无患子总皂苷减压提取工艺优化及其除草活性研究

以水为提取溶剂,采用减压提取法从无患子果实中提取总皂苷,通过分光光度法与超高效液相色谱法测定无患子总皂苷含量,在单因素试验基础上进行正交试验优化提取工艺,无患子总皂苷提取的最佳工艺条件为:提取温度60℃、提取时间1 h和料液比1∶14(g∶mL)。该条件下分光光度法测定无患子总皂苷的得率为15.34%。采用水琼脂培养基法测定无患子提取物的除草活性,结果表明:无患子提取物能有效抑制靶标植物红三叶的根系生长,且对红三叶根系的抑制率与无患子总皂苷含量呈正相关,当无患子总皂苷为15.34%时,其除草半数有效质量浓度(EC₅₀)为0.116 g/L。经薄层色谱化学显色定性分析,初步判断除草活性成分为三萜皂苷类化合物。     

浸种处理下无患子苗期生长差异分析

以普通母树上采摘的无患子种子为试验材料,对其进行9种不同的浸种处理,即不同温度的温水（40℃、50℃、60℃）、不同浓度CuSO4+H2SO4（20%、30%、40%）溶液和HCl溶液（3%、5%、8%）,探讨不同浸种方式和水平对无患子幼苗生长的影响。结果表明：温水浸种处理下无患子幼苗的生长表现较好,40℃温水浸种明显提高幼苗苗高的生长,50℃浸种处理次之;60℃温水浸种处理对提高无患子幼苗地径生长速度在9组浸种处理中表现效果最为良好;CuSO4+H2SO4溶液和HCl溶液对无患子的苗期生长影响差异显著。综合比较,温水是促进无患子幼苗生长的最佳浸种处理方法。     

响应面优化无患子皂苷超声辅助提取工艺

采用超声辅助提取法从无患子果皮中提取无患子皂苷,通过单因素试验考察了乙醇浓度、提取时间、料液比以及提取次数4个因素对无患子皂苷得率的影响,并采用响应面法确定无患子皂苷的最佳提取工艺条件为:乙醇体积分数82.2%、提取时间33.75 min、料液比1:28.9、提取次数4次,在此优化条件下无患子皂苷的理论提取率可达到21.52%。依实际试验情况,将其修正为乙醇体积分数82%、提取时间34 min、料液比1:29、提取次数4次,经验证此条件下无患子皂苷提取率为21.48%,与理论值较为接近,表明采用响应面法分析优化无患子皂苷超声辅助提取工艺的方法可行。     

山核桃外壳单宁提取的工艺条件研究

用有机溶剂法从山核桃外壳中提取单宁,不同的溶剂,不同的温度,不同的提取时间,不同的固液比会影响单宁的提取率,本文采用L9（43）正交实验,锌离子络合滴定法测定提取液中的单宁含量,实验结果表明提取溶剂为水,浸提时间为12 h,温度为50℃,溶剂与溶质比为6∶1为最佳提取工艺。     

无患子总DNA提取方法研究

针对无患子富含多酚、多糖、蛋白质及其他次生代谢物质的特点,以无患子叶片为材料,分别采用改良的CTAB法和CTAB与SDS相结合法提取不同种源无患子的总DNA。结果显示,改良的CTAB法提取的总DNA,得率较高,纯度好,可用于酶切、PCR扩增等后续试验,并能获得清晰、稳定的扩增产物。而采用CTAB与SDS相结合的方法得到的基因组DNA效果不稳定,无法检测出DNA。改良的CTAB法具有简单、经济的特点,可用于无患子总DNA的提取,成功地进行SRAP分子标记分析,为研究无患子遗传资源多样性奠定基础。     

无患子的研究现状及其开发利用

无患子是广泛分布于我国南方的一种乔木,具有十分广泛的利用价值.对无患子的生物学特性、繁育技术、栽培管理、化学成分及其分离提取技术等方面的研究现状进行总结.综述了其在医药、日化、生态环保等方面的应用及在其他领域的发展前景.指出当前在无患子的研究中存在的问题,提出应在良种培育、栽培管理技术、无患子皂苷(包括组成、分离提取技术、产品研发、检测方法等)及无患子的综合开发利用等方面开展更深入研究的建议.     

