复合诱变选育恶臭假单胞菌高产菌株的研究

以恶臭假单胞菌Pseudomonas putida野生株Ps-FLAG01为出发菌株,经超声波(US)-硫酸二乙酯(DES)复合诱变后,筛选出一高产菌株Ps-FLAG05,其总酶活力为0.325 3 u/mL,比出发菌株提高25.89%;对其发酵培养基配方进行了优化,最佳配方为:玉米浆1.0%,葡萄糖3.5%,氯化钠0.15%,诱导剂4.5%,与原配方相比,发酵水平提高了13.03%.     

恶臭假单胞菌诱变与底物类似物抗性筛选

提高海因酶产生菌株的活力,能为β-内酰胺类抗生素的重要中间体D-对羟基苯甘氨酸的生产带来应用价值.对产海因酶的恶臭假单胞菌MZ-4S-0315进行紫外、微波诱变处理,在加有适量底物类似物5-FU的选择培养基上进行筛选.结果表明:经测定的140株菌株,其海因酶活力大部分比原菌株产酶能力有所提高;其中在微波(800 w,2 450 Hz)40 s诱变条件下筛选到一株产酶活力比原菌株提高2.44倍的菌株ZF-109.该方法比以往化学试剂结合的诱变操作简单,危害性小,特别是筛选速度有了极大提高.     

诱变假单胞杆菌对黑松细胞致病性的影响

以假单胞菌为出发菌株,对其进行紫外、亚硝酸盐单因子诱变处理,确定最佳诱变时间和剂量并进行复合诱变以获得低毒性菌株。对诱变后的低毒性菌株PB 1101和PB 0108进行研究,结果显示,这2株诱变菌株在菌落形态、培养液颜色以及pH值上与出发菌株有一定差异,同时在蛋白质含量和种类上也存在差异。     

竹炭固定化微生物去除水样中氨氮的研究

以竹炭为载体,将硝化菌、反硝化菌等微生物固定在竹炭(比表面积365m2·g-1,孔比容积0.34 mL·g-1)上,研究竹炭固定化微生物对氨氮的去除及影响因素.考察初始氨氮质量浓度、固定化微生物投加量、溶解氧、pH等因素对氨氮去除的影响,研究竹炭固定化微生物去除氨氮的反应动力学,进行竹炭吸附法和竹炭固定化微生物处理氨氮的对比试验.结果表明:初始氨氮质景浓度、竹炭固定化微生物投加量、溶解氧、pH等因素均影响氨氮的去除效果.随竹炭固定化微生物投加量增加,氨氮去除率和去除量均趋于增大,但投加量增加到一定量时,氨氮去除率和去除量增幅均趋缓.pH为8的偏碱性环境利于竹炭固定化微生物对氨氮的去除.竹炭固定化微生物处理氨氮水样存在竹炭吸附和微生物脱氮2种作用.对于初始氨氮质量浓度≤200 mg·L-1的水样,调节水样pH为8,控制水样溶解氧质量浓度为1 mg·L-1左右,竹炭固定化微生物系统中可发生同时硝化-反硝化作用,氨氮去除率可达70%以上.竹炭同定化微生物去除氮氮的过程符合一级反应动力学模型.     

荧光假单胞菌荧光显微观察方法比较

采用基于光学平台的荧光显微技术,分析比较了不同处理条件下荧光假单胞菌荧光效果的差别。结果表明:荧光假单胞菌活体状态下的自发荧光弱于死亡状态;不同荧光染色剂对荧光假单胞菌的荧光效应不同。苯胺蓝会减弱荧光假单胞菌的自发荧光,但4,6-联脒-2-苯基吲哚(4,6-diamid ino-2-phenylindole,DAPI)与吖啶橙可使荧光假单胞菌荧光增强,其中吖啶橙的荧光染色效果最好,DAPI次之。     

