海南省番石榴根结线虫病病原的种类鉴定及其寄主范围的测试

对源自海南省3地侵染番石榴的9个根结线虫群体进行了形态观察和同工酶分析,对4个代表性群体在10种常见经济作物15个品种上的繁殖力进行了测试.同工酶鉴定结果表明,病原线虫为象耳豆根结线虫(Meloidogyne enterolobii).生物测试发现或证实:携带Mi基因的抗性番茄以及菜豆、豇豆、茄子、黄瓜、西瓜、辣椒、烟草为供试象耳豆根结线虫群体的高度适宜寄主,大豆为低度适宜寄主,棉花为非寄主.寄主范围的测试结果提示,象耳豆根结线虫可潜在地对农业生产造成巨大的经济损失.     

海南岛茄果类蔬菜根结线虫种类鉴定

应用形态学、同工酶分析及mtDNA分析等鉴定方法对采自海南岛12个市县的14个茄果类根结线虫进行鉴定,结果发现14个种群中,6个样本为象耳豆根结线虫(Meloidogyne enterolobii),2个样本为象耳豆根结线虫(M.enterolobii)和南方根结线虫(M.incognita)的混合种群,另外6个样本为常见的南方根结线虫(M.incognita)。所有14个种群中象耳豆根结线虫的数量跟南方根结线虫的种群数量相同,证明象耳豆根结线虫种群已得到进一步扩散,其对海南冬季瓜菜生产特别是茄果类蔬菜的危害日趋严重,应引起广泛注意。     

福建省象耳豆根结线虫的鉴定及分子检测

从福建省闽南地区的胡萝卜、辣椒和空心菜根系发现一种线虫,通过形态鉴定,结合ITS1-5.8S-ITS2 r DNA区、28S D2-D3区、COⅡ/IrRNA线粒体基因和线粒体DNA 63 bp重复区序列分析等分子生物学方法,将其鉴定为象耳豆根结线虫;采用特异性引物Me-F/Me-R对不同田块的象耳豆根结线虫种群进行进一步检测,结果表明,空心菜为象耳豆根结线虫的新寄主;受侵染的番石榴可能是闽南地区蔬菜象耳豆根结线虫病的重要初侵染源.由此说明,象耳豆根结线虫已经成为福建省蔬菜上的重要病原物,对蔬菜产业发展具有潜在重大威胁.     

广东省和海南省象耳豆根结线虫的鉴定

运用线虫比较形态学、结合同工酶、mtDNA-PCR、rDNA-IGS-PCR技术,对采自中国广东和海南2个省的根结线虫进行鉴定.在海南省定安的木豆(Cajanus cajan)、海南省海口的木豆和番石榴(Psidium guaja-va)、广东省番禺的辣椒(Capsicum annuum)和南瓜(Cucrbita mosechata)及广东省遂溪的豇豆(Vigna sinensis)上发现象有耳豆根结线虫(Meloidogyne enterolobii).这是首次在海南省外发现象耳豆根结线虫,同时还发现该线虫的2个新寄主,即木豆和南瓜.     

象耳豆根结线虫的研究进展

象耳豆根结线虫(Meloidogyne enterolobii)致病力强、寄主范围广,种群扩散迅速,给农作物造成毁灭性危害,尤其在热带及亚热带地区根结线虫常年危害严重,逐渐成为热带和亚热带地区最重要的根结线虫之一。随着现代农业的发展,设施大棚和温室在生产上的应用不断增多,导致土壤温度上升,象耳豆根结线虫向内地蔓延速度不断加快,已受到国内外研究者的广泛关注。从象耳豆根结线虫的分布、鉴定、防治和进化树构建等方面进行综述,旨在为同类研究与应用提供参考。     

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象耳豆根结线虫(Meloidogyne enterolobii)致病力强、寄主范围广,种群扩散迅速,给农作物造成毁灭性危害,尤其在热带及亚热带地区根结线虫常年危害严重,逐渐成为热带和亚热带地区最重要的根结线虫之一.随着现代农业的发展,设施大棚和温室在生产上的应用不断增多,导致土壤温度上升,象耳豆根结线虫向内地蔓延速度不断加快,已受到国内外研究者的广泛关注.从象耳豆根结线虫的分布、鉴定、防治和进化树构建等方面进行综述,旨在为同类研究与应用提供参考.     

