悬铃木体细胞胚胎发生及植株再生

以叶片为材料 ,研究了悬铃木的体细胞胚胎发生及其植株再生。结果表明 ,悬铃木幼苗叶片在WPM 0 1mg·L- 1 IBA 5 0mg·L- 1 BA培养基上的愈伤组织诱导率和胚性愈伤组织诱导率分别为 10 0 %和 89 1% ;2 5℃的温度有利于胚性愈伤组织在WPM 0 5mg·L- 1 BA培养基上进行体细胞胚胎发生 ;黑暗低温处理 (10℃ ) 3d不但可以促进体细胞胚胎的发生过程 ,而且可以提高其发生频率。     

杂交落叶松体细胞胚胎发生的初步研究

本文报道杂交落叶松体细胞胚胎发生的初步结果。该实验系统和系列培养基在西加云杉、日本落叶松和马尾松的种胚和幼嫩组织的体细胞胚胎发生试验中有效。种胚和来源于２８￣４２天无菌实生苗下胚轴、子叶和胚根幼嫩组织不同位置切段接种到ＳＥＩＭ培养基，除ＣＴ和ＨＴ外，所有外植体愈伤组织（Ｃ）的诱导率为１００％；胚性愈伤组织（ＥＣ）的诱导率为３．３０％￣５８．２０％，胚性愈伤组织接种到ＳＥＭＭ培养基，经３￣５次继代培     

楸树不同类型胚性和非胚性愈伤组织的细胞学观察

以楸树幼嫩茎段为外植体,接种在诱导培养基上诱导初始愈伤组织,以初始愈伤组织诱导胚性和非胚性愈伤组织,分别利用扫描电镜和透射电镜对愈伤组织进行了观察。结果表明:不同类型愈伤组织在形态学和细胞学特性方面存在显著差异。III型白色愈伤组织I、V型褐色愈伤组织为非胚性愈伤组织;I型绿色愈伤组织、II型紫色愈伤组织可能为楸树胚性愈伤组织。为楸树体细胞胚胎发生提供了理论基础。     

具有不同胚胎发生及再生能力的橡胶愈伤组织其差异表达cDNA序列及组织学特性的鉴定

来自巴西橡胶树同一基因型的不同松散型愈伤组织系可能会具有不同的胚胎发生及再生潜力,但从外观上却很难对其加以区分。为了深入揭示不同愈伤组织系之间所存在的差异,我们对5个具有不同胚胎发生及再生潜力的愈伤组织系进行了组织及分子学比较研究。试验中我们采用差异显示（DD-RT）技术对诱导期间差异表达的基因进行了分析。在胚性再生型愈伤组织系（ER）诱导期间共鉴定出28个差异表达的cDNA。此外还发现,ER系中胚胎发生结节（胚性结节）的形成要早于胚性非再生型愈伤组织系（ENR）,而非胚性愈伤组织系（NE）中则根本不形成胚性结节。以上28个cDNAs中,有5个可用于诱导之前区分具有不同胚胎发生潜力的愈伤组织系,从而可以对橡胶树松散型愈伤组织的胚胎发生潜力作出提前判断。     

山杏体细胞胚胎发生及其组织学观察

为了建立山杏体细胞胚胎发生再生体系,以山杏茎尖为外植体,研究山杏体细胞胚胎发生及其主要影响因子。结果表明:山杏茎尖在MS+6-BA(0.5 mg/L)+NAA(0.2 mg/L)培养基中愈伤组织诱导率达100%,胚性愈伤组织增殖的最佳培养基为MS+6-BA(0.5 mg/L)+2,4-D(0.2 mg/L)+水解酪蛋白(0.5 g/L)。山杏体细胞胚胎发生过程中能明显看出球形胚、心形胚、鱼雷胚、子叶胚等阶段。     

