匀浆提取喜树叶中喜树碱和羟基喜树碱工艺研究

以喜树叶为原料，研究了不同条件下从喜树叶中匀浆提取两种抗肿瘤生物碱即喜树碱和羟基喜树碱的工艺特点。优化的工艺参数为：提取溶剂为体积分数55％的乙醇，匀浆时间为8min，料液比为1：15（g：mL）。在此工艺条件下，喜树碱和10-羟基喜树碱的提取率分别为0．639‰和0．437‰。匀浆提取喜树碱和羟基喜树碱的提取率高于其他提取方法如：超声提取、回流提取、水浴振荡提取。结果表明，匀浆提取具有得率高、省时间等方面的优势，是一种高效提取喜树碱和羟基喜树碱的方法。图3表1参8。     

优化喜树果中喜树碱和10-羟基喜树碱的匀浆提取工艺

采用匀浆提取的方法从喜树果中提取喜树碱和10-羟基喜树碱，考察乙醇体积分数、匀浆时间和液料比等因素对提取率和纯度的影响，并通过响应面法进行工艺优化，分别得到以喜树碱、10-羟基喜树碱的提取率和纯度为响应值的回归方程，进而获得最佳工艺条件为乙醇体积分数52．41％；匀浆时间2．93min；液料比11．11（mL：g）。最佳条件下的验证实验表明：喜树碱提取率为0．0923％，浸膏中喜树碱的纯度为1．0633％，与模型值相对偏差分别为0．75％和0．88％；10-羟基喜树碱提取率为0．0094％，浸膏中10-羟基喜树碱的纯度为0．1078％，与模型值相对偏差分别为0．53％和0．78％，说明回归方程可以很好地预测实验结果。     

喜树种子中喜树碱和10-羟基喜树碱高效液相色谱法分析

建立了一种简便、快速、准确的测定喜树(Camptotheca acuminata Decne.)种子中喜树碱和10-羟基喜树碱含量的高效液相色谱分析方法;色谱条件为:采用日本KYA HIQ sil C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流速为1 mL/min,梯度洗脱程序为:在前 15 min流动相乙腈 -水的体积比由10 %线性增加至40%,在随后的3 min乙腈 -水的体积比线性降至10 %并保持恒定3 min,在21 min时停止该程序.检测器为二极管阵列检测器,喜树碱定量分析波长254 nm,10-羟基喜树碱定量分析波长266 nm,进样量10 μL.样品制备以60 %的乙醇作溶剂,在60 ℃下超声波提取喜树种子50 min.利用以上方法分别测定了喜树种子胚乳、胚轴、子叶和种皮中的喜树碱和10-羟基喜树碱含量,喜树碱的含量是胚乳＞胚轴,子叶＞种皮,10-羟基喜树碱的含量是胚乳＞种皮＞胚轴＞子叶.     

高效液相色普法测定羟基喜树碱含量方法的研究(英文)

以高效液相色谱法作为羟基喜树碱含量检测方法,系统讨论了用超声法从喜树果实中提取羟基喜树碱用以制备分析样品的方法。采用HIQ sil C18柱(4.6×250 mm),流动相为乙腈:水(3:7,V:V),流速1 mL/min,检测波长266 nm。确定的最佳超声提取条件为:以60%乙醇为提取溶剂在60℃提取50 min。图3表1参10。     

T-羟基喜树碱

从８０年代，我们就对中药抗癌进行研究，并与国内外抗癌药物进行广泛的对比试验，筛选并证实了从珙桐科植物喜树中提取到的微量生物碱，具有显著的抗癌活性，并被批准应用临床。在临床应用中发现，虽然喜树碱抗肿瘤作用强，但毒性也较大，因而没有广泛推广使用。 近几年来，我     

