核型类型为1B; ‘思春’和‘映日荷花’的核型公式是2n = 4x = 28 = 4 sm + 22m + 2m ( SAT) , 核型类型为1A; ‘玉玲珑’的核型公式是2n = 2x = 14 = 2 sm + 12m, 核型类型为1A; ‘月月粉’和‘月月红’的核型公式是2n = 2x = 4 sm + 10m, 核型类型为2A。     

百合新品种‘初夏’

 ‘初夏’百合是以亚洲百合杂种系黄色花品种‘金角’（Golden Horn）为母本,以亚洲百合杂种系橙色花品种‘布鲁内诺’（Brunello）为父本,杂交选育而成。切花生产日数短,丰花。株高65 ~ 70 cm,花径16 ~ 17 cm。花橙色,无斑点,花丝和花柱橙色,花粉黑褐色。三倍体,生长强健,抗逆性强,适宜中国华东地区栽培。     

新铁炮百合3个品种的核型分析

利用普通压片法对新铁炮百合（Lilium × formolongi）3个品种的染色体数与核型进行了分析。结果表明：（1）‘雷山1号’核型公式为2n = 2x = 24 = 4m + 6sm（2SAT）+ 8st + 6t;（2）‘雷山2号’核型公式为2n = 2x = 24 = 4m（2SAT）+ 2sm + 10st + 8t（2SAT）;（3）‘雷山3号’核型公式为2n = 2x = 24 = 2m（2SAT）+ 8sm + 4st + 10t。三者核型均为3B型,其核型不对称系数分别为72.96%、77.39%和75.93%。     

柑桔同源及异源四倍体花粉育性研究

对８个柑桔同源四倍体及通过原生质体融合得到的２个异源四倍体的花粉育性和花粉粒大小进行了测定。结果显示，同源四倍体柑桔花粉育性平均为３６％，约为二倍体（６２％）的６０％。‘伏今夏’甜橙由于是异质结合的染色体易位突变体，其同源四倍体花粉育性比二倍体（２３％）高出５０％。权（Ｐｏｎｃｉｒｕｓｔｒｉｆｏｌｉａｔａ）与甜橙（Ｃｉｔｒｕｓｓｉｎｅｎｓｉｓ）属间以及来檬（Ｃ．ａｕｒａｎｔｉｆｏｌｉａ）与甜橙种间四倍体体细胞杂种花粉育性介于其双亲之间，花粉育性分别为各自高值亲本的９９％和７５％。同源及异源四倍体花粉粒体积平均为二倍体的２倍或双亲之和。本结果说明，柑桔体细胞杂种可作为杂交亲本进一步被利用。     

三倍体葡萄新品种--无核早红

‘无核早红’是以‘二倍体郑州早红’ב四倍体巨峰’育成的三倍体葡萄新品种。经初选、品种比较试验、区域试验及生产试栽 ,表现极早熟、大粒、无核、色艳、抗病、丰产稳产等优良性状。     

天然四倍体枇杷‘B431’减数分裂观察及育性分析

通过流式细胞术和染色体制片确定枇杷天然实生筛选株系‘B431’为四倍体。采用改良涂片法观察了其花粉母细胞减数分裂过程,离体萌发法和人工杂交分析其育性,染色体计数法检测了其后代的染色体数。结果表明:天然四倍体枇杷‘B431’减数分裂过程中染色体存在异常行为;染色体配对以二价体为主,也可见少量单价体和部分多价体;减数分裂进程中出现板外染色体、早熟染色体、落后染色体、染色体桥、微核和极少的三极体等异常现象;四分体时期有二分体、三分体、多分体和微核等异常现象。四倍体枇杷‘B431’育性低于二倍体,但其花粉活力达到66.29%±2.22%,杂交结实率与二倍体差异不显著,仍有较高的育性,其与二倍体的杂交后代三倍体率达到66.67%,可以作为三倍体创制的核心亲本。     

芽变红地球葡萄的倍性结构鉴定

芽变红地球葡萄是新近发现的自然变异新种质。为搞清其倍性结构,以芽变红地球、红地球为试材,根据组织发生层学说推断材料的倍性结构。测定保卫细胞大小和统计叶绿体数目的试验表明,芽变红地球保卫细胞长略大于红地球,宽略小于红地球;保卫细胞中的叶绿体粒数,芽变红地球为11.35个,红地球为10.63个,均没有显著差异,从而推断芽变红地球的L1层为二倍体。测定花粉粒大小的试验结果表明,芽变红地球花粉粒长度为35.46μm,宽度为22.95μm,红地球的花粉粒长度为33.03μm,宽度为18.04μm,存在显著差异,表明芽变红地球的LⅡ层为四倍体。根尖染色体数目观察结果表明,芽变红地球的染色体数目为2n=4x=76,红地球的为2n=2x=38,表明芽变红地球的LⅢ为四倍体。另外,通过对梢端切片观察,芽变红地球的LⅠ层的细胞与红地球的没有明显差异,而LⅡ、LⅢ则显著大于红地球。由此证明,芽变红地球的倍性结构为2-4-4型,为周缘嵌合体。     