外植体和基因型对泡桐体外植株再生的影响

利用叶片和茎段为外植体,研究了毛泡桐和白花泡桐胚性愈伤组织诱导、体细胞胚胎发生及植株再生情况。结果表明,白花泡桐叶片和茎段胚性愈伤组织诱导的最适培养基分别为MS+0.3mg/L NAA+14mg/L BA和MS+0.3mg/L NAA+8mg/L BA,毛泡桐叶片和茎段胚性愈伤组织诱导的最适培养基皆为MS+0.3mg/LNAA+17mg/L BA。从体细胞胚胎发育所需时间来看,2种泡桐叶片的体细胞胚胎发育能力均高于茎段。     

地锦体细胞胚胎发生研究

以地锦幼胚为外植体,接种在附加6 BA2mg·L-1及2,4 D0～4mg·L-1的改良B5培养基中诱导愈伤组织,愈伤诱发率0～100% 对诱导出的愈伤组织采用6 BA和2,4 D不同浓度组合的培养基进行继代,对能稳定继代的愈伤组织,以改良B5为基本培养基进行分化培养,采用L16(44)正交设计,研究6 BA、NAA、AC及LH四因素不同浓度组合对体细胞胚胎发生的影响。结果表明:适宜地锦幼胚体细胞胚胎发生的培养基为:愈伤组织诱导:改良B5 6 BA2 0mg·L-1 2,4 D2 0mg·L-1;愈伤组织继代:改良B5 6 BA2 0mg·L-1 2,4 D1 0mg·L-1;胚状体分化及萌发:改良B5基本培养基。胚状体诱发率33%,成苗率53%,移栽成活率85%。胚状体为外起源发生方式,经球形胚、心形胚、鱼雷形胚、子叶形胚等阶段发育成熟。     

滇楸体胚发生及生理生化特性研究

探讨了滇楸体细胞胚胎发生和发育过程中形态学和解剖学特征及变化,对其发生和发育过程中的一些生理生化特性进行了初步研究.结果表明:(1)滇楸非胚性和胚性愈伤组织在细胞形态和组织结构上差异明显,滇楸体胚起源于单个胚性细胞,经历了单细胞、多细胞、球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚各阶段.(2)在胚性愈伤组织和体细胞胚胎诱导形成及发育早期,3种抗氧化酶(SOD、POD和CAT)活性均提高,而在后期体胚成熟和萌发的过程中3种抗氧化酶的活性变化趋势差异明显.(3)碳、氮类营养物质在胚性愈伤组织内大量积累,为体细胞胚胎发生奠定能量和物质基础;在体胚发育的不同阶段,碳、氮代谢呈现明显的差异.     

杂交鹅掌楸体细胞胚胎发生研究

以杂交鹅掌楸幼胚为外植体,进行体细胞胚胎发生研究.比较了亲本基因型、发育阶段、培养条件、生长调节物质和渗透压等对体细胞胚胎发生的影响.结果表明在以1/2MS培养基为基本成分,添加2.0～3.0mg@L-12,4-D的培养基上能够成功诱导胚性愈伤组织.以蔗糖为渗透剂,提高渗透压有利于体细胞胚胎发生;以MS为基本培养基附加ZT 1.0～4.0mg@L-1对体细胞胚胎诱导最有效;ABA的使用能有效控制畸形胚的产生;基因型、幼胚发育阶段及光照条件对体胚发生起着重要作用.     

外源激素对巴西橡胶树体细胞胚胎发生的影响

橡胶种子的内珠被是难以发生体细胞胚胎的。和其它本本植物一样，橡胶树在体细胞胚胎发生上一般都认为是一个难题。本研究结果表明，当常规所用的３，４－二氯苯氧乙酸（３，４—Ｄ）及苄基氨基嘌吟（ＢＡＰ）量减少２—４倍，以及当材料在这些激素中的培养时间缩短时，愈伤组织的胚胎发生能力会有所增加，且不影响愈伤组织的发生。本试验中，有几个胚胎得以萌发，并获得小植株。我们的结论认为，培养基中生长素和细胞激动素的过量，甚至象３，４—Ｄ这种作用微弱的生长素的过量，以及延长在这些激素中的培养时间都会抑制愈伤组织胚胎发生的能力。     