外源ABA对渗透胁迫下喜树幼苗生理生化指标的影响

为给喜树栽培和利用提供理论依据,研究了外源ABA对渗透胁迫下喜树幼苗几项生理生化指标的影响。结果表明:渗透胁迫导致喜树幼苗内脯氨酸(Pro)含量增高,增施外源ABA其脯氨酸含量较渗透胁迫下低;渗透胁迫下,喜树幼苗内丙二醛(MDA)含量持续上升,外源ABA处理的喜树幼苗内丙二醛含量呈现先上升后下降的趋势;渗透胁迫使喜树幼苗的超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性持续下降,外源ABA的使用可以减缓这种下降趋势;渗透胁迫使喜树幼苗内过氧化物酶(POD)活性呈现先上升后下降的趋势,外源ABA可以提高过氧化物酶活性;渗透胁迫使喜树幼苗内喜树碱(CPT)含量上升,外源ABA处理不能显著提高喜树幼苗内喜树碱含量,而渗透胁迫导致喜树幼苗内10-羟基喜树碱(10-OH CPT)含量下降,外源ABA的使用加剧了下降趋势。     

喜树与喜树碱开发利用进展

自发现喜树中的喜树碱具有抗癌活性以来,科技工作者对喜树和喜树碱进行了较为系统的研究。对喜树的研究,主要体现在对喜树生长发育的基本规律、树体中喜树碱及其类似物的含量及分布规律、部分环境因子对树体内喜树碱含量的影响、组织培养与悬浮培养技术等方面的研究,指出收获幼嫩枝梢是实现提取原料快速生产的一条有效途径。而对喜树碱的研究则集中在对喜树碱的抗癌机理、分子结构、结构与抗癌效果、生产工艺等方面,人工合成也取得了可喜的进展,但一直没有得到左旋的喜树碱。以喜树碱及其类似物为基础的药物开发已进入第３代,临床试验和效果观察更是成绩卓著。本文对几十年来国内外上述几方面的研究进行了综述,并对未来的研究方向进行了展望。     

不同施磷水平对喜树幼苗生长及喜树碱积累的影响

采用盆栽施肥的方法,研究了不同施磷水平(对照0 kg P·hm-2、低磷42 kg P·hm-2、中磷84 kg P·hm-2、高磷168 kg P·hm-2)对喜树当年实生幼苗生长及次生代谢物喜树碱积累的影响。结果表明:随着施磷水平的增加,喜树幼苗的苗高及叶、茎、根的干物质量均增加,且各施磷水平幼苗叶、茎、根的干物质量差异显著(p<0.05)。在不同磷素水平下,幼苗叶、根、茎中的喜树碱含量均在低磷水平时出现最大值,并且低磷水平与对照间喜树碱含量差异显著(p<0.05)。随着磷用量的增加,喜树全株及叶、茎的喜树碱总量持续增加,但喜树全株和叶在高磷与中磷水平间差异不显著。根中喜树碱总量在不同磷素水平差异显著,在中磷水平最高。由结果可知:磷可以促进喜树幼苗中喜树碱的合成,适当的低磷胁迫可以增加喜树幼苗中喜树碱含量。培育喜树碱原料林时,适宜的施磷水平应为中磷水平,幼苗喜树碱总量主要取决于喜树生物量的积累。     

大孔吸附树脂分离喜树碱的研究

研究了6种大孔吸附树脂对喜树碱的吸附和解吸附的特性，筛选出一种对于喜树碱来说吸附和解吸附性能力较好的树脂，并用不同比例的氯仿、乙醇混合液作为洗脱液，确定了最佳比例。其结果表明，AB-8型树脂对喜树碱的吸附及解吸附能力较强，达到16．84mg CPT／g，氯仿／无水乙醇（1：2）时洗脱效果最好。     