森林假单胞菌抑菌物稳定性及其成分分析

森林假单胞菌Pseudomonas silvicola菌株T1-3-2对杉木炭疽病具有较强的防治效果,为将其研发为林木炭疽病的生防制剂,需进一步探明该菌抑菌谱、抑菌物质稳定性以及主要成分等,以补充完善该菌的生防理论。文章通过平板对峙法、菌丝生长速率法、液相色谱/线性离子阱-静电场轨道阱高分辨质谱法(UPLC/LTQ-Orbitrapa MS)和气相色谱-质谱法(GC-MS)分析了该菌的抑菌谱、抑菌物质的稳定性以及主要成分。结果表明,菌株T1-3-2对9株供试病原真菌均具有较好的抑菌活性,尤其对包括杉木炭疽病菌Colletotrichum gloeosporioides在内的多种林木炭疽病菌表现出较强的抑菌作用,抑制率均达到65%以上;其代谢产物粗提物对杉木炭疽病菌的孢子萌发和菌丝生长具有明显抑制作用;温度≤70℃、酸碱度以及紫外辐射对粗提物抑菌效果均无显著影响,但高温处理(T> 70℃)对抑菌效果影响显著;粗提物主要含有14种化合物,其中包含假单胞菌常见的4种吩嗪类抑菌物质,即吩嗪、1,6-二羟基吩嗪、10-乙酰基-3,7-二羟基吩嗪和绿脓菌素;挥发性气体(VOCs)中包含:苯类...     

荧光假单胞菌对湿地松幼林生长量的影响

将荧光假单胞菌Q2-87和1M1-96两菌株施用于1 a生、2 a生和3 a生的湿地松幼林;一个湿地松生长高峰期后,分析自然状态下幼林的生长规律,同时进行施菌前和施菌后苗高和地径的比较。结果表明:13片自然状态下生长的幼林生长情况符合前人总结的规律;2所有施菌的湿地松幼林经过一个生长高峰期后,高增长率均未得到显著提高;3施菌的1 a生幼林地径增长率提高极显著,施菌的2 a生幼林地径增长率提高显著,而施菌的3 a生幼林地径增长率提高不显著。通过分析,认为施菌的3 a生湿地松的地径增长率未提高不显著,原因是该龄期的湿地松对2,4-DAPG已经不敏感。因此,本文的结论是荧光假单胞菌Q2-87和1M1-96通过其产生的2,4-DAPG主要作用于低龄(2 a生以下)的湿地松,并导致其产生类似于生长素作用产生的促生效应,从而使湿地松地径明显地增长。     

一株荧光假单胞菌的溶磷特性及其对杨树的促生效果

从杨树根际筛选出一株荧光假单胞菌JW-JS1菌株,通过液体发酵试验研究其溶磷特性,并利用温室盆栽试验探究其对杨树苗木的促生效果.结果表明:该菌株分别以葡萄糖为碳源,硫酸铵为氮源和碳氮比为100∶1时溶磷能力最强,溶磷量分别达到580.72,708.34和608.97 mg·L-1;该菌株分别在温度为30℃,初始pH 7.0,装液量为1/5和NaCl质量浓度为0时溶磷能力最强,溶磷量分别为562.89,594.58,638.62 mg·L-1和527.82 mg·L-1.接种该菌株可显著促进NL-895杨和美洲黑杨苗期的生长和营养元素含量的提高,其中,NL-895杨和美洲黑杨的苗高、地径、鲜质量和干质量分别比CK增长21.96％,5.04％,57.33％,54.36％和51.66％,1.98％,150.18％,168.49％,植株体内P,K,Ca和Mg含量分别比CK增长25.16％,19.75％,17.12％,10.10％和27.55％,125.53％,55.47％,102.94％.     