无患子不同苗龄苗木造林初期效果分析

采用苗龄1～4年生无患子苗木进行了造林对比试验,并且在林龄7年时分别对无患子的保存率、地径、冠幅、霜冻受害情况进行了调查,结果表明：采用苗龄4年生无患子（造林后3年后调查）的平均保存率、平均地径最高,分别为97．3％,5．9cm ;平均冠幅以苗龄3年生（造林后4年后调查）的无患子最大,为3.8m。霜冻受害率以苗龄4年生无患子最低,为2.9％。     

无患子种仁油提取工艺优化及其理化性质研究

以无患子种仁为材料,采用单因素和正交试验方法优化无患子种仁油的提取工艺;采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)法鉴定无患子种仁油的主要成分,并分析其种仁油的理化性质。结果表明,最优工艺条件为提取时间15min,提取温度70℃,料液比1︰15和粒径为0.3～0.4mm,在此条件下无患子种仁的油脂得率为45.23%;各因素对种仁油得率的影响大小依次为时间温度料液比粒径。分析表明无患子种仁油主要由C_(16)～C_(20)的脂肪酸组成,其主成分为油酸、顺-11-二十碳烯酸、花生酸、亚油酸。无患子种仁油的皂化值为190.24mg/g、酸值为6.75mg/g、碘值为107.70g/100g、DPPH清除率为69.29%,其理化性质优良。该工艺提取效果好,且油脂理化性质优良,适用于无患子种仁油提取。     

国内外无患子属种质资源研究进展

无患子属（Sapindus L.）种质资源是无患子产业发展的基础,种质资源研究可为探讨无患子属的起源、进化、分类、资源保护与利用、良种选育、高效栽培等提供科学依据和基础。文中综述了国内外无患子属分类、分布及亲缘关系,种质资源的收集、保存与评价,种质资源多样性等方面的研究进展,得出如下结论:1）世界上无患子属树种共13种,我国分布4种1变种;2）我国多个研究团队收集、保存无患子属种质资源近1 000份,以假种皮皂苷、种子脂肪酸利用为目标,筛选评价出性状优异的9个种源、7个家系和54株优树;3）无患子种质资源在表型、假种皮皂苷、种子脂肪酸、遗传等方面多样性丰富,并受环境因子极大的影响,根据遗传多样性分析推测我国无患子起源于自然分布区中部并向四周扩散。研究认为,目前研究仍存在种质资源收集不足、缺乏对该属树种系统研究和无优良品种推出等亟待解决的问题,提出应加强无患子属分子生物学基础研究、以居群为单位加强无患子属种质资源收集和评价力度、加强良种选育和高效培育技术以及国际合作研究等建议,以期为无患子产业可持续发展提供有力支撑,促进无患子属种质资源的开发利用。     

无患子景观品种选择与种质资源收集保存方法研究

通过对福建省21个县（市的）634株无患子种质资源观测和调查,结果表明无患子树种在景观性状上个体差异较大,存在着品种选择的基础.根据调查结果,制定出无患子景观品种选择标准,并开展选优,选出65个优树,采用无性系收集和家系收集两种方法对优树材料进行收集,建立无性系收集区和家系收集区,为品种选择、遗传改良提供基础种质材料.     