植物罹病组织中象耳豆根结线虫的LAMP快速检测方法

【目的】建立一种基于环介导等温扩增（Loop-mediated isothermal amplification,LAMP）技术,从植物罹病组织中直接检测象耳豆根结线虫（Meloidogyne enterolobii）的快速检测方法,为象耳豆根结线虫的监测和防治提供技术支持。【方法】根据象耳豆根结线虫与其它根结线虫ITS序列差异设计LAMP特异性引物,通过对LAMP反应条件中的Mg2+、dNTPs、甜菜碱和反应时间进行优化,同时对检测体系的特异性和灵敏度进行验证,建立一种从罹病植物组织中检测象耳豆根结线虫的LAMP快速检测方法。【结果】象耳豆根结线虫LAMP检测体系优化结果表明在Mg2+的浓度为5.0 mmol•L-1、dNTPs的浓度为2.4 mmol•L-1、不添加甜菜碱、反应时间为45 min的条件下,扩增效率最优。本研究建立的LAMP检测方法能够从11个植物线虫种群中特异检测出象耳豆根结线虫,检测灵敏度为1/200000头线虫DNA,比普通PCR灵敏100倍,能够直接从植物根结中检测出象耳豆根结线虫,准确度为100%。【结论】本研究以rDNA-ITS序列为靶基因建立象耳豆根结线虫LAMP快速分子检测方法,具有特异性强、灵敏度高、简单、快速、经济等特征,能够从罹病植物组织中快速准确地检测出象耳豆根结线虫,具有极高的实践应用价值。     

甘薯根结线虫病病原——象耳豆根结线虫的鉴定

自福建省泉州市发生严重根结线虫病的甘薯地采集线虫样本,经形态学观察发现该线虫与象耳豆根结线虫(Meloidogyne enterolobii)原始描述相符;rDNA-ITS序列分析表明,其与GenBank中象耳豆根结线虫同区域序列的相似性达99%以上;利用象耳豆根结线虫特异性引物进行PCR扩增,得到236 bp的特异性片段,据此确定所采集的甘薯根结线虫为象耳豆根结线虫.这是首次在福建省甘薯上发现象耳豆根结线虫.     

番茄品种Mi基因对根结线虫抗性的检测

采用酶切扩增多态性序列(Cleaved amplified polymorphic sequences,CAPS)方法对国内市场上的26个番茄Solanum lycopersicum品种进行Mi基因检测.结果表明,特璐丝、红丽、TRS-401、仙客1号和仙客5号5个品种含有纯合体Mi基因,其余品种均不含Mi基因.进一步用南方根结线虫Meloidogyne incognita和象耳豆根结线虫M.enterolobii对这26个品种进行接种试验,计算根结率和根结指数.结果发现,南方根结线虫和象耳豆根结线虫侵染不含Mi基因的21个番茄品种的根结率为100%,根结指数为100;而含Mi基因的5个番茄品种对南方根结线虫的根结率为1%~5%,根结指数为0~4,而对象耳豆根结线虫的根结率为26.7%~45.6%,根结指数为56~64.表明含Mi基因的番茄高抗南方根结线虫,但对象耳豆根结线虫感病或比较感病.     

深圳市蔬菜基地根结线虫的种类和分布

为明确深圳市威胁蔬菜生产的根结线虫种类和种群分布,对其主要蔬菜基地的根结线虫进行调查,并采用传统形态学与分子生物学结合的方法进行种类鉴定。结果表明:在深圳市13个蔬菜基地的121个调查采样点中,有11个蔬菜基地的74个采样点发现根结线虫Meloidogyne spp.,蔬菜根结线虫发生率为61.16%;从采集的样本中纯化得到76个根结线虫种群,并鉴定出4种根结线虫,其中69个种群为南方根结线虫M.incognita,3个种群为爪哇根结线虫M.javanica,1个种群为花生根结线虫M.arenaria,3个种群为象耳豆根结线虫M.enterolobii;同时发现2个采样点有南方根结线虫和象耳豆根结线虫的复合种群。     