秋水仙素诱导三种紫薇多倍体的研究

 研究了秋水仙素处理浓度和时间对3种紫薇幼苗染色体加倍的诱导效应，通过染色体计数、流式细胞仪以及形态观察等方法进行了倍性鉴定。结果表明：秋水仙素诱导3种紫薇均得到了四倍体,0.5%～0.8%的秋水仙素处理紫薇和银薇48～96 h的变异率较高，其中以0.5%秋水仙素处理紫薇72 h的变异率最高，达54.17%。根尖染色体压片表明四倍体染色体数为：2n=4x=96，二倍体对照为：2n=2x=48。四倍体表现出叶片长、宽、厚均增大，气孔密度减小，气孔保卫细胞增大，保卫细胞内叶绿体数增加，花粉粒直径增大，花径、花瓣长、花瓣基部爪长均较二倍体明显增加，单朵花观赏价值大大提高。     

芋种质资源染色体倍性鉴定

利用流式细胞术（Flow cytometry,FCM）,对芋属（Colocasia）中种质资源类型最为丰富的滇南芋（C.?antiquorum Schott）和芋〔C.?esculenta（L.）Schott〕的染色体倍性进行了鉴定。结果表明：滇南芋的染色体倍性为2n=2x=28。芋中魁芋的染色体倍性表现为2n=2x=28|多头芋、魁子兼用芋为2n=3x=42|多子芋一般为2n=3x=42,但白芽乌绿柄多子芋为2n=2x=28,另外来自印度的绿柄多子芋也为2n=2x=28。     

黄瓜未授粉子房培养获得同源四倍体

为获得稳定纯合的同源四倍体黄瓜材料,采用多种分化培养基对黄瓜(Cucumis sativus L.)未授粉子房培养形成的胚进行培养。结果共获得33个再生植株,经染色体计数后发现7株为同源四倍体植株(2n=4x=28)。利用SSR手段对获得的同源四倍体植株进行了同质性鉴定,发现均为纯合子。利用形态学观察和染色体计数法对同源四倍体单株自交后代的遗传稳定性进行了研究,结果表明自交后代倍性没有发生变异。对此类型同源四倍体植株和经秋水仙素诱导获得的同源四倍体植株分别进行了花粉可染率、花粉萌发率及自交结籽数的观察,发现前者具有高的育性,自交结籽数为15～34粒。上述结果表明,黄瓜未授粉子房培养是获得同源四倍体的一条途径,获得的稳定纯合且育性好的同源四倍体材料可作为特异资源用于黄瓜倍性育种。     

黄瓜与酸黄瓜异源多倍体3种同工酶表达基因组剂量效应

 以甜瓜属（Cucumis）黄瓜与酸黄瓜的3种不同倍性异源多倍体 - 双单倍体种间杂种F₁（2n = 2x = 19,HC）、异源三倍体黄瓜（2n = 3x = 26,HCC）和异源四倍体C. hytivus (2n = 4x = 38,HHCC)及其双亲为试材,比较研究过氧化物酶（POD）、谷氨酸脱氢酶（GDH）和天冬氨酸转氨酶（AAT）在不同倍性异源多倍体中的酶谱表达特性,探讨基因组剂量对酶谱表达的影响。结果表明：不同倍性异源多倍体的酶带染色力表现出明显的差异,但酶带数和酶带分布基本一致。在AAT同工酶中,酶带的表达随基因组剂量的提高而增强,在POD和GDH同工酶中,大部分酶带的表达随基因组剂量的提高而减弱。这些结果表明甜瓜属异源多倍体在不同的酶系统中,酶谱表达可能会表现出截然相反的基因组剂量效应。本研究结果可为     

Occurrence and cytological mechanism of 2n pollen formation in Chinese Diospyros spp. (Ebenaceae) staminate germplasm