无患子属种质资源种实性状变异及综合评价

【目的】对我国及越南无患子属3种1变种的天然种质资源进行综合评价并定向筛选最优种质,为无患子属良种选育提供理论支撑和选育材料。【方法】基于我国14省(市、自治区)及越南1地区的无患子、川滇无患子、毛瓣无患子及石屏无患子共200份无患子属种质资源,针对20个种实性状,利用相关性、聚类和主成分分析等统计方法,分析种实性状变异,量化评价各种质。【结果】 1)无患子属种实性状变异系数(CV)在5.46%~38.19%,平均变异系数为17.42%,以果皮皂苷质量分数(CV=38.19%)、种仁百粒质量(30.23%)和果皮百粒质量(30.29%)变异较大,果型指数(5.46%)和种型指数(5.70%)变异较小。种实性状多样性指数在1.47~2.04之间,平均多样性指数为1.95。2)果实百粒质量与果皮百粒质量( r^2=0.927)、种子百粒质量(0.768)呈极显著正相关;种子百粒质量与种壳百粒质量(0.863)、种仁百粒质量(0.635)呈极显著正相关,而油脂质量分数与果皮皂苷质量分数(-0.382)呈极显著负相关。3)聚类分析将种质划分为3大类群,类群Ⅰ为小果型,类群Ⅲ为中果型,类群Ⅱ为大果型。无患子主要属于类群Ⅰ,川滇无患子、毛瓣无患子、石屏无患子主要属于类群Ⅱ、Ⅲ。类群Ⅱ集中分布于贵州、云南区域。4)针对无患子产业油用、皂用及综合利用开展主成分分析,筛选出3类无患子属优良种质各10份,主要为无患子、毛瓣无患子种质,综合利用优良种质较平均水平增益36.85%。【结论】无患子属果皮皂苷质量分数、种仁百粒质量和果皮百粒质量为代表的产量指标变异幅度最大,为无患子良种选育提供了丰富的资源和极大的空间;无患子属对皂苷产物积累过程投入的增加要以减少对油脂积累的投入为代价,这体现了无患子属在特定生态环境中的权衡策略;筛选出油用、皂用及综合利用3类各10份无患子属最优种质,普遍分布于云南、贵州区域,推测这些区域拥有更适合发展无患子产业的优良种质和环境条件。     

Genetic diversity and association analyses of fruit traits with microsatellite ISSRs in Sapindus

Sapindus mukorossi Gaertn. and S. delavayi Franchet are among the most valuable species in the genus Sapindus for their commercially exploitable plant oils and chemicals. However, few studies have addressed genetic variation and improvement for either species. We evaluated the genetic diversity of germplasm from selected plus trees within a wide region and established the relationship between fruit traits and molecular markers. An association analysis based on inter-simple sequence repeats(ISSRs)provided a genetic basis for studies of fruit traits. A total of 247 loci were detected by scanning 61 trees of S. mukorossi and S. delavayi using 16 ISSR markers. Genetic diversity parameters were estimated for selected superior trees(or germplasm) and S. mukorossi and S. delavayi were categorized into two main groups, as well as into four groups within S. mukorossi. An association analysis between the ISSR markers and 14 fruit traits used the TASSEL MLM model. A genetic structure analysis differentiated S.mukorossi and S. delavayi. Eighteen ISSR loci associated with 13 fruit traits(P<0.005) were identified, with 13, 1,and 4 loci associated with seed oil production, fruit saponin production, and fruit quality, respectively. Using this information, a core collection was selected with adequate genetic diversity and good seed oil characters. Our results demonstrate the feasibility of effectively estimating fruit trait associations in Sapindus using ISSR markers, and the method is applicable and valuable for select germplasm conservation. The markers obtained in this study are potentially useful for molecular-assisted breeding of Sapindus spp.     

Screening of Sapindus germplasm resources in China based on agro-morphological traits

Sapindus L.species are widely cultivated for biodiesel,biomedical,and biochemical raw materials in southern China.However,yields fluctuate widely due to the lack of high-yielding,high-quality,stable cultivars.There-fore,the objectives of this study were to evaluate three species and one variety among 149 nationwide Sapindus species and screen for elite accessions which would serve as Sapindus breeding materials.Accessions were evaluated on 19 agro-morphological traits by correlation analysis and principal component analysis.These displayed substantial diversity and a broad range of economic traits.In particular,accessions of Sapindus mukorossi and Sapindus rarak had more variation in economic traits than Sapindus delavayi and Sapindus rarak var.velutinus.Increased saponin accu-mulation may be achieved at the cost of seed oil production.Thirty elite accessions for oil and saponin production,and for comprehensive utilization were screened and accessions no.80,110,and 112 had significant potential to produce high yields.These elite accessions will facilitate the iden-tification of genetic determinants of valuable traits and the effective utilization of trait variability in Sapindus breeding.     