香瓜根结线虫种类鉴定及杀线剂的室内毒力测定

利用形态学与分子生物学方法,对采集于海南省文昌市乌鸡塘村香瓜根系上的根结线虫种群进行鉴定,明确其为象耳豆根结线虫（Meloidogyne enterolobii）,同时测定3种常用杀线剂对象耳豆根结线虫2龄幼虫的室内毒力。结果表明,95%阿维菌素原药对象耳豆根结线虫2龄幼虫的毒杀效果最好,LC₅₀值为0.351 mg·L?1;85%噻唑膦原药和95%氟吡菌酰胺原药对象耳豆根结线虫2龄幼虫的LC₅₀值分别为0.82 mg·L?1和7.783 mg·L?1。     

陕南蔬菜根结线虫种类的同工酶酶谱鉴定

在形态学鉴定的基础上,运用同工酶电泳技术,对采自陕南3市18县区的37个为害蔬菜的根结线虫种群进行鉴定。结果表明:在所鉴定的种群中,32个种群为南方根结线虫(Meloidogyne incognita),2个种群为花生根结线虫(M.arenaria),1个种群为北方根结线虫(M.hapla),1个种群为南方根结线虫和花生根结线虫的混合群体,1个种群为南方根结线虫和北方根结线虫的混合群体;其中南方根结线虫是陕南为害蔬菜的主要根结线虫。     

海南省番石榴病原根结线虫种类鉴定

运用形态学方法,结合同工酶电泳和线粒体DNA标记技术,对采白海南省10市县的28个番石榴根结线虫种群进行鉴定,明确了25个种群为湛江根结线虫Meloidogyne zhanfiangensis、2个种群为番禺根结线虫M.panyuensis1个种群为南方根结线虫M．incognita,湛江根结线虫是危害海南省番石榴的优势种群．文中对根结线虫的鉴定技术与方法作了讨论．     

福建省部分地区蔬菜根结线虫病的病原种类鉴定

从福建省4个市(县)蔬菜基地采集的蔬菜根结线虫病的16份样本中,鉴定出南方根结线虫(Meloidogyne incognita)、爪哇根结线虫(M.javanica)和花生根结线虫(M.arenaria)3个种,其中,南方根结线虫为优势种.田间根结线虫种群多数为单一种,31%的样品为2个种组成的混合种群,这些混合种群由...     

甘肃省蔬菜根结线虫种群鉴定及其对主栽品种的致病性测定

对甘肃省6个蔬菜主产区的根结线虫发生与危害程度进行系统调查,根结线虫在各主产区均大量发生,土样中根结线虫检出率为58.02%。采用雌虫会阴花纹形态、Mdh Est同工酶以及ITS PCR技术,将采自甘肃省内13种蔬菜上的18个根结线虫种群鉴定为两类,在茄子与芹菜上发生花生根结线虫（Meloidogyne arenaria）,其余作物上均为南方根结线虫（Meloidogyne incognita）,南方根结线虫占检测种群的88.89%。在田间进行9大类共23个蔬菜主栽品种和嫁接砧木的根结线虫抗性鉴定,参试辣椒品种、番茄品种“金鹏M215”和茄子砧木“托鲁巴姆”在田间未发生根结线虫病害,其余蔬菜各品种均为感病类型。     

根结线虫rDNA-ITS片段的克隆与序列分析

用PCR方法扩增了16个不同地区和不同作物上根结线虫群体的ITS片段,并进行了克隆、序列测定分析和比对。结果表明:采自北京密云苦瓜和豇豆、北京通州月季以及山东胶州、烟台、潍坊花生上的6个根结线虫群体为北方根结线虫(Meloidogyne hapla),其ITS片段大小为772 bp;来自云南番茄、成都黄瓜和海南石榴上的3个根结线虫群体为爪哇根结线虫(M.javanica),其ITS片段大小为767 bp;来自河北廊坊番茄、北京海淀番茄和浙江黄瓜上的3个根结线虫则属于花生根结线虫(M.arenaria),其ITS片段大小为768 bp;而安徽和县、宿州的番茄以及太和桔梗上的3个根结线虫则属于南方根结线虫(M.incognita),其ITS片段大小为766 bp;海南胡椒上的根结线虫群体为番禺根结线虫(M.panyuensis),ITS片段大小为869 bp。