Summary

Some Diospyros spp. (Ebenaceae) staminate germplasm (2n = 6x = 90) recently found in Hubei Province, China, was of potential value for breeding. This study evaluated the natural rate of occurrence and cytological mechanism responsible for the formation of 2n pollen in this staminate germplasm. The frequencies of giant pollen, dyads, and triads detected in all accessions were 0 – 2.3%, 0.8 – 2.2%, and 2.3 – 4.3%, respectively. The correlation coefficient (r = 0.98**; P < 0.01) between the frequency of giant pollen and those of dyads and triads was highly significant, which strongly suggests that the giant pollen was 2n pollen. Cytological analysis of pollen mother cell meiosis showed that the main cytological mechanisms responsible for the formation of 2n pollen were tripolar spindles and fused spindles, instead of parallel spindles and vertical spindles. In addition, an abnormal disintegration of sister chromatids, which also produced 2n pollen in the end, was occasionally found at metaphase II. Diploid (2n) pollen produced by tripolar spindles and fused spindles was equivalent to first division restitution (FDR) gametes. Therefore, this Diospyros spp. staminate germplasm may have value for sexual polyploidisation in breeding programmes of Japanese persimmon.     

葡萄新品种早黑宝的倍性结构鉴定

早黑宝是用杂交和诱变相结合的方法培育的早熟鲜食葡萄新品种。为搞清该种质的倍性结构,以便育种利用,根据组织发生层学说,以京亚(4x)、早黑宝、早玫瑰(2x)、瑰宝(2x)4个品种为试材,通过测定气孔保卫细胞大小和叶绿体数目;观测比较花粉粒形态、大小、活力以及坐果率;观察根尖染色体数目等试验分别推断LⅠ层、LⅡ层、LⅢ层细胞的倍性,同时运用梢端切片法对4个品种的3层分生细胞进行观察和大小测定比较,结果表明早黑宝的倍性结构为4-4-4型,为同质四倍体。     

甲基胺草磷诱导大蒜多倍体的研究

以通过生理休眠的紫皮大蒜Z-006-10鳞茎茎尖为试材,利用固体培养基中添加甲基胺草磷的离体诱导方法,研究甲基胺草磷不同处理浓度和时间对紫皮大蒜体细胞染色体的诱导效果,并利用形态观察、根尖细胞染色体计数及流式细胞仪分析等方法对得到的再生植株进行倍性鉴定。试验结果表明：10 μmol?L-1甲基胺草磷处理6 d,四倍体诱导率最高,达32.87%。形态观察结果表明,得到的四倍体植株多倍体形态特征明显,与二倍体植株差异明显。根尖染色体压片观察表明,四倍体染色体数为2n=4x=32,对照为2n=2x=16。流式细胞仪倍性分析表明,四倍体体细胞DNA的相对含量是二倍体的2倍,其结果与染色体计数法鉴定结果一致。     

平邑甜茶无融合生殖基因型分析及雌配子发育模式研究

【目的】为探明平邑甜茶的无融合生殖遗传与发育机制,【方法】以平邑甜茶与B9、M27、M9为亲本杂交,并筛选杂种实生苗;用去雄套袋法鉴定杂种的无融合生殖率,用流式细胞仪鉴定杂种的染色体倍性。【结果】获得种子3101粒,培育实生苗2 388株,从中筛选出杂种实生苗73株,其中58株开始开花结果。经无融合生殖率鉴定,有25株为84.00%~95.06%,8株为10.00%~48.00%,25株为0~5.00%;倍性鉴定表明,10株四倍体皆为无融合生殖型,4株二倍体皆为有性生殖型,三倍体植株中无融合生殖型加上中间型与有性生殖型数量比接近1∶1。【结论】验证了平邑甜茶的无融合生殖以显性单基因质量性状为主,也有数量性状效应;初步认为平邑甜茶无融合生殖核基因型为"Aaa"("A"代表无融合生殖基因,显性;"a"代表有性生殖基因,隐性);平邑甜茶胚囊多数情况下由未减数的2n=3x配子直接发育成与母株基因相同的胚,部分2n配子与雄配子结合,形成2n+n=4x型后代,少量胚囊经减数分裂产生n=x、n=2x两种配子,无融合生殖基因随n=2x配子分离。     

蝴蝶兰若干品种(系)的染色体数和形态分析

 采用酶解去壁法，对蝴蝶兰属（Phalaenopsis ）38个品种（系）进行了染色体观察计数和形态分析。结果表明，供试蝴蝶兰的5个品种中有3个四倍体（2n=4x=76），2个三倍体（2n=3x=57）；20个外引品系中有14个四倍体，1个三倍体和5个非整倍体；13个自育品系包括10个四倍体和3个非整倍体。均未见二倍体。不同品种（系）的染色体长度和形态相差较大，存在核型多样性；有21个品种（系）的染色体组全部由小染色体（长度2.5 μm左右）组成，17个品种或品系除了含小染色体外还含有大染色体（长度为5～9.5 μm），染色体大小组成与花色有一定相关性。本文对不同蝴蝶兰品种（系）的染色体倍性、染色体形态及其育性特点进行了分析讨论。