加工及干燥方式对短小蛇根草活性成分的影响

为进一步推进短小蛇根草Ophiorrhiza pumila在喜树碱产业上的应用，本研究利用高效液相色谱法、紫外可见分光光度法，分析了加工方法(杀青、不杀青)及干燥方式(晒干、阴干、烘干、真空冷冻干燥、真空干燥)对短小蛇根草中活性成分(喜树碱、总黄酮、粗多糖)的影响。结果表明，加工方法及干燥方式均对短小蛇根草活性成分影响较大，喜树碱在晒干后含量最高(1.90 mg·g^-1)，总黄酮含量在真空干燥后含量最高(1.38 mg·g^-1)，粗多糖在冷冻干燥后含量最高(50.01 mg·g^-1)，均显著高于其他处理组(P<0.05)；杀青会导致喜树碱含量普遍降低，总黄酮含量显著提高，粗多糖含量普遍降低。在实际生产中，以晒干作为短小蛇根草的首选干燥方式，干燥前不宜采取杀青处理。     

喜树种源苗期性状遗传变异研究

在浙江湖州对来自广东、云南、福建等10个省的10个喜树种源进行种源试验,对1年生喜树苗期性状分析研究,结果表明：喜树种群内存在丰富的遗传变异,10个参试种源在苗高、地径、各器官生物量及叶片喜树碱含量、单株叶片喜树碱含量等指标上都存在显著或极显著的差异,其广义遗传力为0．527～0．989,这些差异主要受遗传因素制约;利用单株叶片喜树碱产量性状对药材喜树种源进行选择,初步筛选出江西南昌种源作为叶用优良种源,其单株叶片喜树碱产量超过对照浙江临安种源119．39％,单位面积喜树碱产量的遗传增益可望达到105．42％,能取得较理想的结果。     

Optimization of ultrasound-assisted extraction of camptothecin from <Emphasis Type="Italic">Camptotheca acuminata</Emphasis> seeds

Naturally occurring camptothecin(CPT) is an important source of chemotherapeutic agents.The extraction from Camptotheca acuminata is still the main approach to obtain CPT compared with total synthesis.In the present study,ultrasound-assisted extractions(UAE) of CPT from C.acuminata seeds with alkaline solutions were investigated and CPT yield were determined by High Performance Liquid Chromatography.The conditions of alkaline species and concentrations,extraction time,extraction temperature and ultrasonic power were optimized.Results show that both Na3PO4 and Na2CO3 solutions gain good extraction yields,whereas Na3PO4 solution has stronger basicity and need higher concentration than Na2CO3 solution does,thus aqueous Na2CO3 is more beneficial for the extraction.The optimal condition was ultrasonically extracted with 0.5% aqueous Na2CO3 at 50°C and ultrasonic power of 400 W for 60 min.Comparing with UAE with ethanol,the extraction with 0.5% Na2CO3 solution achieves higher yield.Moreover,aqueous Na2CO3 as a solvent has various advantages including non-toxicity,inflammable,non-corrosive and low cost,which ensure this UAE method is a superior method with high utilizing prospect.     

化学及生物学方法合成角鲨烯研究现状

对角鲨烯的化学合成及生物学合成方法研究现状进行了较全面的总结和评述。到目前为止，研究报道的化学合成方法或路线有10余种，主要可归类为基于冗长而复杂的化学反应路线和基于金合欢基衍生物偶联反应两大类，其中从金合欢基衍生物出发用偶联反应合成角鲨烯可以说是一种有效的方法，但反应催化剂的选择非常重要。生物合成则主要采用在特殊培养基上进行细菌培养或发酵的方法，这些方法在菌种和目的物的得率等方面都还不够理想。因此这些合成角鲨烯方法的工业化尚有一定困难。     

Distribution of anticancer drug camptothecin in Nothapodytes foetida

The topoisomerase I-DNA inhibitor alkaloid camptothecin has been evaluated from the various parts of Nothapodytes foetida. The bark contained 0.27% dry wt of camptothecin and 0.11% dry wt 9-methoxycamptothecin followed by the root, stem, and leaves. Immature seeds contained higher concentrations of camptothecin (0.32% dry wt) and 9-methoxycamptothecin (0.16% dry wt) compared to mature seeds. Various parts of mature and immature seeds were analysed to determine the content of the major alkaloids. Zygotic embryos of immature seeds contained 0.11% dry wt of camptothecin and 0.04% dry wt of 9-methoxycamptothecin. The highest concentration of camptothecin (0.42% dry wt) and 9-methoxycamptothecin (0.18% dry wt) were accumulated in the cotyledons of immature seeds.     