‘西林3号’核桃体细胞胚胎诱导与增殖的影响因素

【目的】筛选最佳的‘西林3号’核桃体细胞胚胎诱导和增殖培养条件。【方法】通过进行不同消毒方法、不同外植体、不同采样时期、不同激素浓度配比、不同蔗糖与谷氨酰胺浓度处理,对核桃胚性愈伤组织的诱导情况进行研究,筛选最佳诱导条件;同时对比不同激素浓度对核桃体细胞胚胎增殖率的影响,筛选最佳增殖培养基。【结果】雄花(花药)、种子、幼胚的最佳消毒方法分别为70%乙醇15 s+10%NaClO浸泡4 min、70%乙醇30 s、70%乙醇5 min,培养4 d后的存活率高,污染率低。幼胚是诱导胚性愈伤组织的最佳材料,5月31日是最佳的采样时间,诱导率分别为(65.00±7.07)%和(85.83±1.17)%。以愈伤组织为材料时,诱导胚性愈伤组织的最佳激素浓度配比为改良DKW培养基添加1.0 mg/L 6-BA、2.0 mg/L KT、0.01 mg/L IBA,诱导率为(37.94±1.33)%。以愈伤组织为材料时,诱导胚性愈伤组织的最佳蔗糖质量浓度为30 g/L,诱导率为(82.67±0.94)%,谷氨酰胺不是诱导胚性愈伤组织的影响因素。体胚增殖的最佳激素浓度配比为改良DKW培养基添加0.5 mg...     

花楸树体细胞胚与合子胚的发生发育

利用花楸树人工控制授粉后的未成熟合子胚进行体细胞胚的诱导培养,通过石蜡切片、扫描电镜和透射电镜对合子胚和体细胞胚的发生发育过程进行组织、细胞观察。结果表明:1)体细胞胚发生进程与合子胚相似,均经历了球形期、心形期、鱼雷形期,最终发育成成熟胚;2)直接发生和间接发生在愈伤组织表面的体细胞胚均为单细胞起源,间接发生在愈伤组织内部的体细胞胚存在单细胞起源,同时还存在可能的多细胞起源;3)子叶和愈伤组织表面发生的体细胞胚在发育早期均具明显的胚柄,鱼雷形胚期胚柄退化;4)愈伤组织内部发生的体细胞胚没有胚柄;5)与合子不同,胚性细胞的第1次分裂为均等分裂;6)多细胞原胚周围降解的细胞具有细胞程序性死亡的形态特征。     

海南白花油茶花药再生体系的初步建立

适合本地种植的良种壮苗匮乏,是制约海南省油茶产业可持续发展的关键因素之一。为了通过花药体细胞胚发生途径来获得具主根的体细胞再生植株组培苗,从花粉发育时期的鉴别、初代愈伤组织诱导培养基和培养方式的筛选以及花药体胚植株的再生和移栽等方面进行探索,初步建立了海南白花油茶花药体细胞胚再生体系。结果表明:海南白花油茶未开花蕾的横径为1.19~1.30 cm时,花粉发育多处于单核靠边期,此期的花药是诱导花药胚性愈伤组织的合适外植体;适用于海南油茶花药胚性愈伤组织诱导的初代培养基为改良MS配以NAA和KT激素组合的培养基,适宜的培养方式为暗培养;花药胚性愈伤组织在NAA、BA和Zt激素组合的培养基上可再分化出体细胞胚和诱导体胚成熟。     