荧光假单胞菌的溶磷机制及其在杨树菌根际的定殖动态

【目的】探究荧光假单胞菌菌株JW-JS1的溶磷能力及其在杨树根际和菌根际的定殖动态,揭示菌株的溶磷机制并进一步阐明溶磷细菌与外生菌根真菌的互作机制,为杨树专用复合菌剂的开发与应用提供理论依据。【方法】通过液体培养试验分析荧光假单胞菌菌株JW-JS1培养液可溶性磷含量、p H和可滴定酸含量的变化,采用高效液相色谱(HPLC)法测定有机酸种类和含量,利用抗利福平标记法筛选稳定的标记菌株,运用灌根法研究其在杨树根际和菌根际的定殖动态。【结果】1) JW-JS1菌株培养液可溶性磷含量随接种时间延长逐渐增加,培养液pH与可溶性磷含量呈极显著负相关(r=-0.889~(**)),可滴定酸含量与可溶性磷含量呈极显著正相关(r=0.958~(**));2) JW-JS1菌株分泌的总有机酸量(434.39 mg·L~(-1))明显高于CK (25.94 mg·L~(-1))(P0.05),共检测出草酸、酒石酸、柠檬酸、顺丁烯二酸和反丁烯二酸5种有机酸,其中,草酸含量(273.69 mg·L~(-1))明显高于其他种类有机酸,约占总有机酸量的63.01%;3)筛选出含有300μg·mL~(-1)利福平抗性的标记菌株JW-JS1~(Rif),与原始菌株相比,其菌落形态和溶磷能力均未发生明显变化(P0.05);4)标记菌株在杨树根际和菌根际均能长期稳定存活并保持一定的定殖数量,随接种时间延长定殖数量呈下降趋势,定殖动态基本一致,其中,接种50天后定殖数量分别为5.2×10~4和4.5×10~4cfu·g~(-1)。【结论】荧光假单胞菌菌株JW-JS1的溶磷能力与培养液pH、可滴定酸含量和有机酸密切相关,特别是菌株分泌的草酸可能在溶磷过程中发挥重要作用。荧光假单胞菌菌株JW-JS1在杨树根际和菌根际均能长期稳定存活并保持一定的定殖数量。荧光假单胞菌菌株JW-JS1与红绒盖牛肝菌Xc是构建杨树专用功能复合微生物肥料的理想材料。     

杨树解磷细菌蜡状芽孢杆菌和荧光假单胞菌发酵罐扩繁条件优化

对杨树高效解磷细菌蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)JYZ-SD1和荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)JW-JS1在3L发酵罐里发酵条件进行优化。结果显示这两株解磷细菌在72h内都是接种量20%、转速400 r/min、通气量100ln/h条件下菌体生长量最大。为将这两株杨树根际解磷细菌更高效、更大量的扩繁提供参考依据。     

樟子松木蠹象生物学特性的研究

樟子松木蠹象主要危害樟子松枝和主干。在长春地区，1a发生一代，以成虫在枯枝落叶层下浅土层内和树皮裂缝内越冬。第2年4月下旬越冬成虫开始活动，5月中旬开始产卵，高峰期5月下旬；孵化高峰期为6月上旬；6月下旬化蛹，高峰期为7月上旬；7月上旬羽化，高峰期为7月中旬。卵期平均14d，幼虫期平均34d，蛹期平均12d，成虫期长达300～330d；幼虫分6个龄期。     

铁杉大痣小蜂生物学特性研究

铁杉大痣小蜂（Megastigmus sp．）隶属膜翅目Hymenoptera细腰亚目Apocrita长尾小蜂科Torymidae大痣小蜂属Megastigmus,在云南省主要分布于丽江市、维西县。通过野外调查和标本采集,并结合室内饲养观察,对其生物学特性进行了研究。结果表明该虫在丽江1年发生1代,完全在种子内取食、发育。     

卵叶小蜡叶蜂的初步研究

卵叶小蜡叶蜂是卵叶小蜡和女贞的重要害虫之一 ,在福建晋江 1a发生 2代 ,以老熟幼虫在土中土茧内越冬。卵单产于叶背边缘 ,幼虫取食嫩叶 ,可吃尽嫩梢 ,甚至整枝条 ,影响卵叶小蜡等植物的观赏价值。在室内对 2～ 5龄幼虫喷洒 40 %乐果乳油 2 0 0 0倍液或 30 0 0倍液、80 %敌敌畏乳油 2 0 0 0倍液或 30 0 0倍液、90 %敌百虫晶体的 10 0 0倍液或 12 0 0倍液均能获得良好的防治效果 (死亡率达 82 5 %～ 95 % )。     