无患子扦插育苗试验

采用不同季节、不同生根剂种类及浓度、不同基质进行无患子扦插育苗试验,结果表明:以春季无患子树液未萌动前采集1年生硬枝为插穗,用黄心土∶粗河沙∶草木灰(按1∶1∶1混合)为扦插基质,用ABT1号生根粉200 mg.kg-1浸泡插穗2h,扦插的成活率、抽梢率、抽梢长度最高,分别达90.8%、99.7%、15.2 cm。     

Biogeographic divergence in leaf traits of Sapindus mukorossi and Sapindus delavayi and its relation to climate

To explore differences in leaf morphology between Sapindus mukorossi and Sapindus delavayi,and how the environment might drive these differences,80 germplasm samples from the Sapindus germplasm nursery in Fujian Province were selected.The study revealed a wide variation and diversity in 16 germplasm traits,both within and between species grown under the same conditions.On average,the relative contribution of intraspecific variability to total variability was more important(83%) than the relative contribution of interspecific variability(17%).PERMANOVA analysis showed differences in leaflet thickness,length,perimeter,length to width ratio,and leaf hairs or trichome density.Correlation analyses between leaf morphological traits and environmental variables indicated that leaves tended to be larger,longer,and thicker in wetter,warmer,and low-altitude conditions.Our analysis of the relationship between climate and leaf morphology revealed that S.mukorossi had a greater sensitivity to climate variation,particularly in response to mean temperatures of the coldest and warmest seasons,which led to differences in leaf traits and the distribution of the two species.These findings contribute to the understanding of leaf morphology variations in S.mukorossi and S.delavayi,and provide a basis for the collection of Sapindus germplasm resources,their cultivation and use to help address climate change.     

无患子繁育技术研究进展

笔者对无患子播种、扦插、嫁接和组培繁殖技术的研究进展进行总结,为相关科技工作者提供参考。     

无患子实生苗苗期生长动态研究

在福建省顺昌县开展无患子播种育苗试验,重点研究了其苗期生长动态,掌握无患子在一年中的生长特性,研究结果表明:无患子实生苗的苗高生长高峰期在6月到9月,其中以7月到8月生长最快,生长量占总生长量的41.8%,进入9月后苗高生长放缓;地径增长旺盛时期在8月至9月,生长量占总生长量的20%左右。进入10月后,无患子实生苗的生长逐渐以增粗为主,11月后,苗高生长基本停止。复叶片数的变化趋势与苗高基本一致,即生长高峰期出现在7-8月间。11月后幼苗陆续落叶,进入休眠期,因此,复叶片数出现生长曲线出现回落现象。同时,单株最大小叶叶长和叶宽的增长高峰期也分别出现在7月和8月。无患子实生苗从8月上旬开始有单株萌发侧枝, 8-10月单株侧枝数增加较为迅速,11月后侧枝基本停止萌发。但侧枝基径和枝长的生长并未有明显放缓或停滞。说明,此时的地上部分物质积累主要用于侧枝的生长。     

无患子嫁接试验研究

探索无患子的最佳嫁接时间及嫁接方法:于2006年1月至4月,采用了四种嫁接方法进行嫁接试验。结果表明:不同嫁接时间的成活率差异显著,2～3月最适宜嫁接;不同嫁接方法对成活率的影响较显著,劈接效果最好,成活率高。     

无患子单芽低位嫁接技术研究

对无患子进行了单芽嫁接技术试验。结果表明:不同季节和嫁接方法对无患子的嫁接成活率、抽梢率和抽梢长度的影响极为显著。以春季采用片芽腹接技术嫁接的平均成活率、抽梢率、抽梢长度最高,分别为98.3%,96.7%和64.4cm。