蒙古栎体细胞胚胎发生技术研究

为建立蒙古栎体细胞胚胎发生体系,以蒙古栎未成熟合子胚为外植体,通过不同种源、外植体的取材时间、诱导培养基配比、培养条件等筛选得到胚性愈伤组织,进而进行体胚增殖。结果表明:7月上旬是最佳的取材时期(合子胚大小约10 mm),蒙古栎合子胚在培养基MS+2,4-D1 mg·L~(-1)+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+水解酪蛋白0.5 g·L~(-1)中胚性愈伤组织诱导率可达85.7%,光照条件对胚性愈伤组织的诱导率影响不显著。不同种源对胚性愈伤组织的诱导率有显著影响。在培养基MS+NAA 0.5 mg·L~(-1)+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+水解酪蛋白0.5 g·L~(-1)中体胚增殖率最大72.3%,且培养4周时胚性愈伤组织状态最佳。     

长白落叶松胚性愈伤组织诱导及体细胞胚胎发生

【目的】以长白落叶松的未成熟合子胚为外植体,进行胚性愈伤组织的诱导、增殖培养及体细胞胚胎发生的相关研究,揭示影响长白落叶松胚性愈伤组织诱导的关键因素,并探讨继代培养过程中添加不同种类、浓度的生长调节剂对胚性愈伤组织增殖及体胚发生的影响。【方法】采集长白落叶松3个家系优良单株的种子,诱导胚性愈伤组织,比较外植体采集时间、家系、2,4-D浓度及基本培养基对胚性愈伤组织诱导的影响。诱导出的胚性愈伤组织继代于含不同种类、浓度生长调节剂的增殖培养基,通过体胚发生途径获得体细胞胚。选取发育正常的体胚进行萌发,待体胚生根后移栽。【结果】不同时间采集的未成熟合子胚,其胚性愈伤组织诱导率存在较大差别,授粉后63天的合子胚诱导率为5.61%,授粉后70天诱导率为22.35%,而授粉后80天未诱导出胚性愈伤组织;‘长77-22’、‘长77-37’和‘长73-50’3个家系胚性愈伤组织的平均诱导率分别为6.69%,11.17%和3.11%;2,4-D浓度对长白落叶松胚性愈伤组织诱导具有一定影响,在一定范围内胚性愈伤组织的诱导率会随2,4-D浓度升高而升高,当其浓度为1.5 mg·L~(-1)时胚性愈伤组织的诱导率最高,达到11.11%,而当2,4-D浓度超过1.5 mg·L~(-1)时,胚性愈伤组织的诱导率则开始下降;BM,MS,S培养基均能诱导出胚性愈伤组织,其中,BM培养基的诱导率最高,S培养基的诱导率次之,MS培养基的诱导率最低。胚性愈伤组织在含2,4-D 0.3 mg·L~(-1)、6-BA0.1 mg·L~(-1)及KT 0.1 mg·L~(-1)的BM培养基上增殖15天可获得相对较多的胚性愈伤组织,增殖率为345.93%;在含2,4-D 1.5 mg·L~(-1)、6-BA 0.5 mg·L~(-1)及KT 0.5 mg·L~(-1)的BM培养基上培养14天,再经诱导可获得较多的体细胞胚胎,每克愈伤组织平均诱导179.87个体胚,并且这些体胚的萌发率及植株再生率相对较高,分别为75.00%,66.67%;再生植株移栽成活率为27.08%。【结论】不同长白落叶松家系的胚性愈伤组织诱导率不同,散粉后70天的合子胚适合诱导胚性愈伤组织,基本培养基为BM,添加2,4-D 1.5 mg·L~(-1)。胚性愈伤组织长期继代在含高浓度生长调节剂的培养基上易丧失胚性,且增殖速度慢,但体胚的发生量及萌发率相对较高;适当降低生长调节剂浓度利于愈伤组织保持胚性及增殖,但体胚的发生量及体胚的萌发率有所下降;当培养基中生长调节剂浓度较低时,不利于愈伤组织的增殖,但仍能使其胚性长期保持;采用浓度为0.5 mg·L~(-1)的NAA代替0.15 mg·L~(-1)的2,4-D有助于胚性愈伤组织的增殖,并能在一定程度上提高体胚的萌发率。因此,可根据不同阶段的培养目的,选择添加不同种类和浓度生长调节剂的增殖培养基进行继代。     