弱光条件下光质对喜树生理生化指标的影响

为给喜树栽培提供理论依据,对弱光环境下红、黄、蓝、绿等光质对喜树幼苗叶绿素含量、超氧化物歧化酶活性、丙二醛、游离脯氨酸和喜树碱含量的影响进行了研究。结果表明:绿光使叶绿素含量增加,而其它单色光使叶绿素含量降低,减少部分主要是叶绿素b,叶绿素(a/b)比值升高;与白光相比黄光使叶片中的超氧化物歧化酶活性升高,而其它3种光条件下的超氧化物歧化酶活性降低;红光使丙二醛含量升高,同时使叶内游离脯氨酸含量持续上升,其它3种光对游离脯氨酸和丙二醛含量影响不大;与白光相比,绿光和红光可使叶片中喜树碱含量增加,而黄光和蓝光不能引起喜树碱含量的增加。弱光条件下不同光质对喜树幼苗生长形成了胁迫,光质对其初生和次生代谢均产生了一定的影响。     

The effects of different nitrogen sources on camptothecin content and related gene expression in Camptotheca acuminata seedlings

Camptotheac acuminata Decne is a unique tree species in China with an important secondary metabolite,camptothecin(CPT),used in the treatment of cancer.Nitrogen(N) is an important element that affects plant growth and the accumulation of CPT.Reports on the effect of N on CPT synthesis from a genetic perspective are scarce.To explore the effects of different N sources and levels on CPT synthesis in C.acuminata,two-year-old seedlings were fertilized with different concentrations of pure ammonium sulphate,source of ammonium N(NH_4~+-N),and potassium nitrate for nitrate N(NO_3~--N).Concentrations of 2.5,5,7.5,and10 g pot~(-1) NH_4~+-N and NO_3~--N were used.The results showed that 7.5 g NH_4~+-N and NO_3~--N treatments were best for growth and fresh weight of leaves.Compared with the other treatments,the CPT content,tryptophan synthase and tryptophan decarboxylase activities,and expression of the CaTSB and CaTDCl genes under the 2.5 g NH4+-N and NO_3~--N treatments peaked significantly at 30 days.However,the expression of CaTDC2 surpassed that of the other two genes at 60 days.Therefore,compared with NH4+-N source,the NO_3~--N source was more beneficial for growth,and NO_3~--N was better for CPT yield.Consequently,leaves of C.acuminata treated with 2.5 g NO_3~--N could be harvested after 30 days to obtain maximum CPT content.CaTDC1 is more closely linked to CPT synthesis.The results of this study improved the production of CPT in C.acuminata via fertilization.     

喜树碱在喜树体内分布及在有害生物防治上的应用

喜树碱为重要的抗癌药物和植物源杀虫剂,主要存在于珙桐科的喜树植株体内。该文从季节性、植株组织、产地、栽培密度及环境胁迫等方面分析影响喜树碱在喜树植株中的分布情况,并对其作为杀虫剂和杀菌剂的使用情况进行了综合阐述。     

昆虫性信息素人工合成技术研究进展

探索和研究害虫防治的新途径、新技术, 其中利用昆虫激素, 特别是利用昆虫性信息素进行害虫防治的研究正日益受到人们的关注和重视。文中从昆虫性信息素的化学成分、人工合成等方面综述了昆虫性信息素的研究进展, 并介绍几种常用的昆虫性信息素合成方法, 以期为昆虫性信息素的科学研究和最佳合成方法探索提供理论参考。