云杉树叶象生物学特性初步研究

云杉树叶象是白龙江林区森林苗辅的主要地下害虫，以云杉属苗木为寄主，在该地区1年发生1代。幼虫在苗木根系周围的土壤中越冬，以越冬幼虫在每年春季取食苗木根系而造成主要危害。该虫发生与苗龄、海拨、坡向等因素有关。防治应采取苗木检疫、虫情测报、对苗木进行土壤处理及化学防治等措施。     

银杉落针病的初步研究

由散斑壳菌Lophoder mium sp.引起的落针病是银杉的一种重要叶部病害,导致针叶大量提早脱落,影响树木生长甚至濒于死亡。百菌清、多菌灵、甲基托布津等杀菌剂对病原菌子囊孢子萌发的抑制作用较强,以营林为主、药剂防治为辅的防治方法能控制该病的发生与流行。     

华山松木蠹象为害特性的初步研究

经对华山松木蠹象历时２年的调查和试验研究，初步了解了华山松木蠹象的分布、寄主域、为害特性、为害方式及为害部位。结果表明：该虫在滇东北、滇南、滇中及滇西地区均有分布；其寄主主要是松科的多种树种，该虫具有为害致死速度快，扩散蔓延速度快，只为害健康植株，成虫羽化历期长，防治难度大的特点。本项研究为制定一套经济有效的华山松木蠹象综合防治措施打下了基础。     

枸杞瘿蚊预测预报研究

通过长期在托克托县五申乡的4个自然村蹲点观察记录,研究枸杞瘿蚊蛹的发育天数和温度的关系以及蛹的发育历期,预测枸杞瘿蚊成虫出现的始盛期基本在5月上旬。同时通过多年记录测算,得出有效积温（T）和发育天数（N）预测式为：N=14.2±10.1/T-（13.5±0.6）;越冬蛹（x）和翌年成虫数（y）的预测公式：y=4.48x-12.08,并通过实验验证,认为所得公式在实践中预测的比较准确。     

山葡萄"双红"组培快繁技术的研究

对山葡萄“双红”组培快繁技术的研究结果表明:B5培养基为最佳基本培养基,BA0.03 mg.L-1 IBA0.2 mg.L-1为最佳激素水平配比,生根率达100%;年增殖次数8.5次,每次增殖倍数3.2倍,年增殖倍数为27.2倍;移栽炼苗平均成活率为92.5%,圃地定植成活率可达99.9%。     

土壤质地对落叶松人工林生长的影响

通过对不同土壤质地对落叶松生长影响的试验研究,结果表明,落叶松人工林的生长受土壤质地的影响很大,不同的土层厚度导致落叶松生长有不同的表现;在厚层土（表土〉20cm）生长的落叶松胸径比中层（11～20cm）和薄层（〈11cm）土提高16.6%和38.6%,树高提高21.8%和37.7%;厚层土（〉60cm）自然含水量比中层土（41～60cm）和薄层土（〈41cm）分别高4～11和9～15个百分点,田间持水量比中层土和薄层土分别高3～11和6～17个百分点,凋萎含水量比中层土和薄层土低0.65～1.1和1～2个百分点,厚层土的饱和持水能力比中层土和薄层土高3%和7%;土壤中的各项养分含量指标均是厚层土高于中层土和薄层土,落叶松的生长指标也是厚层土高于中层土和薄层土。     

链霉菌D21产木聚糖酶的发酵条件研究

研究了链霉菌D21产木聚糖酶发酵条件的优化.单因素优化试验结果表明,水不溶玉米芯木聚糖为最佳碳源和诱导物,牛肉蛋白胨为最佳氮源,最适pH值为6.0,最适培养温度40℃.在此条件下,培养4d木聚糖酶活力达到1128U/mL.