黑松未成熟胚的体细胞胚胎发生和植株再生

以未成熟合子胚为外植体,建立黑松体细胞胚胎发生和植株再生体系。研究基本培养基、2,4-D和6-BA对胚性愈伤组织诱导的影响,探讨ABA和PEG对体细胞胚成熟及植株再生的影响。结果表明:在添加4mg·L-12,4-D+2mg·L-16-BA的DCR培养基上胚性愈伤组织诱导率为3.33%;在添加30mg·L-1ABA+25g·L-1PEG的培养基DCR上,每克愈伤组织体细胞胚数量达72个,体细胞胚的萌发率为63.8%、植株转化率为43.5%,高质量的黑松体胚能提高体胚萌发率和植株转化率,再生植株1个月移栽成活率为50%。该研究可为抗病黑松的快速大规模繁殖提供一条新途径。     

利用悬浮培养和培养基选择改善火炬松的体细胞胚胎发生和植株再生(英文)

三个基固型的火炬松成熟合子胚被培养在附加 8mg·L-12 ,4 D ,4mg·L-1BA ,4mg·L-1KT ,5 0 0mg·L-1水解酪蛋白和 5 0 0mg·L-1谷氨酰胺的愈伤组织诱导培养基上诱导愈伤组织 .来自于子叶、胚轴和胚根的愈伤组织在附加 1 6mg·L-12 ,4 D ,0 8mg·L-1BA和 0 8mg·L-1KT的愈伤组织增殖培养基上培养 9周后 ,可获得 16 9%的胚性愈伤组织 .通过建立胚性细胞悬浮系和研究ABA、PEG和活性炭对体细胞胚成熟的促进作用 ,优化的体细胞胚胎发生体系被建立 .71棵再生小苗被用于移栽试验 ,2 3棵小苗在田间移栽成活     

刺槐未成熟合子胚的体细胞胚胎发生和植株再生

以刺槐不同胚龄的未成熟合子胚为外植体,采用混合正交试验设计,研究幼胚胚龄和不同外源激素种类及质量浓度对刺槐胚性愈伤组织的诱导和体细胞胚分化、萌发的影响.结果表明:开花后8周(55天左右)是胚性愈伤组织和体胚诱导的最佳外植体取材时期;MS+2,4-D 5.0 mg·L-1 +BA0.5 mg·L-1是诱导胚性愈伤组织的最佳培养基,出愈率最高为95.42％±0.02％;MS +NAA0.5 mg·L-1 +BA0.5 mg·L-1+谷氨酰胺250 mg·L-1+水解酪蛋白500 mg·L-1是体细胞胚诱导和分化的最佳培养基,直接体细胞胚发生率最高为92.40％±0.12％,通过愈伤组织诱导体细胞胚发生的频率最高为90.73％ ±0.49％.一旦形成球形胚,将培养物转接到不含任何生长调节剂的MS培养基上,体细胞胚经成熟萌发可进一步形成完整小植株.     

国外竹子组织培养研究的现状与前景

由芽,茎尖或分生组织培养直接发育出新梢的报导在多年生单子叶植物中还很有限。然而,体细胞胚胎发生已为竹的大量繁殖提供了一条有效途径。本文从外植体选择,培养基类型,生长调节剂的应用以及愈伤组织的诱导,增殖与形态发生等方面以80年代以来的最新资料综述了国外植物组织培养在竹子上的应用现状及其发展趋势。     

火炬松胚性愈伤组织诱导和植株再生的研究

火炬松胚性愈伤组织诱导和植株再生的研究唐巍欧阳藩（中国科学院化工冶金研究所生化工程国家重点实验室北京１０００８０）郭仲琛（中国科学院植物研究所北京１０００９３关键词火炬松,体细胞胚胎发生,植株再生本文于１９９６年１０月２８日收到。国家“８６３”资...